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熒光檢測(cè)器俞建君常州工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院檢測(cè)系統(tǒng)熒光檢測(cè)器(FluorescenceDetector,簡(jiǎn)稱(chēng)FLD)是高效液相色譜儀常用的一種檢測(cè)器。它用于能激發(fā)熒光的化合物,極高靈敏度和良好選擇性是它最大的優(yōu)點(diǎn),因而在某些領(lǐng)域如藥物和生化分析中起著不可替代的作用。特點(diǎn):當(dāng)試樣組分具有熒光性能時(shí),即可檢出,也可用于檢測(cè)不發(fā)熒光但經(jīng)化學(xué)反應(yīng)后可發(fā)熒光的物質(zhì)。檢測(cè)器介紹檢測(cè)器結(jié)構(gòu)島津熒光檢測(cè)器熒光檢測(cè)器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖檢測(cè)系統(tǒng)工作原理1熒光檢測(cè)器(FLD)就是利用某些溶質(zhì)在受紫外光激發(fā)后,使原子中的某些電子從基態(tài)中的最低振動(dòng)能級(jí)躍遷到較高電子能態(tài)的某些振動(dòng)能級(jí),之后,由于電子在分子中的碰撞,消耗一定的能量而下降到第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí),再躍遷回到基態(tài)中的某些不同振動(dòng)能級(jí),同時(shí)發(fā)射出比原來(lái)所吸收的光頻率較低、波長(zhǎng)較長(zhǎng)的光,即熒光,熒光的強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度、樣品濃度成正比。工作原理2中壓泵燈發(fā)出的連續(xù)光經(jīng)半透半反射鏡分成兩束,分別通過(guò)測(cè)量池和參比池。半透半反射鏡將10%左右的激發(fā)光反射在參比池及相應(yīng)的光電倍增管上。90%左右的激發(fā)光經(jīng)激發(fā)光濾光片分光后,選擇一定波長(zhǎng)的光線作為樣品激發(fā)光。該光束經(jīng)第一透鏡聚光在樣品池入口處,樣品池內(nèi)的組分受激后發(fā)出熒光,此熒光強(qiáng)度與樣品濃度成正比,這正是熒光檢測(cè)器定量的基礎(chǔ)。檢測(cè)系統(tǒng)優(yōu)點(diǎn)特點(diǎn)1、靈敏度極高。熒光檢測(cè)器的靈敏度比紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器的靈敏度約高兩個(gè)數(shù)量級(jí),特別適合于痕量分析。2、良好的選擇性。相對(duì)較少的分子具有大的足夠檢測(cè)的量子效率是熒光檢測(cè)器高選擇性的主要原因。在很多情況下,熒光檢測(cè)器的高選擇性能夠避免不發(fā)熒光的成分的干擾,成為熒光檢測(cè)的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)。3、線性范圍較寬。雖然比紫外吸收檢測(cè)器窄,但對(duì)大多數(shù)痕量分析,該線性范圍已足夠?qū)挕?、受外界條件的影響較小。5、選作流動(dòng)相的溶劑不會(huì)發(fā)射熒光,熒光檢測(cè)器就能適用于梯度洗脫。檢測(cè)系統(tǒng)特點(diǎn)缺點(diǎn)1、熒光檢測(cè)器的高選擇性這個(gè)優(yōu)點(diǎn),在一些情況下,也是該檢測(cè)器的缺點(diǎn)。因?yàn)椴皇撬械幕衔镌谶x擇的條件下都能發(fā)生熒光,所以熒光檢測(cè)器不屬于通用型檢測(cè)器,與紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器相比,應(yīng)用范圍較窄。2、對(duì)通常發(fā)生在熒光測(cè)量中的一些干擾非常敏感,如背景熒光和猝滅效應(yīng)等。雖然這些干擾在液相分析中不經(jīng)常遇到,但在進(jìn)行定量分析時(shí),有必要驗(yàn)證這些干擾是否存在,以及對(duì)樣品測(cè)定的影響程度。尤其對(duì)某些物質(zhì),如鹵素離子、重金屬離子、氧分子及硝基化合物等,都應(yīng)予以特別注意。應(yīng)用范圍1、用于食品工業(yè)、化妝品制造業(yè)、醫(yī)療單位衛(wèi)生監(jiān)測(cè)。2、配合專(zhuān)用試劑,可對(duì)測(cè)液體、
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