2022-2024北京重點(diǎn)校高二（下）期末生物匯編

重組DNA技術(shù)的基本工具

一、單選題

1.（2024北京昌平高二下期末）酒精是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的試劑，下列有關(guān)酒精應(yīng)用的敘述錯(cuò)誤的是

（）

A.進(jìn)行DNA粗提取與鑒定時(shí)，使用冷酒精溶解DNA

B.觀察植物根尖細(xì)胞有絲分裂時(shí)，使用酒精配制解離液

C.在菊花的組織培養(yǎng)時(shí)，使用酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒處理

D.檢測(cè)生物組織中的脂肪時(shí)，使用酒精洗去染液浮色

2.（2024北京石景山高二下期末）下列關(guān)于物質(zhì)的鑒定或提取的實(shí)驗(yàn)操作中，不正確的是（）

A.用斐林試劑鑒定樣液中還原糖時(shí)，需要50~65℃水浴加熱

B.DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)中，用酒精溶解蛋白質(zhì)等雜質(zhì)

C.鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，應(yīng)將雙縮服試劑A液與B液等量混合后使用

D.觀察花生種子中的脂肪時(shí)，需用酒精洗去染液浮色

3.（2024北京豐臺(tái)高二下期末）關(guān)于胰島素、纖維素、核糖核酸的敘述，正確的是（）

A.均含有C、H、。三種元素，并以C鏈為基本骨架

B.均能與相應(yīng)受體結(jié)合，對(duì)生命活動(dòng)起調(diào)節(jié)作用

C.均在核糖體合成，經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工

D.分別用雙縮JR試劑、斐林試劑、二苯胺試劑進(jìn)行鑒定

4.（2024北京朝陽(yáng)高二下期末）關(guān)于化合物分離或鑒定的高中生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，敘述簿誤的是（）

A.利用加熱后與斐林試劑生成磚紅色沉淀的反應(yīng)鑒定還原糖

B.利用常溫條件下與二苯胺試劑呈現(xiàn)紫色的反應(yīng)來(lái)鑒定DNA

C.利用不同光合色素在層析液中溶解度的差異分離光合色素

D.利用能被蘇丹III染液染成橘黃色的特性鑒定細(xì)胞中的脂肪

5.（2024北京海淀高二下期末）下列實(shí)驗(yàn)操作能夠達(dá)成所述目的的是（）

A.利用差速離心的方法，可分離獲得黑藻葉肉細(xì)胞中的葉綠體和中心體

B,用高濃度蔗糖溶液處理紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞，可測(cè)得細(xì)胞液濃度

C.用無(wú)水乙醇提取新鮮綠葉中的色素進(jìn)行紙層析，可分離出四種光合色素

D.將洋蔥研磨液離心后保留沉淀物并加入冷酒精靜置后，可收集到DNA

6.（2024北京東城高二下期末）構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列箭頭指向位置屬于DNA連接

酶作用位點(diǎn)的是（）

3,

A:由卬:5,

OHPOHOH

POHpp

7.（2024北京東城高二下期末）“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過(guò)程是：裂解細(xì)胞一分離DNA-沉淀

DNAT鑒定。下列敘述不正確的是（）

A.裂解：利用研磨等方法使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)

B.分離：離心后留取上清液可去除不溶于研磨液的物質(zhì)

C.沉淀:加入95%冷的酒精溶液沉淀得到粗提DNA

D.鑒定：加入二苯胺沸水浴后可見(jiàn)溶液由藍(lán)變?yōu)榇u紅色

8.（2024北京西城高二下期末）下列關(guān)于高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)法，正確的是（）

A.可用帶落葉的土壤探究微生物的分解作用

B.制作果醋前期需通氣而后期需嚴(yán)格無(wú)氧

C.果酒制作過(guò)程發(fā)酵瓶應(yīng)放在直射光下

D.粗提取的DNA可用雙縮胭試劑鑒定

9.（2024北京大興高二下期末）下圖為DNA分子的某一片段，其中①②③分別表示某種酶的作用部位,

則相應(yīng)的酶依次為（）

[②[③

-

①GAATTcGAATTC

I

—

—

——

—IIIIIII

一G

TTAATTA

cGcA_

A.DNA連接酶、限制酶、解旋酶

B.限制酶、解旋酶、DNA連接酶

C.限制酶、DNA連接酶、解旋酶

D.解旋酶、限制酶、DNA連接酶

10.（2024北京延慶高二下期末）關(guān)于物質(zhì)提取、分離或鑒定的高中生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，敘述錯(cuò)誤的是

（）

A.研磨肝臟以破碎細(xì)胞用于獲取含過(guò)氧化氫酶的粗提液

B.利用不同物質(zhì)在酒精溶液中溶解性的差異粗提DNA

C.依據(jù)吸收光譜的差異對(duì)光合色素進(jìn)行紙層析分離

D.利用與雙縮胭試劑發(fā)生顏色變化的反應(yīng)來(lái)鑒定蛋白質(zhì)

11.（2023北京順義高二下期末）在高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，下列操作與達(dá)成目標(biāo)相符的是（）

選項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作達(dá)成目標(biāo)

A性狀分離比模擬重復(fù)30次降低雌、雄配子比例不等的概率

B設(shè)計(jì)制作生態(tài)缸陽(yáng)光不能直射生態(tài)缸避免生物缸中溫度過(guò)高

C制作果酒發(fā)酵瓶留1/3空間有利于酵母菌產(chǎn)生酒精

DDNA的粗提與鑒定將研磨液進(jìn)行離心防止DNA斷裂

A.AB.BC.CD.D

12.（2023北京海淀高二下期末）下列高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作無(wú)法達(dá)成其目的的是（）

A.對(duì)玻璃培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌，以制備固體培養(yǎng)基

B.花生子葉薄片經(jīng)蘇丹III染液染色后用酒精漂洗，觀察細(xì)胞中的脂肪滴（顆粒）

C.研磨肝臟以破碎細(xì)胞獲取粗提液，探究過(guò)氧化氫酶的活性

D.在含DNA的濾液中加入21noi/L的NaCl溶液，去除雜質(zhì)并析出DNA

13.（2023北京石景山高二下期末）作為基因工程的運(yùn)輸工具一載體，必須具備的條件及理由對(duì)應(yīng)不巧項(xiàng)

的是（）

A.對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)傷害，不影響宿主細(xì)胞的正常生命活動(dòng)

B.具有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，以便于目的基因的插入

C.具有某些標(biāo)記基因，以便目的基因能夠準(zhǔn)確定位與其結(jié)合

D.能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定保存并大量復(fù)制，以便提供大量的目的基因

14.（2023北京大興高二下期末）下列各項(xiàng)科學(xué)研究成果，不能作為基因工程直接理論基礎(chǔ)的是（）

A.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的建立B.孟德?tīng)栠z傳規(guī)律的發(fā)現(xiàn)

C.遺傳密碼的破譯D.中心法則的確立

15.（2023北京大興高二下期末）下表列出了相關(guān)實(shí)驗(yàn)的原理，其中臂卷的是（）

選

實(shí)驗(yàn)原理

項(xiàng)

微生物的純培用平板劃線法或稀釋涂布平板法，將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)得

A

養(yǎng)到單菌落

B制作泡菜乳酸菌在無(wú)氧情況下將葡萄糖分解成乳酸

CDNA的粗提取DNA在2moiL-iNaCl溶液中溶解度最低，可用于提取DNA

DDNA的電泳DNA分子在凝膠中的遷移速率與DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)

A.AB.BC.CD.D

16.（2022北京石景山高二下期末）利用新鮮菜花作為實(shí)驗(yàn)材料提取DNA時(shí)，下列做法正確的是（）

A.可將菜花置于清水中，細(xì)胞吸水破裂后將DNA釋放出來(lái)

B.離心后上清液中加入95%冷酒精，出現(xiàn)的白色絲狀物就是純凈的DNA

C.將晾干的白色絲狀物置于2moi/L的NaCl溶液中，會(huì)發(fā)生溶解現(xiàn)象

D.向DNA溶液中加入二苯胺試劑混勻，溶液會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色

17.（2022北京東城高二下期末）下列實(shí)驗(yàn)需要利用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察或統(tǒng)計(jì)的是（）

A.計(jì)數(shù)平板上尿素分解菌的菌落數(shù)量

B.利用二苯胺鑒定DNA的粗提物

C.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量

D.觀察菊花外植體的生長(zhǎng)狀況

18.（2022北京朝陽(yáng)高二下期末）某生物興趣小組利用不同材料進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”，相關(guān)敘述

正確的是（）

A.可使用雞血、豬肝、大腸桿菌提取核DNA

B.DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度相同

C.洋蔥、菜花、豬肝的DNA粗提液為純凈物

D.沸水浴時(shí)，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色

19.（2022北京海淀高二下期末）下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是（）

A.可選擇香蕉、菜花、豬血等新鮮材料提取DNA

B.加入預(yù)冷的酒精溶液后析出的絲狀物是DNA

C.提取的DNA可溶解在2moi/L的NaCl溶液中

D.使用二苯胺試劑鑒定DNA時(shí)需要沸水浴加熱

二、非選擇題

20.（2023北京順義高二下期末）學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）~（5）題。

AIDS治療的新思路

艾滋?。ˋIDS）是一種由HIV病毒感染，危害人類(lèi)健康，致死率極高的傳染病。在過(guò)去10年間，艾滋病

防治取得了較為顯著的成就。

HIV能夠侵襲人體的T細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，降低人體細(xì)胞免疫功能。HIV感染人的T細(xì)胞需

要經(jīng)過(guò)3個(gè)階段。階段一：HIV識(shí)別T細(xì)胞表面的CD4受體，并在輔助共受體CCR5或CXCR4的幫助

下入侵T細(xì)胞。階段二：HIV的RNA在酶的催化下逆轉(zhuǎn)錄成DNA,DNA被整合到T細(xì)胞基因組中，轉(zhuǎn)

錄出病毒的基因組RNA和mRNA,翻譯出衣殼蛋白。階段三：衣殼蛋白和基因組RNA組裝形成新病毒，

T細(xì)胞裂解，HIV釋放到血液，感染新細(xì)胞。

CRISPR/Cas9是一種基因組編輯技術(shù)，包含一個(gè)sgRNA和Cas9核酸酶。研究人員可依據(jù)需要設(shè)計(jì)sgRNA

的堿基序列，使其能夠特異性識(shí)別DNA中的堿基序列。Cas9能對(duì)sgRNA識(shí)別的DNA位點(diǎn)進(jìn)行有效準(zhǔn)確

地切割，從而達(dá)到敲除基因中部分堿基序列的目的。

研究人員從人流產(chǎn)的胚胎中獲得了胎肝肝臟組織，經(jīng)膠原蛋白酶處理、洗滌、篩選獲得CD34+細(xì)胞。利用

CRISPR/Cas9技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將含有sgRNA和Cas9基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CD34+細(xì)胞，經(jīng)篩選、鑒定獲得

2個(gè)CCR5基因均缺失了32bp堿基的純合細(xì)胞（HSPC）。

研究人員同時(shí)構(gòu)建模型小鼠（對(duì)人體細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生免疫反應(yīng)）。將HSPC注入24小時(shí)內(nèi)新生模型小鼠的肝

臟中，在移植后不同時(shí)間檢測(cè)模型小鼠外周血中人淋巴細(xì)胞（CD45+）占小鼠外周血淋巴細(xì)胞的比例，結(jié)

果如圖。此外在模型小鼠的外周血、脾臟和肝臟中還檢測(cè)到了人的B細(xì)胞、髓系血細(xì)胞（可發(fā)育為T(mén)細(xì)

胞、巨噬細(xì)胞等）。

研究人員用HIV去感染模型小鼠，發(fā)現(xiàn)在感染病毒后第8周，移植了HSPC的小鼠外周血中HIV含量明

顯下降，而對(duì)照組中病毒含量依然保持較高水平。此項(xiàng)研究為有效防治艾滋病提供了新的思路。

移植后的時(shí)間(周)

(1)從實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)分離篩選得到人CD45+細(xì)胞和人髓系血細(xì)胞，對(duì)這兩種細(xì)胞的DNA和蛋白質(zhì)分別比

對(duì)，發(fā)現(xiàn)相同、不同。

⑵上述研究成果若用于治療AIDS,可將HIV阻斷在感染的階段。

(3)研究表明，實(shí)驗(yàn)中從胎肝肝臟組織中篩選得到的人CD34+細(xì)胞屬于多能干細(xì)胞(ips細(xì)胞)，下列選項(xiàng)中

能為其提供證據(jù)的是_。

A.小鼠體內(nèi)檢測(cè)到了HSPC

B.小鼠體內(nèi)檢測(cè)到了多種人細(xì)胞

C.CD34+細(xì)胞取自胎肝肝臟組織

D.CD34+細(xì)胞的CCR5基因發(fā)生了突變

(4)用CRISPR/Cas9對(duì)CD34+細(xì)胞中的CCR5基因進(jìn)行切割，通過(guò)PCR電泳檢測(cè)切割效率僅為27%,即

CRISPR/Cas9技術(shù)在實(shí)際操作中存在著脫靶問(wèn)題。依據(jù)所學(xué)知識(shí)推測(cè)脫靶的主要原因是。

(5)研究人員用HIV去感染注入HSPC的小鼠，測(cè)得其外周血中HIV含量明顯低于對(duì)照組，原因是

21.(2022北京石景山高二下期末)學(xué)習(xí)以下材料，回答(1)?(4)題。

iPS細(xì)胞的新發(fā)展

誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱(chēng)iPS細(xì)胞)，被認(rèn)為是實(shí)現(xiàn)自體器官再生與移植的“救命稻草”。成功誘導(dǎo)出iPS細(xì)胞

的山中伸彌博士于2012年獲得諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。

山中伸彌是如何誘導(dǎo)iPS細(xì)胞產(chǎn)生呢？利用處理后的RNA病毒作為載體，將4種調(diào)控細(xì)胞周期的相關(guān)基

因?qū)塍w外培養(yǎng)的小鼠成纖維細(xì)胞，開(kāi)啟成纖維細(xì)胞內(nèi)相關(guān)基因表達(dá)，使已分化的細(xì)胞重編程回歸到胚胎

細(xì)胞狀態(tài)，即iPS細(xì)胞。由于該方法具有一定的危險(xiǎn)性，山中伸彌團(tuán)隊(duì)又對(duì)此進(jìn)行了改進(jìn)：將運(yùn)送基因的

載體換成了更為安全的“質(zhì)?！?，降低對(duì)受體細(xì)胞帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)。

獲得iPS細(xì)胞后，通過(guò)誘導(dǎo)可使其分化為神經(jīng)、骨骼、肌肉等各種細(xì)胞。但是并不是所有的iPS細(xì)胞都能

分化成功，如何收集需要的某種特定細(xì)胞呢？山中伸彌團(tuán)隊(duì)的研究人員使用人工RNA,達(dá)到只收集特定種

類(lèi)細(xì)胞的目的。

每種細(xì)胞內(nèi)部都有特定的“標(biāo)記”，這個(gè)標(biāo)記就是在細(xì)胞質(zhì)中游離存在的一段短RNA——miRNAo假設(shè)我們

要從iPS細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)的細(xì)胞集合中選出心肌細(xì)胞，首先需要設(shè)計(jì)特定的人工RNA,其包括兩個(gè)部分：能

與心肌細(xì)胞中特有的miRNA互補(bǔ)結(jié)合的部分和能翻譯出綠色熒光蛋白的部分。將其放置在人工膜內(nèi)，導(dǎo)

入誘導(dǎo)iPS細(xì)胞形成的所有細(xì)胞中。人工RNA能與心肌細(xì)胞內(nèi)的miRNA結(jié)合，這種結(jié)合就像一種信號(hào)，

導(dǎo)致了整個(gè)人工RNA被很快降解。若細(xì)胞內(nèi)不存在該miRNA,則不會(huì)發(fā)生這個(gè)過(guò)程。一段時(shí)間后，通過(guò)

觀察某項(xiàng)指標(biāo)即可準(zhǔn)確找到心肌細(xì)胞。

目前，很多科研團(tuán)隊(duì)正在進(jìn)行將iPS細(xì)胞應(yīng)用于角膜、軟骨、腦神經(jīng)等再生的研究，由誘導(dǎo)iPS細(xì)胞制成

的視網(wǎng)膜已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了人體移植。相關(guān)的臨床應(yīng)用已經(jīng)在切實(shí)的進(jìn)行中，但用于普通醫(yī)療還需要幾年的時(shí)

間。

(l)RNA病毒載體進(jìn)入受體細(xì)胞后在______酶作用下合成DNA,可隨機(jī)插入受體細(xì)胞基因組。質(zhì)粒相對(duì)

RNA病毒載體更為安全的原因是0

(2)除了最初誘導(dǎo)出iPS細(xì)胞，文中提到山中伸彌團(tuán)隊(duì)的研究進(jìn)展包括o

A.改進(jìn)誘導(dǎo)方法，利用質(zhì)粒作為基因表達(dá)載體

B.發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞中有miRNA,是不同細(xì)胞的標(biāo)記

C.利用人工RNA,篩選目標(biāo)種類(lèi)細(xì)胞

D.將iPS細(xì)胞誘導(dǎo)并制成視網(wǎng)膜實(shí)現(xiàn)人體移植

(3)根據(jù)文中內(nèi)容，寫(xiě)出通過(guò)人工RNA從iPS細(xì)胞誘導(dǎo)形成的細(xì)胞中篩選心肌細(xì)胞的檢測(cè)指標(biāo)與實(shí)驗(yàn)預(yù)期

結(jié)果。

(4)科學(xué)家普遍認(rèn)為，iPS細(xì)胞在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。請(qǐng)你結(jié)合所學(xué)知識(shí)，寫(xiě)出其優(yōu)越性的

兩點(diǎn)體現(xiàn)。

參考答案

1.A

【分析】精是生物實(shí)驗(yàn)常用試劑之一，如檢測(cè)脂肪實(shí)驗(yàn)中需用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液洗去浮色；觀察

植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)和低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實(shí)驗(yàn)中都需用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精對(duì)材料進(jìn)行解離；

綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中需用無(wú)水酒精來(lái)提取色素；果酒和果醋制作實(shí)驗(yàn)中可用體積分?jǐn)?shù)為70%的

酒精進(jìn)行消毒，DNA的粗提取和鑒定中可以體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精進(jìn)一步純化DNA等。

【詳解】A、"DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，蛋白質(zhì)能溶于酒精，DNA不溶于酒精，故可以用酒精初步

分離DNA與蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤;

B、觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)時(shí)用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精和鹽酸一起制成解離液對(duì)材料進(jìn)行解離，B正

確；

C、菊花的組織培養(yǎng)中，要用酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒，C正確；

D、“檢測(cè)生物組織中脂肪”實(shí)驗(yàn)中，可以用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精洗去蘇丹III染色后的浮色，D正確。

故選Ao

2.C

【分析】有機(jī)物的鑒定方法：（1）斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為

磚紅色（沉淀）。（2）蛋白質(zhì)可與雙縮版試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)；（3）脂肪可用蘇丹III染液鑒定，呈橘黃。（4）

淀粉遇碘液變藍(lán)。

【詳解】A、用斐林試劑檢測(cè)還原糖時(shí)必須用50~65℃水浴加熱才能產(chǎn)生磚紅色沉淀，A正確；

B、DNA不溶于酒精，蛋白質(zhì)則溶于酒精，加酒精使DNA析出，與蛋白質(zhì)分離，B正確；

C、鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，雙縮）R試劑應(yīng)先加入A液，振蕩均勻后再加入4滴B液，C錯(cuò)誤；

D、觀察花生種子中的脂肪時(shí)，應(yīng)該用50%的酒精洗去多余染液，D正確。

故選Co

3.A

【分析】胰島素的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，纖維素是一種多糖，核糖核酸即RNA。

【詳解】A、胰島素的組成元素為C、H、O、N等，纖維素的組成元素為C、H、O,核糖核酸的組成元素

為C、H、O、N、P,三者都是大分子，均以C鏈為基本骨架，A正確；

B、纖維素是植物細(xì)胞壁的成分，不能與受體結(jié)合，B錯(cuò)誤；

C、蛋白質(zhì)在核糖體合成，需要經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工，但纖維素和核糖核酸都不在核糖體中合成，C

錯(cuò)誤；

D、雙縮）R試劑、斐林試劑、二苯胺試劑可分別鑒定蛋白質(zhì)、還原糖（纖維素不是還原糖）、DNA（即脫氧

核糖核酸），D錯(cuò)誤。

故選Ao

4.B

【分析】生物組織中化合物的鑒定：（1）斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色

變化為磚紅色；（2）蛋白質(zhì)可與雙縮月尿試劑反應(yīng)呈紫色；（3）脂肪可被蘇丹III染液染成橘黃色。

【詳解】A、在水浴加熱的條件下，還原糖和斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生胸紅色沉淀，A正確；

B、在水浴加熱的條件下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，B錯(cuò)誤；

C、光合色素分離的原理是色素在層析液中的溶解度不同，隨著層析液擴(kuò)散的速度不同，C正確；

D、脂肪可被蘇丹III染液染成橘黃色，利用此特性可用蘇丹DI染液鑒定細(xì)胞中的脂肪，D正確。

故選B。

5.C

【分析】1、綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)，提取色素時(shí)需要加入無(wú)水乙醇（溶解色素）、石英砂（使研磨

更充分）和碳酸鈣（防止色素被破壞）；分離色素時(shí)采用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不

同，隨著層析液擴(kuò)散的速度不同，最后的結(jié)果是觀察到四條色素帶，從上到下依次是胡蘿卜素（橙黃

色）、葉黃素（黃色）、葉綠素a（藍(lán)綠色）、葉綠素b（黃綠色）；

2、DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化

鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分

離的目的；①DNA不容易酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和

DNA進(jìn)一步分離；③DNA對(duì)于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是不能水解DNA,

蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響；④在沸水

浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色.

【詳解】A、黑藻是高等植物，葉肉細(xì)胞中無(wú)中心體，A錯(cuò)誤；

B、用高濃度蔗糖溶液處理紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞會(huì)使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離，不能測(cè)得細(xì)胞液濃度的大

小，B錯(cuò)誤；

C、用無(wú)水乙醇提取新鮮綠葉中的色素進(jìn)行紙層析，由于色素在層析液中的溶解度不同，隨著層析液擴(kuò)散

的速度不同，最后的結(jié)果是觀察到四種光合色素帶，C正確；

D、將洋蔥研磨液離心后保留上清液并加入冷酒精靜置后，可收集到DNA,D錯(cuò)誤。

故選C。

6.C

【分析】1、限制性?xún)?nèi)切核酸酶：又稱(chēng)限制酶，主要來(lái)源于原核生物，能識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核甘酸

序列，并使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，切割的結(jié)果是形成黏性末端或平末端。

2、DNA連接酶常用T4DNA連接酶和EcoliDNA連接酶，T4DNA連接酶既能連接黏性末端又能連接平

末端，不過(guò)連接平末端的效率低；EcoliDNA連接酶只能連接黏性末端。

【詳解】構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶，其作用是將限制酶切下來(lái)的DNA片段拼接成新的DNA分

子，單鏈DNA中，5,端存在游離的磷酸基團(tuán)，3,端存在-0H,兩個(gè)DNA片段之間的磷酸基團(tuán)和-0H在

DNA連接酶作用下形成磷酸二酯鍵，C正確，ABD錯(cuò)誤。

故選C。

7.D

【分析】DNA的粗提取和鑒定：DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精，利用這一原理可初步分離

DNA與蛋白質(zhì)。DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2moi/L的NaCl溶液。在一定溫度

下，DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。

【詳解】A、裂解：倒入研磨液，充分研磨，使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)，A正確；

B、分離：離心后留取上清液，棄沉淀物，可去除不溶于研磨液的多糖、蛋白質(zhì)等物質(zhì)，B正確；

C、沉淀：DNA不溶于酒精，加入95%冷的酒精溶液沉淀得到的白色絲狀物就是粗提DNA,C正確；

D、鑒定：在一定溫度下，DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，加入二苯胺沸水浴后可見(jiàn)溶液變藍(lán)色，D錯(cuò)誤。

故選D。

8.A

【分析】制作果醋利用的是醋酸菌，醋酸菌屬于需氧型生物，發(fā)酵溫度為30?35℃,因此在果醋發(fā)酵過(guò)程

中，應(yīng)通入充足的無(wú)菌空氣；制作泡菜利用的是乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸的原理；參與果酒制作的微生物

是酵母菌，其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型，前期需氧，后期不需氧。

【詳解】A、可用帶落葉的土壤探究微生物的分解作用，實(shí)驗(yàn)組的土壤要進(jìn)行滅菌處理，排除土壤微生物

的作用，A正確；

B、醋酸菌是好氧菌，全程需要持續(xù)通入無(wú)菌空氣，B錯(cuò)誤；

C、果酒制作過(guò)程發(fā)酵瓶不能放在直射光下以防止溫度過(guò)高影響發(fā)酵效果，C錯(cuò)誤；

D、粗提取的DNA可用二苯胺試劑鑒定，雙縮版試劑鑒定蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。

故選A。

9.D

【分析】解旋酶：能使DNA分子兩條鏈之間的氫鍵斷裂，使DNA雙鏈打開(kāi)。

限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核甘酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核甘酸之間

的磷酸二酯鍵斷裂。

DNA連接酶：連接的是兩個(gè)DNA片段之間的磷酸二酯鍵。

【詳解】①處為氫鍵，是解旋酶的作用部位；②處為磷酸二酯鍵，是限制酶的作用部位；③處為兩個(gè)DNA

片段的缺口，是DNA連接酶的作用部位，催化磷酸二酯鍵的形成，即D正確。

故選D。

10.C

【分析】綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)，提取色素時(shí)需要加入無(wú)水乙醇（溶解色素）、石英砂（使研磨更

充分）和碳酸鈣（防止色素被破壞）；分離色素時(shí)采用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，

隨著層析液擴(kuò)散的速度不同，最后的結(jié)果是觀察到四條色素帶，從上到下依次是胡蘿卜素（橙黃色）、葉

黃素（黃色）、葉綠素a（藍(lán)綠色）、葉綠素b（黃綠色）。

【詳解】A、肝臟細(xì)胞中存在過(guò)氧化氫酶，故需要破碎細(xì)胞制成肝臟研磨液來(lái)獲得過(guò)氧化氫酶的粗提液，

A正確；

B、不同物質(zhì)在酒精溶液中的溶解度不同，故可粗提取DNA,B正確；

C、依據(jù)光合色素在層析液中的溶解度不同，對(duì)光合色素進(jìn)行紙層析分離，C錯(cuò)誤；

D、蛋白質(zhì)與雙縮版試劑會(huì)發(fā)生紫色反應(yīng)，可以利用與雙縮服試劑發(fā)生顏色變化的反應(yīng)來(lái)鑒定蛋白質(zhì)，D

正確。

故選Co

11.B

【分析】設(shè)計(jì)制作生態(tài)缸，將生態(tài)缸放置于室內(nèi)通風(fēng)、光線良好的地方，陽(yáng)光不能直射生態(tài)缸避免生物缸

中溫度過(guò)高；

制作果酒時(shí)，發(fā)酵瓶留1/3空間，有利于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖以及防止發(fā)酵過(guò)程中發(fā)酵液溢出；

DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面存在差異，可以利用這些差異，選用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧?/p>

學(xué)方法對(duì)它們進(jìn)行提取。

【詳解】A、性狀分離比模擬，重復(fù)30次，目的是減小實(shí)驗(yàn)誤差，A錯(cuò)誤；

B、設(shè)計(jì)制作生態(tài)缸，將生態(tài)缸放置于室內(nèi)通風(fēng)、光線良好的地方，陽(yáng)光不能直射生態(tài)缸避免生物缸中溫

度過(guò)高，B正確；

C、制作果酒時(shí)，發(fā)酵瓶留1/3空間，有利于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖以及防止發(fā)酵過(guò)程中發(fā)酵液溢

出，C錯(cuò)誤；

D、DNA的粗提與鑒定，將研磨液進(jìn)行離心的目的是將混合物中的細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)和其他大分子物質(zhì)與

DNA分離開(kāi)，D錯(cuò)誤。

故選B。

12.D

【分析】DNA的溶解度規(guī)律：不溶于酒精，在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。

【詳解】A、玻璃培養(yǎng)器皿需要保持干燥，可進(jìn)行干熱滅菌，以制備固體培養(yǎng)基，A正確；

B、花生子葉薄片經(jīng)蘇丹III染液染色后用50%酒精漂洗，在顯微鏡下觀察細(xì)胞中被染成橘黃色的脂肪滴

（顆粒），B正確;

C、過(guò)氧化氫酶在肝細(xì)胞中含量較多，可研磨肝臟以破碎細(xì)胞獲取粗提液，探究過(guò)氧化氫酶的活性，C正

確；

D、在含DNA的濾液中加入2moi/L的NaCl溶液，DNA會(huì)溶解，不會(huì)析出，D錯(cuò)誤。

故選D。

13.C

【分析】作為載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)，以便于目的基因的插入；②要有標(biāo)記基

因（如抗性基因），以便于重組后重組DNA的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)

受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)。

【詳解】A、作為載體，要對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)傷害，以免影響宿主細(xì)胞的正常生命活動(dòng)，A正確；

B、作為載體，要具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便于不同目的基因的插入，B正確；

C、作為載體，要具有某些標(biāo)記基因，便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D、作為載體，要能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來(lái)并大量復(fù)制，以便目的基因能夠穩(wěn)定的存在和數(shù)量的

擴(kuò)大，D正確。

故選C。

14.B

【分析】基因工程又叫DNA重組技術(shù)，是在生物化學(xué)、分子生物學(xué)和微生物學(xué)等學(xué)科的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)

的；是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺

傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。

【詳解】A、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的建立屬于基因工程直接理論基礎(chǔ)，A不符合題意；

B、孟德?tīng)栠z傳規(guī)律的發(fā)現(xiàn)不屬于基因工程直接理論基礎(chǔ)，B符合題意；

C、遺傳密碼的破譯屬于基因工程直接理論基礎(chǔ)，C不符合題意；

D、中心法則的確立明確了的生物界共用一套密碼子，是基因工程直接理論基礎(chǔ)，D不符合題意。

故選B。

15.C

【分析】微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃

線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后

可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經(jīng)培

養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】A、平板劃線法和稀釋涂布平板法都是常用的接種方法，用平板劃線法或稀釋涂布平板法，將單

個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)得到單菌落，A正確；

B、乳酸菌是厭氧生物，在無(wú)氧條件下可進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸，可用于制作泡菜，B正確；

C、DNA在2moi?LrNaCl溶液中溶解度最高，可用于溶解DNA,C錯(cuò)誤；

D、DNA分子在凝膠中的遷移速率與凝膠瓊脂糖的濃度、DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān)，可用于DNA電

泳，D正確。

故選Co

16.C

【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：

1、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解

度最低），利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分

離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA

與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。

2、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不

能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。

3、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試

劑。

【詳解】A、菜花是植物細(xì)胞，其細(xì)胞壁有保護(hù)和支撐的作用，不會(huì)吸水漲破，需要用洗滌劑瓦解細(xì)胞

膜，A錯(cuò)誤;

B、在上清液中加入等體積的95%的冷酒精，白色絲狀物是粗提取的DNA,B錯(cuò)誤；

C、DNA在2moi/L的氯化鈉溶液中溶解度較大，所以將晾干的白色絲狀物置于2moi/L的NaCl溶液中，

會(huì)發(fā)生溶解現(xiàn)象，C正確；

D、DNA在沸水浴條件下遇到二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)，D錯(cuò)誤。

故選C。

17.C

【分析】微生物的計(jì)數(shù)方法：（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，

在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活

菌。（2）活菌計(jì)數(shù)法：①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋

液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。

【詳解】A、計(jì)數(shù)平板上尿素分解菌的菌落數(shù)量通過(guò)肉眼觀察即可，不需要利用光學(xué)顯微鏡，A錯(cuò)誤；

B、利用二苯胺鑒定DNA的粗提物，只需要肉眼觀察顏色變化即可，不需要利用光學(xué)顯微鏡，B錯(cuò)誤；

C、采用顯微計(jì)數(shù)法用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板測(cè)定酵母菌數(shù)量時(shí)需要利用光學(xué)顯微鏡觀察，C正確；

D、肉眼觀察菊花外植體的生長(zhǎng)狀況即可，不需要利用光學(xué)顯微鏡，D錯(cuò)誤。

故選C。

18.D

【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶

液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性。

（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】A、大腸桿菌是原核生物，沒(méi)有細(xì)胞核，不能用它提取核DNA,A錯(cuò)誤；

B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)最低，B錯(cuò)誤；

C、洋蔥、菜花、豬肝的DNA粗提液含有大量的雜質(zhì)，不是純凈物，C錯(cuò)誤；

D、在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，D正確。

故選D。

19.A

【分析】DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：

①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可

以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；

②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一

步分離；

③DNA對(duì)于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是不能水解DNA,蛋白質(zhì)不能耐受較

高溫度，DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響；

④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。

【詳解】A、哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核，沒(méi)有DNA,因此不能作為提取DNA的材料，A錯(cuò)誤；

B、DNA不溶于95%的冷酒精，加入預(yù)冷的酒精溶液后析出的絲狀物是DNA,B正確；

C、當(dāng)NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時(shí)，隨著NaCl溶液濃度增加，DNA的溶解度降低；當(dāng)NaCl溶液濃

度高于0.14mol/L時(shí)，隨著NaCl溶液濃度增加，DNA的溶解度升高，因此提取的DNA可溶解在2moi/L

的NaCl溶液中，C正確；

D、在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。

故選Ao

20.(1)DNA蛋白質(zhì)

⑵一

⑶B

(4)非基因編輯對(duì)象也可能含有與sgRNA配對(duì)的堿基序列，造成sgRNA選錯(cuò)對(duì)象與之錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶

(5)注入HSPC的小鼠不能合成輔助共受體CCR5,而HIV識(shí)別T細(xì)胞表面的CD4受體