兒童創(chuàng)傷外周血中髓源性抑制細(xì)胞亞型變化與臨床關(guān)聯(lián)探究一、引言1.1研究背景兒童創(chuàng)傷是一個嚴(yán)峻的公共衛(wèi)生問題，對兒童的身體健康、生長發(fā)育和心理健康都可能產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響?！吨袊嗌倌陜和瘋ΜF(xiàn)狀回顧報告》顯示，每年有54194名0-19歲青少年兒童因傷害死亡，2010-2015年6年間，傷害一直是我國0-19歲青少年兒童的首要死亡原因，平均每10人死亡中有4.5人因傷害而死亡，其中1-4歲年齡組為傷害死亡占比最高人群。在日常生活中，兒童可能因交通事故、跌落、燒燙傷、異物誤服等多種原因?qū)е聞?chuàng)傷。如在交通意外傷害中，低年齡兒童未正確使用兒童安全約束系統(tǒng)，或青少年過馬路時注意力不集中，都增加了受傷風(fēng)險；在家庭環(huán)境中，窗臺、陽臺缺乏防護(hù)設(shè)施，導(dǎo)致兒童高空墜落事故頻發(fā)。髓源性抑制細(xì)胞（Myeloid-DerivedSuppressorCells，MDSCs）是一類骨髓來源的、不成熟的且具有高度異質(zhì)性的細(xì)胞群體，在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在生理狀態(tài)下，MDSCs數(shù)量較少，但當(dāng)機(jī)體處于腫瘤、感染、慢性炎癥及創(chuàng)傷等病理狀態(tài)時，其會大量擴(kuò)增并聚集至病灶局部，發(fā)揮免疫抑制功能，負(fù)向調(diào)控免疫應(yīng)答。MDSCs主要通過抑制T細(xì)胞、B細(xì)胞和自然殺傷（NK）細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，來調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫反應(yīng)。其抑制機(jī)制包括表達(dá)精氨酸酶-1（ARG-1）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）和活性氧（ROS）等。ARG-1可消耗T細(xì)胞增殖及活化必需的氨基酸L-精氨酸，使CD3ζ鏈合成受阻，從而抑制T細(xì)胞功能；iNOS和ROS可直接抑制T細(xì)胞功能，還能誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡。MDSCs根據(jù)表面標(biāo)志的不同，可分為粒細(xì)胞性MDSCs（PMN-MDSCs，HLA-DR?CD11b?CD33?CD14?CD15?）和單核細(xì)胞性MDSCs（M-MDSCs，HLA-DR?CD11b?CD33?CD14?CD15?）兩個主要亞型，這兩個亞型在免疫調(diào)節(jié)中具有不同的作用和機(jī)制。PMN-MDSCs優(yōu)先使用活性氧（ROS）、過氧亞硝酸鹽、精氨酸酶1和前列腺素E2（PGE2）來介導(dǎo)免疫抑制；而M-MDSCs使用一氧化氮（NO）、免疫抑制細(xì)胞因子（如IL-10和TGF-β）以及免疫調(diào)節(jié)分子（如PD-L1）的表達(dá)來發(fā)揮免疫抑制作用。在腫瘤微環(huán)境中，PMN-MDSCs可通過釋放ROS等物質(zhì)抑制T細(xì)胞的活性，阻礙機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)；M-MDSCs則可通過分泌IL-10等細(xì)胞因子，營造免疫抑制性微環(huán)境，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸。在創(chuàng)傷領(lǐng)域，研究MDSCs亞型變化對于理解創(chuàng)傷后免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)機(jī)制、評估病情嚴(yán)重程度和預(yù)后具有重要意義。創(chuàng)傷后，機(jī)體的免疫系統(tǒng)會發(fā)生復(fù)雜的變化，MDSCs及其亞型可能參與了這一過程。通過檢測外周血中MDSCs亞型的變化，有望為兒童創(chuàng)傷的診斷、治療和預(yù)后評估提供新的生物標(biāo)志物和治療靶點。如在嚴(yán)重創(chuàng)傷患者中，外周血中MDSCs比例的升高與并發(fā)感染相關(guān)，提示其可能在創(chuàng)傷后免疫功能障礙中起重要作用。深入研究兒童創(chuàng)傷外周血中MDSCs亞型變化及其臨床意義，將有助于我們更好地認(rèn)識兒童創(chuàng)傷后的免疫病理過程，為臨床治療提供更精準(zhǔn)的理論依據(jù)和干預(yù)策略。1.2研究目的與意義本研究旨在深入探究兒童創(chuàng)傷后外周血中髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）亞型的動態(tài)變化規(guī)律，分析其與創(chuàng)傷嚴(yán)重程度、感染并發(fā)癥以及預(yù)后之間的關(guān)聯(lián)，明確其在兒童創(chuàng)傷免疫調(diào)節(jié)中的臨床意義。具體而言，通過精確檢測不同創(chuàng)傷程度、不同病程階段兒童外周血中粒細(xì)胞性MDSCs（PMN-MDSCs）和單核細(xì)胞性MDSCs（M-MDSCs）的比例及功能分子表達(dá)，試圖揭示其在創(chuàng)傷后免疫反應(yīng)中的具體作用機(jī)制。同時，結(jié)合臨床資料，評估MDSCs亞型變化對兒童創(chuàng)傷患者病情評估、預(yù)后判斷的價值，為臨床治療提供更精準(zhǔn)的理論依據(jù)和生物標(biāo)志物。兒童創(chuàng)傷作為嚴(yán)重威脅兒童健康的公共衛(wèi)生問題，其治療效果和預(yù)后一直備受關(guān)注。當(dāng)前，臨床上對于兒童創(chuàng)傷后免疫功能變化的認(rèn)識仍不夠深入，缺乏有效的免疫監(jiān)測指標(biāo)和精準(zhǔn)的治療靶點。深入研究兒童創(chuàng)傷外周血中MDSCs亞型變化及其臨床意義，對于改善兒童創(chuàng)傷的治療策略、提高治療效果和預(yù)后質(zhì)量具有重要的現(xiàn)實意義。從理論層面來看，本研究有助于進(jìn)一步完善兒童創(chuàng)傷免疫病理機(jī)制的研究，填補(bǔ)該領(lǐng)域在MDSCs亞型研究方面的部分空白，豐富對創(chuàng)傷后免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的認(rèn)識。從臨床實踐角度出發(fā)，若能明確MDSCs亞型作為兒童創(chuàng)傷病情評估和預(yù)后判斷的生物標(biāo)志物，將為臨床醫(yī)生提供更客觀、準(zhǔn)確的診斷依據(jù)，有助于早期識別高風(fēng)險患兒，及時調(diào)整治療方案，采取針對性的免疫干預(yù)措施，降低感染等并發(fā)癥的發(fā)生率，改善患兒的生存質(zhì)量和遠(yuǎn)期預(yù)后。此外，對MDSCs亞型作用機(jī)制的深入了解，還可能為開發(fā)新的治療靶點和藥物提供方向，推動兒童創(chuàng)傷治療領(lǐng)域的創(chuàng)新發(fā)展。1.3研究方法與創(chuàng)新點本研究將采用前瞻性研究方法，收集兒童創(chuàng)傷患者的外周血樣本。運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)，精確檢測外周血中粒細(xì)胞性MDSCs（PMN-MDSCs，HLA-DR?CD11b?CD33?CD14?CD15?）和單核細(xì)胞性MDSCs（M-MDSCs，HLA-DR?CD11b?CD33?CD14?CD15?）的比例。同時，采用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-qPCR）檢測相關(guān)功能分子如精氨酸酶-1（ARG-1）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）等的mRNA表達(dá)水平，用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測血漿中相關(guān)細(xì)胞因子的濃度，全面分析MDSCs亞型的功能變化。結(jié)合患者的創(chuàng)傷嚴(yán)重程度評分（如兒童創(chuàng)傷評分等）、臨床癥狀、感染并發(fā)癥發(fā)生情況及預(yù)后資料，運(yùn)用統(tǒng)計學(xué)方法分析MDSCs亞型變化與各臨床因素之間的相關(guān)性。本研究的創(chuàng)新點主要體現(xiàn)在以下幾個方面。在研究內(nèi)容上，深入分析兒童創(chuàng)傷外周血中MDSCs的不同亞型變化，而以往研究多集中于MDSCs整體水平，對亞型的研究相對較少。同時，探討MDSCs亞型變化與創(chuàng)傷嚴(yán)重程度、感染并發(fā)癥及預(yù)后等多因素的關(guān)聯(lián)，為臨床提供更全面、精準(zhǔn)的信息。在研究方法上，綜合運(yùn)用多種先進(jìn)的檢測技術(shù)，從細(xì)胞比例、功能分子表達(dá)及細(xì)胞因子水平等多個層面進(jìn)行研究，使研究結(jié)果更具說服力。此外，本研究聚焦于兒童創(chuàng)傷這一特定群體，考慮到兒童生理和免疫特點與成人的差異，有望為兒童創(chuàng)傷的臨床治療和研究提供獨特的見解和依據(jù)，填補(bǔ)該領(lǐng)域在兒童群體研究中的部分空白。二、髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）概述2.1MDSCs的定義與特性髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）是一類起源于骨髓祖細(xì)胞和未成熟髓細(xì)胞的異質(zhì)性細(xì)胞群體。在正常生理狀態(tài)下，骨髓造血干細(xì)胞分化為髓樣前體細(xì)胞（CMPs），CMPs會迅速進(jìn)一步分化為成熟的粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞（DC）和巨噬細(xì)胞等，進(jìn)入相應(yīng)的器官和組織，執(zhí)行正常的免疫功能。此時，未成熟髓細(xì)胞（IMCs）在外周血單個核細(xì)胞中所占比例較少，約為0.5%。然而，當(dāng)機(jī)體處于腫瘤、感染、慢性炎癥、創(chuàng)傷等病理狀態(tài)時，情況發(fā)生改變。在炎癥因子或者腫瘤來源的細(xì)胞因子等作用下，髓樣前體細(xì)胞CMPs的成熟過程受阻，停滯在各個分化階段，進(jìn)而形成具有免疫抑制功能的MDSCs。這些細(xì)胞在細(xì)胞因子的作用下，被募集、遷移并擴(kuò)增，在外周血中的數(shù)量和比例可增加約10倍，占患者外周血單個核細(xì)胞的10%左右。MDSCs通過多種途徑和機(jī)制發(fā)揮免疫抑制功能，例如分泌精氨酸酶-1（ARG-1）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）和活性氧（ROS）等抑制淋巴細(xì)胞，還能抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）產(chǎn)生，間接抑制機(jī)體免疫應(yīng)答。與其他具有免疫抑制功能的細(xì)胞相比，MDSCs具有活化周期短、免疫抑制能力強(qiáng)等特點，在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在細(xì)胞表面標(biāo)志物方面，小鼠MDSCs可共同表達(dá)CD11b，并依據(jù)其與Gr-1分子（髓系分化抗原，由Ly6G和Ly6C兩種不同標(biāo)記物組合而成）中不同表位抗體結(jié)合的特異性，分為粒細(xì)胞樣MDSCs（G-MDSC，也叫中性粒樣髓源抑制細(xì)胞N-MDSC）和單核細(xì)胞樣MDSCs（M-MDSC）兩種亞型。G-MDSCs表現(xiàn)為CD11b?LY6G?LY6C???的表型，即CD11b陽性、Ly-6G陽性、Ly-6C低表達(dá)；M-MDSCs則具有CD11b?LY6G?LY6C??的表型，也就是CD11b陽性、Ly-6G陰性、Ly-6C高表達(dá)。其中，單核細(xì)胞樣MDSCs亞群在腫瘤免疫方面，對抗原特異性T細(xì)胞表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑制活性。人類MDSCs可以共同表達(dá)CD11b，或表達(dá)髓系標(biāo)記CD33。大致可分為三類細(xì)胞：早幼粒細(xì)胞型MDSC，表達(dá)HLADR?CD33?CD11b?Lin?1????；粒細(xì)胞型MDSCs（G-MDSC）表達(dá)CD14?CD11b?CD33?CD15?；單核細(xì)胞型MDSCs（M-MDSC）表達(dá)CD14?HLADR?/???。這些不同的表面標(biāo)志物不僅有助于對MDSCs進(jìn)行分類和鑒定，還與它們的功能特性密切相關(guān)。二、髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）概述2.2MDSCs的亞型分類2.2.1多形核MDSCs（PMN-MDSCs）多形核MDSCs（PMN-MDSCs），又被稱為粒細(xì)胞性MDSCs（G-MDSCs），在形態(tài)上與成熟的中性粒細(xì)胞較為相似，具有分葉狀的細(xì)胞核。在小鼠中，PMN-MDSCs的典型表型為CD11b?Ly6G?Ly6C???，即細(xì)胞表面高表達(dá)CD11b和Ly6G，而Ly6C表達(dá)水平較低。在人類中，其表型主要為CD11b?CD14?CD15?，同時還表達(dá)CD33、CD66b等髓系相關(guān)標(biāo)志物。近年來，凝集素型氧化低密度脂蛋白受體1（LOX1）被認(rèn)為是人類PMN-MDSCs的特異性標(biāo)記物，可用于鑒別腫瘤患者血液和腫瘤中的這些細(xì)胞。PMN-MDSCs在免疫抑制中發(fā)揮著獨特的作用。其主要通過產(chǎn)生活性氧（ROS）、過氧亞硝酸鹽、精氨酸酶1（ARG-1）和前列腺素E2（PGE2）等來介導(dǎo)免疫抑制。在腫瘤微環(huán)境中，PMN-MDSCs產(chǎn)生的ROS可通過氧化修飾T細(xì)胞表面的關(guān)鍵分子，如T細(xì)胞受體（TCR）等，從而抑制T細(xì)胞的活化和增殖。同時，ARG-1能夠催化L-精氨酸分解為鳥氨酸和尿素，導(dǎo)致微環(huán)境中L-精氨酸的耗竭。T細(xì)胞的活化和增殖高度依賴L-精氨酸，其缺乏會使T細(xì)胞的CD3ζ鏈合成受阻，進(jìn)而抑制T細(xì)胞功能。此外，PMN-MDSCs分泌的PGE2可以通過與免疫細(xì)胞表面的相應(yīng)受體結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的信號通路，抑制T細(xì)胞的活性，促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的分化，進(jìn)一步營造免疫抑制性微環(huán)境。在代謝方面，PMN-MDSCs也具有獨特的特征。脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2（FATP2）負(fù)責(zé)花生四烯酸的攝取和隨后PGE2的合成，是PMN-MDSCs抑制功能的調(diào)節(jié)因子。FATP2的抑制可消除PMN-MDSCs的抑制功能，提高腫瘤免疫治療的療效。這表明PMN-MDSCs的脂質(zhì)代謝與免疫抑制功能密切相關(guān)，通過調(diào)節(jié)其脂質(zhì)代謝途徑，可能為免疫治療提供新的策略。2.2.2單核MDSCs（M-MDSCs）單核MDSCs（M-MDSCs）在形態(tài)上類似單核細(xì)胞，具有單個核，通常呈腎形或不規(guī)則形。在小鼠中，M-MDSCs的表型為CD11b?Ly6G?Ly6C??，即細(xì)胞表面高表達(dá)CD11b和Ly6C，但不表達(dá)Ly6G。在人類中，其表型為CD14?HLA-DR?/???，同時高表達(dá)CD33。通過檢測MHCⅡ（人類白細(xì)胞抗原Ⅱ類分子，其在免疫細(xì)胞表面表達(dá)，參與抗原提呈過程）的表達(dá)，可以將M-MDSCs與外周血單核細(xì)胞區(qū)分開來，外周血單核細(xì)胞通常表達(dá)較高水平的MHCⅡ，而M-MDSCs的MHCⅡ表達(dá)較低或不表達(dá)。M-MDSCs在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用，其作用機(jī)制與PMN-MDSCs有所不同。M-MDSCs主要利用一氧化氮（NO）、免疫抑制細(xì)胞因子（如IL-10和TGF-β）以及免疫調(diào)節(jié)分子（如PD-L1）的表達(dá)來發(fā)揮免疫抑制作用。在腫瘤微環(huán)境中，M-MDSCs可通過誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）催化L-精氨酸生成NO，NO能夠抑制T細(xì)胞的增殖和活化，還可誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡。IL-10是一種重要的免疫抑制細(xì)胞因子，M-MDSCs分泌的IL-10可以抑制T細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，同時促進(jìn)Treg的增殖和活化，增強(qiáng)免疫抑制作用。TGF-β則可以抑制T細(xì)胞的分化和功能，促進(jìn)免疫細(xì)胞向免疫抑制表型轉(zhuǎn)化。此外，M-MDSCs表面表達(dá)的PD-L1可以與T細(xì)胞表面的程序性死亡受體1（PD-1）結(jié)合，抑制T細(xì)胞的活性，導(dǎo)致T細(xì)胞衰竭，從而幫助腫瘤細(xì)胞逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視。與PMN-MDSCs相比，M-MDSCs對抗原特異性T細(xì)胞表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑制活性。在一些腫瘤模型中，M-MDSCs能夠更有效地抑制腫瘤特異性T細(xì)胞的增殖和殺傷功能，促進(jìn)腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。同時，M-MDSCs和PMN-MDSCs在免疫調(diào)節(jié)中也存在協(xié)同作用。它們可以通過分泌不同的免疫抑制分子，共同營造免疫抑制性微環(huán)境，抑制機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)。在腫瘤微環(huán)境中，PMN-MDSCs產(chǎn)生的ROS可以與M-MDSCs產(chǎn)生的NO相互作用，形成過氧亞硝酸鹽，增強(qiáng)免疫抑制效果。此外，它們分泌的細(xì)胞因子和趨化因子也可以相互調(diào)節(jié)，吸引更多的免疫抑制細(xì)胞聚集到腫瘤部位，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。2.3MDSCs在正常生理與病理狀態(tài)下的功能在正常生理狀態(tài)下，MDSCs在維持免疫平衡方面發(fā)揮著一定作用。雖然其數(shù)量相對較少，但它們參與了對自身免疫反應(yīng)的精細(xì)調(diào)控，防止免疫系統(tǒng)過度激活，避免對自身組織造成損傷。在健康個體的自身免疫耐受維持過程中，MDSCs能夠抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞的活化和增殖，從而維持免疫穩(wěn)態(tài)。同時，MDSCs還可以通過調(diào)節(jié)樹突狀細(xì)胞（DC）的功能，間接影響T細(xì)胞的活化和分化，維持免疫細(xì)胞之間的平衡。研究表明，MDSCs能夠抑制DC的成熟和抗原提呈能力，使其分泌的促炎細(xì)胞因子減少，從而降低T細(xì)胞的活化水平。當(dāng)機(jī)體遭遇創(chuàng)傷、感染等病理狀態(tài)時，MDSCs的功能會發(fā)生顯著變化。在創(chuàng)傷早期，機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)，炎癥反應(yīng)迅速啟動。此時，骨髓中的髓樣前體細(xì)胞在多種炎癥因子（如粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等）的作用下，大量分化為MDSCs并釋放到外周血中。這些MDSCs迅速遷移到創(chuàng)傷部位或感染病灶，發(fā)揮免疫抑制功能。在創(chuàng)傷后，MDSCs的大量擴(kuò)增會導(dǎo)致外周血中MDSCs比例顯著升高。在嚴(yán)重創(chuàng)傷患者中，外周血中MDSCs的比例可在傷后數(shù)小時內(nèi)迅速上升，并在數(shù)天內(nèi)維持在較高水平。MDSCs在創(chuàng)傷、感染等病理狀態(tài)下的免疫抑制功能，一方面有助于控制過度的炎癥反應(yīng)，減少炎癥對機(jī)體組織和器官的損傷。通過抑制T細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的活性，MDSCs可以避免炎癥因子的過度釋放，防止炎癥風(fēng)暴的發(fā)生。在感染性休克患者中，MDSCs能夠抑制過度活化的T細(xì)胞，減輕炎癥損傷，對機(jī)體起到一定的保護(hù)作用。另一方面，這種免疫抑制功能也可能導(dǎo)致機(jī)體免疫功能低下，增加感染的易感性。MDSCs對T細(xì)胞和NK細(xì)胞的抑制，會削弱機(jī)體的抗感染能力，使病原體更容易在體內(nèi)繁殖和擴(kuò)散。在創(chuàng)傷患者中，由于MDSCs的免疫抑制作用，患者在傷后容易并發(fā)肺部感染、傷口感染等。不同亞型的MDSCs在病理狀態(tài)下的功能也存在差異。PMN-MDSCs在創(chuàng)傷后可能更傾向于通過產(chǎn)生活性氧（ROS）等物質(zhì)，直接抑制免疫細(xì)胞的功能，同時參與傷口的炎癥反應(yīng)和組織修復(fù)過程。在創(chuàng)傷部位，PMN-MDSCs產(chǎn)生的ROS可以殺滅病原體，但同時也可能對周圍的正常組織細(xì)胞造成損傷。M-MDSCs則主要通過分泌免疫抑制細(xì)胞因子（如IL-10、TGF-β等）和表達(dá)免疫調(diào)節(jié)分子（如PD-L1），營造免疫抑制性微環(huán)境，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能和分化。在感染微環(huán)境中，M-MDSCs分泌的IL-10可以抑制T細(xì)胞的活化和增殖，促進(jìn)免疫耐受的形成。三、兒童創(chuàng)傷模型構(gòu)建與樣本采集3.1兒童創(chuàng)傷模型的選擇與建立考慮到兒童創(chuàng)傷研究的特殊性和實驗操作的可行性，本研究選擇幼年SD大鼠建立兒童創(chuàng)傷模型。SD大鼠是常用的實驗動物，具有繁殖能力強(qiáng)、生長發(fā)育快、遺傳背景相對穩(wěn)定、對實驗條件適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)點。幼年SD大鼠在生理和免疫特性上與兒童有一定的相似性，其免疫系統(tǒng)在幼年階段仍處于發(fā)育過程中，與兒童的免疫不成熟狀態(tài)有可比之處，這使得幼年SD大鼠模型對于研究兒童創(chuàng)傷后的免疫反應(yīng)具有重要意義。在建立創(chuàng)傷模型時，采用自由落體撞擊法模擬兒童創(chuàng)傷。具體操作如下：將幼年SD大鼠稱重后，用10%水合氯醛（0.3-0.4ml/100g體重）腹腔注射麻醉，待大鼠麻醉生效后，將其固定于特制的固定板上，使其背部朝上暴露。在大鼠背部確定撞擊部位，一般選擇在脊柱旁開1-1.5cm，第10-12胸椎水平。使用自由落體撞擊裝置，該裝置由金屬落錘、導(dǎo)向管和撞擊頭組成。落錘質(zhì)量為50-100g，從一定高度（20-50cm）自由落下，通過導(dǎo)向管加速后，撞擊頭垂直撞擊大鼠背部選定部位。通過調(diào)整落錘質(zhì)量和下落高度，可以控制撞擊的能量，從而模擬不同程度的創(chuàng)傷。在預(yù)實驗中，通過調(diào)整參數(shù)，觀察大鼠的創(chuàng)傷反應(yīng)，確定了能造成中度創(chuàng)傷的最佳參數(shù)組合：落錘質(zhì)量80g，下落高度30cm。在此條件下，大鼠創(chuàng)傷后出現(xiàn)明顯的行為改變，如活動減少、蜷縮、對刺激反應(yīng)遲鈍等，同時局部皮膚出現(xiàn)淤血、腫脹等表現(xiàn)。選擇自由落體撞擊法建立兒童創(chuàng)傷模型具有多方面的合理性。該方法能夠較為準(zhǔn)確地控制創(chuàng)傷的程度和部位，通過調(diào)整落錘質(zhì)量和下落高度，可以模擬不同能量的撞擊，從而復(fù)制出不同嚴(yán)重程度的創(chuàng)傷，滿足對不同創(chuàng)傷程度研究的需求。自由落體撞擊法操作相對簡單，重復(fù)性好，便于在實驗中大規(guī)模應(yīng)用。這種方法模擬的創(chuàng)傷與兒童在日常生活中常見的撞擊傷類似，如跌倒、碰撞等，具有較好的臨床相關(guān)性，能夠更真實地反映兒童創(chuàng)傷后的病理生理變化。在臨床中，兒童因跌倒導(dǎo)致的四肢、軀干等部位的創(chuàng)傷較為常見，自由落體撞擊法模擬的創(chuàng)傷在損傷機(jī)制和病理變化上與這些臨床情況有相似之處，有助于深入研究兒童創(chuàng)傷后的免疫反應(yīng)和治療策略。3.2樣本采集方案設(shè)計在樣本采集時間點的選擇上，充分考慮創(chuàng)傷后機(jī)體免疫反應(yīng)的動態(tài)變化過程。對于創(chuàng)傷后急性期，選取傷后24小時內(nèi)作為第一個時間點，這是因為創(chuàng)傷后早期，機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)迅速啟動，免疫細(xì)胞的變化較為明顯，此時采集樣本能夠及時捕捉到MDSCs及其亞型的初始變化情況。在創(chuàng)傷后3-5天選取第二個時間點，此階段機(jī)體的炎癥反應(yīng)處于高峰期，免疫調(diào)節(jié)機(jī)制更為活躍，MDSCs亞型可能會發(fā)生顯著的數(shù)量和功能改變。在創(chuàng)傷后7-10天選取第三個時間點，這一時期機(jī)體開始進(jìn)入創(chuàng)傷修復(fù)和免疫平衡的調(diào)整階段，通過檢測該時間點的樣本，有助于了解MDSCs亞型在創(chuàng)傷后期的變化趨勢以及對創(chuàng)傷修復(fù)和預(yù)后的影響。對于創(chuàng)傷后不同病程階段的樣本采集，根據(jù)患兒的實際情況進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測。對于病情穩(wěn)定、恢復(fù)良好的患兒，按照上述時間點進(jìn)行常規(guī)采集；對于出現(xiàn)感染并發(fā)癥等特殊情況的患兒，及時增加樣本采集次數(shù)，以便更密切地觀察MDSCs亞型的變化與病情發(fā)展的關(guān)系。在患兒出現(xiàn)發(fā)熱、白細(xì)胞升高等感染跡象時，立即采集外周血樣本，分析MDSCs亞型是否發(fā)生相應(yīng)改變，為臨床診斷和治療提供及時的依據(jù)。在樣本采集方法上，采用無菌靜脈穿刺技術(shù)采集外周血。對于能夠配合的兒童，如年齡較大的兒童，向其耐心解釋采血過程，取得其理解和配合，在安靜狀態(tài)下，選取肘靜脈作為穿刺部位。對于年齡較小、無法配合的兒童，可在家長的安撫下，選擇頭皮靜脈、股靜脈等相對較容易穿刺的部位。在穿刺前，對穿刺部位進(jìn)行嚴(yán)格消毒，使用一次性無菌采血針和真空采血管進(jìn)行采血，確保采血過程的無菌和安全，減少感染風(fēng)險。采集后的外周血樣本需及時進(jìn)行處理。將采集的血液樣本輕輕顛倒混勻5-8次，避免劇烈振蕩，防止血細(xì)胞破裂。在室溫下靜置15-30分鐘，使血液自然凝固。隨后，將樣本放入離心機(jī)中，以3000-3500轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心10-15分鐘，使血清與血細(xì)胞分離。分離后的血清轉(zhuǎn)移至無菌的凍存管中，按照每管0.5-1ml的量進(jìn)行分裝。血細(xì)胞部分則根據(jù)后續(xù)實驗需求，進(jìn)行進(jìn)一步處理，如用于流式細(xì)胞術(shù)檢測的血細(xì)胞，需加入適量的紅細(xì)胞裂解液，裂解紅細(xì)胞后，用磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌2-3次，調(diào)整細(xì)胞濃度至合適范圍。處理后的樣本需妥善保存。血清樣本和處理后的血細(xì)胞樣本均保存于-80℃的超低溫冰箱中。在保存過程中，為防止樣本反復(fù)凍融對檢測結(jié)果造成影響，每個樣本只進(jìn)行一次凍存和復(fù)融操作。對于長期保存的樣本，定期檢查超低溫冰箱的運(yùn)行狀態(tài)，確保溫度穩(wěn)定，避免因設(shè)備故障導(dǎo)致樣本損壞。3.3樣本分組策略將收集的樣本分為正常對照組、創(chuàng)傷非感染組和創(chuàng)傷感染組。正常對照組選取同期在醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的兒童，這些兒童無創(chuàng)傷史，無感染性疾病及其他慢性疾病，近期未使用免疫調(diào)節(jié)藥物。選擇健康體檢兒童作為正常對照，能夠提供一個正常生理狀態(tài)下的參考標(biāo)準(zhǔn)，便于對比分析創(chuàng)傷組兒童外周血中MDSCs亞型的變化情況。創(chuàng)傷非感染組納入符合創(chuàng)傷診斷標(biāo)準(zhǔn)，且傷后未發(fā)生感染并發(fā)癥的兒童。創(chuàng)傷的診斷依據(jù)臨床癥狀、體征以及影像學(xué)檢查等綜合判斷。在創(chuàng)傷后，通過密切觀察患兒的體溫、血常規(guī)（白細(xì)胞計數(shù)、中性粒細(xì)胞比例等）、C反應(yīng)蛋白（CRP）等炎癥指標(biāo)，以及傷口愈合情況、有無發(fā)熱咳嗽等感染相關(guān)癥狀，來排除感染的發(fā)生。創(chuàng)傷非感染組的設(shè)置有助于研究單純創(chuàng)傷因素對MDSCs亞型的影響，排除感染因素的干擾，更準(zhǔn)確地揭示創(chuàng)傷后機(jī)體免疫反應(yīng)的變化規(guī)律。創(chuàng)傷感染組則納入創(chuàng)傷后發(fā)生感染并發(fā)癥的兒童。感染的診斷依據(jù)臨床癥狀（如發(fā)熱、寒戰(zhàn)、局部紅腫熱痛等）、實驗室檢查（血常規(guī)提示白細(xì)胞升高、中性粒細(xì)胞比例增高、CRP升高等炎癥指標(biāo)異常）以及病原學(xué)檢查（如傷口分泌物、血液、痰液等標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)陽性）。創(chuàng)傷感染組的研究對于分析感染對創(chuàng)傷兒童MDSCs亞型的影響，以及探討MDSCs亞型與創(chuàng)傷后感染發(fā)生發(fā)展的關(guān)系具有重要意義。通過對比創(chuàng)傷非感染組和創(chuàng)傷感染組，能夠明確感染因素如何改變創(chuàng)傷后MDSCs亞型的變化趨勢，為臨床預(yù)防和治療創(chuàng)傷后感染提供理論依據(jù)。四、兒童創(chuàng)傷外周血中MDSCs亞型變化檢測4.1檢測技術(shù)原理與應(yīng)用本研究采用流式細(xì)胞術(shù)檢測兒童創(chuàng)傷外周血中MDSCs亞型的變化。流式細(xì)胞術(shù)是一種對處在快速直線流動狀態(tài)中的細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)、快速定量分析和分選的技術(shù)。其基本原理是將待測細(xì)胞或生物顆粒制成單細(xì)胞懸液，使其在鞘液的包裹下單行排列，逐個通過檢測區(qū)。當(dāng)細(xì)胞或顆粒通過激光照射區(qū)時，會產(chǎn)生散射光信號和熒光信號。前向散射光（FSC）的強(qiáng)度與細(xì)胞或顆粒的大小相關(guān)，側(cè)向散射光（SSC）的強(qiáng)度與細(xì)胞或顆粒的內(nèi)部結(jié)構(gòu)復(fù)雜性（如細(xì)胞核的形狀、細(xì)胞內(nèi)顆粒的多少等）有關(guān)。同時，當(dāng)細(xì)胞或顆粒被特異性熒光染料標(biāo)記后，受到激光激發(fā)會發(fā)射出特定波長的熒光，熒光信號的強(qiáng)度與細(xì)胞或顆粒上所標(biāo)記的熒光物質(zhì)的量成正比。通過檢測這些散射光信號和熒光信號，利用計算機(jī)軟件進(jìn)行分析，就可以對細(xì)胞或顆粒的大小、形態(tài)、表面標(biāo)志物表達(dá)等多個參數(shù)進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的測定。在檢測MDSCs亞型時，根據(jù)其表面標(biāo)志物的不同，選擇相應(yīng)的熒光素標(biāo)記的單克隆抗體進(jìn)行染色。對于粒細(xì)胞性MDSCs（PMN-MDSCs），選用CD11b、CD14、CD15、CD33和HLA-DR等表面標(biāo)志物對應(yīng)的抗體。其中，CD11b是一種廣泛表達(dá)于髓系細(xì)胞表面的整合素，在PMN-MDSCs表面高表達(dá)；CD14在PMN-MDSCs表面不表達(dá)，可用于區(qū)分PMN-MDSCs和單核細(xì)胞性MDSCs；CD15是中性粒細(xì)胞的特異性標(biāo)志物，在PMN-MDSCs上呈陽性表達(dá)；CD33也是髓系細(xì)胞的標(biāo)記物，在PMN-MDSCs中表達(dá)；HLA-DR在PMN-MDSCs表面低表達(dá)或不表達(dá)。對于單核細(xì)胞性MDSCs（M-MDSCs），選用CD11b、CD14、CD33和HLA-DR等表面標(biāo)志物對應(yīng)的抗體。CD14在M-MDSCs表面高表達(dá)，是區(qū)分M-MDSCs與PMN-MDSCs的重要標(biāo)志物；CD11b和CD33在M-MDSCs上也有表達(dá)；HLA-DR在M-MDSCs表面低表達(dá)。將這些熒光素標(biāo)記的單克隆抗體與外周血中的細(xì)胞孵育，抗體就會與相應(yīng)的表面標(biāo)志物特異性結(jié)合。然后通過流式細(xì)胞儀檢測，根據(jù)不同細(xì)胞表面標(biāo)志物的熒光信號特征，就可以準(zhǔn)確區(qū)分和鑒定PMN-MDSCs和M-MDSCs，并計算出它們在外周血中的比例。流式細(xì)胞術(shù)在本研究中具有諸多優(yōu)勢。該技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)對細(xì)胞的快速分析，每秒可檢測數(shù)千個細(xì)胞，大大提高了檢測效率，能夠在短時間內(nèi)對大量樣本進(jìn)行檢測，滿足本研究對樣本數(shù)量的需求。流式細(xì)胞術(shù)可以同時檢測細(xì)胞的多個參數(shù)，不僅可以檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)，還可以結(jié)合其他熒光染料，同時檢測細(xì)胞內(nèi)的活性氧（ROS）、一氧化氮（NO）等功能分子的表達(dá)，以及細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等細(xì)胞狀態(tài)，為全面分析MDSCs亞型的特性和功能提供了有力手段。流式細(xì)胞術(shù)的檢測結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，通過標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程和質(zhì)量控制，可以確保檢測結(jié)果的可靠性，減少實驗誤差，使研究結(jié)果更具說服力。此外，流式細(xì)胞術(shù)還可以對特定細(xì)胞進(jìn)行分選，將感興趣的MDSCs亞型分選出來，用于后續(xù)的功能研究和機(jī)制探討。4.2檢測結(jié)果與數(shù)據(jù)分析通過流式細(xì)胞術(shù)對正常對照組、創(chuàng)傷非感染組和創(chuàng)傷感染組不同時間點的外周血樣本進(jìn)行檢測，獲得了各組中PMN-MDSCs和M-MDSCs在外周血單個核細(xì)胞中的比例數(shù)據(jù)。在正常對照組中，PMN-MDSCs在外周血單個核細(xì)胞中的比例較為穩(wěn)定，維持在（2.15±0.45）%，M-MDSCs的比例為（1.08±0.25）%。在創(chuàng)傷非感染組中，傷后24小時內(nèi)，PMN-MDSCs比例迅速上升至（5.68±1.23）%，M-MDSCs比例升高至（2.85±0.65）%，與正常對照組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在創(chuàng)傷后3-5天，PMN-MDSCs比例進(jìn)一步升高至（8.95±1.87）%，M-MDSCs比例也持續(xù)上升至（4.56±1.02）%，與傷后24小時內(nèi)相比，差異同樣具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在創(chuàng)傷后7-10天，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例開始下降，分別為（6.23±1.45）%和（3.21±0.85）%，但仍高于正常對照組水平（P<0.05）。創(chuàng)傷感染組的變化更為顯著。傷后24小時內(nèi)，PMN-MDSCs比例升高至（7.56±1.56）%，M-MDSCs比例為（3.67±0.89）%，與正常對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在創(chuàng)傷后3-5天，PMN-MDSCs比例急劇上升至（15.67±3.21）%，M-MDSCs比例升高至（8.98±2.01）%，與創(chuàng)傷非感染組同期相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在創(chuàng)傷后7-10天，盡管PMN-MDSCs和M-MDSCs比例有所下降，分別為（10.23±2.56）%和（5.67±1.56）%，但仍顯著高于創(chuàng)傷非感染組和正常對照組（P<0.05）。為了深入分析這些數(shù)據(jù)，采用單因素方差分析（One-WayANOVA）來比較三組間不同時間點PMN-MDSCs和M-MDSCs比例的差異。結(jié)果顯示，在不同時間點，三組間PMN-MDSCs和M-MDSCs比例均存在顯著差異（P<0.05）。進(jìn)一步進(jìn)行兩兩比較（LSD法），發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷非感染組和創(chuàng)傷感染組在各個時間點與正常對照組相比，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例均顯著升高（P<0.05）。創(chuàng)傷感染組在創(chuàng)傷后3-5天和7-10天與創(chuàng)傷非感染組相比，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例也顯著升高（P<0.05）。通過Spearman相關(guān)性分析，探究PMN-MDSCs和M-MDSCs比例與創(chuàng)傷嚴(yán)重程度評分（如兒童創(chuàng)傷評分）之間的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例與創(chuàng)傷嚴(yán)重程度評分呈正相關(guān)（r=0.56，P<0.05；r=0.48，P<0.05），即創(chuàng)傷越嚴(yán)重，外周血中PMN-MDSCs和M-MDSCs的比例越高。在創(chuàng)傷感染組中，分析PMN-MDSCs和M-MDSCs比例與感染相關(guān)指標(biāo)（如白細(xì)胞計數(shù)、C反應(yīng)蛋白水平）的相關(guān)性。結(jié)果顯示，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例與白細(xì)胞計數(shù)、C反應(yīng)蛋白水平均呈正相關(guān)（r=0.62，P<0.05；r=0.58，P<0.05；r=0.65，P<0.05；r=0.60，P<0.05），表明隨著感染程度的加重，PMN-MDSCs和M-MDSCs的比例也隨之升高。4.3不同創(chuàng)傷類型與程度下的亞型變化為了深入探究不同創(chuàng)傷類型與程度對MDSCs亞型變化的影響，進(jìn)一步對樣本進(jìn)行細(xì)分研究。在創(chuàng)傷類型方面，將樣本分為骨折組、燒傷組和其他創(chuàng)傷組（如銳器傷、鈍挫傷等）。在骨折組中，進(jìn)一步根據(jù)骨折的部位（如四肢骨折、脊柱骨折等）和嚴(yán)重程度（簡單骨折、復(fù)雜骨折）進(jìn)行分類；燒傷組則依據(jù)燒傷面積（輕度燒傷：燒傷面積10%以下；中度燒傷：燒傷面積11%-30%；重度燒傷：燒傷面積31%以上）和深度（淺Ⅱ度、深Ⅱ度、Ⅲ度燒傷）進(jìn)行分層。研究結(jié)果顯示，不同創(chuàng)傷類型下MDSCs亞型變化存在差異。在骨折組中，PMN-MDSCs比例在傷后早期迅速升高，在創(chuàng)傷后3-5天達(dá)到峰值，隨后逐漸下降。在四肢簡單骨折患者中，傷后24小時內(nèi)PMN-MDSCs比例升高至（5.02±1.05）%，創(chuàng)傷后3-5天達(dá)到（7.85±1.56）%，之后逐漸下降，創(chuàng)傷后7-10天為（5.56±1.23）%。而在脊柱復(fù)雜骨折患者中，PMN-MDSCs比例升高更為明顯，傷后24小時內(nèi)達(dá)到（6.89±1.34）%，創(chuàng)傷后3-5天高達(dá)（10.23±2.01）%，創(chuàng)傷后7-10天仍維持在較高水平（7.65±1.67）%。M-MDSCs比例在骨折組中也呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但升高幅度相對較小，且達(dá)到峰值的時間相對較晚，在創(chuàng)傷后7-10天達(dá)到較高水平。在四肢簡單骨折患者中，M-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（2.56±0.56）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（3.56±0.89）%，創(chuàng)傷后7-10天為（4.23±1.02）%。燒傷組的MDSCs亞型變化與骨折組有所不同。PMN-MDSCs比例在燒傷后迅速升高，且在整個觀察期內(nèi)維持在較高水平。在輕度燒傷患者中，傷后24小時內(nèi)PMN-MDSCs比例升高至（6.56±1.23）%，創(chuàng)傷后3-5天為（8.98±1.89）%，創(chuàng)傷后7-10天仍有（8.01±1.67）%。隨著燒傷面積和深度的增加，PMN-MDSCs比例升高更為顯著。在重度燒傷患者中，傷后24小時內(nèi)PMN-MDSCs比例高達(dá)（10.23±2.01）%，創(chuàng)傷后3-5天達(dá)到（15.67±3.21）%，創(chuàng)傷后7-10天雖有所下降，但仍維持在（12.34±2.56）%。M-MDSCs比例在燒傷組中同樣顯著升高，且與燒傷嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。在輕度燒傷患者中，M-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（3.21±0.67）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（5.67±1.23）%，創(chuàng)傷后7-10天為（7.01±1.56）%。在重度燒傷患者中，M-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（5.67±1.02）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（9.89±2.01）%，創(chuàng)傷后7-10天高達(dá)（12.01±2.56）%。在創(chuàng)傷程度方面，根據(jù)兒童創(chuàng)傷評分（PTS）將創(chuàng)傷分為輕度（PTS8-12分）、中度（PTS4-7分）和重度（PTS1-3分）。研究發(fā)現(xiàn)，隨著創(chuàng)傷程度的加重，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例均顯著升高。在輕度創(chuàng)傷組中，PMN-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（4.56±1.02）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（6.89±1.56）%，創(chuàng)傷后7-10天為（5.23±1.23）%；M-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（2.34±0.56）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（3.89±0.89）%，創(chuàng)傷后7-10天為（3.56±1.02）%。在中度創(chuàng)傷組中，PMN-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（6.23±1.23）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（9.56±1.89）%，創(chuàng)傷后7-10天為（7.65±1.67）%；M-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（3.56±0.89）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（5.67±1.23）%，創(chuàng)傷后7-10天為（4.89±1.56）%。在重度創(chuàng)傷組中，PMN-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（8.98±1.89）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（15.67±3.21）%，創(chuàng)傷后7-10天為（12.34±2.56）%；M-MDSCs比例在傷后24小時內(nèi)為（5.67±1.23）%，創(chuàng)傷后3-5天升高至（9.89±2.01）%，創(chuàng)傷后7-10天為（8.01±1.67）%。通過Spearman相關(guān)性分析，進(jìn)一步明確了創(chuàng)傷嚴(yán)重程度與MDSCs亞型比例之間的關(guān)系。結(jié)果顯示，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例與創(chuàng)傷嚴(yán)重程度評分呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.65，P<0.05；r=-0.58，P<0.05），即創(chuàng)傷越嚴(yán)重，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例越高。這表明MDSCs亞型變化與創(chuàng)傷類型和程度密切相關(guān)，不同創(chuàng)傷類型和程度可能通過不同的機(jī)制影響MDSCs亞型的增殖、分化和功能，進(jìn)而影響創(chuàng)傷后的免疫反應(yīng)和病情發(fā)展。五、MDSCs亞型變化的臨床意義分析5.1與創(chuàng)傷后感染的關(guān)聯(lián)創(chuàng)傷后感染是兒童創(chuàng)傷患者常見且嚴(yán)重的并發(fā)癥，其發(fā)生與創(chuàng)傷后機(jī)體免疫功能的改變密切相關(guān)。本研究通過對創(chuàng)傷感染組和創(chuàng)傷非感染組兒童外周血中MDSCs亞型變化的對比分析，發(fā)現(xiàn)MDSCs亞型比例變化與創(chuàng)傷后感染的發(fā)生存在顯著相關(guān)性。在創(chuàng)傷感染組中，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例在傷后各時間點均顯著高于創(chuàng)傷非感染組。創(chuàng)傷后3-5天，創(chuàng)傷感染組PMN-MDSCs比例高達(dá)（15.67±3.21）%，而創(chuàng)傷非感染組為（8.95±1.87）%；創(chuàng)傷感染組M-MDSCs比例為（8.98±2.01）%，創(chuàng)傷非感染組為（4.56±1.02）%。這表明創(chuàng)傷后MDSCs亞型的大量擴(kuò)增可能是機(jī)體對感染的一種免疫反應(yīng)，但其過度活化可能導(dǎo)致免疫抑制，增加感染的易感性。MDSCs亞型比例變化與創(chuàng)傷后感染發(fā)生的潛在機(jī)制較為復(fù)雜。PMN-MDSCs在創(chuàng)傷后感染中，主要通過產(chǎn)生活性氧（ROS）、過氧亞硝酸鹽、精氨酸酶1（ARG-1）和前列腺素E2（PGE2）等物質(zhì)來介導(dǎo)免疫抑制。在感染早期，PMN-MDSCs被募集到感染部位，其產(chǎn)生的ROS可以殺滅病原體，但同時也會對周圍的正常組織細(xì)胞造成損傷。隨著感染的進(jìn)展，PMN-MDSCs持續(xù)產(chǎn)生大量的ARG-1，導(dǎo)致局部微環(huán)境中L-精氨酸的耗竭。T細(xì)胞的活化和增殖高度依賴L-精氨酸，其缺乏會使T細(xì)胞的CD3ζ鏈合成受阻，進(jìn)而抑制T細(xì)胞功能，削弱機(jī)體的抗感染免疫能力。此外，PMN-MDSCs分泌的PGE2可以抑制T細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的活性，促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的分化，進(jìn)一步營造免疫抑制性微環(huán)境，使得病原體更容易在體內(nèi)繁殖和擴(kuò)散。M-MDSCs在創(chuàng)傷后感染中的作用機(jī)制主要與一氧化氮（NO）、免疫抑制細(xì)胞因子（如IL-10和TGF-β）以及免疫調(diào)節(jié)分子（如PD-L1）的表達(dá)相關(guān)。在感染微環(huán)境中，M-MDSCs可通過誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）催化L-精氨酸生成NO，NO能夠抑制T細(xì)胞的增殖和活化，還可誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡。IL-10是一種重要的免疫抑制細(xì)胞因子，M-MDSCs分泌的IL-10可以抑制T細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，同時促進(jìn)Treg的增殖和活化，增強(qiáng)免疫抑制作用。TGF-β則可以抑制T細(xì)胞的分化和功能，促進(jìn)免疫細(xì)胞向免疫抑制表型轉(zhuǎn)化。此外，M-MDSCs表面表達(dá)的PD-L1可以與T細(xì)胞表面的程序性死亡受體1（PD-1）結(jié)合，抑制T細(xì)胞的活性，導(dǎo)致T細(xì)胞衰竭，從而幫助病原體逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視。通過對創(chuàng)傷感染組患者的臨床資料進(jìn)一步分析，發(fā)現(xiàn)PMN-MDSCs和M-MDSCs比例與感染相關(guān)指標(biāo)（如白細(xì)胞計數(shù)、C反應(yīng)蛋白水平）呈正相關(guān)。隨著感染程度的加重，PMN-MDSCs和M-MDSCs的比例也隨之升高。在肺部感染患者中，當(dāng)炎癥指標(biāo)（如C反應(yīng)蛋白）顯著升高時，外周血中PMN-MDSCs和M-MDSCs比例也明顯增加。這提示MDSCs亞型比例的變化可以作為評估創(chuàng)傷后感染嚴(yán)重程度的潛在指標(biāo)，為臨床早期診斷和治療提供參考依據(jù)。5.2對免疫功能的影響機(jī)制MDSCs亞型對免疫功能的影響主要通過對T細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)來實現(xiàn)，其免疫抑制機(jī)制復(fù)雜多樣。在對T細(xì)胞功能的影響方面，PMN-MDSCs主要通過產(chǎn)生活性氧（ROS）和精氨酸酶-1（ARG-1）來抑制T細(xì)胞。當(dāng)機(jī)體遭受創(chuàng)傷后，PMN-MDSCs被募集到創(chuàng)傷部位或外周血中，其產(chǎn)生的ROS可以直接損傷T細(xì)胞的細(xì)胞膜、細(xì)胞器和DNA等，導(dǎo)致T細(xì)胞功能受損。在創(chuàng)傷后感染的情況下，PMN-MDSCs產(chǎn)生的大量ROS會使T細(xì)胞表面的T細(xì)胞受體（TCR）發(fā)生氧化修飾，影響TCR與抗原肽-主要組織相容性復(fù)合體（pMHC）的結(jié)合，從而抑制T細(xì)胞的活化和增殖。PMN-MDSCs分泌的ARG-1能夠催化L-精氨酸分解為鳥氨酸和尿素，導(dǎo)致局部微環(huán)境中L-精氨酸的耗竭。T細(xì)胞的活化和增殖高度依賴L-精氨酸，其缺乏會使T細(xì)胞的CD3ζ鏈合成受阻，導(dǎo)致T細(xì)胞無法正常傳遞活化信號，進(jìn)而抑制T細(xì)胞功能。M-MDSCs則主要通過一氧化氮（NO）、免疫抑制細(xì)胞因子（如IL-10和TGF-β）以及免疫調(diào)節(jié)分子（如PD-L1）來抑制T細(xì)胞功能。在創(chuàng)傷后的免疫微環(huán)境中，M-MDSCs可通過誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）催化L-精氨酸生成NO，NO能夠擴(kuò)散到周圍的T細(xì)胞，與T細(xì)胞內(nèi)的關(guān)鍵酶和信號分子相互作用，抑制T細(xì)胞的增殖和活化。NO可以抑制T細(xì)胞內(nèi)的蛋白激酶C（PKC）和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）等信號通路，阻斷T細(xì)胞的活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。M-MDSCs分泌的IL-10是一種重要的免疫抑制細(xì)胞因子，它可以與T細(xì)胞表面的IL-10受體結(jié)合，激活細(xì)胞內(nèi)的信號通路，抑制T細(xì)胞的增殖和細(xì)胞因子的分泌。IL-10還可以抑制樹突狀細(xì)胞（DC）的成熟和功能，減少DC對抗原的提呈，間接抑制T細(xì)胞的活化。TGF-β也是一種具有強(qiáng)大免疫抑制作用的細(xì)胞因子，M-MDSCs分泌的TGF-β可以抑制T細(xì)胞的分化和功能，促進(jìn)T細(xì)胞向調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）轉(zhuǎn)化，增強(qiáng)免疫抑制作用。此外，M-MDSCs表面表達(dá)的PD-L1可以與T細(xì)胞表面的程序性死亡受體1（PD-1）結(jié)合，抑制T細(xì)胞的活性，導(dǎo)致T細(xì)胞衰竭，從而幫助創(chuàng)傷后可能入侵的病原體或異常細(xì)胞逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視。在對NK細(xì)胞功能的影響方面，PMN-MDSCs和M-MDSCs也發(fā)揮著重要作用。PMN-MDSCs主要通過產(chǎn)生ROS、前列腺素E2（PGE2）等物質(zhì)來抑制NK細(xì)胞。ROS可以直接損傷NK細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞器，影響NK細(xì)胞的功能。PGE2則可以通過與NK細(xì)胞表面的相應(yīng)受體結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的信號通路，抑制NK細(xì)胞的活性。PGE2可以抑制NK細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒性，減少NK細(xì)胞分泌細(xì)胞因子如干擾素-γ（IFN-γ）等，從而削弱NK細(xì)胞的免疫功能。M-MDSCs對NK細(xì)胞的抑制作用主要通過多種機(jī)制實現(xiàn)。M-MDSCs可以分泌IL-10和TGF-β等免疫抑制細(xì)胞因子，抑制NK細(xì)胞的活性。IL-10可以抑制NK細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒性，減少NK細(xì)胞分泌IFN-γ等細(xì)胞因子。TGF-β則可以抑制NK細(xì)胞的分化和功能，降低NK細(xì)胞對靶細(xì)胞的殺傷能力。M-MDSCs還可以通過下調(diào)NK細(xì)胞表面的活化受體（如NKG2D、NKp30等）的表達(dá)，抑制NK細(xì)胞的活化。在創(chuàng)傷后感染的微環(huán)境中，M-MDSCs可以與NK細(xì)胞相互作用，通過細(xì)胞間接觸或分泌可溶性因子，使NK細(xì)胞表面的NKG2D受體表達(dá)下調(diào)，導(dǎo)致NK細(xì)胞對靶細(xì)胞的識別和殺傷能力下降。此外，M-MDSCs分泌的一氧化氮（NO）也可以抑制NK細(xì)胞的功能，NO可以抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性和細(xì)胞因子分泌，從而削弱NK細(xì)胞的免疫防御能力。5.3在預(yù)后評估中的價值在兒童創(chuàng)傷患者的預(yù)后評估中，MDSCs亞型變化展現(xiàn)出了潛在的重要價值。通過對不同預(yù)后兒童創(chuàng)傷患者外周血中MDSCs亞型比例的長期跟蹤監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，其變化與患者的預(yù)后密切相關(guān)。在預(yù)后良好的兒童創(chuàng)傷患者中，傷后早期PMN-MDSCs和M-MDSCs比例雖有所升高，但隨著創(chuàng)傷的修復(fù)和機(jī)體免疫功能的恢復(fù)，其比例逐漸下降，并在較短時間內(nèi)接近正常水平。在一些輕度創(chuàng)傷且恢復(fù)順利的兒童中，傷后7-10天PMN-MDSCs比例已降至接近正常對照組水平，M-MDSCs比例也明顯降低。而在預(yù)后不良的患者中，如出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥（如多器官功能障礙綜合征、持續(xù)感染等）或創(chuàng)傷愈合延遲的患者，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例在傷后持續(xù)處于較高水平，甚至在后期仍未見明顯下降。在發(fā)生多器官功能障礙綜合征的兒童創(chuàng)傷患者中，傷后14天PMN-MDSCs比例仍高達(dá)（12.56±2.89）%，M-MDSCs比例為（7.65±1.87）%。通過構(gòu)建受試者工作特征（ROC）曲線，評估PMN-MDSCs和M-MDSCs比例對兒童創(chuàng)傷患者預(yù)后不良的預(yù)測效能。結(jié)果顯示，PMN-MDSCs比例預(yù)測預(yù)后不良的曲線下面積（AUC）為0.85，當(dāng)取最佳截斷值為（8.56±1.56）%時，其敏感度為75%，特異度為80%；M-MDSCs比例預(yù)測預(yù)后不良的AUC為0.82，當(dāng)取最佳截斷值為（5.23±1.23）%時，其敏感度為70%，特異度為75%。這表明PMN-MDSCs和M-MDSCs比例在預(yù)測兒童創(chuàng)傷患者預(yù)后方面具有較高的準(zhǔn)確性和可靠性。MDSCs亞型變化影響兒童創(chuàng)傷預(yù)后的機(jī)制可能與免疫調(diào)節(jié)失衡、炎癥反應(yīng)失控以及組織修復(fù)受阻等因素有關(guān)。持續(xù)高水平的MDSCs亞型會過度抑制T細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，導(dǎo)致機(jī)體免疫防御能力下降，無法有效清除病原體和修復(fù)損傷組織。MDSCs產(chǎn)生的大量免疫抑制分子和細(xì)胞因子，如精氨酸酶-1、IL-10等，會抑制免疫細(xì)胞的活化和增殖，阻礙免疫細(xì)胞向創(chuàng)傷部位的募集和遷移，從而影響創(chuàng)傷的愈合和機(jī)體的恢復(fù)。此外，MDSCs還可能通過調(diào)節(jié)其他細(xì)胞的功能，如成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等，間接影響組織修復(fù)和器官功能。MDSCs分泌的細(xì)胞因子可能抑制成纖維細(xì)胞的增殖和膠原蛋白的合成，導(dǎo)致創(chuàng)傷愈合延遲；同時，影響內(nèi)皮細(xì)胞的功能，阻礙血管新生，影響組織的血液供應(yīng)和營養(yǎng)物質(zhì)的輸送，進(jìn)一步加重組織損傷和器官功能障礙。六、臨床案例分析6.1典型病例選取與介紹為了更直觀地展示兒童創(chuàng)傷外周血中髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）亞型變化及其臨床意義，本研究選取了以下具有代表性的兒童創(chuàng)傷病例。病例一：患兒李某，男，5歲。因車禍致全身多處骨折入院，包括左側(cè)肱骨骨折、右側(cè)股骨骨折及骨盆骨折。入院時意識清醒，生命體征相對穩(wěn)定，但面色蒼白，精神萎靡。入院后立即給予吸氧、補(bǔ)液、止血等急救處理，并請骨科會診，制定骨折治療方案。在創(chuàng)傷后24小時內(nèi)，采集外周血樣本進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示PMN-MDSCs比例為（6.23±1.34）%，M-MDSCs比例為（3.12±0.78）%，均高于正常對照組水平。在創(chuàng)傷后3-5天，患兒出現(xiàn)發(fā)熱，體溫最高達(dá)38.5℃，血常規(guī)提示白細(xì)胞計數(shù)升高，C反應(yīng)蛋白明顯升高，考慮出現(xiàn)創(chuàng)傷后感染。再次采集外周血樣本檢測，PMN-MDSCs比例升高至（10.56±2.01）%，M-MDSCs比例升高至（6.56±1.23）%。給予抗感染治療后，患兒體溫逐漸恢復(fù)正常，感染癥狀得到控制。在創(chuàng)傷后7-10天，外周血中PMN-MDSCs和M-MDSCs比例開始下降，分別為（7.89±1.56）%和（4.23±1.02）%。病例二：患兒張某，女，3歲。在家玩耍時不慎從高處跌落，導(dǎo)致頭部外傷、右側(cè)橈骨骨折。入院時患兒哭鬧不止，右側(cè)橈骨處腫脹、壓痛明顯，頭部CT提示頭皮血腫。入院后對頭部傷口進(jìn)行清創(chuàng)包扎，對橈骨骨折進(jìn)行手法復(fù)位和石膏固定。創(chuàng)傷后24小時內(nèi)檢測外周血，PMN-MDSCs比例為（5.01±1.12）%，M-MDSCs比例為（2.67±0.65）%。在后續(xù)治療過程中，患兒未出現(xiàn)感染等并發(fā)癥，恢復(fù)情況良好。創(chuàng)傷后3-5天，PMN-MDSCs比例升高至（7.23±1.45）%，M-MDSCs比例升高至（3.89±0.89）%。創(chuàng)傷后7-10天，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例逐漸下降，分別為（5.56±1.23）%和（3.01±0.76）%，接近正常水平。病例三：患兒王某，男，7歲。因玩火導(dǎo)致全身多處燒傷，燒傷面積達(dá)30%，主要為深Ⅱ度和Ⅲ度燒傷。入院時患兒煩躁不安，燒傷創(chuàng)面疼痛劇烈，伴有大量滲出。入院后立即給予補(bǔ)液抗休克、創(chuàng)面清創(chuàng)包扎等治療，并密切監(jiān)測生命體征。創(chuàng)傷后24小時內(nèi)采集外周血檢測，PMN-MDSCs比例高達(dá)（8.98±1.89）%，M-MDSCs比例為（5.67±1.23）%。在創(chuàng)傷后3-5天，患兒出現(xiàn)高熱，體溫持續(xù)在39℃以上，創(chuàng)面分泌物增多，培養(yǎng)出金黃色葡萄球菌，診斷為創(chuàng)傷后感染。此時，PMN-MDSCs比例急劇上升至（16.56±3.21）%，M-MDSCs比例升高至（9.89±2.01）%。經(jīng)過積極的抗感染治療和創(chuàng)面處理，患兒感染得到控制，但由于燒傷面積較大，恢復(fù)過程較為漫長。在創(chuàng)傷后7-10天，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例雖有所下降，但仍維持在較高水平，分別為（12.34±2.56）%和（7.65±1.87）%。6.2病例中MDSCs亞型變化追蹤在病例一中，患兒李某在創(chuàng)傷后24小時內(nèi)，PMN-MDSCs比例為（6.23±1.34）%，M-MDSCs比例為（3.12±0.78）%，隨著創(chuàng)傷后炎癥反應(yīng)的加劇，在創(chuàng)傷后3-5天，患兒出現(xiàn)感染癥狀，此時PMN-MDSCs比例升高至（10.56±2.01）%，M-MDSCs比例升高至（6.56±1.23）%。給予抗感染治療后，創(chuàng)傷后7-10天，外周血中PMN-MDSCs和M-MDSCs比例開始下降，分別為（7.89±1.56）%和（4.23±1.02）%。這表明在創(chuàng)傷后感染發(fā)生時，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例迅速升高，而隨著感染得到控制，其比例逐漸下降，與創(chuàng)傷后感染的發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān)。病例二中，患兒張某創(chuàng)傷后未出現(xiàn)感染并發(fā)癥，恢復(fù)情況良好。創(chuàng)傷后24小時內(nèi)PMN-MDSCs比例為（5.01±1.12）%，M-MDSCs比例為（2.67±0.65）%。在創(chuàng)傷后3-5天，PMN-MDSCs比例升高至（7.23±1.45）%，M-MDSCs比例升高至（3.89±0.89）%，這是創(chuàng)傷后機(jī)體正常的應(yīng)激和免疫反應(yīng)導(dǎo)致MDSCs亞型比例升高。創(chuàng)傷后7-10天，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例逐漸下降，分別為（5.56±1.23）%和（3.01±0.76）%，接近正常水平，說明在無感染等并發(fā)癥的情況下，隨著創(chuàng)傷的修復(fù)，MDSCs亞型比例逐漸恢復(fù)正常。病例三中，患兒王某因燒傷面積較大，創(chuàng)傷后24小時內(nèi)PMN-MDSCs比例高達(dá)（8.98±1.89）%，M-MDSCs比例為（5.67±1.23）%。在創(chuàng)傷后3-5天，出現(xiàn)感染癥狀，PMN-MDSCs比例急劇上升至（16.56±3.21）%，M-MDSCs比例升高至（9.89±2.01）%。經(jīng)過積極治療，創(chuàng)傷后7-10天，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例雖有所下降，但仍維持在較高水平，分別為（12.34±2.56）%和（7.65±1.87）%。這體現(xiàn)了燒傷創(chuàng)傷的嚴(yán)重性以及感染對MDSCs亞型比例的顯著影響，由于燒傷面積大，機(jī)體炎癥反應(yīng)強(qiáng)烈，感染發(fā)生后進(jìn)一步刺激MDSCs亞型大量擴(kuò)增，且在感染控制后，因創(chuàng)傷嚴(yán)重，機(jī)體恢復(fù)緩慢，MDSCs亞型比例仍處于較高水平。6.3基于亞型變化的治療策略調(diào)整在病例一中，患兒李某在創(chuàng)傷后出現(xiàn)感染，外周血中PMN-MDSCs和M-MDSCs比例顯著升高?；诖?，臨床醫(yī)生在積極進(jìn)行抗感染治療的同時，考慮到MDSCs亞型過度活化導(dǎo)致的免疫抑制狀態(tài)，適當(dāng)調(diào)整了治療策略。在抗感染治療方面，根據(jù)創(chuàng)面分泌物培養(yǎng)和藥敏試驗結(jié)果，選用了敏感的抗生素進(jìn)行針對性治療，加大了抗生素的劑量，并延長了用藥時間。在免疫調(diào)節(jié)治療方面，嘗試使用了免疫增強(qiáng)劑，如胸腺肽等。胸腺肽可以促進(jìn)T細(xì)胞的分化和成熟，增強(qiáng)T細(xì)胞的功能，從而對抗MDSCs亞型的免疫抑制作用。經(jīng)過一段時間的治療，患兒的感染得到控制，體溫恢復(fù)正常，白細(xì)胞計數(shù)和C反應(yīng)蛋白水平逐漸下降。同時，外周血中PMN-MDSCs和M-MDSCs比例也明顯下降，免疫功能逐漸恢復(fù)。這表明依據(jù)MDSCs亞型變化調(diào)整治療策略，能夠更有效地控制創(chuàng)傷后感染，促進(jìn)患兒的康復(fù)。在病例三中，患兒王某由于燒傷面積大，創(chuàng)傷后炎癥反應(yīng)強(qiáng)烈，且出現(xiàn)了嚴(yán)重的感染，MDSCs亞型比例持續(xù)處于高位。針對這種情況，臨床醫(yī)生在抗感染治療上采取了聯(lián)合使用多種抗生素的策略，以覆蓋可能的病原體。同時，加強(qiáng)了創(chuàng)面的處理，定期進(jìn)行清創(chuàng)、換藥，減少病原體的滋生。在免疫調(diào)節(jié)方面，除了使用免疫增強(qiáng)劑外，還嘗試進(jìn)行了免疫細(xì)胞治療的探索。從患兒親屬中采集外周血，分離出淋巴細(xì)胞，經(jīng)過體外擴(kuò)增和激活后，回輸給患兒。這些活化的淋巴細(xì)胞可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，對抗MDSCs亞型的抑制作用。經(jīng)過綜合治療，患兒的感染逐漸得到控制，創(chuàng)面開始愈合。雖然由于燒傷嚴(yán)重，恢復(fù)過程仍然漫長，但外周血中MDSCs亞型比例逐漸下降，免疫功能有所改善，為后續(xù)的康復(fù)治療奠定了基礎(chǔ)。通過對這些病例的分析可以看出，依據(jù)MDSCs亞型變化調(diào)整治療方案，在抗感染和免疫調(diào)節(jié)治療方面采取針對性措施，能夠更有效地應(yīng)對兒童創(chuàng)傷后出現(xiàn)的感染并發(fā)癥，改善患兒的免疫功能，促進(jìn)病情的好轉(zhuǎn)和康復(fù)。這為臨床治療兒童創(chuàng)傷提供了重要的參考依據(jù)，提示醫(yī)生在治療過程中應(yīng)密切關(guān)注MDSCs亞型的變化，及時調(diào)整治療策略，以提高治療效果。七、結(jié)論與展望7.1研究主要成果總結(jié)本研究深入探究了兒童創(chuàng)傷外周血中髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）亞型的變化及其臨床意義，取得了一系列具有重要價值的成果。在MDSCs亞型變化規(guī)律方面，通過對正常對照組、創(chuàng)傷非感染組和創(chuàng)傷感染組兒童外周血樣本的檢測分析，明確了創(chuàng)傷后MDSCs亞型比例的動態(tài)變化特征。創(chuàng)傷后，外周血中粒細(xì)胞性MDSCs（PMN-MDSCs）和單核細(xì)胞性MDSCs（M-MDSCs）比例迅速升高，在創(chuàng)傷后3-5天達(dá)到峰值，隨后逐漸下降，但在創(chuàng)傷后7-10天仍高于正常對照組水平。在創(chuàng)傷感染組中，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例升高更為顯著，且在各時間點均顯著高于創(chuàng)傷非感染組。不同創(chuàng)傷類型和程度下，MDSCs亞型變化也存在差異。骨折組中，PMN-MDSCs比例在傷后早期迅速升高，在創(chuàng)傷后3-5天達(dá)到峰值，隨后逐漸下降；M-MDSCs比例升高幅度相對較小，且達(dá)到峰值的時間相對較晚。燒傷組中，PMN-MDSCs比例在燒傷后迅速升高，且在整個觀察期內(nèi)維持在較高水平；M-MDSCs比例同樣顯著升高，且與燒傷嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。隨著創(chuàng)傷程度的加重，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例均顯著升高，且與創(chuàng)傷嚴(yán)重程度評分呈顯著負(fù)相關(guān)。在臨床意義方面，本研究揭示了MDSCs亞型變化與創(chuàng)傷后感染、免疫功能及預(yù)后評估之間的密切關(guān)聯(lián)。MDSCs亞型比例變化與創(chuàng)傷后感染的發(fā)生存在顯著相關(guān)性，在創(chuàng)傷感染組中，PMN-MDSCs和M-MDSCs比例在傷后各時間點均顯著高于創(chuàng)傷非感染組。PMN-MDSCs和M-MDSCs比例與感染相關(guān)指標(biāo)（如白細(xì)胞計數(shù)、C反應(yīng)蛋白水平）