2016CLSIM100S(第26版)主要更新內容解讀第一頁，共42頁。美國臨床和實驗室標準協(xié)會（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI）是美國國家標準協(xié)會最早認定的標準制定機構，通過制訂和實施適用全球的臨床實驗室標準和指南，幫助實驗室高效、有力地履行其職責，以促進實驗室醫(yī)學追求卓越。其制定的微生物臨床檢驗標準及操作規(guī)范被視為相關檢驗領域的金標準。自1998年以來，衛(wèi)生部將CLSI制定的藥敏標準定為我國的部頒標準。2010年4月1日，中華檢驗醫(yī)學雜志與CLSI就在中國境內翻譯并使用CLSI相關檢驗標準及操作規(guī)范一事達成協(xié)議，并于當年完成了6個標準的翻譯工作（M100-S20、M02-A10、M07-A8、M11A7、M47-A、M35-A2）。這些標準的應用對促進我國臨床檢驗標準建設、提高臨床檢驗質量和規(guī)范化管理方面具有重要意義。CLSI第二頁，共42頁。M100S,26thEdition--PerformanceStandardsforAntimicrobialSusceptibilityTesting,26thEdition.--抗菌藥物敏感性試驗執(zhí)行標準;第二十六版M100S

(第26版)更新快，時效性強！應用范圍有限制！2016年M100-S26正式更名為M100S（第26版），是CLSI批準的藥敏試驗標準（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的補充文件。本增刊提供的表格資料代表了應用M02、M07和M11標準化的藥敏試驗操作步驟所得到的關于選藥、結果解釋和質量控制的新信息。第三頁，共42頁。目錄摘要…………1委員會成員…………………5本文件主要變化簡介……………………13CLSI建立解釋標準和質量控制過程簡介………………22CLSI參考方法與商品化方法和CLSI與FDA解釋標準（折點）…………23自2010年以來CLSI折點的增加及修訂…………………24抗菌藥物敏感性試驗分委會宗旨聲明…………………26表格使用說明……………27第四頁，共42頁。表格Table1A-1C抗菌藥物的分組Table2A-2J紙片法及MIC法的解釋標準Table3A-3I篩選實驗及確證實驗的解釋Table4A-5G質量控制Table6A-8B制備方案AppendixA-Glossary3補充說明及術語表第五頁，共42頁。表格第二十六版主要修改內容表格內容更新內容表格使用說明說明和定義（藥敏試驗分類的變化：常規(guī)試驗、補充試驗、篩選試驗、替代試驗、等價試驗）Table1A-1C抗菌藥物的分組藥物的增減與分組變化Table2A-2J紙片法及MIC法的解釋標準新增藥物折點、折點解釋標準、拖尾現象判讀、福氏/宋氏志賀菌ECVTable3A-3I篩選實驗及確證實驗的解釋碳青霉烯酶的檢測-CarbaNP試驗結果判斷圖片的更新Table4A-5G質量控制增加藥物質控菌株的質控范圍、增加質控菌株E.coliNCTC13353Table6抗微生物藥物儲存液的溶劑和稀釋劑增加新的藥物和聯合用藥的用法與用量附錄與詞匯表固有耐藥的增加與刪除New!第六頁，共42頁。一、AST試驗定義的變化二、常規(guī)試驗及報告藥物的更新三、藥敏折點的相關更新四、腸桿菌科部分主要更新五、關于藥敏質控的相關更新六、關于藥敏試驗操作和結果讀取的建議七、其他主要更新重點更新介紹第七頁，共42頁。一、AST試驗定義的變化New!Addednewsectiondefiningroutine,supplemental,screening,surrogateagent,andequivalentagenttests,whichreplacedtheoriginal“ScreeningTests”section(p.33).常規(guī)試驗補充試驗篩選試驗替代試驗等價試驗用于臨床常規(guī)檢測的紙片擴散法、肉湯或瓊脂稀釋法。用以測試一種或者一類藥物的敏感性或耐藥性的試驗方法，并非常規(guī)試驗，也不需要額外增加試驗來確證。有一些補充試驗可以鑒定特定耐藥機制。必報或選擇性向臨床報告。結果用于預測，需要額外的試驗確證藥物的敏感性或耐藥性。當目標抗菌藥物的藥敏無法檢測或替代藥物的藥敏操作優(yōu)于目標抗菌藥物時，該藥物可替代目標抗菌藥物進行藥敏試驗。可預測與其密切相關的同類藥物的藥敏結果，并通過減少多種密切相關藥物的藥敏檢測數量以提高檢測效率。第八頁，共42頁。一、AST試驗定義的變化需要做!補充試驗見M100S,26thEdi.P34.補充試驗細菌試驗描述應用條件誘導克林霉素耐藥金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、β溶血鏈球菌通過微量肉湯或紙片擴散法同時檢測克林霉素和紅霉素藥敏（D試驗）對于紅霉素耐藥和克林霉素敏感(或中介)的菌株，在報告其克林霉素敏感之前需要進行此試驗β內酰胺酶凝固酶陰性葡萄球菌產色頭孢菌素（頭孢硝噻吩法）青霉素檢測為敏感的菌株β內酰胺酶金黃色葡萄球菌產色頭孢菌素，青霉素紙片擴散法抑菌圈邊緣試驗青霉素檢測為敏感的菌株用以測試一種或者一類藥物的敏感性或耐藥性的試驗方法，并非常規(guī)試驗，也不需要額外增加試驗來確證。有一些補充試驗可以鑒定特定耐藥機制。必報或選擇性向臨床報告。第九頁，共42頁。一、AST試驗定義的變化選擇做!補充試驗見M100S,26thEdi.P34.補充試驗

細菌

試驗描述應用條件

ESBL(超廣譜β-內酰胺酶)大腸埃希菌、克雷伯菌屬、奇異變形桿菌克拉維酸抑制實驗檢測ESBL(微涼肉湯稀釋法或紙片擴散法)對于頭孢菌素敏感性下降的菌株結果指示產生ESBLMHT(改良Hodge試驗)腸桿菌科生長增強試驗檢測碳青霉烯類水解對于碳青霉烯類敏感性下降的菌株結果指示產生某些碳青霉烯CarbaNP試驗腸桿菌科顯色試驗檢測碳青霉烯類水解對于碳青霉烯類敏感性下降的菌株結果指示產生某些碳青霉烯MRSA篩選瓊脂法金黃色葡萄球菌瓊脂稀釋法，含4%Nacl和6mg/L苯唑西林的MHA檢測MRSA，建議使用頭孢西丁代替實驗用以測試一種或者一類藥物的敏感性或耐藥性的試驗方法，并非常規(guī)試驗，也不需要額外增加試驗來確證。有一些補充試驗可以鑒定特定耐藥機制。必報或選擇性向臨床報告。第十頁，共42頁。一、AST試驗定義的變化篩選試驗見M100S,26thEdi.P34.篩選試驗

細菌

試驗描述確證實驗萬古霉素瓊脂篩查金黃色葡萄球菌、腸球菌屬瓊脂稀釋法，含6mg/L萬古霉素的腦心浸液如果篩選試驗陽性，則檢測萬古霉素MIC進行確證紙片擴散法檢測高水平氨基糖苷類耐藥腸球菌屬慶大霉素和鏈霉素的紙片擴散法如果篩選結果不確定（7-9cm），則采用微量肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法確證結果用于預測，需要額外的試驗確證藥物的敏感性或耐藥性！第十一頁，共42頁。一、AST試驗定義的變化替代試驗見M100S,26thEdi.P35.當目標抗菌藥物的藥敏無法檢測或替代藥物的藥敏操作優(yōu)于目標抗菌藥物時，該藥物可替代目標抗菌藥物進行藥敏試驗！替代藥物細菌試驗描述結果頭孢西丁金黃色葡萄球凝固酶陰性葡萄球菌（假中間葡萄球菌除外）肉湯稀釋法（僅用于金黃色葡萄球菌）或紙片擴散法預測由mecA基因導致的苯唑西林耐藥頭孢唑啉大腸埃希菌克雷伯菌屬奇異變形桿菌肉湯稀釋法或紙片擴散法預測用于治療非復雜性尿路感染的口服藥物：頭孢克洛、頭孢地尼、頭孢泊肟、頭孢羅齊、頭孢呋辛、頭孢氨芐和氯碳頭孢的敏感及耐藥性；但頭孢地尼，頭孢泊肟和頭孢呋辛可能需要單獨檢測，因為某些菌株可能對上述藥物敏感但對頭孢唑啉耐藥培氟沙星沙門氏菌屬紙片擴散法預測氟喹諾酮類的敏感性是否降低奈啶酸沙門氏菌屬肉湯稀釋法或紙片擴散法預測氟喹諾酮類的敏感性是否降低苯唑西林肺炎鏈球菌紙片擴散法當苯唑西林≥20mm,青霉素敏感。如果當苯唑西林≤19mm，必須測青霉素的MIC值第十二頁，共42頁。一、AST試驗定義的變化等價試驗見M100S,26thEdi.P36.可預測與其密切相關的同類藥物的藥敏結果，并通過減少多種密切相關藥物的藥敏檢測數量以提高檢測效率。藥物細菌鑒定表格位置頭孢噻肟或頭孢曲松腸桿菌科“or”（兩種藥物幾乎完全交叉敏感和交叉耐藥，僅需檢測一種藥物）1A和2A-1阿奇霉素、克拉霉素或紅霉素葡萄球菌屬“or”（兩種藥物幾乎完全交叉敏感和交叉耐藥，僅需檢測一種藥物）1A和2C對青霉素敏感葡萄球菌也對其它β內酰胺類敏感，這些藥物對葡萄球菌感染有療效（包括不耐酶青霉素和耐酶青霉素）。對青霉素耐藥的葡萄球菌對青霉素酶不穩(wěn)定的青霉素類耐藥葡萄球菌屬注釋列出1A和2C氨芐西林的藥敏結果能用于預測阿莫西林的敏感性流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌注釋列出1B和2E第十三頁，共42頁。二、常規(guī)試驗及報告藥物的更新見M100S,26thEdi.P40-50：Tables1A-1CDrugsRecommendedforTestingandReporting非苛養(yǎng)菌腸桿菌科銅綠假單胞菌葡萄球菌屬腸球菌屬A組首選試驗常規(guī)報告哌拉西林-他唑巴坦B組首選試驗選擇性報告ceftolozane-tazobactamceftolozane-tazobactam奧利萬星特拉萬星泰地唑胺奧利萬星特拉萬星泰地唑胺C組補充試驗選擇性報告U組補充試驗，僅用于或首選治療泌尿道感染O組包含對細菌組有臨床適應癥，但在美國一般不作為常規(guī)測試與報告的藥物洛美沙星氧氟沙星哌拉西林替卡西林-克拉維酸哌拉西林洛美沙星氧氟沙星洛美沙星氧氟沙星替卡西林替卡西林第十四頁，共42頁。二、常規(guī)試驗及報告藥物的更新鮑曼不動桿菌屬洋蔥伯克霍爾德菌嗜麥芽窄食單胞菌其它非腸桿A組美羅培南左氧氟沙星B組C組氯霉素氯霉素U組四環(huán)素O組哌拉西林替卡西林-克拉維酸替卡西林-克拉維酸替卡西林-克拉維酸哌拉西林替卡西林-克拉維酸洛美沙星氧氟沙星非苛養(yǎng)菌美洛西林替卡西林羧芐西林美洛西林替卡西林見M100S,26thEdi.P40-50：Tables1A-1CDrugsRecommendedforTestingandReporting第十五頁，共42頁。二、常規(guī)試驗及報告藥物的更新流感/副流感嗜血桿菌淋病奈瑟氏菌肺炎鏈球菌β溶血鏈球菌草綠色鏈球菌A組B組C組氯霉素奧利萬星特拉萬星泰地唑胺ceftolozane-tazobactam奧利萬星特拉萬星泰地唑胺U組O組洛美沙星氧氟沙星泰利霉素大觀霉素氧氟沙星泰利霉素氧氟沙星奎奴普汀/達福普汀苛養(yǎng)菌見M100S,26thEdi.P40-50：Tables1A-1CDrugsRecommendedforTestingandReporting第十六頁，共42頁。三、藥敏折點的相關更新自2010年起CLSI折點增加及修訂見M100S,26thEdi.P52-116：Tables2A-2JInterpretiveCriteria(Breakpoints)第十七頁，共42頁。三、藥敏折點的相關更新New!2016年新增加折點解釋標準的藥物腸桿菌科:ceftolozane-tazobactam銅綠假單胞菌：

ceftolozane-tazobactam葡萄球菌屬：奧利萬星、特拉萬星、泰地唑胺、苯唑西林腸球菌屬：奧利萬星、特拉萬星、泰地唑胺β溶血鏈球菌：奧利萬星、特拉萬星、泰地唑胺草綠色鏈球菌：

ceftolozane-tazobactam、奧利萬星、

特拉萬星、泰地唑胺第十八頁，共42頁。三、藥敏折點的相關更新Ceftolozane屬于三代頭孢FDA2014年12月19號批準治療成人的復雜性泌尿道感染治療成人的腹腔內感染Ceftolozane/Tazobactam（頭孢洛扎-他唑巴坦）

——CLSI2016細菌種類紙片含量（ug）紙片直徑（mm）MIC（ug/ml）SIRSIR腸桿菌科––––≤2/44/4≥8/4銅綠假單胞菌30/10≥2117–20≤16≤4/48/4≥16/4草綠色鏈球菌––––≤8/416/4≥32/4第十九頁，共42頁。三、藥敏折點的相關更新Oritavancin-奧利萬星脂糖肽類抗生素，商品名：Orbactiv?對革蘭陽性菌有殺菌活性，包括萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌和腸球菌屬McKayetal.2009.JAC63:1191-1199FDA2014年8月批準：用于急性細菌性皮膚和皮膚結構感染金黃色葡萄球菌（包括MRSA）、化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、咽峽炎鏈球菌群、停乳鏈球菌、糞腸球（萬古霉素敏感）

跟據FDA的折點，萬古霉素敏感預測奧利萬星敏感性準確率≥97.7%

萬古霉素非敏感不能預測奧利萬星敏感性RonJones,InformationalPresentation,CLSIJune2014Meeting

細菌種類紙片含量（ug）紙片直徑（mm）MIC（ug/ml）SIRSIR金黃色葡萄球菌（包含MRSA）––––≤0.12––糞腸球（萬古霉素S）––––≤0.12––草綠色鏈球菌––––≤0.25––β溶血鏈球菌––––≤0.25––第二十頁，共42頁。三、藥敏折點的相關更新Telavancin-特拉萬星由FDA2013年批準治療成人：復雜的皮膚和皮膚結構感染由金黃色葡萄球菌引起的醫(yī)院獲得性或呼吸機相關性肺炎細菌種類紙片含量（ug）紙片直徑（mm）MIC（ug/ml）SIRSIR金黃色葡萄球菌（包含MRSA）30≥15––≤0.12––糞腸球（萬古霉素S）30≥15––≤0.25––草綠色鏈球菌30≥15––≤0.06––β溶血鏈球菌30≥15––≤0.12––第二十一頁，共42頁。三、藥敏折點的相關更新Tedizolid-泰地唑胺噁唑烷酮類抗菌藥物抑制細菌蛋白質合成與利奈唑胺相比，具有更長的半衰期對敏感的革蘭氏陽性細菌廣泛的活性FDA2014年7月批準：用于成人急性細菌性皮膚和皮膚結構感染，同時有口服和靜脈制劑細菌種類紙片含量（ug）紙片直徑（mm）MIC（ug/ml）SIRSIR金黃色葡萄球菌––––≤0.51≥2糞腸球––––≤0.5––化膿性鏈球菌無乳鏈球菌––––≤0.5––咽峽炎鏈球菌群––––≤0.25––第二十二頁，共42頁。三、藥敏折點的相關更新張雅薇,王輝.2016年CLSIM100S(第26版)主要更新內容解讀[J].中華檢驗醫(yī)學雜志藥物紙片含量紙片直徑（mm）MIC（ug/ml）細菌SIRSIR苯唑西林1ug≥18–≤17≤0.25–≥0.5假中間葡萄球菌注釋：頭孢西丁的MIC法，KB法對檢測由mecA基因介導的假中間葡萄球菌是不可靠的第二十三頁，共42頁。四、腸桿菌科部分主要更新頭孢唑啉治療腸桿菌科細菌感染的解釋說明第二十四頁，共42頁。四、腸桿菌科部分主要更新抗生素紙片含量抑菌圈直徑ECV（mm）MIC值ECV（ug/ml）注釋WTNWTWTNWT阿奇霉素15ug≥16≤15≤8≥16福氏志賀菌–––≤16≥32宋內志賀菌什么是ECVsCutoff值—epidemiologicalcutoffvalues，ECVsECVs是根據體外藥敏表型（MIC值）來區(qū)分有無獲得性和/或突變耐藥細菌，該MIC值即為ECVs；“野生型”（wild-type,WT）指菌株MIC值≤ECV，說明無獲得性和（或）突變耐藥；“非野生型”（non-wild-type,NWT）指MIC高于ECV，則菌株有獲得性和（或）突變耐藥；ECVs不同于臨床折點，主要用于標識NWT菌株的出現和發(fā)展。只能確定單一菌種的ECV，同屬內細菌也有差異；MIC值采用標準方法測得，符合ISO-20776-1；受試菌株來自至少三個相互獨立的實驗室，菌株數不少于100株；各實驗室MIC值分布盡可能在稀釋范圍內可評價；若很多菌株的MIC為檢測最低濃度則數據不納入；目測確定界限，當野生型和非野生型MIC值分布明顯重疊，用統(tǒng)計學方法確定。ECVs如何確定？福氏/宋內志賀菌的流行病學臨界值（ECV）流病學折點EVC≠臨床折點（2015年提出），在藥物可以用于治療某種細菌感染，而缺乏足夠數據來建立臨床折點時使用，用于標識非野生型（NWT）菌株的出現，意味著該藥物在治療NWT菌株時可能會效果不佳或治療失敗。第二十五頁，共42頁。四、腸桿菌科部分主要更新治療腸桿菌引起的尿路感染中，奈啶酸的折點解釋標準范圍縮小M100-S252015M100S,26th2016第二十六頁，共42頁。四、腸桿菌科部分主要更新喹諾酮類和氟喹諾酮類折點解釋標準用于腸桿菌時的更新解釋標準用于除沙門菌以外的腸桿菌科細菌解釋標準用于沙門菌第二十七頁，共42頁。五、關于藥敏質控的相關更新2016年文件新增和修訂了下列藥物對部分質控菌株紙片擴散法和MIC法的質控范圍，包括氨曲南-阿維巴坦、Delafloxacin（德拉沙星）、Gepotidacin、Levonadifloxacin和Lefamulin等多種新藥紙片法的質控范圍Tables4and5–QualityControl第二十八頁，共42頁。五、關于藥敏質控的相關更新多種新藥MIC的質控范圍第二十九頁，共42頁。五、關于藥敏質控的相關更新ATCC:AmericanTypeCultureCollectionNCTC:NationalCollectionofTypeCulturesEcoNCTC13353

產CTX-M-15（水解頭孢吡肟，但被他唑巴坦抑制）

質量控制的補充，不常規(guī)做

用于頭孢吡肟-他唑巴坦MIC值（0.06–0.25μg/mL）大腸埃希菌NCTC13353新的質控菌株第三十頁，共42頁。六、關于藥敏試驗操作和結果讀取的建議1.拖尾現象判讀的方法對于葡萄球菌來說，當測試氯霉素、克林霉素、紅霉素、利奈唑胺、泰地唑胺、四環(huán)素的MIC值時，因有拖尾現象很難確定其終點。在這種情況下，拖尾現象開始的最低濃度為其MIC值。微量生長應該被忽略（M7圖3-4）。對于甲氧芐啶、磺胺類拮抗劑，允許有一些輕微的生長。終點判讀為80％被抑制時的藥物濃度。第三十一頁，共42頁。六、關于藥敏試驗操作和結果讀取的建議對于革蘭陽性球菌來說，當測試氯霉素、克林霉素、紅霉素、利奈唑胺、四環(huán)素的MIC值時，因有拖尾現象很難確定其終點。在這種情況下，拖尾現象開始的最低濃度為其MIC值。微量生長應該被忽略。拖尾現象判讀的方法---氯霉素、克林霉素等藥物第三十二頁，共42頁。六、關于藥敏試驗操作和結果讀取的建議拖尾現象判讀的方法---甲氧芐啶、磺胺類藥物由于培養(yǎng)基中可能存在拮抗劑，甲氧芐啶和磺胺類藥可允許輕微的生長，終點判讀為80％被抑制時的藥物濃度。M7-10第30、31頁.第三十三頁，共42頁。六、關于藥敏試驗操作和結果讀取的建議“Insuchcases,readtheMICatthelowestconcentrationwherethetrailingbegins”腸球菌屬：氯霉素、紅霉素、利奈唑胺、泰地唑胺、四環(huán)素肺炎鏈球菌：氯霉素、克林霉素、紅霉素、利奈唑胺、泰地唑胺、四環(huán)素β溶血鏈球菌：氯霉素、克林霉素、紅霉素、利奈唑胺、泰地唑胺、四環(huán)素草綠色鏈球菌：氯霉素、克林霉素、紅霉素、利奈唑胺、泰地唑胺、四環(huán)素第三十四頁，共42頁。六、關于藥敏試驗操作和結果讀取的建議2.CarbaNP試驗CarbaNP確證試驗是一種腸桿菌科、銅綠假單胞菌和不動桿菌屬細菌中碳青霉烯酶的表型檢測方法。2015年引入CLSI藥敏標準采用比色法主要用于流行病學研究或感染控制，尚不推薦作為臨床常規(guī)使用。研究表明，此試驗在檢測KPC、NDM、VIM、SPM和SME型碳青霉烯酶方面具有較好的敏感性（90%）和特異性（90%）。對于OXA-48型碳青霉烯酶敏感性低（11%）。第三十五頁，共42頁。六、關于藥敏試驗操作和結果讀取的建議2.CarbaNP試驗

改良Hodge試驗CarbaNP試驗其他(如分子檢測)細菌對1種或1種以上碳青霉烯類不敏感的腸桿菌科細菌對1種或1種以上碳青霉烯類不敏感的腸桿菌科細菌、銅綠假單胞菌和不動桿菌屬對1種或1種以上碳青霉烯類不敏感的腸桿