④步驟取一定稀釋倍數(shù)的雜交瘤細(xì)胞懸液加入多孔板中，適宜條件下培養(yǎng)后，利用原理進(jìn)行抗體陽性檢測(cè)。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交一雜交瘤細(xì)胞。（4）單克隆雜交一雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，需在培養(yǎng)液中提供細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，此外，通常還需要加入等天然成分。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需提供的氣體環(huán)境是。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)榧?xì)胞密度過大、和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。（5）與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是。25．（11分）人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解血栓，但給心?；颊咦⑸浯髣┝康膖-PA蛋白，會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血。研究表明，將t-PA蛋白第84位的半胱氨酸（密碼子UGU）換成絲氨酸（密碼子UCU），制造出性能優(yōu)異的t-PA改良蛋白，能顯著降低顱內(nèi)出血的副作用。某研究小組利用重疊延伸方法對(duì)t-PA基因進(jìn)行定點(diǎn)突變，其改良過程如圖1所示?；卮鹣铝袉栴}。（1）科學(xué)家將t-PA蛋白第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，生產(chǎn)出性能優(yōu)良的t-PA突變蛋白的生物技術(shù)手段屬于范疇。獲得性能優(yōu)良的t-PA突變蛋白的正確順序是（選擇正確編號(hào)并排序）。①t－PA蛋白功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)②借助定點(diǎn)突變改造t-PA基因序列③檢驗(yàn)t－PA蛋白的結(jié)構(gòu)和功能④設(shè)計(jì)t-PA蛋白氨基酸序列和基因序列⑤利用工程菌發(fā)酵合成t-PA蛋白（2）已知t-PA蛋白第84位是半胱氨酸，相應(yīng)的基因模板鏈（圖中t-PA基因的上鏈）上的堿基序列是ACA，絲氨酸的密碼子是UCU。引物b中突變位點(diǎn)的堿基和引物c中突變位點(diǎn)的堿基分別為。（3）重疊延伸過程中，用于PCR3的是AB上鏈和CD下鏈，請(qǐng)?jiān)谙聢D中中標(biāo)注兩條鏈方向（填“5”或“3”）。（4）據(jù)圖可知，利用PCR3獲得大量的t-PA改良基因，需要的引物是，引物的作用是。若擴(kuò)增圖中序列時(shí)引物選擇正確，PCR操作過程沒有問題，但對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行電泳時(shí)，發(fā)現(xiàn)除了目標(biāo)序列外還有很多非特異性條帶，請(qǐng)分析出現(xiàn)此情況的原因（答兩點(diǎn)）。（5）若獲得的t-PA突變基因如圖所示，那么質(zhì)粒pCLY11需用限制酶切開，才能與t-PA突變基因高效連接。（6）mlacZ表達(dá)產(chǎn)物會(huì)使細(xì)胞呈黃色，使菌落呈現(xiàn)黃色，否則菌落為白色。將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含有的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，含重組質(zhì)粒的大腸桿菌應(yīng)具有的表型是。吉林省普通高中G8教考聯(lián)盟2024-2025學(xué)年下學(xué)期期末考試高二年級(jí)生物學(xué)科A卷參考答案選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。12345678CDABCBDB9101112131415CDBCCAC選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有一項(xiàng)或多項(xiàng)是符合題目要求的。全部選對(duì)得3分，選對(duì)但選不全得1分，有選錯(cuò)得0分。1617181920ABDBCBCDABDABC三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.（11分）（1）協(xié)助擴(kuò)散、主動(dòng)運(yùn)輸（2分寫對(duì)一點(diǎn)1分寫錯(cuò)0分）（2）胞吐（1分）需要（1分）（3）氫離子的電化學(xué)梯度勢(shì)能（2分）（4）b：海水稻通過細(xì)胞膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SOSⅠ將Na+從細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞外；c：海水稻通過胞吐的方式分泌出抗菌蛋白。（2分）1點(diǎn)1分（5）（共3分）分別取長勢(shì)相同的海水稻和一般水稻的根尖成熟區(qū)組織細(xì)胞，制成臨時(shí)裝片，（1分）配制一系列濃度梯度的蔗糖溶液，分別處理兩品種根尖成熟區(qū)細(xì)胞，（1分）處理一定時(shí)間后，用顯微鏡觀察并對(duì)比兩種植物根尖成熟區(qū)細(xì)胞在發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)所對(duì)應(yīng)的蔗糖溶液濃度。（1分）?22．（11分）（1）降低化學(xué)反應(yīng)的活化能（1分）蛋白質(zhì)（1分）單位時(shí)間內(nèi)淀粉的水解量（或水解產(chǎn)物的生成量）（2分）（2）能（1分）試管I>試管Ⅱ>試管Ⅲ（2分）（3）無關(guān)變量（2分）若不控制實(shí)驗(yàn)時(shí)間的長短，則可能會(huì)出現(xiàn)試管Ⅱ和試管Ⅲ中的淀粉均被完全水解，從而無法判斷兩種淀粉酶催化速率的大小的結(jié)果（2分）23．（11分）（1）碳源、氮源、無機(jī)鹽(任寫兩種即可)（1分）瓊脂（1分）中性或弱堿性（1分）（2）AD（1分）（3）4.3×105（2分）（4）DNA分子具有特異性（1分）（5）a.金黃色葡萄球菌菌液（1分）b．丙酮（1分）c．慶大霉素液（bc可以顛倒）（1分）d．圓紙片周圍抑菌圈的大小(直徑)（1分）24．（11分）（1）刺激小鼠產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞（1分）滅活病毒誘導(dǎo)法（1分）（2）克隆化培養(yǎng)（1分）能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并可大量制備（1分）（3）抗原與抗體特異性結(jié)合（1分）2（或兩）（1分）（4）血清（1分）95%空氣和5%CO2（1分）有害代謝產(chǎn)物積累（1分）（5）雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞（2分）25．（11分）（1）蛋白質(zhì)工程（1分）①④②⑤③（1分）（2）G/鳥嘌呤和C/胞嘧啶（1分，有錯(cuò)誤不給分）（3）（1分，有錯(cuò)誤不給分）（4）