消除階段麻疹風(fēng)疹監(jiān)測病例實驗室證實技術(shù)指南2025-04-23實施2025-04-23實施中國疫苗行業(yè)協(xié)會中國標準化協(xié)會聯(lián)合發(fā)布I 1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14縮略語 15麻疹風(fēng)疹監(jiān)測病例證實的相關(guān)影響因素和原則 16麻疹風(fēng)疹監(jiān)測病例證實流程 2附錄A(資料性)監(jiān)測病例實驗室證實的相關(guān)影響因素 3附錄B(規(guī)范性)監(jiān)測病例病原學(xué)檢測證實流程圖 4附錄C(規(guī)范性)監(jiān)測病例血清學(xué)檢測證實流程圖 5附錄D(規(guī)范性)監(jiān)測病例IgM雙陽性證實流程圖 6參考文獻 7本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所提出。本文件由中國疫苗行業(yè)協(xié)會歸口。本文件起草單位：中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所、遼寧省疾病預(yù)防控制中心、云南省疾病預(yù)防控制中心、江西省疾病預(yù)防控制中心、內(nèi)蒙古自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心、黑龍江省疾病預(yù)防控制中心、甘肅省疾病預(yù)防控制中心、青海省疾病預(yù)防控制中心、安徽省疾病預(yù)防控制中心、廣州市婦女兒童醫(yī)療中心。本文件主要起草人：張燕、毛乃穎、朱貞、崔愛利、王慧玲、江潔、劉瑩、王艷、李立群、熊英、田曉靈、孫兆丹、梁舒、范麗霞、周淑潔、朱冰。和風(fēng)疹戰(zhàn)略框架》,重申未來十年內(nèi)在全球六大區(qū)域達到并維持消除麻疹和風(fēng)核酸檢測方法敏感性較高，通常作為監(jiān)測病例證實的補充方法。然而，隨著麻疹和風(fēng)疹接單獨采用血清學(xué)或病原學(xué)檢測對監(jiān)測病例進行實驗室證實均具有一定的局限性，因此需要聯(lián)合血清學(xué)1僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本檢測血清學(xué)標本中麻疹和風(fēng)疹病毒IgM抗體，同時出現(xiàn)麻疹病毒IgM抗體陽性和風(fēng)疹病毒IgM抗體出疹后28d內(nèi)采集的血清學(xué)標本以及出疹前后5d內(nèi)采集的病原學(xué)標本。ELISA:酶聯(lián)免疫吸附試驗(EnzIgM:免疫球蛋白M(ImmunoglobulinM)RT-PCR:逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(ReversetranReal-timeRT-PCR:實時熒光定量RT-PCR(Real-timereversetranscriptionc)病原學(xué)檢測病毒核酸陽性或病毒分離陽25.3.1IgM抗體陽性檢測結(jié)果有假陽性可能，作為實驗室確診病例唯一證據(jù)時應(yīng)排除假陽性。6.1病原學(xué)檢測證實流程(見附錄B)PCR方法。如檢測結(jié)果呈陽性，且近期有含麻疹或風(fēng)疹成分疫苗免疫史(出疹前14d內(nèi)),可進一步進行序列測定。如基因型鑒定結(jié)果為疫苗株序列，則證實為麻疹/風(fēng)疹排除病例；如序列測定結(jié)果為陰6.1.4麻疹病毒/風(fēng)疹病毒核酸檢測結(jié)果呈陰性，且其他病原體檢測結(jié)果為陽性，則證實為排除病例；6.2血清學(xué)檢測證實流程(見附錄C)6.2.1采集監(jiān)測病例合格血清學(xué)標本，使用ELISA方法檢測麻疹病毒/風(fēng)疹病毒IgM抗體。如檢測結(jié)果為單陽性或雙陽性，且近期有含麻疹或風(fēng)疹成分疫苗免疫史(出疹前8d～56d內(nèi)),則證實為排除6.2.2在排除近期免疫史的基礎(chǔ)上，如檢測結(jié)果呈單陽性或雙陽性，可使用基于不同原理的E劑(例如間接法和捕獲法)再次檢測麻疹病毒/風(fēng)疹病毒IgM抗體。如兩次IgM抗體單陽性檢測結(jié)果一6.2.3如麻疹病毒/風(fēng)疹病毒IgM抗體檢測結(jié)果仍為雙陽性，則按照附錄D進行病例證實。6.2.5如第一份血清學(xué)標本(于出疹后3d內(nèi)采集)的麻疹病毒/風(fēng)疹病毒IgM抗體檢測結(jié)果為陰性，則需在出疹后4d～28d采集第二份血清學(xué)標本，并按照附錄C再次進行病例證實。如第二份血清學(xué)標本麻疹病毒/風(fēng)疹病毒IgM抗體檢測結(jié)6.2.6如第二份血清學(xué)標本與第一份血清學(xué)標本采集時間間隔10d～20d,可開展雙份血清學(xué)標本麻6.3監(jiān)測病例IgM雙陽性證實流程(見附錄D)6.3.1經(jīng)6.2證實后，如麻疹病毒/風(fēng)疹病毒IgM抗體檢測結(jié)果仍為雙陽性，可使用ELISA法對采集的血清學(xué)標本進行麻疹和/或風(fēng)疹病毒IgG抗體檢3(資料性)監(jiān)測病例實驗室證實的相關(guān)影響因素監(jiān)測病例實驗室證實的相關(guān)影響因素包括以下內(nèi)容：A.1存在非特異性反應(yīng)，如類風(fēng)濕因子等的干擾，可能出現(xiàn)IgM抗體假陽性結(jié)果。A.2出疹3d內(nèi)采集血清學(xué)標本，約30%的麻疹和風(fēng)疹病毒IgM抗體因抗體未產(chǎn)生或低于檢出限而呈假陰性結(jié)果。A.3麻疹發(fā)病率降低導(dǎo)致ELISA檢測試劑陽性預(yù)測值降低，可能出現(xiàn)IgM抗體假陽性比例增高。A.4近期8d～56d接種過含麻疹和風(fēng)疹成分疫苗，可能出現(xiàn)麻疹和風(fēng)疹病毒IgM抗體雙陽性結(jié)果。A.5近期8d～56d接種過含麻疹成分疫苗且當(dāng)前感染了風(fēng)疹病毒，可出現(xiàn)麻疹和風(fēng)疹病毒IgM抗體雙陽性結(jié)果。A.6近期(既往)感染過麻疹病毒且當(dāng)前感染了風(fēng)疹病毒(麻疹病毒IgM抗體可長期存在),可能出現(xiàn)麻疹和風(fēng)疹病毒IgM抗體雙陽性結(jié)果。A.7近期(既往)感染過風(fēng)疹病毒且當(dāng)前感染麻疹病毒(風(fēng)疹病毒IgM抗體可長期存在),可能出現(xiàn)麻疹和風(fēng)疹病毒IgM抗體雙陽性結(jié)果。A.8檢測試劑特異性低于100%,與其他病毒抗體發(fā)生交叉反應(yīng)，可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果。A.9繼發(fā)性免疫失敗病例中IgM抗體水平較低，且高水平IgG抗體會干擾IgM抗體的檢測，可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。A.10標本采集時間和質(zhì)量等因素會影響麻疹病毒/風(fēng)疹病毒核酸檢測(Real-timeRT-PCR)的敏感性，可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。A.11由于麻疹病毒/風(fēng)疹病毒核酸檢測(Real-timeRT-PCR)方法敏感性較高，會存在交叉污染的問題，可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果。A.12由于病毒基因變異導(dǎo)致麻疹病毒/風(fēng)疹病毒核酸檢測(Real-timeRT-PCR)引物不匹配，可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。A.13實驗室質(zhì)量控制缺失可能導(dǎo)致核酸檢測出現(xiàn)假陽性結(jié)果。4監(jiān)測病例病原學(xué)檢測證實流程圖是否結(jié)果陰性疫苗株序列野病毒序列一是否陽性?否與實驗室、流行內(nèi)是否有免疫史?否是是圖B.1監(jiān)測病例病原學(xué)檢測證實流程圖5(規(guī)范性)監(jiān)測病例血清學(xué)檢測證實流程圖監(jiān)測病例(采集第一份血清學(xué)標本)IgM抗體檢測IgM單(+)IgM雙(+)出疹前是Bd-56d是否有排除病例否出疹后3d內(nèi)采集血清學(xué)標本否是病原學(xué)樣本是參照附錄B進行病例證實否是否采集檢測檢測否再次檢測IgM抗體核酸陰性雙份標本IgG抗體平行檢測否否否單(+)結(jié)果是否是確診病例是陽轉(zhuǎn)或四倍及以上增高確診病例陰性或陽性無增高排除病例定規(guī)則如下：(1)初次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陰性),再次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陰性),為麻疹確診病例；(2)初次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陰性),再次結(jié)果(麻疹陰性，風(fēng)疹陽性),為排除病例；(3)初次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陰性),再次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陽性),為麻疹確診病例；(4)初次結(jié)果(麻疹陰性，風(fēng)疹陽性),再次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陰性),為排除病例；(5)初次結(jié)果(麻疹陰性，風(fēng)疹陽性),再次結(jié)果 (麻疹陰性，風(fēng)疹陽性),為風(fēng)疹確診病例；(6)初次結(jié)果(麻疹陰性，風(fēng)疹陽性),再次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陽性),為風(fēng)疹確診病例；(7)初次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陽性),再次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陰性),為麻疹確診病例；(8)初次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陽性),再次結(jié)果(麻疹陰性，風(fēng)疹陽性),為風(fēng)疹確診病例；(9)初次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹陽性),再次結(jié)果(麻疹陽性，風(fēng)疹