專題二十三傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與微生物的應(yīng)用

0夯基礎(chǔ)考點(diǎn)練透

考點(diǎn)1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

1.[2021陜西渭南六校聯(lián)考，15分]回答下列有關(guān)泡菜制作的問題：

(1)制作泡菜時(shí),所用鹽水需煮沸，其目的是o為了縮短制作時(shí)間，有

人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液,加入陳泡菜液的作用是

(2)泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵的過程即乳酸菌進(jìn)行的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細(xì)

胞的中。

(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有、和等。

(4)從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和

其他雜菌的消長規(guī)律是,原因是，，

2.[2020河北九校聯(lián)考，15分]請(qǐng)【可答下列利用微生物發(fā)酵制作食品的相關(guān)問題：

(1)果酒制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型微生物,在、呈____________的

發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。

⑵在變酸的酒的表面可以觀察到一層白色菌膜，其形成原因

是。

當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)?再轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿帷?/p>

⑶民間制作腐乳時(shí)"當(dāng)豆腐上長出毛霉后，要對(duì)豆腐進(jìn)行裝瓶,制作后期要加入酒和鹵湯，其

中酒含量一般控制在左右，若酒精含量過高，會(huì)導(dǎo)

致c

(4)工業(yè)化生產(chǎn)以上食品，需要對(duì)微生物進(jìn)行純化。不同微生物培養(yǎng)的溫度和時(shí)間往往不同，

可以每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止

因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目。在一定的培養(yǎng)條件下，依據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上形成菌

落的(請(qǐng)寫出兩種)等特征可以區(qū)分不同的

菌落。

考點(diǎn)2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

3.[2021安徽示范高中聯(lián)考，15分]大腸桿菌是寄生于人和動(dòng)物腸道中的細(xì)菌，其代謝產(chǎn)物能與

染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。其培養(yǎng)基配方如表所示。

成分蛋白乳糖磷酸二氫鉀瓊脂蒸儲(chǔ)水2%的伊紅水溶液0.5%的美藍(lán)水溶液

陳

20~

含量10g10g2g1000mL20mL13mL

30g

回答下列問題：

(1)該培養(yǎng)基中，蛋白豚為大腸桿菌提供的主要營養(yǎng)有和維生素。

(2)在接種大腸桿菌前，需先將滅菌后的空白培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察是否有

菌落生成,其目的是O

(3)為了檢測(cè)嚴(yán)重污染的水體中大腸桿菌的數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培

養(yǎng)基中，應(yīng)選擇顏色為的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),該方法是通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)

來推測(cè)樣品中的活菌數(shù),其原理是o

⑷將1mL水樣稀釋1000者,在3個(gè)平板.上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3

個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37o據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。

(5)除利用特定培養(yǎng)基選擇鑒定某種細(xì)菌外,還可以依據(jù)對(duì)

細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定和分類。

4.［2020河北唐山模擬，15分］在日常生活中，人們非常重視食品安全問題。當(dāng)食品中的大腸桿

菌數(shù)目超過某一限定值之后會(huì)對(duì)人體造成嚴(yán)重危害，因此,大腸桿菌含量是檢測(cè)食品衛(wèi)生狀況

的重要指標(biāo)。以下是能夠檢測(cè)大腸桿菌數(shù)量的三種方法?；卮鹣铝袉栴}：

(1)平板計(jì)數(shù)法:培養(yǎng)大腸桿菌通常使用(填“LB”或“查氏”)培養(yǎng)基，其成分有醇母

言、蛋白陳、NaCl.由)、X,其中為大腸桿菌提供氮源的是.X代

表O

(2)濾膜法:將已知體積的水過濾后，將濾膜放在培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上,大腸

桿菌的菌落呈現(xiàn)色。利川該方法所統(tǒng)計(jì)的樣品中的菌落數(shù)往往較實(shí)際值低的原因

是_。

(3)多管發(fā)酵法；根據(jù)大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特征,檢測(cè)水樣中的大腸桿菌。該方法使

用的是乳糖蛋白腺培養(yǎng)液,其乳糖可為大腸桿菌提供和。

庭提能力［考法實(shí)戰(zhàn)

1.［2021四川綿陽一診，15分］米酒酒精含量低，口味香甜醇美，深受人們的喜愛。家庭制作米

酒時(shí),一般先把糯米淘凈，蒸熟,攤開冷透;然后再將酒曲浸水活化,直到冒出魚眼大小的氣泡;

最后將冷卻的熟米與活化的酒曲混合后再進(jìn)行發(fā)酵?；卮鹣铝袉栴}：

（1）酒曲中的微生物主要是酵母菌，酵母菌的呼吸類型是C酵母菌進(jìn)行酒精

發(fā)酵的反應(yīng)式是，

⑵酒曲浸水后會(huì)被活化的原因是酒曲中的微生

物°

⑶將冷卻的熟米與活化的酒曲混合后，裝入一個(gè)潔凈的泡菜壇里進(jìn)行發(fā)酵，

（填操作）可保證無氧環(huán)境。

（4）室內(nèi)溫度在10℃左右時(shí)，可用棉絮將泡菜壇包裹起來，因?yàn)榻湍妇M(jìn)行酒精發(fā)酵的最適溫

度是0米酒酒精度數(shù)一般不會(huì)很高，原因

是O

2.[2021廣東廣州階段訓(xùn)練,15分]控制飲用水中的細(xì)菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施,

回答下列與檢驗(yàn)飲用水中的大腸桿菌有關(guān)的問題。

⑴檢蛤大腸桿菌的含曷時(shí)，有時(shí)需要將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水

樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱

為。如圖所示為四種菌落分布圖，在這些菌落分布中，一般不能由該方法得到的是

（填字母）。

⑵用上述方法檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)（填“需要”或“不需要”）設(shè)置空白對(duì)照，原

因是o

⑶在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，一般選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因

而遺漏菌落的數(shù)目。若分別取0.1mL已稀釋10；'倍的水樣分別涂布到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的

表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基中大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55、56、57,則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)

為o

⑷統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比接種水樣中活菌的實(shí)際數(shù)目（填“高”或“低”），原因

是O

3.[2021長春質(zhì)量監(jiān)測(cè)，15分]豐富且不可食用的木質(zhì)纖維素被作為潛在原料用于生產(chǎn)乙醇，這

首先需要獲得高產(chǎn)纖維素酶的纖維素分解菌。如圖是從腐殖土中篩選纖維素分解菌的流程,請(qǐng)

分析回答：

腐殖土溶液f選擇培養(yǎng)一①f將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上f挑選產(chǎn)生透明圈的菌落

⑴圖中步驟①為,鑒別培養(yǎng)基中應(yīng)加入O

(2)纖維素分解菌可產(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶至少包括三種組分，

為進(jìn)一步確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行。纖維素

能活性的測(cè)定方法為。

⑶利用纖維素生產(chǎn)乙醇時(shí)，發(fā)酵罐中還需要接種菌，發(fā)酵時(shí)應(yīng)控制溫度

為C,通氣情況為O

4.[2021陜西部分學(xué)校摸底，15分]研究發(fā)現(xiàn)土壤中的一種極毛桿菌，能夠以3,4-二甲苯酚為碳

源,對(duì)土壤殘留農(nóng)藥中的該成分有較好的降解作用。請(qǐng)回答：

(1)某興趣小組欲從土壤中篩選出能高效降解3,4-二甲茶酚的極毛桿菌菌株,分離極毛桿菌的

土樣應(yīng)來自土壤，在配制篩選極毛桿菌的培養(yǎng)基時(shí)對(duì)其碳源的選擇

應(yīng)，在實(shí)驗(yàn)室一般采用法對(duì)配制的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。

⑵分離純化極毛桿菌時(shí),首先需要用對(duì)土壤浸出液進(jìn)行梯度稀釋的理由

是,

該分離純化方法為。若采用平板劃線法分離土樣中的極毛桿菌,在進(jìn)行第二次及以

后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的

是。

(3)為了統(tǒng)計(jì)土壤浸出液中極毛桿菌的總數(shù)，他們選用稀釋倍數(shù)分別為10"、10\IO,的稀釋液

進(jìn)行涂布，每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿。為了保證實(shí)臉的準(zhǔn)確性，還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)

驗(yàn)是。

5.[2021安徽合肥檢測(cè)，15分]研究顯示溶藻細(xì)菌對(duì)控制水華有非常重要的作用，研究人員從池

塘中采集水樣，加入無菌錐形瓶中，用搖床在37C下振蕩培養(yǎng)2()min,使其均勻分散成菌懸液,

再通過分離、純化、鑒定得到了溶藻細(xì)菌。請(qǐng)回答下列問題：

⑴分離前需用無菌移液管從菌懸液中吸取菌液1mL,進(jìn)行梯度稀釋。梯度稀釋的目的

是o再取每個(gè)稀釋度下的菌懸液0.1瓶用法

接種到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上,每個(gè)梯度做三組實(shí)驗(yàn),在370C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),直至長出菌落。

(2)若將1mL菌懸液稀釋U倍,再取o.lmL接種到細(xì)菌同體培養(yǎng)基上,分別形成了263、278、

269個(gè)菌落，則每亳升原菌懸液中有細(xì)菌個(gè),用該方法所得結(jié)果一般比實(shí)際值偏低的

原因是>

(3)水華為藍(lán)藻暴發(fā)所致。研究人員嘗試?yán)萌茉寮?xì)菌限制藍(lán)藻數(shù)量，相關(guān)實(shí)驗(yàn)如圖所示(圖中

①“⑥表示實(shí)驗(yàn)步驟)。實(shí)驗(yàn)組做二個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

薇藻臺(tái)三4一溶藻細(xì)做

尸可裂解藍(lán)藻)

①光照卜，振演培養(yǎng)④振蕩培養(yǎng)

②接種(平鋪于⑤實(shí)驗(yàn)組:取曲液

固體培養(yǎng)基上)滴加在培養(yǎng)皿中

'③光照培養(yǎng).一./一、⑥光照培養(yǎng)三天.包y

為完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，應(yīng)增設(shè)對(duì)照組，可采取的做法

是O

6.[2020湖北普通高中聯(lián)考，11分]紅酸湯是一種很有特色的火鍋底料，制作流程如圖所示。請(qǐng)

分析回答以下問題：

(1)密封發(fā)酵時(shí),常在壇中加入成品紅酸湯,其目的是。乳酸發(fā)酵的過程

即風(fēng)酸菌進(jìn)行的過程。

(2)裝壇時(shí)壇口留有一點(diǎn)空間而不裝滿的目的是，紅酸湯制作過程的初

期會(huì)有氣泡冒出，但氣泡的產(chǎn)生會(huì)逐漸停止，試分析原

因：，

(3)紅酸湯有利于人體腸道內(nèi)多種益生菌的生長。消化道炎癥往往與益生菌群減少、有害菌群

增多有關(guān)。研究表明，治療消化道慢性炎癥時(shí)，不宜濫用抗生素，濫用抗生素的害處

有“

7.[2020安徽合肥調(diào)研，14分]某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí),不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混合在

一起，得到混合菌。請(qǐng)你完善分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的實(shí)驗(yàn)步驟,并回答有

關(guān)問題。

(1)主要步驟

①制備兩種培養(yǎng)基:一種是培養(yǎng)基，另一種是加青霉素的培養(yǎng)基。分別分成

兩份，依次標(biāo)上A、A'和B、B',備用。

②分別向A、B培養(yǎng)基中接種。

③接種后,放在恒溫箱中培養(yǎng)3~4天。

④分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種,接種到A'、B'培養(yǎng)基中。

⑤接種后，把A'、B'培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)3~4天。

(2)回答問題

在步驟①中，為保證無雜菌污染，實(shí)驗(yàn)中應(yīng)采用的主要拮施有：對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行、將

在酒精燈火焰上滅菌、接種過程在附近進(jìn)行。在步驟④中,A培養(yǎng)基上生長良好的菌

種是o④⑤兩個(gè)步驟的目的是獲

得___________________________________________________________________________________

重應(yīng)用I素養(yǎng)提升

1.［乳酪制作，社會(huì)責(zé)任］［15分］如圖表示乳酪（有酸甜味的一種食品）的生產(chǎn)流程，已知牛奶中

含有乳糖,乳糖可被水解為前萄糖和半乳糖。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

新鮮牛奶一（I）巴斯德消毒法一（H）溫度恢復(fù)至培養(yǎng)溫度一（III）發(fā)酵（加入兩種細(xì)

菌）一*（N）在37℃下培養(yǎng)一包裝和儲(chǔ)存

注：巴斯德消毒法是將原料加熱至68、70C,并保持此溫度30min以后急速冷卻到4~5C;新

鮮牛奶沒有甜味。

⑴生產(chǎn)流程中進(jìn)行步驟II的目的是,步驟III中加入的兩種細(xì)菌中包括用

（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基擴(kuò)大化培養(yǎng)后獲得的乳酸菌，在培養(yǎng)過程中必須控制的環(huán)境因

素有（至少回答兩個(gè)）。

⑵在發(fā)酵過程中，新鮮牛奶中的（填具體物質(zhì)名稱）被分解導(dǎo)致乳酪有甜味，乳酸菌

進(jìn)而分解產(chǎn)生乳酸，使乳酪有酸味。

（3）在生產(chǎn)乳酪的過程中加入新鮮草莓碎片就能制作出草莓乳酪，已知草莓中含有豐富的糖，

在（填羅馬數(shù)字）階段后加入草莓碎片最合適，原因

是O

2.［新情境，社會(huì)責(zé)任］［11分］約2.5億年前二疊紀(jì)末期，無數(shù)物種由于無法及時(shí)適應(yīng)當(dāng)時(shí)氣候

變化而滅絕。但細(xì)菌X得到快速大量繁殖，細(xì)菌X快速大量繁殖的原因包括:細(xì)菌X能利用海

洋沉積層的二氧化碳和氫氣合成并釋放甲烷，顯著改變氣候和海洋化學(xué)成分；火山噴發(fā)導(dǎo)致銀

元素迅速增多，這種至關(guān)重要的營養(yǎng)物質(zhì)幫助微生物（細(xì)菌X）繁殖。銀污染是由銀及其化合物

所引起的環(huán)境污染，銀對(duì)環(huán)境是一種潛在的危害物。請(qǐng)回答：

（DX細(xì)菌的代謝類型最可能是,該細(xì)菌的遺傳信息主要存在于（填細(xì)胞結(jié)構(gòu)）

中。

（2）鑒于細(xì)菌X在高濃度銀污染廢水的生物處理中能發(fā)揮很大作用，某同學(xué)欲篩選高效緩解銀

污染的細(xì)菌X,他應(yīng)從采集土樣。

（3）篩選細(xì)菌X的培養(yǎng)基從功能上講屬于培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中（填“需要”或“不

需要”）添加有機(jī)碳源,（填“需要”或“不需要”）添加含鍥化合物。

⑷在純化細(xì)菌X時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法

有o為了進(jìn)行計(jì)數(shù)，該同學(xué)吸取菌液1mL稀釋1（）00倍，然

后吸取稀釋后的菌液0.21nL，接種于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。一段時(shí)間后觀察菌落并計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)重

復(fù)三次，得到3個(gè)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)分別為70、80、90,則該菌液的濃度是個(gè)細(xì)菌/mL。

答案

專題二十三傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與微生物的應(yīng)用

目夯基礎(chǔ)；考點(diǎn)練透

1.（除標(biāo)明外，每空2分）（1）殺滅雜菌增加乳酸菌數(shù)量（2）無氧呼吸細(xì)胞質(zhì)（3）溫度（1

分）腌制時(shí)間（1分）食鹽用量（1分）（三空順序可顛倒）⑷乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減

少乳酸菌比雜菌更耐酸

2.（除標(biāo)明外,每空2分）（1）缺氧（1分）酸性（1分）（2）酒表面氧氣濃度較大,醋酸菌會(huì)大量

繁殖形成菌膜（3分）乙醛（3）12%腐乳成熟時(shí)間延長（4）菌落數(shù)相對(duì)穩(wěn)定形狀、大小、

隆起程度、顏色

【解析】（1）在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因

無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。（2）因?yàn)榫频谋韺友鯕鉂舛容^大,醋酸菌會(huì)大量繁殖形成菌膜,

所以在變酸的酒的表面可以觀察到一層白色菌膜。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌可以將糖分

解為醋酸；當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時(shí)，醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)橐胰賹⒁胰┺D(zhuǎn)變?yōu)榇姿?。?）

制作腐乳后期要加入酒和鹵湯，其中酒的含量一般控制在12%左右,加酒可以抑制微生物的生

長，同時(shí)使腐乳具有獨(dú)特的香味。若酒精含量過高,會(huì)使腐乳成熟的時(shí)間延長。（4）不同微生物

所需培養(yǎng)溫度和時(shí)間往往不同，可以每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，為防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而

遺漏菌落的數(shù)目，應(yīng)該選取菌落數(shù)相對(duì)穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。在一定的培養(yǎng)條件下，依據(jù)微

生物在固體培養(yǎng)基上形成函落的形狀、大小、顏色等特征可以區(qū)分不同的菌落。

X10*（3分）（5）菌落的形狀、大小等菌落特征

【解析】（1）蛋白陳可為大腸桿菌提供碳源、氮源和維生素。（2）為了檢測(cè)培養(yǎng)基制備是否

合格（或滅菌是否徹底），在接種大腸桿菌前，需先將滅菌后的空白培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)一

段時(shí)間，觀察是否布菌落生成。（3）大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與培養(yǎng)基中的染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使

菌落呈黑色，因此,為了檢測(cè)嚴(yán)重污染水體中大腸桿菌的數(shù)量,將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在

題述平板培養(yǎng)基中，應(yīng)選擇顏色為黑色的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表

面生長的?個(gè)菌落來源于樣品稀釋液中的?個(gè)活菌，因此可通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)興推測(cè)

樣品中的活菌數(shù)。（4）將1mL水樣稀釋1000倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀

釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌

數(shù)為（39+38+37）+3+X1000XX10\（5）一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出

穩(wěn)定的菌落特征,因此可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定和分類。

4.（除標(biāo)明外，每空2分）（1）LB（1分）酵母膏、蛋白陳瓊脂（2）伊紅美藍(lán)黑當(dāng)兩個(gè)或

多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落（答案合理即可）（3）碳源能量

【解析】（1）培養(yǎng)大腸桿菌通常使用LB培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中的酵母膏和蛋白陳可為大腸桿菌

提供氮源。用平板計(jì)數(shù)法檢測(cè)大腸桿菌數(shù)量時(shí),所用的培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基,故該LB培養(yǎng)基

中還應(yīng)含有瓊脂。（2）在伊紅美赫培養(yǎng)某匕大腸桿菌的菌落呈黑色，統(tǒng)計(jì)黑色菌落的數(shù)目，就

可估算出單位體積樣品中大腸桿菌的數(shù)目。但由于兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌細(xì)胞連在一起時(shí)，平板

上只能觀察到一個(gè)菌落，故用濾膜法得到的統(tǒng)計(jì)值往往要比實(shí)際值低。（3）多管發(fā)酵法是根據(jù)

大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特征,檢測(cè)水樣中大腸桿曲的方法。乳糖可為大腸桿菌提供碳

源和能量。

目提能力7考法實(shí)戰(zhàn)

1.（1）兼性厭氧型（2分）CM206f2c用OH+2co2（3分）（2）得到更多的水分，新陳代謝增強(qiáng)（3

分）（3）向壇蓋邊緣的水槽中注滿水（2分）（4）18~25c（2分）酵母菌發(fā)酵過程中產(chǎn)生的

酒精對(duì)酵母菌細(xì)胞有毒害作用（3分）

【解析】⑴酵母菌的呼吸類型為兼性厭氧型。在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵，反應(yīng)

式為CMQBf2c2HQH+2c02。（2）酒曲浸水后會(huì)被活化的原因是酒曲中的微生物獲得了更多的水

分，新陳代謝增強(qiáng)。（3）可以向壇蓋邊緣的水槽中注滿水，以保證酵母菌發(fā)酵的無氧環(huán)境。（4）

酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵的最適溫度為18?25°C。醉母菌發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酒精對(duì)酵母菌細(xì)胞有

毒害作用，因此,米酒酒精度數(shù)一般不會(huì)很高。

X10"（4）低（1分）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

【解析】（1）分析題干信息可知,對(duì)微生物計(jì)數(shù)時(shí),采用的接種方法是稀釋涂布平板法.得到

圖I）所示結(jié)果的接種方法是平板劃線法，其他三個(gè)圖都是利用稀釋涂布平板法接種得到的結(jié)

果。（2）對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)對(duì)，需要設(shè)置一個(gè)不接種細(xì)菌的空白培養(yǎng)基，可以檢測(cè)培養(yǎng)基是否被

污染。⑶在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，一般選擇菌落數(shù)目杉定時(shí)的記求作為結(jié)果，從而可以避免因培界

時(shí)間不足等而遺漏菌落數(shù)目。三個(gè)培養(yǎng)基中大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55、56、57,其平均值是

56,每升原水樣中的大腸桿菌數(shù)量為564-X103X10：，X10%（4）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，

平板上觀察到的只是一個(gè)南落，因此統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往比實(shí)際值低。

3.（除標(biāo)明外，每空2分）（1）梯度稀釋剛果紅（1分）（2）G酶、G酶、福萄糖昔酶發(fā)酵產(chǎn)

纖維素酶的實(shí)驗(yàn)測(cè)定纖維素完全分解所需時(shí)間（測(cè)定單位時(shí)間產(chǎn)生葡萄糖的量或?qū)ζ咸烟?/p>

的產(chǎn)生量進(jìn)行定量測(cè)定,答出纖維素分解情況、葡萄糖產(chǎn)生量給1分）（3）酵母18~25先

通氣后密封

【解析】（1）由于選擇培養(yǎng)之后菌群的密度較大，需要進(jìn)行梯度稀群之后再將樣品涂布到鑒

別培養(yǎng)基上,才能形成單個(gè)菌落,便于鑒別。剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,因此鑒別培

養(yǎng)基中應(yīng)加入剛果紅。（2）纖維素酶至少包括G酶、a酷和葡萄糖普酶三種組分，為進(jìn)一步確

定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)?？梢酝ㄟ^測(cè)定纖維素完全分解

所需的時(shí)間測(cè)定纖維索酶活性的大小。（3）酵母前通過無氧呼吸可將葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇，一般

情況下，要先通氣后密封,使酵母菌數(shù)量達(dá)到一定程度后再進(jìn)行酒精發(fā)酵。發(fā)酵溫度應(yīng)控制在

18~25℃,,

4.（除標(biāo)明外，每空2分）（1）3,4-二甲苯酚含量高的以3,4-二甲苯酚為唯一碳源高壓蒸汽

滅菌（2）無菌水（1分）土壤浸出液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落，同時(shí)用無

菌水可以防止雜菌污染稀釋涂布平板法將聚集的菌種逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落（3）

未接種的空白培養(yǎng)基

【解析】（1）篩選目的菌機(jī)應(yīng)從富含該菌的土壤中采集土樣，極毛桿菌對(duì)土壤殘留農(nóng)藥中的

3,4-二甲苯酚有較好的降解作用，因此應(yīng)從該物質(zhì)含量高的十.壤取樣。篩選某種微生物E勺選擇

培養(yǎng)基應(yīng)有利于該種微生物生存,而不利于其他微生物生存,極毛桿菌能夠以3,4-二甲苯酚為

碳源,因此配制篩選極毛桿菌的培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以3,4-二甲苯酚為唯一碳源,實(shí)驗(yàn)室對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行

滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。（2）分離純化極毛桿菌時(shí)，首先需要用無菌水對(duì)土壤浸出

液進(jìn)行梯度稀釋，這樣既可避免雜菌污染，又可將極毛桿菌分散開，以便在培養(yǎng)基表面7成單

個(gè)菌落。利用系列梯度稀釋的方法對(duì)微生物進(jìn)行分離純化屬于稀釋涂布平板法。利用立板劃

線法分離該菌時(shí),在進(jìn)行第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣可

以將聚集的菌種逐步稀釋以便得到單個(gè)菌落。（3）通過稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)該菌時(shí)，需要設(shè)置

一組空白對(duì)照組，即未接種的空白培養(yǎng)基。

X10"當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落（3）在對(duì)照組的每個(gè)培

養(yǎng)皿中，各滴加等量的、不含溶藻細(xì)菌的培養(yǎng)液

【解析】（1）梯度稀釋的Fl的是使水樣中的各種微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，以便在固體培養(yǎng)基

表面形成單個(gè)菌落。對(duì)微生物進(jìn)行分離并計(jì)數(shù)通常采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。（2）每亳升

原菌懸液中有細(xì)菌（263+278+269）+3X1064-X101個(gè)），力于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，

平板上觀察到的只是?個(gè)菌落，故用稀釋涂布平板法所得的結(jié)果?般比實(shí)際值偏低。（3）為了

排除培養(yǎng)液對(duì)藍(lán)藻的影響，應(yīng)該在對(duì)照組每個(gè)培養(yǎng)皿中各滴加等最的、不含溶藻細(xì)菌的培養(yǎng)

液。

6.（除標(biāo)明外，每空2分）（1）增加乳酸菌含量無氧呼吸（2）防止西紅柿發(fā)酵后發(fā)酵液外溢

剛?cè)雺瘍?nèi)，西紅柿表面的雜菌（酵母菌等）呼吸產(chǎn)生C（h隨著乳酸積累抑制了雜菌的生長，乳酸

菌產(chǎn)生乳酸的過程不產(chǎn)生CO2（合理即可,3分）（3）濫用抗生素會(huì)殺死腸道內(nèi)多種益生菌、抗

生素對(duì)有害菌產(chǎn)生選擇作用（合理即可）

【解析】（1）成品紅酸湯中乳酸菌的含量比較高，在壇中加入成品紅酸湯的目的是增加乳酸

菌的含最，從而縮短發(fā)醉時(shí)間。乳酸發(fā)酵是乳酸菌講行無氧呼吸的過程。（2）在發(fā)酵過程中，由

于細(xì)胞呼吸會(huì)產(chǎn)生熱量，同忖壇中存在某些發(fā)酵過程中能產(chǎn)生CO2的雜菌,上述兩種情況