2025年全國衛(wèi)生資格考試病理學(xué)技術(shù)初級師主管技師題庫(含答案)1.單選題：以下哪種固定液最常用于常規(guī)組織病理學(xué)標(biāo)本的固定？A.Bouin液B.10%中性福爾馬林C.卡諾固定液D.戊二醛答案：B解析：10%中性福爾馬林（pH7.0-7.4）是最常用的常規(guī)固定液，對組織穿透性好，能較好保存組織形態(tài)和抗原性，適用于HE染色及大多數(shù)免疫組化檢測。Bouin液含苦味酸，主要用于糖原和尼氏體固定；卡諾固定液滲透快但易使組織收縮，常用于冰凍切片；戊二醛主要用于電鏡標(biāo)本固定。2.多選題：組織脫水不徹底可能導(dǎo)致的后果包括？A.切片時(shí)組織發(fā)脆易碎裂B.透明劑無法完全滲透C.包埋劑無法充分浸入D.染色時(shí)染料吸附不均勻答案：BCD解析：脫水是將組織內(nèi)水分置換為乙醇的過程，若不徹底，殘留水分會阻礙后續(xù)透明劑（如二甲苯）滲透，導(dǎo)致包埋劑（石蠟）無法充分浸入，造成組織與包埋劑結(jié)合不良，切片時(shí)易出現(xiàn)裂隙；同時(shí)殘留水分會影響染料與組織成分的結(jié)合，導(dǎo)致染色不均。切片發(fā)脆通常是脫水過度或透明時(shí)間過長所致。3.簡答題：簡述HE染色中“藍(lán)化”步驟的作用及操作要點(diǎn)。答案：作用：蘇木精染色后，組織細(xì)胞核呈紫紅色（酸性蘇木精-鋁絡(luò)合物與核酸結(jié)合），需通過“藍(lán)化”將其轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的藍(lán)色。藍(lán)化是利用弱堿性溶液（如稀氨水、Scott氏自來水）中和組織內(nèi)多余的酸，使蘇木精-鋁絡(luò)合物從紅色（酸性環(huán)境）變?yōu)樗{(lán)色（堿性環(huán)境）。操作要點(diǎn)：①藍(lán)化液pH需控制在8.0-8.5，過堿會導(dǎo)致背景著色過深；②藍(lán)化時(shí)間不宜過長（通常30秒-1分鐘），否則可能引起核染色減弱；③藍(lán)化后需用蒸餾水充分沖洗，避免殘留堿性物質(zhì)影響后續(xù)伊紅染色；④若藍(lán)化不充分（核呈淡紅或紫色），可重復(fù)藍(lán)化步驟。4.單選題：細(xì)胞病理學(xué)中，痰液標(biāo)本采集的最佳時(shí)間是？A.清晨第一口痰B.餐后2小時(shí)C.睡前D.任意時(shí)間答案：A解析：清晨第一口痰經(jīng)夜間積聚，含較多呼吸道脫落細(xì)胞，且受食物、唾液污染較少，是痰液標(biāo)本采集的最佳時(shí)間。采集前需用清水漱口，避免口腔上皮細(xì)胞混入。5.多選題：免疫組織化學(xué)染色中，內(nèi)源性過氧化物酶活性的阻斷方法包括？A.3%過氧化氫孵育B.0.3%過氧化氫甲醇溶液孵育C.10%福爾馬林固定D.胰酶消化答案：AB解析：內(nèi)源性過氧化物酶常見于血細(xì)胞（如中性粒細(xì)胞）、肝細(xì)胞等，會與DAB顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生假陽性。阻斷方法為用3%過氧化氫（水溶液，用于石蠟切片）或0.3%過氧化氫甲醇（用于冰凍切片，甲醇可增強(qiáng)滲透）孵育10-15分鐘。福爾馬林固定無法阻斷內(nèi)源性酶活性；胰酶消化用于抗原修復(fù)，與酶阻斷無關(guān)。6.簡答題：簡述石蠟切片制作中“透明”步驟的目的及常用透明劑的特點(diǎn)。答案：目的：透明是將組織內(nèi)的脫水劑（乙醇）置換為能與包埋劑（石蠟）互溶的試劑，使石蠟充分浸入組織，確保切片時(shí)組織與石蠟結(jié)合緊密。常用透明劑特點(diǎn)：①二甲苯：最常用，透明速度快（一般15-30分鐘/次），但對組織有一定收縮性，過度透明會導(dǎo)致組織發(fā)脆；②甲苯：透明效果與二甲苯類似，但揮發(fā)性稍低；③氯仿：透明速度較慢（1-2小時(shí)），對組織收縮小，適用于精細(xì)組織（如神經(jīng)組織）；④苯甲醇：透明時(shí)間長（數(shù)小時(shí)），但對組織損傷小，適用于胚胎或柔軟組織。7.單選題：以下哪種染色方法可特異性顯示神經(jīng)髓鞘？A.Masson三色染色B.蘇丹Ⅲ染色C.韋格納（Weigert）髓鞘染色D.PAS染色答案：C解析：Weigert髓鞘染色利用鐵蘇木精與髓鞘中的類脂-蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)合，染成藍(lán)黑色，軸突呈紅色，是顯示神經(jīng)髓鞘的經(jīng)典方法。Masson用于區(qū)分膠原纖維（藍(lán)/綠色）和肌纖維（紅色）；蘇丹Ⅲ顯示脂肪（紅色）；PAS顯示糖原及黏液（紫紅色）。8.多選題：冰凍切片制作中，組織易出現(xiàn)冰晶的原因包括？A.組織未充分固定B.冷凍速度過慢C.組織含水量過高D.冷凍溫度過低（<-30℃）答案：BC解析：冰晶形成與冷凍速度和組織含水量直接相關(guān)。冷凍速度慢時(shí)，細(xì)胞內(nèi)水分緩慢形成大冰晶，破壞組織結(jié)構(gòu)；組織含水量高（如腦、腎）更易形成冰晶。充分固定可減少組織含水量（固定液置換部分水分），但非必需；冷凍溫度過低（如-80℃）反而因超快速冷凍（玻璃化）減少冰晶形成。9.案例分析題：某病理科在HE染色中發(fā)現(xiàn)切片背景著色深，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)對比度差，可能的原因及解決方法有哪些？答案：可能原因及解決方法：（1）蘇木精染色時(shí)間過長：蘇木精過度著色會導(dǎo)致背景（如膠原纖維、細(xì)胞質(zhì)）吸附過多染料，需縮短蘇木精染色時(shí)間（從5分鐘調(diào)整為2-3分鐘），或稀釋蘇木精工作液。（2）分化不充分：分化步驟（1%鹽酸乙醇）未去除背景多余染料，應(yīng)延長分化時(shí)間（從數(shù)秒延長至10-20秒），或檢查鹽酸乙醇濃度是否準(zhǔn)確（1%鹽酸+99%乙醇）。（3）藍(lán)化后沖洗不徹底：殘留的堿性溶液（如稀氨水）會使伊紅染色時(shí)酸性染料吸附減少，導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)著色淺，需用蒸餾水充分沖洗（5-10分鐘），確保組織呈中性。（4）伊紅染色時(shí)間過短或濃度過低：伊紅濃度不足（常規(guī)0.5%-1%伊紅水溶液）或染色時(shí)間過短（1-2分鐘）會導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)著色淺，需調(diào)整伊紅濃度或延長染色時(shí)間。（5）脫水不徹底：殘留水分阻礙伊紅滲透，應(yīng)檢查脫水步驟（70%→80%→90%→95%→100%乙醇）是否充分，每級乙醇時(shí)間不少于30分鐘（小標(biāo)本）至2小時(shí)（大標(biāo)本）。10.單選題：電子顯微鏡標(biāo)本制備中，戊二醛固定的主要作用是？A.保存細(xì)胞內(nèi)酶活性B.交聯(lián)蛋白質(zhì)分子，保存超微結(jié)構(gòu)C.沉淀核酸D.增強(qiáng)組織對重金屬染色的親和力答案：B解析：戊二醛含兩個(gè)醛基，可與蛋白質(zhì)的氨基（-NH?）共價(jià)結(jié)合，形成穩(wěn)定的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)，固定細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)成分（如細(xì)胞器膜、細(xì)胞骨架），較好保存超微結(jié)構(gòu)。保存酶活性需用冷戊二醛（4℃）并縮短固定時(shí)間；沉淀核酸常用鋨酸；增強(qiáng)重金屬親和力需通過鋨酸后固定（與脂類結(jié)合）或鈾鉛染色。11.多選題：病理標(biāo)本接收時(shí)需核對的信息包括？A.患者姓名、年齡、住院號B.標(biāo)本類型（如手術(shù)切除、活檢）C.臨床診斷及送檢目的D.固定液種類及量（固定液體積應(yīng)為標(biāo)本體積的5-10倍）答案：ABCD解析：標(biāo)本接收需嚴(yán)格核對患者信息（防止張冠李戴）、標(biāo)本類型（不同標(biāo)本處理方式不同，如活檢需快速固定，大標(biāo)本需切開固定）、臨床診斷（指導(dǎo)特殊染色或免疫組化）、固定情況（未固定或固定液不足需重新固定，避免自溶）。12.簡答題：簡述PAS染色的原理及主要應(yīng)用。答案：原理：過碘酸（HIO?）氧化多糖（如糖原、黏液）及糖蛋白中的1,2-乙二醇基（-CHOH-CHOH-），生成醛基（-CHO）；醛基與無色品紅亞硫酸溶液（Schiff試劑）反應(yīng)，形成紫紅色復(fù)合物。主要應(yīng)用：①顯示糖原（肝細(xì)胞、橫紋肌細(xì)胞內(nèi)的糖原顆粒呈紫紅色）；②顯示黏液（胃黏膜杯狀細(xì)胞、大腸腺的黏液）；③顯示基底膜（腎小球基底膜、血管基底膜）；④鑒別腺癌細(xì)胞（分泌黏液的腺癌PAS陽性）與未分化癌。13.單選題：組織包埋時(shí)，石蠟熔點(diǎn)的選擇主要依據(jù)？A.組織大小B.切片厚度C.實(shí)驗(yàn)室溫度D.染色方法答案：C解析：石蠟熔點(diǎn)需與實(shí)驗(yàn)室溫度匹配。夏季（室溫25℃以上）選用高熔點(diǎn)石蠟（58-60℃），防止切片軟化變形；冬季（室溫15℃以下）選用低熔點(diǎn)石蠟（52-54℃），避免切片過硬易碎裂。組織大小影響包埋盒選擇，切片厚度（3-5μm）由切片機(jī)調(diào)節(jié)，染色方法不直接影響石蠟熔點(diǎn)選擇。14.多選題：免疫組化中，非特異性染色的常見原因包括？A.一抗?jié)舛冗^高B.血清封閉不充分C.孵育時(shí)間過長D.組織內(nèi)存在內(nèi)源性生物素答案：ABCD解析：非特異性染色指抗體與目標(biāo)抗原以外的成分結(jié)合，原因包括：①一抗?jié)舛冗^高（與組織內(nèi)非靶蛋白結(jié)合）；②血清封閉不充分（未阻斷組織內(nèi)非特異性蛋白結(jié)合位點(diǎn)）；③孵育時(shí)間過長（增加非特異性結(jié)合機(jī)會）；④內(nèi)源性生物素（如肝、腎組織）與鏈霉親和素-生物素系統(tǒng)結(jié)合（需用生物素阻斷劑處理）。15.案例分析題：某實(shí)驗(yàn)室制作的石蠟切片出現(xiàn)“裂隙”（組織與石蠟間有空隙），可能的原因及解決方法是什么？答案：可能原因及解決方法：（1）脫水不徹底：殘留水分阻礙透明劑和石蠟滲透，導(dǎo)致組織與石蠟結(jié)合不良。解決：延長脫水時(shí)間（每級乙醇時(shí)間增加30分鐘），或檢查乙醇濃度（100%乙醇需定期更換，避免吸水）。（2）透明不充分：二甲苯未完全置換乙醇，石蠟無法浸入。解決：延長透明時(shí)間（從2次×15分鐘改為2次×20分鐘），或更換新鮮二甲苯（避免因吸收水分變渾濁）。（3）浸蠟時(shí)間不足：石蠟未充分滲入組織。解決：增加浸蠟次數(shù)（從2次×30分鐘改為3次×40分鐘），或提高浸蠟溫度（比石蠟熔點(diǎn)高2-3℃，如58℃石蠟用60℃浸蠟）。（4）包埋時(shí)石蠟溫度過低：石蠟?zāi)踢^快，無法與組織緊密結(jié)合。解決：包埋時(shí)使用恒溫包埋臺（55-60℃），確保石蠟在液態(tài)下充分包裹組織。（5）組織固定不良：自溶或固定不足的組織細(xì)胞間隙增大，石蠟無法填充。解決：接收標(biāo)本后及時(shí)固定（固定液體積≥標(biāo)本體積5倍），大標(biāo)本需切開（厚度≤0.5cm）以利固定液滲透。16.單選題：細(xì)胞病理學(xué)中，TCT（液基薄層細(xì)胞學(xué)）制片的主要優(yōu)勢是？A.操作簡單，成本低B.減少血液、黏液等干擾，細(xì)胞分布均勻C.可同時(shí)進(jìn)行HPV檢測D.適用于胸腹水標(biāo)本答案：B解析：TCT通過液基技術(shù)將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至保存液中，經(jīng)離心、過濾去除血液、黏液等雜質(zhì)，制成薄層均勻的細(xì)胞片，提高診斷準(zhǔn)確性。操作成本高于傳統(tǒng)涂片；HPV檢測需額外取材；胸腹水標(biāo)本常用細(xì)胞塊制片。17.多選題：HE染色中，細(xì)胞核著色過淺的可能原因有？A.蘇木精老化（氧化失效）B.分化時(shí)間過長C.藍(lán)化時(shí)間過短D.組織固定不當(dāng)（如福爾馬林酸性過高）答案：ABD解析：①蘇木精老化（有效成分氧化）會導(dǎo)致染色能力下降；②分化過度（鹽酸乙醇作用時(shí)間過長）會洗脫過多核染料；③組織固定時(shí)若福爾馬林酸性過高（未加緩沖劑），會使核酸（帶負(fù)電荷）與蘇木精（陽離子染料）結(jié)合減少；④藍(lán)化時(shí)間過短會導(dǎo)致核呈紫紅色而非藍(lán)色，但不會影響著色深淺。18.簡答題：簡述免疫組化中“抗原修復(fù)”的目的及常用方法。答案：目的：石蠟切片制作過程中，甲醛固定會使蛋白質(zhì)分子間形成交聯(lián)（甲酰橋），掩蓋抗原表位（epitope）?？乖迯?fù)通過破壞交聯(lián)，暴露抗原表位，增強(qiáng)抗體結(jié)合能力。常用方法：（1）熱修復(fù)：①高壓蒸汽法（121℃，2-5分鐘）：適用于大多數(shù)抗原（如CK、CD3）；②微波修復(fù)（95-100℃，10-15分鐘）：需保持緩沖液不沸騰；③水浴加熱（95℃，20-30分鐘）：溫和，適用于敏感抗原。熱修復(fù)常用緩沖液為枸櫞酸鹽緩沖液（pH6.0）或EDTA緩沖液（pH8.0-9.0，用于某些核抗原如ER、PR）。（2）酶消化修復(fù)：用胰酶、蛋白酶K等消化交聯(lián)的蛋白質(zhì)，適用于熱修復(fù)效果不佳的抗原（如纖維連接蛋白）。酶濃度（0.1%-0.5%）和消化時(shí)間（37℃，5-30分鐘）需嚴(yán)格控制，避免過度消化破壞組織形態(tài)。19.單選題：電子顯微鏡超薄切片的厚度通常為？A.50-80nmB.1-2μmC.5-10μmD.100-200nm答案：A解析：超薄切片厚度需滿足電子束穿透要求，通常為50-80nm（0.05-0.08μm）。1-2μm為半薄切片（光鏡觀察），5-10μm為常規(guī)石蠟切片厚度。20.多選題：病理技術(shù)質(zhì)量控制中，“內(nèi)部質(zhì)量控制”的內(nèi)容包括？A.定期校準(zhǔn)切片機(jī)、烤箱溫度B.使用已知陽性/陰性對照組織C.記錄每批試劑的有效期及使用情況D.參加室間質(zhì)量評價(jià)（EQA）答案：ABC解析：內(nèi)部質(zhì)量控制（IQC）指實(shí)驗(yàn)室自身對技術(shù)流程的監(jiān)控，包括設(shè)備校準(zhǔn)、對照設(shè)置、試劑管理等。室間質(zhì)量評價(jià)（EQA）是外部機(jī)構(gòu)對實(shí)驗(yàn)室能力的評估，屬于外部質(zhì)量控制。21.案例分析題：某實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行免疫組化時(shí)，陽性對照切片無著色，而陰性對照切片出現(xiàn)弱著色，可能的原因及解決方法是什么？答案：可能原因及解決方法：（1）一抗失效：陽性對照無著色可能因一抗保存不當(dāng)（反復(fù)凍融、4℃長期保存）導(dǎo)致活性喪失。解決：更換新批次一抗，按說明書保存（-20℃分裝保存，避免反復(fù)凍融）。（2）檢測系統(tǒng)故障：二抗、HRP酶或DAB顯色液失效。解決：用已知陽性組織切片驗(yàn)證檢測系統(tǒng)（如更換二抗或顯色液）。（3）抗原修復(fù)不充分：陽性對照組織抗原表位未暴露。解決：調(diào)整抗原修復(fù)方法（如延長熱修復(fù)時(shí)間或改用酶消化修復(fù)）。（4）陰性對照非特異性染色：可能因血清封閉不充分（未阻斷組織內(nèi)Fc受體）或二抗?jié)舛冗^高。解決：增加封閉血清濃度（如從5%正常山羊血清改為10%），或降低二抗工作濃度。（5）孵育條件不當(dāng)：一抗孵育溫度過低（如4℃過夜但實(shí)際溫度高于4℃）或時(shí)間過短。解決：嚴(yán)格控制孵育條件（4℃過夜需確保冰箱溫度穩(wěn)定）。22.單選題：以下哪種固定液可用于糖原的保存？A.10%中性福爾馬林B.乙醇（80%）C.戊二醛D.苦味酸答案：B解析：糖原易溶于水，需用非水溶液固定。80%乙醇可迅速沉淀糖原，防止其溶解；10%福爾馬林含大量水分，會導(dǎo)致部分糖原丟失；戊二醛和苦味酸（Bouin液）均含水，不適合糖原固定。23.多選題：組織切片“刀痕”（切片表面出現(xiàn)平行細(xì)溝）的可能原因包括？A.切片刀有缺口B.組織過硬（脫水過度）C.切片時(shí)刀與組織塊角度不當(dāng)D.包埋劑熔點(diǎn)過低答案：ABC解析：刀痕是切片刀與組織接觸時(shí)產(chǎn)生的機(jī)械損傷。切片刀有缺口（肉眼不可見的微缺損）會直接導(dǎo)致溝痕；組織過硬（脫水或透明過度）增加切割阻力，易產(chǎn)生刀痕；刀與組織塊角度（通常3-8°）過大或過小會改變切割力方向，導(dǎo)致不均勻損傷。包埋劑熔點(diǎn)過低（組織過軟）會導(dǎo)致切片褶皺，而非刀痕。24.簡答題：簡述脫落細(xì)胞涂片的固定方法及注意事項(xiàng)。答案：固定方法：①濕固定：涂片未干燥時(shí)立即固定（30秒內(nèi)），常用95%乙醇（適用于HE染色、巴氏染色）或卡諾固定液（甲醇:冰醋酸=3:1，適用于核染色質(zhì)顯示）；②干固定：涂片自然干燥后固定（如丙酮，適用于免疫細(xì)胞化學(xué)）。注意事項(xiàng)：①固定時(shí)間：95%乙醇固定15-30分鐘（保證細(xì)胞蛋白質(zhì)凝固）；②固定液需新鮮配制（避免乙醇吸水或卡諾液冰醋酸揮發(fā)）；③涂片厚度適中（過厚固定液無法滲透，過薄細(xì)胞易脫落）；④標(biāo)記清楚（避免混淆患者信息）。25.單選題：Masson三色染色中，膠原纖維的染色結(jié)果是？A.紅色B.藍(lán)色或綠色C.黑色D.黃色答案：B解析：Masson染色步驟：①鐵蘇木精染核（藍(lán)黑色）；②麗春紅-酸性品紅染胞質(zhì)及肌纖維（紅色）；③磷鉬酸/磷鎢酸分化（去除膠原纖維上的紅色染料）；④苯胺藍(lán)或亮綠染膠原纖維（藍(lán)色/綠色）。最終結(jié)果：細(xì)胞核藍(lán)黑，肌纖維紅色，膠原纖維藍(lán)/綠色。26.多選題：免疫組化中，“脫片”（組織從載玻片脫落）的常見原因包括？A.載玻片清潔不徹底（有油脂）B.黏附劑使用不當(dāng)（如APES未完全干燥）C.抗原修復(fù)時(shí)溫度過高（組織與玻片分離）D.切片過厚（>5μm）答案：ABC解析：①載玻片需經(jīng)清潔（酸處理或?qū)Ｓ们鍧崉┎⑼筐じ絼ㄈ鏏PES、多聚賴氨酸），油脂殘留會降低黏附力；②APES需干燥（37℃孵育30分鐘）形成穩(wěn)定膜，未干燥時(shí)遇水易脫落；③熱修復(fù)時(shí)高溫高壓可能導(dǎo)致組織與玻片分離（需使用高質(zhì)量黏附劑）；④切片厚度（3-5μm）與脫片無直接關(guān)系，過厚會影響染色但不易脫落。27.案例分析題：某實(shí)驗(yàn)室HE染色后，細(xì)胞核呈紅色而非藍(lán)色，可能的原因及解決方法有哪些？答案：可能原因及解決方法：（1）藍(lán)化步驟缺失或失?。禾K木精染色后未進(jìn)行藍(lán)化（直接進(jìn)入伊紅染色），或藍(lán)化液失效（如稀氨水揮發(fā)導(dǎo)致pH降低）。解決：檢查藍(lán)化步驟是否執(zhí)行，更換新鮮藍(lán)化液（如1%氨水或Scott氏液）。（2）蘇木精染色后沖洗不充分：殘留的酸性分化液（鹽酸乙醇）未被中和，導(dǎo)致藍(lán)化時(shí)堿性溶液無法起作用。解決：蘇木精染色后用自來水沖洗5分鐘（中和酸性），再進(jìn)行藍(lán)化。（3）組織固定液酸性過高：福爾馬林未加緩沖劑（如磷酸二氫鈉），固定時(shí)組織內(nèi)pH降低，蘇木精-鋁絡(luò)合物無法與核酸穩(wěn)定結(jié)