生物檢測技術(shù)試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共30分）1.以下哪種技術(shù)不屬于分子生物學(xué)檢測技術(shù)？（）A.聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）B.酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）C.流式細胞術(shù)D.比色法2.用于檢測蛋白質(zhì)表達水平的常用技術(shù)是（）A.NorthernblottingB.SouthernblottingC.WesternblottingD.Easternblotting3.熒光定量PCR技術(shù)中，SYBRGreen染料的作用是（）A.特異性結(jié)合雙鏈DNAB.特異性結(jié)合單鏈DNAC.標記引物D.標記探針4.在ELISA實驗中，包被抗原的目的是（）A.使抗原固定在固相載體上B.使抗原與抗體更好結(jié)合C.增加抗原的穩(wěn)定性D.便于檢測5.流式細胞術(shù)可用于分析細胞的（）A.大小B.內(nèi)部結(jié)構(gòu)C.表面抗原表達D.以上都是6.以下哪種微生物檢測方法屬于快速檢測方法？（）A.傳統(tǒng)培養(yǎng)法B.免疫熒光法C.顯微鏡鏡檢法D.生化鑒定法7.核酸分子雜交技術(shù)的原理是（）A.抗原抗體反應(yīng)B.堿基互補配對C.蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用D.酶促反應(yīng)8.在基因芯片技術(shù)中，用于檢測的探針是（）A.已知序列的DNA片段B.未知序列的DNA片段C.蛋白質(zhì)分子D.糖類分子9.用于檢測細胞內(nèi)活性氧水平的熒光探針是（）A.熒光素酶B.DCFHDAC.FITCD.PE10.以下哪種技術(shù)可用于檢測基因突變？（）A.基因測序技術(shù)B.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)C.細胞培養(yǎng)技術(shù)D.組織切片技術(shù)11.微生物的生化鑒定主要依據(jù)是（）A.微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)B.微生物的代謝產(chǎn)物C.微生物的生長速度D.微生物的顏色12.免疫膠體金技術(shù)中，膠體金顆粒的作用是（）A.標記抗體B.作為催化劑C.吸附抗原D.增強免疫反應(yīng)13.實時熒光定量PCR中，Ct值與模板DNA的起始濃度（）A.成正比B.成反比C.無關(guān)D.呈對數(shù)關(guān)系14.以下哪種技術(shù)可用于細胞分選？（）A.流式細胞術(shù)B.顯微鏡觀察法C.免疫組化技術(shù)D.原位雜交技術(shù)15.酶標儀主要用于檢測（）A.熒光強度B.吸光度C.放射性強度D.化學(xué)發(fā)光強度二、多項選擇題（每題3分，共15分）1.常見的生物分子檢測技術(shù)包括（）A.核酸檢測技術(shù)B.蛋白質(zhì)檢測技術(shù)C.糖類檢測技術(shù)D.脂類檢測技術(shù)2.以下關(guān)于PCR技術(shù)的描述，正確的是（）A.需要引物B.需要DNA聚合酶C.可用于擴增特定的DNA片段D.反應(yīng)過程包括變性、退火、延伸三個階段3.免疫檢測技術(shù)的特點有（）A.特異性強B.靈敏度高C.操作簡便D.可用于定量檢測4.基因芯片技術(shù)可應(yīng)用于（）A.基因表達譜分析B.基因突變檢測C.基因分型D.藥物篩選5.流式細胞術(shù)可用于（）A.細胞周期分析B.細胞凋亡檢測C.細胞免疫表型分析D.細胞內(nèi)鈣離子濃度測定三、判斷題（每題2分，共20分）1.聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）只能擴增雙鏈DNA模板。（）2.酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）只能用于檢測抗原。（）3.核酸分子雜交技術(shù)可以在DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA之間進行。（）4.流式細胞術(shù)只能檢測單個細胞，不能檢測細胞群體。（）5.免疫膠體金技術(shù)可以用于定性和定量檢測。（）6.實時熒光定量PCR中，熒光信號的積累與PCR產(chǎn)物的積累成正比。（）7.基因測序技術(shù)可以準確測定基因的堿基序列。（）8.微生物的生化鑒定結(jié)果不受培養(yǎng)條件的影響。（）9.免疫組化技術(shù)主要用于檢測細胞或組織中的蛋白質(zhì)。（）10.酶標儀可以檢測多種波長的吸光度。（）四、簡答題（每題10分，共20分）1.簡述聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）的基本原理和主要步驟。2.請說明酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的基本原理和常見類型。五、論述題（15分）請論述生物檢測技術(shù)在疾病診斷中的應(yīng)用及發(fā)展趨勢。答案一、單項選擇題1.D比色法是通過比較或測量有色物質(zhì)溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法，不屬于分子生物學(xué)檢測技術(shù)。PCR、ELISA、流式細胞術(shù)都屬于分子生物學(xué)或細胞生物學(xué)檢測技術(shù)。2.CWesternblotting即蛋白質(zhì)印跡法，用于檢測蛋白質(zhì)表達水平；Northernblotting用于檢測RNA；Southernblotting用于檢測DNA；Easternblotting主要用于檢測蛋白質(zhì)的翻譯后修飾。3.ASYBRGreen染料能特異性結(jié)合雙鏈DNA，在PCR過程中，隨著雙鏈DNA的擴增，染料結(jié)合量增加，熒光信號增強，從而實現(xiàn)對PCR產(chǎn)物的定量檢測。4.A在ELISA實驗中，包被抗原的目的是使抗原固定在固相載體上，以便后續(xù)與抗體結(jié)合進行檢測。5.D流式細胞術(shù)可通過檢測細胞的光散射和熒光信號，分析細胞的大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)以及表面抗原表達等多種參數(shù)。6.B免疫熒光法屬于快速檢測方法，能在較短時間內(nèi)檢測出目標微生物；傳統(tǒng)培養(yǎng)法、顯微鏡鏡檢法和生化鑒定法相對耗時較長。7.B核酸分子雜交技術(shù)的原理是堿基互補配對，通過將已知序列的核酸探針與待測核酸樣品進行雜交，檢測是否存在互補序列。8.A基因芯片技術(shù)中，用于檢測的探針是已知序列的DNA片段，通過與樣品中的核酸進行雜交，檢測基因的表達情況等。9.BDCFHDA是用于檢測細胞內(nèi)活性氧水平的熒光探針，進入細胞后被酯酶水解成DCFH，DCFH被活性氧氧化后發(fā)出熒光。10.A基因測序技術(shù)可直接測定基因的堿基序列，從而檢測基因突變；蛋白質(zhì)印跡技術(shù)主要檢測蛋白質(zhì)；細胞培養(yǎng)技術(shù)用于細胞的培養(yǎng)和研究；組織切片技術(shù)用于觀察組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。11.B微生物的生化鑒定主要依據(jù)微生物的代謝產(chǎn)物，不同微生物具有不同的代謝途徑和代謝產(chǎn)物，通過檢測這些代謝產(chǎn)物可以對微生物進行鑒定。12.A免疫膠體金技術(shù)中，膠體金顆粒的作用是標記抗體，形成金標抗體，用于檢測抗原。13.B實時熒光定量PCR中，Ct值與模板DNA的起始濃度成反比，起始濃度越高，Ct值越小。14.A流式細胞術(shù)可以根據(jù)細胞的特性對細胞進行分選；顯微鏡觀察法主要用于觀察細胞形態(tài)；免疫組化技術(shù)用于檢測組織或細胞中的抗原；原位雜交技術(shù)用于檢測核酸在細胞或組織中的定位。15.B酶標儀主要用于檢測吸光度，通過檢測酶催化底物反應(yīng)后的吸光度變化來進行定量分析。二、多項選擇題1.ABCD常見的生物分子檢測技術(shù)包括核酸檢測技術(shù)、蛋白質(zhì)檢測技術(shù)、糖類檢測技術(shù)和脂類檢測技術(shù)等，用于檢測不同類型的生物分子。2.ABCDPCR技術(shù)需要引物引導(dǎo)DNA合成，需要DNA聚合酶催化反應(yīng)，可用于擴增特定的DNA片段，反應(yīng)過程包括變性（使雙鏈DNA解開）、退火（引物與模板結(jié)合）、延伸（DNA聚合酶合成新的DNA鏈）三個階段。3.ABCD免疫檢測技術(shù)具有特異性強、靈敏度高、操作簡便等特點，并且可用于定量檢測，如ELISA可通過檢測吸光度進行定量分析。4.ABCD基因芯片技術(shù)可用于基因表達譜分析，檢測不同基因的表達水平；基因突變檢測，發(fā)現(xiàn)基因序列的變異；基因分型，確定基因的不同類型；藥物篩選，篩選對特定基因有作用的藥物。5.ABCD流式細胞術(shù)可用于細胞周期分析，檢測細胞在不同周期的分布情況；細胞凋亡檢測，通過檢測凋亡相關(guān)指標判斷細胞是否凋亡；細胞免疫表型分析，檢測細胞表面的免疫相關(guān)抗原；細胞內(nèi)鈣離子濃度測定，通過熒光探針檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度變化。三、判斷題1.×PCR可以擴增雙鏈DNA模板，也可以擴增單鏈DNA模板，單鏈DNA模板會先在反應(yīng)體系中形成雙鏈結(jié)構(gòu)后再進行擴增。2.×ELISA既可以用于檢測抗原，也可以用于檢測抗體。根據(jù)檢測目的不同，有不同的檢測模式。3.√核酸分子雜交技術(shù)可以在DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA之間進行，只要存在互補的堿基序列就可以發(fā)生雜交。4.×流式細胞術(shù)既可以檢測單個細胞，也可以檢測細胞群體，通過對大量細胞的分析，可以獲得細胞群體的特征信息。5.√免疫膠體金技術(shù)可以通過觀察顏色變化進行定性檢測，也可以通過儀器檢測金顆粒的信號強度進行定量檢測。6.√在實時熒光定量PCR中，熒光信號的積累與PCR產(chǎn)物的積累成正比，通過檢測熒光信號的強度可以實時監(jiān)測PCR產(chǎn)物的擴增情況。7.√基因測序技術(shù)可以準確測定基因的堿基序列，是目前檢測基因突變和分析基因結(jié)構(gòu)的重要方法。8.×微生物的生化鑒定結(jié)果受培養(yǎng)條件的影響，如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間等都會影響微生物的代謝產(chǎn)物，從而影響生化鑒定結(jié)果。9.√免疫組化技術(shù)是利用抗體與抗原特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原，主要用于檢測細胞或組織中的蛋白質(zhì)。10.√酶標儀可以檢測多種波長的吸光度，根據(jù)不同的檢測需求選擇合適的波長。四、簡答題1.基本原理：PCR是一種體外擴增特定DNA片段的技術(shù)，其原理是基于DNA半保留復(fù)制的特性。在模板DNA、引物、四種脫氧核苷酸（dNTP）、DNA聚合酶等條件下，通過高溫變性使雙鏈DNA解開成單鏈，低溫退火使引物與單鏈DNA模板結(jié)合，適溫延伸使DNA聚合酶沿著引物合成新的DNA鏈，經(jīng)過多次循環(huán)，使目的DNA片段呈指數(shù)級擴增。主要步驟：變性：將反應(yīng)體系加熱至9495℃，使雙鏈DNA解開成單鏈。退火：溫度降至5065℃，引物與單鏈DNA模板的互補序列結(jié)合。延伸：溫度升至72℃，DNA聚合酶以dNTP為原料，從引物的3'端開始合成新的DNA鏈。重復(fù)上述變性、退火、延伸步驟2535個循環(huán)，即可獲得大量的目的DNA片段。2.基本原理：ELISA是一種基于抗原抗體特異性結(jié)合的免疫檢測技術(shù)。將抗原或抗體吸附在固相載體表面，加入待檢樣品，若樣品中存在相應(yīng)的抗體或抗原，則會與固相載體上的抗原或抗體結(jié)合，再加入酶標記的抗體或抗原，通過酶催化底物顯色，根據(jù)顏色深淺來判斷樣品中抗原或抗體的含量。常見類型：間接法：用于檢測抗體。先將抗原包被在固相載體上，加入待檢血清樣品，若樣品中有相應(yīng)抗體，則與固相抗原結(jié)合，再加入酶標記的抗免疫球蛋白抗體（二抗），最后加入底物顯色。雙抗體夾心法：用于檢測抗原。先將特異性抗體包被在固相載體上，加入待檢樣品，若樣品中有相應(yīng)抗原，則與固相抗體結(jié)合，再加入酶標記的特異性抗體，最后加入底物顯色。競爭法：可用于檢測抗原或抗體。以檢測抗原為例，將已知抗原包被在固相載體上，加入待檢樣品和酶標記的抗原，兩者競爭結(jié)合固相抗體，結(jié)合在固相上的酶標抗原量與待檢樣品中抗原量成反比，加入底物顯色后，顏色深淺與待檢樣品中抗原量成反比。五、論述題應(yīng)用：傳染病診斷：生物檢測技術(shù)在傳染病診斷中發(fā)揮著重要作用。例如，PCR技術(shù)可快速、靈敏地檢測病原體的核酸，如新冠病毒核酸檢測，能在感染早期準確檢測出病毒，為疫情防控提供重要依據(jù)；免疫檢測技術(shù)如ELISA可檢測病原體的抗體或抗原，用于乙肝、艾滋病等傳染病的篩查和診斷。腫瘤診斷：基因檢測技術(shù)可檢測腫瘤相關(guān)基因的突變、表達情況，如檢測BRCA1和BRCA2基因的突變，有助于乳腺癌和卵巢癌的風(fēng)險評估；蛋白質(zhì)檢測技術(shù)如腫瘤標志物檢測，可通過檢測血液中腫瘤標志物（如AFP、CEA等）的水平，輔助腫瘤的早期診斷、病情監(jiān)測和預(yù)后評估。遺傳病診斷：基因測序技術(shù)可對患者的基因進行全面檢測，診斷各種遺傳病，如地中海貧血、苯丙酮尿癥等；產(chǎn)前診斷中，通過對胎兒的細胞或DNA進行檢測，可早期發(fā)現(xiàn)胎兒是否患有遺傳病。發(fā)展趨勢：高靈敏度和特異性：不斷提高檢測技術(shù)的靈敏度和特異性，能夠檢測到更低濃度的病原體或生物標志物，減少假陽性和假陰性結(jié)果，提