生物檢驗(yàn)技術(shù)試題及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共30分）1.在微生物檢驗(yàn)中，常用的革蘭氏染色法中，革蘭氏陽(yáng)性菌被染成（）A.紅色B.紫色C.藍(lán)色D.黃色答案：B。革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，在革蘭氏染色中能保留結(jié)晶紫碘復(fù)合物，從而被染成紫色，而革蘭氏陰性菌則被番紅復(fù)染成紅色。2.以下哪種培養(yǎng)基可用于分離培養(yǎng)真菌（）A.血瓊脂培養(yǎng)基B.麥康凱培養(yǎng)基C.沙保弱培養(yǎng)基D.伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基答案：C。沙保弱培養(yǎng)基具有合適的酸堿度和營(yíng)養(yǎng)成分，適合真菌的生長(zhǎng)，常用于真菌的分離培養(yǎng)。血瓊脂培養(yǎng)基用于培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌；麥康凱培養(yǎng)基主要用于腸道桿菌的分離；伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基用于鑒別大腸桿菌等腸道菌。3.用于檢測(cè)細(xì)菌是否能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的培養(yǎng)基是（）A.糖發(fā)酵管B.三糖鐵培養(yǎng)基C.動(dòng)力吲哚尿素培養(yǎng)基D.枸櫞酸鹽培養(yǎng)基答案：A。糖發(fā)酵管含有特定的糖類(lèi)（如乳糖），可觀(guān)察細(xì)菌對(duì)糖類(lèi)的發(fā)酵情況，包括產(chǎn)酸產(chǎn)氣。三糖鐵培養(yǎng)基用于檢測(cè)細(xì)菌對(duì)葡萄糖、乳糖、蔗糖的發(fā)酵及產(chǎn)生硫化氫的能力；動(dòng)力吲哚尿素培養(yǎng)基用于檢測(cè)細(xì)菌的動(dòng)力、吲哚產(chǎn)生和尿素分解情況；枸櫞酸鹽培養(yǎng)基用于檢測(cè)細(xì)菌能否利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源。4.血清學(xué)試驗(yàn)中，直接凝集試驗(yàn)可用于檢測(cè)（）A.抗原B.抗體C.抗原或抗體D.補(bǔ)體答案：C。直接凝集試驗(yàn)是顆粒性抗原（如細(xì)菌、紅細(xì)胞等）與相應(yīng)抗體直接結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象，可用于檢測(cè)抗原（如診斷傷寒的肥達(dá)試驗(yàn)）或抗體（如血型鑒定）。5.以下哪種方法可用于病毒的分離培養(yǎng)（）A.人工培養(yǎng)基培養(yǎng)B.動(dòng)物接種C.基因測(cè)序D.免疫熒光法答案：B。病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，動(dòng)物接種是病毒分離培養(yǎng)的常用方法之一，還可通過(guò)雞胚培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)等?；驕y(cè)序主要用于病毒的基因分析；免疫熒光法用于病毒的快速診斷。6.細(xì)菌的生化鑒定中，吲哚試驗(yàn)是檢測(cè)細(xì)菌能否分解（）A.色氨酸B.胱氨酸C.葡萄糖D.乳糖答案：A。吲哚試驗(yàn)是檢測(cè)細(xì)菌是否具有色氨酸酶，能分解色氨酸產(chǎn)生吲哚，加入吲哚試劑后可出現(xiàn)紅色反應(yīng)。7.在生物安全實(shí)驗(yàn)室中，屬于二級(jí)生物安全防護(hù)水平的實(shí)驗(yàn)室，其防護(hù)要求不包括（）A.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置可自動(dòng)關(guān)閉的門(mén)B.應(yīng)配備生物安全柜C.應(yīng)設(shè)置洗眼裝置D.必須設(shè)置獨(dú)立的空氣凈化系統(tǒng)答案：D。二級(jí)生物安全防護(hù)水平實(shí)驗(yàn)室要求實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置可自動(dòng)關(guān)閉的門(mén)，配備生物安全柜，設(shè)置洗眼裝置等，但不要求必須設(shè)置獨(dú)立的空氣凈化系統(tǒng)，三級(jí)和四級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室對(duì)空氣凈化系統(tǒng)有更嚴(yán)格要求。8.用顯微鏡觀(guān)察細(xì)菌時(shí)，通常使用的物鏡放大倍數(shù)是（）A.10×B.40×C.100×D.400×答案：C。觀(guān)察細(xì)菌通常使用油鏡，油鏡的放大倍數(shù)一般為100×，配合目鏡（通常為10×），可達(dá)到1000倍左右的放大倍數(shù)，能清晰觀(guān)察細(xì)菌的形態(tài)。9.以下哪種物質(zhì)可用于消毒皮膚（）A.過(guò)氧乙酸B.新潔爾滅C.碘伏D.戊二醛答案：C。碘伏具有殺菌譜廣、毒性低、刺激性小等特點(diǎn)，常用于皮膚消毒。過(guò)氧乙酸具有強(qiáng)氧化性，對(duì)皮膚有較強(qiáng)刺激性，一般不用于皮膚消毒；新潔爾滅常用于醫(yī)療器械等的消毒；戊二醛常用于醫(yī)療器械的滅菌。10.食品微生物檢驗(yàn)中，菌落總數(shù)的測(cè)定通常采用（）A.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法B.稀釋平板計(jì)數(shù)法C.比濁法D.濾膜法答案：B。稀釋平板計(jì)數(shù)法是通過(guò)將樣品進(jìn)行系列稀釋后，取一定量的稀釋液接種到平板上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)菌落數(shù)，從而推算出樣品中的活菌數(shù)，是食品微生物檢驗(yàn)中測(cè)定菌落總數(shù)的常用方法。顯微鏡直接計(jì)數(shù)法不能區(qū)分活菌和死菌；比濁法是通過(guò)測(cè)量菌液的濁度來(lái)估計(jì)細(xì)菌數(shù)量，但準(zhǔn)確性相對(duì)較低；濾膜法常用于檢測(cè)水中的微生物。11.檢測(cè)支原體常用的方法是（）A.革蘭氏染色鏡檢B.分離培養(yǎng)后觀(guān)察典型菌落C.血清學(xué)試驗(yàn)D.以上都是答案：D。支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，革蘭氏染色不易著色，但也可用于初步觀(guān)察其形態(tài)；分離培養(yǎng)后可觀(guān)察到支原體的典型“油煎蛋”樣菌落；血清學(xué)試驗(yàn)可檢測(cè)支原體抗體，常用于支原體的診斷，所以以上方法都可用于支原體檢測(cè)。12.用于檢測(cè)內(nèi)毒素的試劑是（）A.鱟試劑B.青霉素C.鏈霉素D.磺胺類(lèi)藥物答案：A。鱟試劑是從鱟的血液中提取的一種試劑，可與細(xì)菌內(nèi)毒素發(fā)生凝膠反應(yīng)，用于檢測(cè)內(nèi)毒素。青霉素、鏈霉素是抗生素，用于抑制或殺滅細(xì)菌；磺胺類(lèi)藥物也是抗菌藥物。13.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的維持液是為了（）A.促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)B.維持細(xì)胞存活但限制其生長(zhǎng)C.提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)D.防止細(xì)胞污染答案：B。維持液的營(yíng)養(yǎng)成分相對(duì)較低，主要用于維持細(xì)胞的存活，但限制細(xì)胞的生長(zhǎng)，常用于病毒培養(yǎng)等過(guò)程中。生長(zhǎng)液則用于促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。14.以下關(guān)于PCR技術(shù)的描述，錯(cuò)誤的是（）A.可用于擴(kuò)增特定的DNA片段B.需要DNA聚合酶C.不需要引物D.經(jīng)過(guò)變性、退火、延伸三個(gè)步驟循環(huán)進(jìn)行答案：C。PCR技術(shù)是體外擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù)，需要DNA聚合酶、引物、模板DNA、dNTP等。反應(yīng)過(guò)程包括變性（使DNA雙鏈解開(kāi)）、退火（引物與模板DNA結(jié)合）、延伸（DNA聚合酶合成新的DNA鏈）三個(gè)步驟循環(huán)進(jìn)行。15.生物樣品的采集應(yīng)遵循的原則不包括（）A.代表性B.無(wú)菌操作C.隨意性D.適量性答案：C。生物樣品采集應(yīng)遵循代表性原則，確保采集的樣品能反映總體情況；無(wú)菌操作原則，防止樣品被污染；適量性原則，采集合適數(shù)量的樣品。不能隨意采集。二、多項(xiàng)選擇題（每題3分，共15分）1.以下屬于細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的有（）A.莢膜B.芽孢C.菌毛D.鞭毛答案：ABCD。莢膜具有保護(hù)細(xì)菌、抗吞噬等作用；芽孢是細(xì)菌的休眠體，對(duì)不良環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力；菌毛與細(xì)菌的黏附等有關(guān)；鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，這些都屬于細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)。2.血清學(xué)試驗(yàn)的類(lèi)型包括（）A.凝集試驗(yàn)B.沉淀試驗(yàn)C.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)D.中和試驗(yàn)答案：ABCD。血清學(xué)試驗(yàn)是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理進(jìn)行的試驗(yàn)，凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)都屬于血清學(xué)試驗(yàn)的常見(jiàn)類(lèi)型。3.用于病毒檢測(cè)的分子生物學(xué)方法有（）A.PCRB.核酸雜交C.基因測(cè)序D.ELISA答案：ABC。PCR可擴(kuò)增病毒的核酸進(jìn)行檢測(cè)；核酸雜交是利用核酸分子的互補(bǔ)性進(jìn)行檢測(cè)；基因測(cè)序可確定病毒的基因序列。ELISA是免疫酶技術(shù)，屬于免疫學(xué)檢測(cè)方法，不是分子生物學(xué)方法。4.微生物檢驗(yàn)中常用的染色方法有（）A.革蘭氏染色B.抗酸染色C.芽孢染色D.鞭毛染色答案：ABCD。革蘭氏染色用于區(qū)分革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌；抗酸染色用于檢測(cè)抗酸菌（如結(jié)核桿菌）；芽孢染色可觀(guān)察細(xì)菌的芽孢；鞭毛染色可使鞭毛著色以便觀(guān)察，這些都是微生物檢驗(yàn)中常用的染色方法。5.生物安全防護(hù)的措施包括（）A.個(gè)人防護(hù)裝備的使用B.實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的建設(shè)C.安全操作規(guī)程的制定D.廢棄物的處理答案：ABCD。生物安全防護(hù)需要綜合采取多種措施，個(gè)人防護(hù)裝備（如口罩、手套、防護(hù)服等）的使用可保護(hù)操作人員；實(shí)驗(yàn)室設(shè)施（如生物安全柜、通風(fēng)系統(tǒng)等）的建設(shè)提供安全的實(shí)驗(yàn)環(huán)境；制定安全操作規(guī)程可規(guī)范操作流程；廢棄物的正確處理可防止生物污染的擴(kuò)散。三、判斷題（每題2分，共20分）1.所有的細(xì)菌都能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖。（）答案：錯(cuò)誤。有些細(xì)菌如衣原體、立克次體等需要在活細(xì)胞內(nèi)寄生，不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。2.免疫熒光法可用于快速檢測(cè)病毒抗原。（）答案：正確。免疫熒光法利用熒光標(biāo)記的抗體與病毒抗原結(jié)合，通過(guò)熒光顯微鏡觀(guān)察，可快速檢測(cè)病毒抗原。3.細(xì)菌的芽孢是細(xì)菌的繁殖體。（）答案：錯(cuò)誤。芽孢是細(xì)菌的休眠體，不是繁殖體，當(dāng)環(huán)境適宜時(shí)，芽孢可發(fā)芽形成新的細(xì)菌個(gè)體。4.食品微生物檢驗(yàn)中，大腸菌群數(shù)可反映食品被糞便污染的程度。（）答案：正確。大腸菌群主要來(lái)源于人和動(dòng)物的糞便，其數(shù)量可作為食品被糞便污染程度的指標(biāo)。5.病毒的核酸只有DNA或RNA其中一種。（）答案：正確。病毒根據(jù)其核酸類(lèi)型可分為DNA病毒和RNA病毒，一種病毒只含有一種核酸。6.革蘭氏染色中，脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致革蘭氏陽(yáng)性菌被染成紅色。（）答案：正確。脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁中的結(jié)晶紫碘復(fù)合物被過(guò)度洗脫，從而被番紅復(fù)染成紅色，造成假陰性結(jié)果。7.生物安全實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)水平越高，對(duì)人員和環(huán)境的保護(hù)越好，但建設(shè)和運(yùn)行成本也越高。（）答案：正確。高防護(hù)水平的生物安全實(shí)驗(yàn)室有更嚴(yán)格的設(shè)施和操作要求，能更好地保護(hù)人員和環(huán)境，但建設(shè)和運(yùn)行成本也相應(yīng)增加。8.血清學(xué)試驗(yàn)中，抗體的效價(jià)越高，說(shuō)明抗體的質(zhì)量越好。（）答案：錯(cuò)誤。抗體效價(jià)是指能與抗原發(fā)生反應(yīng)的抗體的最高稀釋度，效價(jià)高只能說(shuō)明抗體的含量相對(duì)較高，但不能說(shuō)明抗體的質(zhì)量好，抗體的質(zhì)量還與特異性、親和力等有關(guān)。9.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，只要保證培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分充足，細(xì)胞就可以一直生長(zhǎng)下去。（）答案：錯(cuò)誤。細(xì)胞培養(yǎng)除了需要合適的營(yíng)養(yǎng)成分外，還受培養(yǎng)條件（如溫度、pH、氣體環(huán)境等）、細(xì)胞本身的生長(zhǎng)特性（如細(xì)胞的壽命等）等多種因素的影響，細(xì)胞不可能一直無(wú)限制生長(zhǎng)。10.PCR技術(shù)中，引物的設(shè)計(jì)對(duì)擴(kuò)增的特異性沒(méi)有影響。（）答案：錯(cuò)誤。引物的設(shè)計(jì)對(duì)PCR擴(kuò)增的特異性至關(guān)重要，合適的引物能特異性地結(jié)合到目標(biāo)DNA序列上，避免非特異性擴(kuò)增。四、簡(jiǎn)答題（每題10分，共20分）1.簡(jiǎn)述革蘭氏染色的步驟及結(jié)果判斷。答：革蘭氏染色步驟如下：（1）涂片固定：將待檢細(xì)菌制成均勻的涂片，在火焰上固定。（2）初染：滴加結(jié)晶紫染液，染色1分鐘后水洗。（3）媒染：滴加碘液，作用1分鐘后水洗。（4）脫色：用95%乙醇脫色，約30秒，至流出的乙醇無(wú)紫色為止，水洗。（5）復(fù)染：滴加番紅染液，染色12分鐘后水洗，干燥后鏡檢。結(jié)果判斷：革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。這是因?yàn)楦锾m氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁較厚，肽聚糖含量高，經(jīng)乙醇脫色時(shí)，肽聚糖網(wǎng)孔因脫水而收縮，阻止結(jié)晶紫碘復(fù)合物的溶出，故保留紫色；而革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁薄，外膜易被乙醇溶解，結(jié)晶紫碘復(fù)合物被溶出，再經(jīng)番紅復(fù)染而呈紅色。2.簡(jiǎn)述病毒分離培養(yǎng)的常用方法及其優(yōu)缺點(diǎn)。答：病毒分離培養(yǎng)的常用方法有以下幾種：（1）動(dòng)物接種：優(yōu)點(diǎn)：能在整體動(dòng)物水平觀(guān)察病毒的致病情況，結(jié)果直觀(guān)，可用于研究病毒的致病性、毒力等。缺點(diǎn)：動(dòng)物個(gè)體差異較大，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性可能受影響；成本較高，需要合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件；存在動(dòng)物倫理問(wèn)題。（2）雞胚培養(yǎng)：優(yōu)點(diǎn)：雞胚來(lái)源豐富，操作相對(duì)簡(jiǎn)單，培養(yǎng)條件容易控制；雞胚對(duì)多種病毒敏感，可用于多種病毒的分離培養(yǎng)和疫苗制備。缺點(diǎn)：某些病毒可能不適應(yīng)雞胚培養(yǎng)；雞胚本身可能攜帶潛在的病原體，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（3）細(xì)胞培養(yǎng)：優(yōu)點(diǎn)：可在體外模擬病毒的生長(zhǎng)環(huán)境，便于觀(guān)察病毒的生長(zhǎng)特性和細(xì)胞病變效應(yīng)；可大量培養(yǎng)病毒，用于病毒的研究和疫苗生產(chǎn)；實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性好。缺點(diǎn)：細(xì)胞培養(yǎng)需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作和合適的培養(yǎng)條件；細(xì)胞系的維持需要一定的技術(shù)和成本；有些病毒可能不能在現(xiàn)有細(xì)胞系中生長(zhǎng)。五、論述題（15分）論述生物檢驗(yàn)技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用及重要性。答：生物檢驗(yàn)技術(shù)在食品安全檢測(cè)中具有廣泛的應(yīng)用和重要的意義。應(yīng)用1.微生物檢測(cè)細(xì)菌檢測(cè)：通過(guò)傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法（如平板計(jì)數(shù)法）檢測(cè)食品中的菌落總數(shù)、大腸菌群、金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌等致病菌。也可采用快速檢測(cè)方法，如免疫磁珠分離技術(shù)結(jié)合PCR可快速準(zhǔn)確地檢測(cè)食品中的病原菌。真菌及真菌毒素檢測(cè)：利用選擇性培養(yǎng)基分離培養(yǎng)食品中的霉菌，如黃曲霉、鐮刀菌等。對(duì)于真菌毒素（如黃曲霉毒素、赭曲霉毒素等），可采用免疫分析法（如ELISA）、色譜法（如高效液相色譜）等進(jìn)行檢測(cè)。病毒檢測(cè)：對(duì)于食品中可能污染的病毒（如諾如病毒、甲肝病毒等），可采用核酸提取技術(shù)結(jié)合RTPCR等方法進(jìn)行檢測(cè)。2.生物毒素檢測(cè)：除了真菌毒素，還可檢測(cè)貝類(lèi)毒素、藻類(lèi)毒素等。如采用小鼠生物測(cè)定法、細(xì)胞毒性測(cè)定法、免疫分析法等檢測(cè)貝類(lèi)毒素。3.轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)：利用PCR技術(shù)檢測(cè)食品中的轉(zhuǎn)基因成分，可針對(duì)特定的外源基因進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè)，以確定食品是否為轉(zhuǎn)基因食品。4.過(guò)敏原檢測(cè)：采用免疫印跡法、ELISA等方法檢測(cè)食品中的過(guò)敏原（如牛奶、雞蛋、花生等過(guò)敏原），保障過(guò)敏人群的食品安全。重要性1.保障消費(fèi)者健康：通過(guò)檢測(cè)食品中的致病菌、生物毒素和過(guò)敏原等有害物質(zhì)，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)食品安全隱患，防止消費(fèi)者因食用受污染的食品而患病，保障公眾的身體健康。2.維護(hù)市場(chǎng)秩序：準(zhǔn)確的生物檢驗(yàn)結(jié)果可作為判斷食品質(zhì)量的依