離心機操作規(guī)程與注意事項一、引言離心機是利用離心力實現(xiàn)樣品分離、濃縮或純化的關(guān)鍵設(shè)備，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)（如細胞分離、蛋白質(zhì)純化）、化工（如晶體分級）、食品（如乳脂分離）等領(lǐng)域。其核心原理是通過高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力，使樣品中密度不同的組分沿徑向分層或沉淀。正確操作離心機不僅能保證實驗結(jié)果的準確性，還能避免設(shè)備損壞、樣品污染甚至人身安全事故。本文結(jié)合GB/T____《離心機安全要求》及行業(yè)實踐，梳理離心機的標準操作規(guī)程與關(guān)鍵注意事項，為實驗室及工業(yè)用戶提供參考。二、離心機的基本分類與適用場景在制定操作流程前，需明確離心機的類型，避免因設(shè)備不匹配導(dǎo)致操作失誤。常見分類如下：**分類依據(jù)****類型****轉(zhuǎn)速范圍****適用場景**轉(zhuǎn)速低速離心機≤6000rpm細胞沉淀、血漿分離、固液粗分離高速離心機____rpm亞細胞結(jié)構(gòu)（如線粒體）、蛋白質(zhì)分離超速離心機≥____rpm病毒、核酸（如DNA）、納米顆粒分離結(jié)構(gòu)臺式離心機≤____rpm小型實驗室、少量樣品處理落地式離心機≥____rpm工業(yè)生產(chǎn)、大量樣品連續(xù)處理功能冷凍離心機可制冷（0-4℃）生物樣品（如酶、細胞）避免變性常溫離心機無制冷功能化工、食品等非熱敏樣品三、離心機標準操作規(guī)程（一）操作前準備1.設(shè)備狀態(tài)檢查檢查電源插頭、電纜是否破損，接地是否良好（避免漏電風險）；打開離心機蓋，檢查腔體內(nèi)部是否有異物（如殘留樣品、碎屑），用干燥紗布擦拭干凈；檢查轉(zhuǎn)頭（Rotors）是否有裂紋、腐蝕或變形（用強光照射轉(zhuǎn)頭表面，觀察是否有細紋），確認轉(zhuǎn)頭型號與離心機匹配（如超速離心機需使用專用鈦合金轉(zhuǎn)頭）；確認離心機蓋門密封膠圈是否完好（避免運行時樣品泄漏）。2.樣品準備平衡樣品：離心管內(nèi)樣品重量差需嚴格控制在廠家規(guī)定范圍內(nèi)（通常0.1-0.5g，超速離心機需≤0.1g）。平衡方法：將樣品管對稱放置在電子天平上稱量，調(diào)整樣品量或添加等量平衡液（如PBS、生理鹽水）；密封樣品：使用帶螺旋蓋或橡膠塞的離心管，確保密封（避免揮發(fā)性樣品腐蝕腔體或生物樣品污染環(huán)境）；選擇合適離心管：根據(jù)樣品性質(zhì)選擇材質(zhì)（如腐蝕性樣品用聚四氟乙烯管，生物樣品用聚丙烯管），避免離心管破裂（如玻璃管需確認無裂紋）。3.環(huán)境準備離心機周圍留出至少30cm空間（便于散熱和維護）；冷凍離心機需提前30分鐘預(yù)冷（設(shè)置目標溫度，如4℃），待腔體溫度穩(wěn)定后再放入樣品。（二）樣品與轉(zhuǎn)頭安裝1.安裝轉(zhuǎn)頭握住轉(zhuǎn)頭手柄，將轉(zhuǎn)頭緩慢放入離心機轉(zhuǎn)軸（注意對準鍵槽），順時針旋轉(zhuǎn)至鎖定（聽到“咔嗒”聲）；用手輕輕轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)頭，確認無卡頓或松動（若有異常，立即停止安裝并檢查轉(zhuǎn)軸是否有異物）。2.放置樣品管將平衡好的樣品管對稱放入轉(zhuǎn)頭孔（如8孔轉(zhuǎn)頭需放置2、4、6、8支樣品管，確保重心平衡）；若使用角轉(zhuǎn)頭（AngleRotors），樣品管需垂直放入孔內(nèi)；若使用水平轉(zhuǎn)頭（Swing-outRotors），樣品管需固定在吊籃內(nèi)，避免運行時晃動。（三）參數(shù)設(shè)置與啟動1.設(shè)置離心參數(shù)轉(zhuǎn)速/離心力：優(yōu)先使用相對離心力（RCF，單位：g）設(shè)置（公式：\(RCF=1.118\times10^{-5}\timesr\timesn^2\)，其中\(zhòng)(r\)為轉(zhuǎn)頭半徑（cm），\(n\)為轉(zhuǎn)速（rpm））。如需用轉(zhuǎn)速，需確認轉(zhuǎn)頭的最大允許轉(zhuǎn)速（如某轉(zhuǎn)頭標注“Max____rpm”，則不能超過該值）；時間：根據(jù)樣品性質(zhì)設(shè)置（如細胞沉淀通常5-10分鐘，蛋白質(zhì)分離可能需要30分鐘以上）；溫度：冷凍離心機設(shè)置目標溫度（如生物樣品4℃），常溫離心機無需設(shè)置；加速/減速檔：敏感樣品（如細胞）選擇低加速/減速檔（避免樣品分層混亂），常規(guī)樣品可選擇中速。2.啟動離心機關(guān)閉離心機蓋門（確保蓋門完全鎖死，部分設(shè)備有安全聯(lián)鎖裝置，蓋門未關(guān)無法啟動）；按下“啟動”鍵，觀察離心機運行狀態(tài)（初期轉(zhuǎn)速緩慢上升，無異常噪音或振動）；記錄啟動時間（便于后續(xù)追溯）。（四）運行監(jiān)控與異常處理1.運行中的監(jiān)控離心機運行時，操作人員需全程在場（避免無人值守導(dǎo)致事故擴大）；觀察設(shè)備是否有異常：如劇烈振動、異常噪音（如金屬摩擦聲）、溫度異常（冷凍離心機溫度突然上升）、蓋門松動等；若使用分析型離心機，需監(jiān)控離心曲線（如沉降系數(shù)），確保符合預(yù)期。2.異常情況處理若出現(xiàn)劇烈振動或異常噪音，立即按下“緊急停止”鍵（或切斷電源），待離心機完全停止后，檢查樣品是否平衡、轉(zhuǎn)頭是否安裝正確、腔體是否有異物；若蓋門松動或樣品泄漏，立即停機，佩戴手套清理腔體（用含有效氯的消毒液擦拭生物樣品污染區(qū)域）；若溫度異常（如冷凍離心機無法制冷），停止使用并聯(lián)系維修人員（避免樣品變性）。（五）停機與后續(xù)處理1.停機操作離心結(jié)束后，離心機自動減速至停止（禁止手動強制停機）；待轉(zhuǎn)頭完全停止（通常需1-5分鐘），打開蓋門（避免樣品管內(nèi)壓力驟變導(dǎo)致樣品噴出）；取出樣品管（輕拿輕放，避免樣品震蕩重新混合），檢查樣品是否分離成功（如細胞沉淀是否緊密、上清液是否澄清）。2.設(shè)備清潔與維護用干燥紗布擦拭轉(zhuǎn)頭表面（若有樣品泄漏，用中性清潔劑清洗，再用去離子水沖洗）；清理腔體內(nèi)部（用棉簽擦拭轉(zhuǎn)頭孔內(nèi)的殘留樣品，避免腐蝕）；關(guān)閉電源，蓋上離心機防塵罩（避免灰塵進入）。3.記錄與歸檔填寫《離心機運行記錄》，內(nèi)容包括：樣品名稱、數(shù)量、離心參數(shù)（轉(zhuǎn)速/RCF、時間、溫度）、運行狀態(tài)、操作人員、備注（如異常情況）；記錄需保存1-3年（便于實驗追溯和設(shè)備維護）。四、關(guān)鍵注意事項（一）安全操作規(guī)范1.禁止超速運行：嚴格按照轉(zhuǎn)頭標注的最大轉(zhuǎn)速操作（如超速離心機轉(zhuǎn)頭最大轉(zhuǎn)速為10萬rpm，若設(shè)置11萬rpm，可能導(dǎo)致轉(zhuǎn)頭破裂，樣品飛濺）；2.禁止不平衡運行：樣品重量差超過規(guī)定范圍會導(dǎo)致轉(zhuǎn)軸彎曲、轉(zhuǎn)頭損壞，甚至離心機傾覆；3.禁止運行時打開蓋門：部分離心機有安全聯(lián)鎖裝置，但仍需避免強行開門（防止樣品管飛出傷人）；4.禁止使用破損離心管：玻璃管或塑料管有裂紋時，離心力會導(dǎo)致管體破裂，樣品泄漏污染腔體；5.禁止超載運行：轉(zhuǎn)頭的最大負載（如每孔最大負載50ml）需符合廠家規(guī)定，避免轉(zhuǎn)頭變形。（二）樣品處理要求1.腐蝕性樣品：如強酸、強堿、有機溶劑（如丙酮），需使用耐腐蝕性轉(zhuǎn)頭（如鈦合金、聚四氟乙烯），并在離心后及時清理腔體（避免腐蝕）；2.揮發(fā)性樣品：如乙醇、乙醚，需使用密封離心管（避免蒸汽進入腔體，腐蝕電子元件）；3.生物樣品：如血液、細胞培養(yǎng)液，需進行生物安全處理（如使用帶蓋轉(zhuǎn)頭、離心后消毒腔體），避免交叉污染；4.高溫樣品：如剛加熱的化工樣品，需冷卻至室溫后再離心（避免離心管膨脹破裂）。（三）設(shè)備維護與校準1.定期清潔：每周用中性清潔劑擦拭腔體和轉(zhuǎn)頭（避免殘留樣品腐蝕），每月用去離子水沖洗轉(zhuǎn)頭孔（去除無機鹽沉淀）；2.定期檢查轉(zhuǎn)頭：每3個月檢查轉(zhuǎn)頭是否有裂紋、腐蝕（用強光照射），每1年送廠家檢測（如超速離心機轉(zhuǎn)頭需進行疲勞測試）；3.定期校準：每6個月校準轉(zhuǎn)速和溫度（用專業(yè)校準設(shè)備，如轉(zhuǎn)速計、溫度計），確保參數(shù)準確（如轉(zhuǎn)速誤差≤±2%，溫度誤差≤±1℃）；4.潤滑與保養(yǎng)：按廠家要求定期潤滑轉(zhuǎn)軸（如使用專用潤滑脂），避免轉(zhuǎn)軸磨損（每1年更換一次潤滑脂）。（四）緊急情況應(yīng)對1.轉(zhuǎn)頭破裂：立即切斷電源，撤離現(xiàn)場（避免樣品飛濺傷人），聯(lián)系專業(yè)維修人員處理（禁止自行打開腔體）；2.樣品泄漏：佩戴手套和護目鏡，用含有效氯的消毒液擦拭腔體（生物樣品）或中性清潔劑（化工樣品），清理后通風30分鐘；3.電源故障：若離心機在運行中突然斷電，待電源恢復(fù)后，檢查樣品是否平衡、轉(zhuǎn)頭是否損壞，再重新啟動（禁止強制啟動）。五、常見問題與解決方法**問題****可能原因****解決方法**離心后樣品沉淀不完全轉(zhuǎn)速不足、時間過短、樣品濃度過高提高轉(zhuǎn)速（或RCF）、延長時間、稀釋樣品轉(zhuǎn)頭無法安裝轉(zhuǎn)軸有異物、轉(zhuǎn)頭型號不符清潔轉(zhuǎn)軸、核對轉(zhuǎn)頭型號運行時劇烈振動樣品不平衡、轉(zhuǎn)頭安裝松動重新平衡樣品、重新安裝轉(zhuǎn)頭冷凍離心機無法制冷制冷劑泄漏、散熱口堵塞聯(lián)系維修人員、清理散熱口離心管破裂離心管有裂紋、轉(zhuǎn)速超過管體承受范圍更換新離心管、降低轉(zhuǎn)速六、結(jié)語離心機的正確操作與維護是保證實驗結(jié)果準確性和設(shè)備使用壽命的關(guān)鍵。用戶需根據(jù)設(shè)備類型（