ICS65.020.99B60.79備案號：DB42Thetechnicalspecificationofterrestrialwildlifeepidemicfocusanddisease（本稿完成日期：4月18日）湖北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB42/T978—2014本標準按GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本標準由湖北省野生動物疫源疫病監(jiān)測中心提出。本標準由湖北省林業(yè)廳歸口。本標準由湖北省野生動物疫源疫病監(jiān)測中心負責(zé)起草。本標準主要起草人：陳婧、雷永松、熊艷平、楊國祥、何武、張俊、陳光。DB42/T978—2014自2003年SARS、2004年禽流感疫情在我國及全球爆發(fā)后，野生動物疫情疫病對自然生態(tài)環(huán)境安全、公共衛(wèi)生安全、人民生命財產(chǎn)安全的巨大影響，引起人民的高度關(guān)注與政府的高度重視。2005年，我國設(shè)立了國家林業(yè)局陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測總站，負責(zé)開展和管理全國野生動物疫源疫病監(jiān)測工作；2006年3月，國家林業(yè)局印發(fā)了《陸生野生動物疫源疫病監(jiān)并設(shè)立了300個國家級陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測站，開展陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測防控工作。2010年9月，河南省質(zhì)監(jiān)局發(fā)布了由河南省野生動物疫源疫病監(jiān)測中心主持制定的“陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測技術(shù)規(guī)范”（DB41/T639—20102012年4月，湖南省質(zhì)監(jiān)局發(fā)布了由湖南省野生動物疫源疫病監(jiān)測中心主持制定的“陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測技術(shù)規(guī)程”（DB43/T675—2012）。到目前為止，湖北省尚未發(fā)布相關(guān)技術(shù)規(guī)程或標準。湖北省自2005年開始開展陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測防控工作以來，從最初的布設(shè)野生動物疫源疫病監(jiān)測站點，建立疫源疫病監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)，制定監(jiān)測管理方案，到初步實現(xiàn)由被動監(jiān)測到主動監(jiān)測的轉(zhuǎn)變，繼而開展疫源疫病監(jiān)測標準化建設(shè)理念的提出，全省的監(jiān)測工作已逐漸成熟。2013年1月，國家林業(yè)局以31號令的形式發(fā)布了《陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測防控管理辦法》，從此陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測防控工作更加有法可為、有章可依、有規(guī)可循。綜上所述，為使湖北省陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測工作更加科學(xué)化、規(guī)范化、制度化，確保野生動物疫病監(jiān)測日常操作和發(fā)生異常情況時，能及時、迅速、高效、有序地進行應(yīng)急處理，維護生態(tài)平衡和公共衛(wèi)生安全，湖北省野生動物疫源疫病監(jiān)測中心特提出制定本標準。DB42/T978—20141陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測及技術(shù)規(guī)范本標準規(guī)定了陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測的主要監(jiān)測任務(wù)、監(jiān)測區(qū)域、監(jiān)測對象、監(jiān)測規(guī)范、監(jiān)測信息報告及疫情發(fā)布。本標準適用于湖北省陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測工作。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。DB41/T639—2010陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測技術(shù)規(guī)范DB43/T675—2012陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測技術(shù)規(guī)程3術(shù)語及定義3.1陸生野生動物terrestrialwildlife指凡生存在天然自由狀態(tài)下，或雖然已經(jīng)短期馴養(yǎng)但野外還存在天然種群的陸生野生脊椎動物（終生水生的除外包括哺乳類、鳥類、爬行類、兩棲類。3.2疫源epidemicsource特指攜帶并有可能向人類、飼養(yǎng)動物和環(huán)境傳播危險性病原體的陸生野生動物。3.3疫病epidemicdiseases指在陸生野生動物之間傳播、流行，對陸生野生動物種群構(gòu)成威脅或可能傳染給人類和飼養(yǎng)動物的傳染性疾病。3.4陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測monitoringofepidemicdiseasesandepidemicsourcefor指在監(jiān)測陸生野生動物物種種群過程中，發(fā)現(xiàn)行為異常或不正常死亡個體時，記錄信息、科學(xué)取樣、檢驗檢測、報告結(jié)果、應(yīng)急處置、發(fā)布疫情的全過程。3.5野生動物異常死亡突發(fā)事件emergencyofwildlifeextraordinarydeaths指在一定區(qū)域，短時間內(nèi)發(fā)生波及范圍廣泛、出現(xiàn)大量患病病例或不明原因死亡野生動物的事件。3.6重大野生動物疫情thesignificantepidemicsituationofwildlife野生動物種群患有一種或幾種，發(fā)病率或者死亡率高、發(fā)病急、傳播迅速的疫病，危及到整個野生動物種群生存，并可能對公眾身體健康與生態(tài)安全造成嚴重威脅、危害的疫情。DB42/T978—201423.7無害化處理harmlesstreatment用物理、化學(xué)或生物學(xué)等方法處理帶有或疑似帶有病原體的動物尸體、動物產(chǎn)品及衍生物，達到消滅傳染源、切斷傳播途徑，阻止病原擴散的目的。4主要監(jiān)測任務(wù)4.1監(jiān)測陸生野生動物的活動范圍及行為狀態(tài)。4.2發(fā)現(xiàn)陸生野生動物異常情況報告當(dāng)?shù)卣蜕霞壭袠I(yè)主管部門。4.3對發(fā)生異常情況的野生動物采樣送檢。4.4積極配合相關(guān)部門的應(yīng)急處置。5監(jiān)測區(qū)域5.1野生動物的集中分布區(qū)域指陸生野生動物的集中繁殖地、越冬地、夜棲地、取食地及遷徙途中停歇地等，是野生動物疫病發(fā)生和傳染的主要區(qū)域，包括：——自然濕地區(qū)域，這一區(qū)域需要重點監(jiān)測的地方：湖泊岸線、沼澤灘涂、自然水域、江河水道、河口洲灘、季節(jié)性泛洪地、其它鳥類常見聚集地?！匀涣謪^(qū)區(qū)域，這一區(qū)域需要重點監(jiān)測的地方：林地、森林公園、森林類型自然保護區(qū)、林緣、溪流、峽谷、豁口、山區(qū)和平原過渡帶、大型山峰或山系交匯地帶、其它獸類常見聚集地。5.2野生動物與人、飼養(yǎng)動物密切接觸區(qū)域這一區(qū)域陸生野生動物與人、飼養(yǎng)動物能夠密切接觸，疫病能在不同動物與人之間相互感染和傳播。它是陸生野生動物疫病擴散并造成社會重大生物安全事件的主要區(qū)域，也是陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測的重點區(qū)域。常見的野生動物與人、飼養(yǎng)動物能夠密切接觸區(qū)域分為兩種：——人工濕地區(qū)域，包括：大中型水庫、大型圍堰、開闊地魚塘、大片藕池、河谷湖岸開闊稻田、其他鳥類常見聚集地?！謪^(qū)農(nóng)田附近的區(qū)域，包括：開闊平原農(nóng)田區(qū)、湖區(qū)周邊開墾的稻田區(qū)、河谷地帶、分布在開闊地的森林灌叢、丘崗地次生林、村莊、其他獸類常見聚集地。5.3重大疫病發(fā)生地及周邊地區(qū)指曾經(jīng)發(fā)生過或正在發(fā)生重大疫病的區(qū)域及周邊地區(qū)，重點監(jiān)測異常情況發(fā)生地、與異常物種混居過鳥類的移動路線、與異常物種混居鳥類的遷徙擴散地、相鄰站點敏感區(qū)域。6監(jiān)測對象6.1作為儲存宿主、攜帶者能向人、飼養(yǎng)動物傳播造成嚴重危害病原體的陸生野生動物，包括：——鳥類：湖北有分布或可監(jiān)測到的鳥類；——哺乳類：以靈長類、嚙齒類、食肉類、食蟲類、偶蹄類和翼手類為主；——其它種類：兩棲類、爬行類等。6.2已知的陸生野生動物與人類、飼養(yǎng)動物共患的重要疫病。包含：——巴氏桿菌、肉毒梭菌、沙門氏菌、結(jié)核分支桿菌、溶血性鏈球菌、鼠疫桿菌、豬鏈球菌、土拉DB42/T978—20143桿菌、布魯氏菌、炭疽桿菌等引起的細菌性疾?。弧萘鞲胁《?、冠狀病毒、副粘病毒、禽痘病毒、鴨瘟病毒、新城疫病毒、東部馬腦炎病毒、西尼羅河病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒、副粘病毒、漢坦病毒、狂犬病毒、犬瘟熱病毒、登革熱病毒、黃熱病病毒、馬爾堡病毒、艾博拉病毒、西尼羅河病毒、猴B病毒等引起的病毒性疾?。弧略w、立克次氏體病。6.3對陸生野生動物自身具有嚴重危害的疾病，可引起陸生野生動物發(fā)病或死亡的不明原因的疫病和國家要求監(jiān)測的其它疫源疫病。6.4在國外發(fā)生過國內(nèi)尚未發(fā)生，但有可能在我國發(fā)生的，與陸生野生動物密切相關(guān)的人或飼養(yǎng)動物的新的重要傳染性疫病。7監(jiān)測規(guī)范7.1防護要求7.1.1進行野外監(jiān)測時，監(jiān)測人員要了解監(jiān)測環(huán)境和氣候條件，了解監(jiān)測環(huán)境中具有危險性野生動物，并配備相應(yīng)的自衛(wèi)防護工具，采取措施預(yù)防可能造成的意外。7.1.2進行野外采樣時，監(jiān)測人員要確保自己處于有效的個人防護中。必要時采取相應(yīng)的防護措施，包括穿戴防護服、護目鏡、標準手術(shù)口罩、消毒橡膠手套、膠鞋等。7.1.3定期為監(jiān)測人員進行健康體檢和接種相關(guān)疫病的防疫疫苗。7.1.4密切接觸陸生野生動物的監(jiān)測人員，每次操作完畢后，及時清理消毒，廢棄物裝入防滲塑料袋中，置于指定地點并進行無害化處理。7.2監(jiān)測設(shè)備7.2.1開展野外監(jiān)測活動時需要的儀器設(shè)備，主要包括雙筒望遠鏡、單筒望遠鏡、電子監(jiān)控系統(tǒng)、電子測溫儀、GPS定位儀、通訊和交通工具等。7.2.2發(fā)現(xiàn)陸生野生動物異常情況后記錄、傳遞監(jiān)測信息時需要用到的儀器設(shè)備，主要包括多功能檢測采樣箱、樣品保存運輸箱、相機、攝像機等。7.3監(jiān)測方法7.3.1線路巡查法根據(jù)陸生野生動物種類、習(xí)性及當(dāng)?shù)厣程攸c設(shè)立巡查線路，定期按線路進行巡查。點線布設(shè)要考慮鳥類資源動態(tài)、自然生境條件、人為活動影響情況等因素。以平原濕地為主的水網(wǎng)湖區(qū)地帶，監(jiān)測面積不少于總濕地面積的1‰，湖區(qū)巡查線路長度范圍為1000-10000m，單側(cè)寬度100-1500m；農(nóng)田類型長度1000-5000m，單側(cè)寬度50-500m，監(jiān)測時允許機車代步。森林類型及平原丘陵地帶的監(jiān)測線路，充分考慮重點物種在本地區(qū)的分布情況以及獸類留下的糞便、臥跡、足跡、尿跡等因素，設(shè)置在能夠看到動物又能保證監(jiān)測人員安全的地帶。巡查線路一般不少于1000m，單側(cè)寬不少于10m，采用步行進行監(jiān)測。7.3.2定點觀測法在陸生野生動物種群聚集地或遷徙通道設(shè)立固定觀測點進行定點觀察。根據(jù)監(jiān)測對象和野生動物生境類型劃分標準的不同，充分利用現(xiàn)有的自然保護區(qū)和觀測點、國家森林資源連續(xù)清查固定樣地和科研系統(tǒng)的生態(tài)定位監(jiān)測點。DB42/T978—20144水網(wǎng)湖區(qū)固定觀察點設(shè)在鳥類棲息或取食地附近50-1000m，使用單筒或雙筒望遠鏡輔助觀察。森林類固定監(jiān)測點半徑，在視野較開闊的地帶半徑為25m，森林地帶半徑為10m。7.3.3群防群控法公開日常監(jiān)測行為、活動信息，公布監(jiān)測電話，開展宣傳活動、鼓勵群眾提供野生動物異常信息。一旦接到群眾報告野生動物異常情況，組織工作人員在2h內(nèi)趕赴現(xiàn)場進行處理。7.4監(jiān)測強度根據(jù)全省野生動物活動和動物疫病發(fā)生規(guī)律，將陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測劃分為重點時期和非重點時期；重點時期是每年的10月1日至次年的3月31日，非重點時期是每年的4月1日至9月30日。不同時期監(jiān)測強度不同：——非重點時期每7-15d一次路線巡查；——重點時期對重點路線和重點區(qū)域一日一次巡查監(jiān)測；——在發(fā)生重大動物疫情或野生動物異常事件等緊急情況下，實行24h監(jiān)控。7.5監(jiān)測樣本的采集7.5.1樣本采集對象病死的大型野生動物采取典型性病變的部位的組織（包括體液）。小型野生動物或禽類，直接采集整尸?；铙w野生動物可采集拭子、血液和糞便樣品。7.5.2樣本采集用品個人防護裝備和采樣記錄用品，包括：乳膠或聚乙烯手套、+/-N95或FFP2面罩、護目鏡、標簽紙、記號筆、樣品標簽、包裝膠帶和記錄表格等。樣品采集保存運輸裝備，包括：裝有運輸介質(zhì)的凍存管、人造纖維或聚酯纖維棉簽、剪刀、冰盒或液氮容器等。7.5.3拭子的采集7.5.3.1肛或泄殖腔拭子的采集肛或泄殖腔拭子的采集步驟：——從包裝袋的莖稈底部打開聚酯纖維棉簽（根據(jù)動物大小選擇合適的棉簽小心避免接觸棉簽——取出棉簽，把整個棉簽頭插入肛門或泄殖腔。溫和地施壓，棉簽頭在泄殖腔旋轉(zhuǎn)2-4次?！堵浯笥?.5cm的糞塊,打開凍存管，把棉簽頭插入運輸介質(zhì)中距離凍存管底部約3/4的位置?！獢Q斷（或剪斷）棉簽，使棉簽可以完全放入管中并擰緊管蓋。整個拭子頭和部分莖稈應(yīng)留在凍存管中?！趦龃婀苌献龊脴擞?，樣品編號、注明樣品類型（肛拭子/泄殖腔拭子）?！顚憳颖静杉涗洷恚ㄒ姼奖鞟.2），詳細注明樣品編號、樣品類型（肛拭子/泄殖腔拭子）、樣品采集的日期、物種、年齡、性別、地點等信息，確保凍存管上的信息與樣本采集記錄表的數(shù)據(jù)信息一致。7.5.3.2氣管拭子的采集DB42/T978—20145氣管拭子采集的步驟與肛拭子采集相同，但收集氣管內(nèi)容物要先輕柔地把棉簽頭插入氣管，待動物開始呼吸、保護氣管的軟骨打開允許氣流通過時，再輕柔的旋轉(zhuǎn)棉簽頭取樣。雀形目鳥，因個體小氣管直徑狹窄，可以采集咽拭子代替氣管拭子，采樣時輕柔地把棉簽頭插入鳥的口腔中，在口腔的上、下部和舌頭后面旋轉(zhuǎn)棉簽取樣即可。7.5.4血液的采集7.5.4.1血液采集的部位動物的采血部位見表1。表1常見動物采血部位表動物種類大型偶蹄動物毛皮動物猴類兔禽類采血部位耳靜脈耳殼外側(cè)靜脈前臂靜脈腿部隱靜脈尾尖耳背靜脈眼窩內(nèi)血管耳背靜脈頸靜脈心臟頸靜脈（頸部右側(cè)）臂/尺脈（翼靜脈）跖骨靜脈（腿部內(nèi)側(cè)）7.5.4.2血液采集量一般動物的安全采血量為每100g體重0.3-0.6ml。體重低于1000g的動物采血量不能超過安全量，其它動物根據(jù)檢測需要盡可能少采血液。7.5.4.3血液采集步驟血液采集步驟如下：——左手食指撥開準備采血部位的羽毛，右手用酒精棉球擦拭采血部位?！笫帜粗赴醋§o脈近心端位置可看到血管鼓起?！沂殖轴?，針尖斜面朝上與血管呈一定角度從遠心端進針?！⌒恼{(diào)整針頭位置，看到回血時用左手拇指固定住針頭，右手將采血針的另一端插入采血管收集血液?！杉暄汉?，用干棉球按在進針位置，右手拔出針頭，左手拇指繼續(xù)按壓1-2min?！獙⒉裳槒牟裳苌先∠拢瑮売诶魇占??！獙Σ裳苓M行編號，記錄樣品信息，填寫樣本采集記錄表（見附表A.2）。7.5.5糞便的采集采集糞便時需選取新鮮糞便，盡量采取糞便內(nèi)部未被氧化部分，不成形糞便應(yīng)避免采取糞便中的白色部分。采集糞便時用棉簽蘸取糞便放入采集管中，每采集一個樣品更換一個棉簽。做好標記和采樣記錄，不同地點的糞樣分別放置，同一個地點的樣品可密封在一個袋子內(nèi)。7.5.6樣本的處置及保存7.5.6.1抗凝血可直接凍存；血清可將血液37℃靜置1h后，置于4℃3-4h析出血清或離心取血清，再將血清轉(zhuǎn)入凍存管中凍存。7.5.6.2肛拭子、咽拭子和泄殖腔拭子保存在pH值為7.0-7.4的病毒運輸介質(zhì)中。7.5.6.3用福爾馬林固定的組織不能凍存，用于提取DNA/RNA的組織采用-80℃凍存。DB42/T978—201467.5.6.4糞便置于不含有抗菌素的保存液中冷藏，若只做病毒檢測可以使用含有抗菌素的保存液。7.5.6.5病死或死因不明的小型野生動物尸體裝入雙層塑料袋，密封完全后凍存。7.6監(jiān)測結(jié)果處理7.6.1野外監(jiān)測人員在監(jiān)測工作結(jié)束后及時將監(jiān)測情況填入監(jiān)測記錄表（見附表A.1）。7.6.2監(jiān)測站發(fā)現(xiàn)陸生野生動物異常情況時，要在2h內(nèi)組織兩名或兩名以上專業(yè)技術(shù)人員趕赴現(xiàn)場做流行病學(xué)現(xiàn)場調(diào)查和野外初步診斷，按規(guī)定采集樣品填寫野外樣本采集表（見附表A.2），并填寫疫病報檢記錄表（見附表A.3）送檢。7.6.3懷疑為重大動物疫情的應(yīng)立即報告當(dāng)?shù)貏游锓酪卟块T，由其組織開展采樣、檢測工作，并同時報告當(dāng)?shù)亓謽I(yè)主管部門及上級監(jiān)測管理機構(gòu)。7.6.4確診為重大動物疫情時，由當(dāng)?shù)卣块T立即啟動應(yīng)急預(yù)案。7.7無害化處理7.7.1處理原則帶有或疑似帶有病原體的陸生野生動物尸體、動物產(chǎn)品或其他物品選擇深埋、焚化、發(fā)酵等方法進行處理。在處理過程中，防止病原微生物擴散，涉及運輸、裝卸等環(huán)節(jié)要避免灑漏，對運輸工具進行徹底消毒。7.7.2處理方法7.7.2.1深埋深埋點應(yīng)選擇遠離居民區(qū)、水源和交通要道，避開公眾視野，清楚標示；坑的覆蓋土層厚度應(yīng)大于1.5m，坑底鋪墊生石灰，覆蓋土以前再撒一層生石灰。坑的位置和類型應(yīng)利于防洪。掩埋時將動物尸體、飼料、污染物、排泄物及動物所產(chǎn)卵置于坑中，噴灑消毒劑并澆油焚燒后再用土覆蓋。填土不宜太實，表層土壤與周圍持平并做標記，避免尸腐產(chǎn)氣溢出將病原帶出。7.7.2.2焚化根據(jù)異