2025年微生物學(xué)實驗室操作規(guī)范考核答案及解析一、單項選題1.微生物實驗室內(nèi)，開啟菌種管時應(yīng)在（）操作。A.超凈工作臺內(nèi)B.普通實驗臺上C.通風(fēng)櫥內(nèi)D.任意位置2.高壓蒸汽滅菌的溫度和時間通常為（）。A.100℃，30分鐘B.121℃，15-20分鐘C.160℃，2小時D.180℃，1小時3.革蘭氏染色中，媒染劑是（）。A.結(jié)晶紫B.碘液C.95%乙醇D.稀釋復(fù)紅4.以下哪種微生物屬于原核細(xì)胞型微生物（）。A.病毒B.真菌C.細(xì)菌D.原生動物5.細(xì)菌生長繁殖的最適pH值一般為（）。A.5.5-6.5B.6.5-7.5C.7.5-8.5D.8.5-9.56.用于培養(yǎng)厭氧菌的培養(yǎng)基是（）。A.普通瓊脂培養(yǎng)基B.血瓊脂培養(yǎng)基C.巧克力瓊脂培養(yǎng)基D.庖肉培養(yǎng)基7.微生物實驗中，常用的接種工具不包括（）。A.接種環(huán)B.接種針C.吸管D.鑷子8.對芽孢無殺滅作用的消毒劑是（）。A.戊二醛B.過氧乙酸C.碘伏D.75%乙醇9.下列哪種方法可用于病毒的分離培養(yǎng)（）。A.固體培養(yǎng)基培養(yǎng)B.液體培養(yǎng)基培養(yǎng)C.雞胚接種D.半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)10.微生物實驗結(jié)束后，用過的培養(yǎng)物應(yīng)（）。A.直接倒入下水道B.隨意丟棄C.高壓蒸汽滅菌后處理D.放在實驗臺上待下次使用二、多項選題1.微生物實驗室常用的安全設(shè)備有（）。A.生物安全柜B.高壓蒸汽滅菌器C.離心機(jī)D.培養(yǎng)箱2.以下屬于細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的是（）。A.細(xì)胞壁B.莢膜C.芽孢D.菌毛3.革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的主要成分包括（）。A.肽聚糖B.磷壁酸C.外膜D.脂多糖4.影響微生物生長的環(huán)境因素有（）。A.溫度B.pH值C.氧氣D.營養(yǎng)物質(zhì)5.常用的細(xì)菌染色方法有（）。A.革蘭氏染色B.抗酸染色C.鞭毛染色D.莢膜染色6.病毒的特點(diǎn)包括（）。A.無細(xì)胞結(jié)構(gòu)B.只含有一種核酸C.嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生D.對干擾素敏感7.微生物實驗室的質(zhì)量控制包括（）。A.人員培訓(xùn)B.儀器設(shè)備校準(zhǔn)C.培養(yǎng)基質(zhì)量控制D.室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評價8.以下哪些屬于真菌的繁殖方式（）。A.無性繁殖B.有性繁殖C.二分裂繁殖D.復(fù)制繁殖三、填空題1.微生物根據(jù)其結(jié)構(gòu)和組成可分為_____、_____和_____三大類。2.細(xì)菌的基本形態(tài)有_____、_____和_____。3.常用的濕熱滅菌法有_____、_____和_____。4.病毒的基本結(jié)構(gòu)包括_____和_____。5.細(xì)菌的生長曲線可分為_____、_____、_____和_____四個時期。6.真菌的營養(yǎng)體包括_____和_____。7.微生物實驗中，常用的接種方法有_____、_____和_____等。8.消毒是指殺死物體上的_____，滅菌是指殺死物體上的_____。四、判斷題（√/×）1.所有微生物都對人類有害。（）2.芽孢是細(xì)菌的繁殖體。（）3.革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁比革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁厚。（）4.病毒可以在無生命的培養(yǎng)基上生長繁殖。（）5.紫外線消毒主要用于空氣和物體表面的消毒。（）6.微生物實驗中，用過的吸管可以直接放在桌面上。（）7.真菌的細(xì)胞壁主要成分是肽聚糖。（）8.半固體培養(yǎng)基主要用于觀察細(xì)菌的動力。（）五、簡答題1.簡述革蘭氏染色的原理及主要步驟。六、案例分析患者，男性，25歲，發(fā)熱、咳嗽、咳痰3天，痰為鐵銹色痰。體格檢查：體溫39.5℃，呼吸急促，右下肺可聞及濕啰音。血常規(guī)：白細(xì)胞計數(shù)15×10?/L，中性粒細(xì)胞比例85%。胸部X線檢查：右下肺大片炎癥浸潤陰影。問題1：該患者最可能的診斷是什么？問題2：為明確診斷，還需要進(jìn)行哪些檢查？試卷答案一、單項選題（答案）1.答案：A解析：開啟菌種管應(yīng)在超凈工作臺內(nèi)，可避免雜菌污染及對環(huán)境造成污染。2.答案：B解析：高壓蒸汽滅菌常用溫度121℃，時間15-20分鐘，可有效殺滅各種微生物。3.答案：B解析：革蘭氏染色中碘液是媒染劑，可增強(qiáng)染料與細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)合力。4.答案：C解析：細(xì)菌屬于原核細(xì)胞型微生物，病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，真菌和原生動物是真核細(xì)胞型微生物。5.答案：B解析：多數(shù)細(xì)菌生長繁殖的最適pH值為6.5-7.5，在此范圍內(nèi)細(xì)菌生長良好。6.答案：D解析：庖肉培養(yǎng)基是專門用于培養(yǎng)厭氧菌的培養(yǎng)基，能提供無氧環(huán)境。7.答案：D解析：鑷子一般不用于接種，接種環(huán)、接種針、吸管是常用接種工具。8.答案：D解析：75%乙醇對芽孢無殺滅作用，戊二醛、過氧乙酸、碘伏對芽孢有殺滅作用。9.答案：C解析：病毒只能在活細(xì)胞內(nèi)寄生，雞胚接種是常用的病毒分離培養(yǎng)方法之一。10.答案：C解析：用過的培養(yǎng)物需高壓蒸汽滅菌后處理，防止微生物污染環(huán)境和傳播疾病。二、多項選題（答案）1.答案：ABC解析：生物安全柜、高壓蒸汽滅菌器、離心機(jī)是微生物實驗室常用安全設(shè)備，培養(yǎng)箱主要用于微生物培養(yǎng)。2.答案：BCD解析：細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)包括莢膜、芽孢、菌毛等，細(xì)胞壁是細(xì)菌基本結(jié)構(gòu)。3.答案：ACD解析：革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁主要成分有肽聚糖、外膜、脂多糖，磷壁酸是革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁成分。4.答案：ABCD解析：溫度、pH值、氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)等都是影響微生物生長的重要環(huán)境因素。5.答案：ABCD解析：革蘭氏染色、抗酸染色、鞭毛染色、莢膜染色都是常用的細(xì)菌染色方法。6.答案：ABCD解析：病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，只含一種核酸，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，對干擾素敏感。7.答案：ABCD解析：微生物實驗室質(zhì)量控制包括人員培訓(xùn)、儀器設(shè)備校準(zhǔn)、培養(yǎng)基質(zhì)量控制、室內(nèi)外質(zhì)量評價等多方面。8.答案：AB解析：真菌繁殖方式有無性繁殖和有性繁殖，二分裂繁殖是細(xì)菌的繁殖方式，復(fù)制繁殖是病毒的繁殖方式。三、填空題（答案）1.答案：原核細(xì)胞型微生物、真核細(xì)胞型微生物、非細(xì)胞型微生物解析：微生物按結(jié)構(gòu)和組成分為這三大類。2.答案：球狀、桿狀、螺旋狀解析：這是細(xì)菌的三種基本形態(tài)。3.答案：高壓蒸汽滅菌法、煮沸法、流通蒸汽滅菌法解析：這是常用的濕熱滅菌方法。4.答案：核酸、蛋白質(zhì)衣殼解析：病毒基本結(jié)構(gòu)由核酸和蛋白質(zhì)衣殼組成。5.答案：遲緩期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期、衰亡期解析：細(xì)菌生長曲線的四個時期。6.答案：菌絲、孢子解析：真菌營養(yǎng)體主要包括菌絲和孢子。7.答案：平板劃線接種法、穿刺接種法、液體接種法解析：這些是微生物實驗常用的接種方法。8.答案：病原微生物、所有微生物解析：消毒和滅菌的定義區(qū)別。四、判斷題（答案）1.答案：×解析：部分微生物對人類有益，如益生菌等。2.答案：×解析：芽孢是細(xì)菌的休眠體，不是繁殖體。3.答案：√解析：革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁較厚，革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁較薄。4.答案：×解析：病毒只能在活細(xì)胞內(nèi)寄生，不能在無生命培養(yǎng)基上生長繁殖。5.答案：√解析：紫外線常用于空氣和物體表面消毒。6.答案：×解析：用過的吸管應(yīng)放在指定容器內(nèi)，不能直接放桌面。7.答案：×解析：真菌細(xì)胞壁主要成分是幾丁質(zhì)等，肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁成分。8.答案：√解析：半固體培養(yǎng)基可用于觀察細(xì)菌動力。五、簡答題（答案）1.答：革蘭氏染色原理：細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)不同，革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁較厚，肽聚糖含量高，脂類含量低，乙醇處理后細(xì)胞壁脫水，肽聚糖層孔徑變小，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被保留在細(xì)胞內(nèi)，呈現(xiàn)紫色；革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁較薄，肽聚糖含量低，脂類含量高，乙醇處理后脂類溶解，細(xì)胞壁通透性增加，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被洗脫，再用復(fù)紅復(fù)染，呈現(xiàn)紅色。主要步驟：涂片固定、結(jié)晶紫初染1分鐘、碘液媒染1分鐘、95%乙醇脫色30秒、稀釋復(fù)紅