微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)

微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)「篇一」

為期五天（20XX年6月11日—15日）的食品衛(wèi)生綜合檢測(cè)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)告一段落

了，在這一周的微生物實(shí)驗(yàn)主要包括牛奶中大腸菌群的計(jì)數(shù)、雞蛋中沙門(mén)氏菌的檢

驗(yàn)和牛奶中金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)三個(gè)實(shí)驗(yàn)，經(jīng)過(guò)三個(gè)綜合實(shí)驗(yàn)的課程，能讓我更

能理解試驗(yàn)時(shí)要掌握的細(xì)節(jié)，也要保持頭腦的時(shí)刻清醒。同時(shí)讓我對(duì)這三種微生物

有了更進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)，同時(shí)讓我也對(duì)實(shí)驗(yàn)也更加熟悉了。

首先我們做的是大腸菌群的計(jì)數(shù)，它是采用MPN（最大可能數(shù)法）的計(jì)數(shù)來(lái)測(cè)

定的。大腸菌群的特性為：在37C,24小時(shí)內(nèi)能發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，好氧或

兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽抱桿菌，一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸

檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。其檢測(cè)原理為細(xì)菌在樣品內(nèi)的分布是

隨機(jī)的，所以檢測(cè)細(xì)菌時(shí)，可按概率理論計(jì)算菌數(shù)。大腸菌群MPN計(jì)數(shù)的檢驗(yàn)程序

為樣品的稀釋、初發(fā)酵試驗(yàn)、復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)和最后的大腸菌群最可能數(shù)（MPN）的報(bào)

告。那么在第一天的上午，老師基本給我們講了實(shí)驗(yàn)的原理和步驟，以及一些需要

注意的地方，我們便開(kāi)始計(jì)算自己需要配制的實(shí)驗(yàn)試劑的量，并且稱(chēng)取試劑的量和

清洗所要用的實(shí)驗(yàn)器皿，首先配置的是生理鹽水和LST肉湯，并且把生理鹽水和

LST肉湯分裝到試管內(nèi)，蓋好蓋子包扎好進(jìn)行滅菌，滅完菌也就到了吃飯時(shí)間，等

下午來(lái)接種培養(yǎng)了。

牛奶樣品與生理鹽水以1：9的比例進(jìn)行混合，搖勻后做10倍系列的稀釋?zhuān)?/p>

了3個(gè)稀釋度。隨后將三個(gè)稀釋度的樣品勻液以每個(gè)稀釋度3支試管接種到內(nèi)裝小

導(dǎo)管的含LST肉湯的試管中，最后放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。在經(jīng)過(guò)24h的培養(yǎng)

后，所有的試管內(nèi)均產(chǎn)生氣體，而后我們要將培養(yǎng)后的有菌落的LST肉湯接種到

BGLB肉湯試管中進(jìn)行培養(yǎng)24—48h,觀(guān)察后發(fā)現(xiàn)所有的BGLB管都產(chǎn)氣，顏色也有

原來(lái)的綠色變成暗黃色，證明也產(chǎn)生了酸，所以記為所有產(chǎn)氣管為大腸菌群陽(yáng)性

管。最后查MPN表可得出每亳升樣品中大腸菌群的MPN為大于等于llOOml/MPN。

我們小組在做大腸菌群測(cè)定還是很順利的，中途沒(méi)有出現(xiàn)什么錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)很順

利，小組成員的配合和分工也都很好。

第二個(gè)實(shí)驗(yàn)是雞蛋中的沙門(mén)氏菌的檢測(cè)，他的特性是：沙門(mén)氏菌需氧或兼性厭

氧，10—42℃都可生長(zhǎng)，最適溫度為37C,大部分可發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，是

革蘭氏陰性的無(wú)芽泡桿菌。在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)產(chǎn)生光滑，濕潤(rùn)，半透明，邊緣

整齊的菌落。在血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)，形成大小中等的灰白色菌落。實(shí)驗(yàn)過(guò)程

可分為前增菌、選擇性增菌、選擇性平板分離、生物化學(xué)篩選四個(gè)階段。

實(shí)驗(yàn)首先配制BPW溶液，進(jìn)行分裝和高壓滅菌，在無(wú)菌條件下，移取5nli雞蛋

液樣品于盛有45mlBPW的組織培養(yǎng)瓶中，混勻，放置于36℃±1℃的恒溫培養(yǎng)箱中

培養(yǎng)24h±2h,觀(guān)察生長(zhǎng)現(xiàn)象。接下來(lái)的增菌階段，需要配制TTB增菌液和SC增

菌液,移取1ml的前增菌液接種到lOmlTTB增菌液內(nèi),在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h?

24h,SC增菌液過(guò)程與7TB一樣。接下來(lái)需要制備BS平板和HE平板，等平板凝固

后便可以開(kāi)始接種了，是采用平板分多區(qū)劃線(xiàn)的方法，然后放在37度溫箱培養(yǎng)

18~24h.最后要進(jìn)行生叱實(shí)驗(yàn)，要先配制三糖鐵瓊脂，從培養(yǎng)皿的平板上挑取可疑

菌落，接種到三糖鐵瓊脂，先與底層穿刺，再在斜面劃線(xiàn)。同時(shí)把菌落接種到各種

生化試劑里，封口后一起放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18hc取出培養(yǎng)皿和生化小試管觀(guān)察

結(jié)果，記錄。

第三個(gè)實(shí)驗(yàn)是金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)，它的特性一般是無(wú)芽抱，鞭毛。大多數(shù)

無(wú)莢膜，革蘭氏染色陽(yáng)性，它培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上就能生長(zhǎng)良

好，需氧或兼性狀氧。在血平板上培養(yǎng)會(huì)使紅細(xì)胞破裂，形成透明的溶血環(huán)。在顯

微鏡下可以看到是紫色的，排列成葡萄狀的.圓形的菌。

首先是樣品的處理，稱(chēng)取22g7.5%氯化鈉肉湯溶解于250nli水中，在每個(gè)均質(zhì)

瓶?jī)?nèi)移取45ml,同時(shí)制取Baird—Parker培養(yǎng)基，高壓滅菌后吸取牛奶樣品5ml

到均質(zhì)瓶?jī)?nèi)。放入恒溫箱培養(yǎng)18—24h。然后用接種環(huán)取培養(yǎng)物分別劃線(xiàn)接種到

Baird一Parker平板和血平板上，培養(yǎng)18—24h,Baird一Parker平板有可能需要

培養(yǎng)45—48h。最后進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn)，挑取BP平板或血平板上可疑菌落1個(gè)

或以上，分別接種到5ml左右BHI肉湯中,36±1℃培養(yǎng)18—24h。取新鮮兔血漿

0.5ml,加入BHI培養(yǎng)物0.2—0.3ml,振蕩搖勻，置36土1C溫箱培養(yǎng)，半小時(shí)觀(guān)

察一次，6小時(shí)觀(guān)察，直至出現(xiàn)凝固，判為陽(yáng)性結(jié)果。也有小組6h后也沒(méi)凝固

的，則判為陰性。最后進(jìn)行革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)，觀(guān)察細(xì)菌的形態(tài)特征。最后記錄結(jié)

果。

三個(gè)實(shí)驗(yàn)雖然不多，但是三個(gè)實(shí)驗(yàn)的跨度剛好是一個(gè)星期，所以我們實(shí)驗(yàn)剛好

可以做完，實(shí)驗(yàn)從剛開(kāi)始的懵懂到慢慢的熟悉，到最后的成功，少不了的是小組合

作和老師的幫助。經(jīng)過(guò)三個(gè)微生物的實(shí)驗(yàn)，讓我對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)的過(guò)程。不過(guò)對(duì)于微

生物的實(shí)驗(yàn)一定要細(xì)心，一個(gè)是它需要的時(shí)間很長(zhǎng)，要滅菌和培養(yǎng)，如果做錯(cuò)都得

重新再來(lái)，并且實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不能被污染，否則會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成一定的污染或完全

不可用。對(duì)實(shí)驗(yàn)流程一定要熟悉，現(xiàn)象一定要觀(guān)察仔細(xì)，因?yàn)轭?lèi)似的菌類(lèi)有很多，

其生產(chǎn)的習(xí)性也類(lèi)似，若不觀(guān)察仔細(xì)，就會(huì)有結(jié)果的偏差。我們小組的實(shí)驗(yàn)都很順

利，中途雖有一點(diǎn)點(diǎn)過(guò)失，但對(duì)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)度和結(jié)果沒(méi)有什么大的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果也

是讓我們蠻有成就感的，感謝小組的配合。操作不像理論，只有多次練習(xí)才有體

會(huì)，在今后的實(shí)驗(yàn)中，我會(huì)更加努力。

微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)「篇二」

微生物在地球上存在了30多億年，人類(lèi)在數(shù)百萬(wàn)年前出現(xiàn)之后就一直和微生

物發(fā)生著千絲萬(wàn)縷的聯(lián)系。發(fā)面、果酒和啤酒釀造、牛奶和奶制品的發(fā)酵等都是那

些看不見(jiàn)的小生命做出的貢獻(xiàn)。微生物存在于我們生活中的每一個(gè)角落，通過(guò)微生

物實(shí)驗(yàn)我們可以更加的了解微生物的“習(xí)性”就如同養(yǎng)的寵物一樣，什么樣的食物

會(huì)發(fā)育更好，什么樣的天氣會(huì)心情好，什么樣的玩具會(huì)有益等等。培養(yǎng)、分離、鑒

別微生物或積累代謝產(chǎn)物。自然界中培養(yǎng)基的種類(lèi)很多，但是不同的培養(yǎng)基中，一

般含有水分、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等，不同類(lèi)別的微生物對(duì)PH值的要

求一般不同。同過(guò)這些實(shí)驗(yàn)便能一一考證。

實(shí)驗(yàn)是培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力、觀(guān)察能力、思維能力、表達(dá)能力、合作能力、創(chuàng)

新能力等的最佳途徑。還要求實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員必須具備相應(yīng)的素質(zhì)，實(shí)驗(yàn)操作人員必

須具備較扎實(shí)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)、熟練的實(shí)驗(yàn)技能及高度的責(zé)任心，在工作中要善于總

結(jié)，同時(shí)還要和理論課老師積極溝通，這樣才能夠真正的學(xué)好微生物實(shí)驗(yàn)這門(mén)課

程。在每一次實(shí)驗(yàn)中不僅僅要專(zhuān)心認(rèn)真的做實(shí)驗(yàn)，還要認(rèn)真的寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，并從實(shí)

驗(yàn)中總結(jié)不足。再比如在調(diào)試顯微鏡的時(shí)候由低倍向高倍慢慢調(diào)試，在使用高倍時(shí)

更應(yīng)該小心調(diào)試細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，以免壓壞我玻片，在使用油鏡后要將油鏡拭擦干凈，

保證顯微鏡的清潔，這些細(xì)節(jié)是需要注意的。

以下就我們做的實(shí)臉錯(cuò)誤做列舉：

進(jìn)行菌種接種的時(shí)候，選擇合適的方式并，注意不要把平板弄破，等到平板凝

固后才可以進(jìn)行接種。接種時(shí)也要注意在無(wú)菌條件下接種。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，再觀(guān)察最

后得出結(jié)論。在酸奶中菌落測(cè)定時(shí)，封口不及時(shí)有外界的細(xì)菌污染。藥敏實(shí)驗(yàn)中因

為試驗(yàn)中放置牛津杯時(shí)也將培養(yǎng)基戳破，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)觀(guān)察受到影響，并且在接種時(shí)因

為亂放培養(yǎng)基將未接種和已接種的培養(yǎng)基混淆導(dǎo)致試驗(yàn)中3個(gè)培養(yǎng)基并沒(méi)有實(shí)驗(yàn)結(jié)

果，實(shí)驗(yàn)失敗。

我們的自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)是探究滲透壓對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響，原理是將細(xì)菌置于抵

滲液中，菌體因吸收水分膨脹甚至破裂；如果將菌體置于高滲液中，則菌體內(nèi)的水

分就會(huì)滲出，結(jié)果發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。不同的細(xì)菌對(duì)滲透壓的抵抗力不同。但無(wú)論

哪種細(xì)菌對(duì)滲透壓的抵抗力是有一定限度的，超過(guò)一定限度則使菌體生長(zhǎng)受到抑制

只有在等滲溶液中，微生物才能正常生長(zhǎng)、繁殖。實(shí)現(xiàn)這一理論我們需要制作

200ml的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基（牛肉膏1g,蛋白陳2g,蒸儲(chǔ)水200nl）,將其調(diào)

PH至7.2,后平均分成四份各50ml,分別加入0g、1g、2.5g、5g的NaCl固體，

配置成NaCl濃度分別為0%、2%.5%、10舟的4種不同濃度的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)

基。從培養(yǎng)基中吸取1加1加入試管中，不同濃度的培養(yǎng)基各取三支試管。在此操

作時(shí)因?qū)嶒?yàn)思考不嚴(yán)謹(jǐn)是采取分別稱(chēng)量配置了3份不同濃度的溶液，而正確的做法

應(yīng)該是配一份未加入NaCl的培養(yǎng)基，再份為3份，加入不同克數(shù)的NaCl,這樣一

來(lái)可以避免由于營(yíng)養(yǎng)素的計(jì)量不同導(dǎo)致的誤差。雖后來(lái)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并未受到影響，

但思考不嚴(yán)謹(jǐn)是值得反思的。

通過(guò)以上的錯(cuò)誤我們明白了做好實(shí)驗(yàn)的具體要求，實(shí)驗(yàn)前做好預(yù)習(xí)，并思考實(shí)

驗(yàn)原理。實(shí)驗(yàn)中正確選擇實(shí)驗(yàn)方法與實(shí)驗(yàn)器材，學(xué)會(huì)控制實(shí)驗(yàn)條件。知道如何實(shí)

驗(yàn)、判斷結(jié)果的可靠程度。理解和掌握有關(guān)課程內(nèi)容和重要的物理概念，以形成物

理思想，培養(yǎng)解決物理問(wèn)題的能力。通過(guò)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)掌握基本物理量的測(cè)量方法，以

培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)技能。最后就是最重要的一點(diǎn)，培養(yǎng)自己嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)態(tài)度、科學(xué)的實(shí)驗(yàn)方

法及良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。

微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)「篇三」

微生物實(shí)驗(yàn)優(yōu)秀總結(jié)

這學(xué)期的微生物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)結(jié)束，這是我第一次接觸到微生物的世界中，以前也

只是在書(shū)本中學(xué)習(xí)，但是真正走進(jìn)它們的世界中是通過(guò)這個(gè)課程開(kāi)始的。在開(kāi)始微

生物實(shí)驗(yàn)之前我是以為這個(gè)實(shí)驗(yàn)不會(huì)很難，但是通過(guò)本學(xué)期的學(xué)習(xí)發(fā)現(xiàn)這個(gè)課程真

的很難。你不僅需要理論知識(shí)作為鋪墊，你還需要有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)精神。

第一節(jié)課老師給我們介紹了我們本學(xué)期微生物實(shí)驗(yàn)的幾個(gè)實(shí)驗(yàn)和報(bào)告的要求，

也讓我們了解了微生物實(shí)驗(yàn)和以往其他實(shí)驗(yàn)的不同。實(shí)驗(yàn)步驟雖然很簡(jiǎn)單，但是往

往一個(gè)微小的細(xì)節(jié)處理不當(dāng)也會(huì)導(dǎo)致你整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的失敗。這個(gè)我真的深有體

會(huì)，我們小組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都很不理想。實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)難也不難，其實(shí)無(wú)非是先對(duì)配置

培養(yǎng)液，然后對(duì)清洗干凈的試管、培養(yǎng)皿以及配置好的‘培養(yǎng)液進(jìn)行滅菌，等滅菌

完了就放入無(wú)菌室進(jìn)行細(xì)菌的接種，最后將接種好細(xì)菌和培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿放進(jìn)恒溫

培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)?？此葡︳藓?jiǎn)單的操作過(guò)程我卻狀況百出。我總結(jié)了幾點(diǎn)導(dǎo)致這么多

次實(shí)驗(yàn)失敗的地方。第一是操作不夠規(guī)范，在培養(yǎng)皿中倒入培養(yǎng)液后沒(méi)有搖勻?qū)е?/p>

培養(yǎng)基邊緣開(kāi)裂，未等瓊脂培養(yǎng)液凝固就倒置導(dǎo)致培養(yǎng)基分布不均勻。第二是理論

知識(shí)欠缺，沒(méi)有等培養(yǎng)液冷卻至40到50攝氏度就倒入培養(yǎng)基然后馬上就接種了細(xì)

菌，導(dǎo)致細(xì)菌己經(jīng)被燙死。

好在值得欣慰的是最后一個(gè)自主實(shí)驗(yàn)還是比較成功的。試驗(yàn)以環(huán)境對(duì)微生物生

長(zhǎng)的影響為題設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，我們小組通過(guò)PH值，溫度，紫外線(xiàn)照射三個(gè)方面進(jìn)行研

究，結(jié)果很滿(mǎn)意，很明顯。大腸桿菌在PH值為7時(shí)生長(zhǎng)最適，在溫度為37℃時(shí)生

長(zhǎng)最佳，紫外線(xiàn)會(huì)抑制其生長(zhǎng)。

不得不承認(rèn)，通過(guò)這次實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)，我們學(xué)到了很多，得到了很多，有些是書(shū)

本上學(xué)不到的，只有自己參與了，操作了，才會(huì)知道。也要感謝老師對(duì)我們的照

顧。

微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)「篇四」

一、培養(yǎng)基

（一）培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分

一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，有些微生物需要添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（如

培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需添加生長(zhǎng)因子：維生素）

高考警示鐘：自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同

（1）自養(yǎng)微生物所需的碳源來(lái)自含碳的無(wú)機(jī)物（如C02），而異養(yǎng)微生物需要

的碳源來(lái)自含碳的有機(jī)物，因此可根據(jù)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)判斷微生物的代謝類(lèi)型。

（2）含氮無(wú)機(jī)物不但能給自養(yǎng)微生物提供氮源，也能作為能源物質(zhì)，提供能

量，如NH3既作為硝化細(xì)菌的氮源也作為能源。

（二）培養(yǎng)基的配制原則

（D目的明確。要根據(jù)微生物的種類(lèi)、培養(yǎng)目的等選擇原料、配制培養(yǎng)基。

（2）營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)。各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要保證適當(dāng)?shù)臐舛群捅壤I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比例過(guò)

低，不能滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)；濃度過(guò)高則會(huì)抑制微生物的正常生長(zhǎng)。

（3）pH要適當(dāng)。不同微生物生長(zhǎng)所需pH不同。如細(xì)菌為中性或微堿性（65?

7.5）；霉菌等真菌為酸性（5.0?6.0）。

（三）培養(yǎng)基的分類(lèi)及作用：

1.物理性質(zhì)：根據(jù)是否添加瓊脂等凝固劑

（1）液體培養(yǎng)基：不加凝固劑，常用于工業(yè)生產(chǎn)

（2）固體培養(yǎng)基：加凝固劑，常用于微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)

2.用途或功能

（1）選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入或去除某種化學(xué)物質(zhì)，允許特定種類(lèi)的微生

物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)。

常見(jiàn)例子：

①培養(yǎng)基中加入青霉素，篩選酵母菌或霉菌等真菌；

②培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽，篩選金黃色葡萄球菌；

③無(wú)氮培養(yǎng)基，篩選固氮微生物；

④無(wú)碳培養(yǎng)基，篩選自養(yǎng)微生物；

⑤以石油為唯一碳源，選擇能分解石油的微生物；

⑥以尿素為唯一氮源，篩選尿素分解菌；

⑦以纖維素為唯一碳源，通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈篩選纖維素分解菌。

⑧將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)，分離耐高溫的微生物。

（2）鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化

學(xué)藥品，以鑒別不種類(lèi)的微生物。

①伊紅一美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，茵落呈深

紫色，并帶有金屬光澤;；

②培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，鑒定尿素分解菌；

③培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）,鑒定纖維素分解菌。

注意:

①病毒為非細(xì)胞結(jié)溝的生物體，專(zhuān)營(yíng)活細(xì)胞寄生，目前不能利用人工培養(yǎng)基來(lái)

培養(yǎng)，需接種在動(dòng)植物組織中才能增殖。常用于培養(yǎng)病毒的是活雞胚。

②加入培養(yǎng)基中的凝固劑（如瓊脂），一般不能被微生物利用，只起到凝固作

用。

二、無(wú)菌技術(shù)

（-）關(guān)鍵

獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵。

（二）消毒、滅菌：

二者主要區(qū)別中；芽泡和泡子是否存活（芽泡是微生物度過(guò)不良環(huán)境的體眠

體，而劑子是微生物進(jìn)行無(wú)性生殖時(shí)的繁殖體即無(wú)性生殖細(xì)胞。）

1.消毒:使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人

體等有害的微生物（不包括抱子和芽抱）

常用方法

應(yīng)用范圍

巴氏消毒法：70?75c水中煮30min或在80℃水中煮15min

一些不耐高溫的物體如牛奶

煮沸消毒法：在100℃水浴中煮沸5?6min

一般物品

化學(xué)藥劑消毒法：用乙醇、氯氣、KMnO4等藥劑來(lái)殺死或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)或繁殖

可用來(lái)對(duì)環(huán)境、雙手和衣物等消甫

紫外線(xiàn)消毒法：30W紫外燈照射30min

接種室、接種箱、超凈工作臺(tái)

2.滅菌:使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生.物，包括芽抱和抱子

常用方法

應(yīng)用范圍

灼燒滅菌法：酒精燈火焰

接種工具如接種環(huán)、接種針等

干熱滅菌法：在160?170C加熱1?2h

如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具

高壓蒸汽滅菌：壓力為100kPa,溫度為121℃的條件下，維持15?30min

培養(yǎng)基及容器的滅菌

注意：

(1)酒精消毒用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精效果最好，濃度過(guò)低。殺菌力弱，濃

度過(guò)高，會(huì)使菌體表面蛋白凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能進(jìn)入其中

(2)關(guān)于高壓蒸汽滅菌注意以下幾點(diǎn)：

①壓力為100kPa,溫度為121C的條件下，維持15?30min；

②注意同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺旋，使螺栓松緊一致;

③到滅菌時(shí)間后，當(dāng)壓力表的壓力降為零時(shí)，才能打開(kāi)排氣閥，否則滅菌鍋的

液體會(huì)沖出容器，造成污染。

（3）滅菌消毒的原理.，就是通過(guò)一定理化手段，使病原菌蛋白質(zhì)變性，失去

生命活性。

（4）灼燒滅菌用的是酒精燈火焰的充分燃燒層。

三、微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)

（-）常用細(xì)菌培養(yǎng)基一一牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基配制流程：

計(jì)算

稱(chēng)量

溶化

火菌

注意：據(jù)配方計(jì)算配制一定體積培養(yǎng)基時(shí)各成分的用量

注意：

①倒平板時(shí)，燒杯口要通過(guò)酒精燈火焰滅菌。

②平板冷凝后要將平板倒置，既可防止皿蓋上凝結(jié)的水滴滴入培養(yǎng)基造成污

染；又可使培養(yǎng)基表面的水分更好的揮發(fā)。

（調(diào)PH）

倒平板

注意:

①牛肉膏較粘稠，應(yīng)玻棒挑取，在稱(chēng)量紙上稱(chēng)量

②牛肉膏蛋白陳易吸潮，動(dòng)作要迅速

注意：

①溶化瓊脂時(shí)要不斷攪拌，防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂；

②加熱過(guò)程中部分水分蒸發(fā)，待瓊脂完全溶化后應(yīng)補(bǔ)加蒸饋水，以保持溶液的

濃度

注意：

由于不同微生物適宜的pH不同，因此在熔化后，必須用NaOH或HC1來(lái)調(diào)節(jié)

pH

注意：

①用高壓蒸汽滅菌法

②培養(yǎng)基先調(diào)PH再滅菌

③一般是培養(yǎng)基先滅菌再倒平板

計(jì)算

稱(chēng)量

溶化

滅菌

注意：據(jù)配方計(jì)算配制一定體積培養(yǎng)基時(shí)各成分的用量

注意:

①倒平板時(shí)，燒杯口要通過(guò)酒精燈火焰滅菌。

②平板冷凝后要將平板倒置，既可防止皿蓋上凝結(jié)的水滴滴入培養(yǎng)基造成污

染；又可使培養(yǎng)基表面的水分更好的'揮發(fā)。

（調(diào)PH）

倒平板

注意：

①牛肉膏較粘稠，應(yīng)玻棒挑取，在稱(chēng)量紙上稱(chēng)量

②牛肉膏蛋白膿易吸潮，動(dòng)作要迅速

注意：

①溶化瓊脂時(shí)要不斷攪拌，防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂；

②加熱過(guò)程中部分水分蒸發(fā)，待瓊脂完全溶化后應(yīng)補(bǔ)加蒸儲(chǔ)水，以保持溶液的

濃度

注意：

由于不同微生物適宜的pH不同，因此在熔化后，必須用NaOH或HC1來(lái)調(diào)節(jié)

pH

注意:

①用高壓蒸汽滅菌法

②培養(yǎng)基先調(diào)PH再滅菌

③一般是培養(yǎng)基先滅菌再倒平板

（二）純化大腸桿菌

1.原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，

這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。

2.微生物接種方法：

平板劃線(xiàn)法（只可純化）和稀釋涂布平板法（既可純化又可計(jì)數(shù)）

（1）平