TCALAS90-2020實驗動物小鼠肝炎病毒逆轉錄環(huán)介導等溫擴增（RTLAMP）檢測方法_第1頁
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ICSBT/CALAS90— Laboratoryanimal-Detectionofmousehepatitisvirusbyreversetranscriptionloop-mediatedisothermalamplificationassay2020-12- 發(fā) 2021-01- 實中國實驗動物學會 GB/T1.1—2020給出的規(guī)則起草。本文件由全國實驗動物標準化技術委員會（SAC/TC281）實驗動物小鼠肝炎病毒逆轉錄-環(huán)介導等溫本文件規(guī)定了實驗動物小鼠肝炎病毒（MHV）RT-LAMP檢測的原理、方法和結果DNAAMV逆轉錄酶的混合溶液1h內完成核酸擴增反應DNA在65℃左右處于動態(tài)平衡狀態(tài)，利用可以產生環(huán)狀結構的引物和酶溶液（BstDNAAMV逆轉錄酶的混合溶液聚合酶鏈置換合成的活性，在靶序列兩端引物RNADEPCRNARNAF3：5′-AAGCAGTTCCAACCAGCG-3′B3：5′-TGGGCACTGCTTGTTTGG-3′FIP：5′-GGCCGGCATCTTTACCGAGCAAAACCTGATATGGCCGAAGA-3′BIP：5′-GCAAGTAACGAAGCAAAGTGCCAGTCCTCTTTTGGCGAGGC-3′LF：5′-TTAGCCAAAACAAGAGCAGCA-3′1.0g2mL0.1mol/L7.2～7.6的磷酸鹽緩沖液（PBS），12000r/min5min，取上清，用病毒RNARNARNA濃度進入25μL11RT-LAMP 12.5FIP引 40pmol（1BIP引 40pmol（1F3引 5pmol（1B3引 5pmol（1 1DEPC去離子 1.5 5 16560min實驗動物小鼠肝炎病毒逆轉錄-環(huán)介導等溫擴增（

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