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152024-02-23發(fā)布本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAM/TC1I綿羊瘤胃微生物儲(chǔ)備糖原的測定方法GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和微生物儲(chǔ)備糖原microbialreservecarbohyd存糖原的形式儲(chǔ)備多量碳水化合物,稱為微生物儲(chǔ)備糖),125.8無氮PBS緩沖液:準(zhǔn)確稱取665于90ml雙蒸水中,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.80,定容至100mL。至溶液清亮,然后用塑料管量取上層清液108mL,用無二氧化碳的水稀釋至1000mL,搖勻即可。6.2分析天平,感量0.0001g。6.3量筒,規(guī)格100mL和1000mL。6.4分液漏斗,規(guī)格250mL。6.5生化培養(yǎng)箱,控溫范圍0℃~50℃。6.7低溫冰箱,溫度范圍:-20℃~4℃。6.8高速冷凍離心機(jī),溫度范圍:-20℃~40℃,轉(zhuǎn)速:200rpm~15000rpm。6.9恒溫水浴鍋,精度±0.5℃。通過瘤胃瘺管或口腔瘤胃液取樣器采集瘤胃內(nèi)容物,取200mL瘤胃內(nèi)容物放置于39℃預(yù)熱的暖水瘤胃混合液置于生化培養(yǎng)箱中39℃培養(yǎng),45min后草渣顆粒上升到頂層,通過漏斗口獲得下層瘤10000rpm離心10min,去除上清液后留取下層固體,獲得混合瘤胃微生物,儲(chǔ)存在-20℃?zhèn)溆?。獲得的混合瘤胃微生沉淀重懸于1mL水中,沸水浴15min使糖苷酶失活,10000rpm離心13置于冰水內(nèi)冷卻至室溫;加完后,將試管放入沸水中水浴15min,水浴液面略高于試管中試劑液面,待反應(yīng)完成后冰水中冷卻至室溫,然后于620nm波長處比色測定吸光8.1糖原含量以W表示,數(shù)值以mg/mL計(jì),按公式(1)進(jìn)行計(jì)算:1/10——表示由10mL瘤胃內(nèi)容
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