硫代葡萄糖苷在奶山羊體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程編制說明_第1頁
硫代葡萄糖苷在奶山羊體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程編制說明_第2頁
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內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會《硫代葡萄糖苷在奶山羊體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程》編制說明(征求意見稿)《硫代葡萄糖苷在奶山羊體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程》起草組2025年7月《硫代葡萄糖苷在奶山羊體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程》編制說明一、工作簡況1、任務(wù)來源根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會、民政部印發(fā)《團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)定》和《內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》相關(guān)文件要求,2024年7月11日,在內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院召開《硫代葡萄糖苷在奶畜體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程》等團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項評審會議,內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會下達(dá)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項的公告通知,同意本標(biāo)準(zhǔn)立項,起草單位按要求開始起草標(biāo)準(zhǔn)。2、起草單位及協(xié)作單位起草單位:內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院協(xié)作單位:呼和浩特市農(nóng)牧技術(shù)推廣中心、國家乳業(yè)技術(shù)創(chuàng)新中心3、主要起草人本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人為:王麗芳、李秀萍、楊健、宋潔、郭晨陽、張騰龍、鐘華晨、劉嘉琳、張瑩、李琴、羿靜。二、制定標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義近年來,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部大力實施豆粕減量替代行動,聚焦“提效減量、開源替代”,在需求端壓減豆粕用量,在供給端增加替代資源供應(yīng)。我國作為全球最大的大豆進(jìn)口國,年進(jìn)口量超過1億噸,對外依存度高達(dá)80%以上,通過開發(fā)新型蛋白飼料來源,可顯著降低對進(jìn)口大豆的依賴,增強(qiáng)飼料原料供應(yīng)的自主可控能力,保障國家糧食安全。菜籽餅粕作為重要的植物蛋白資源,其蛋白質(zhì)含量高達(dá)35%-45%,且氨基酸組成較為均衡,是極具開發(fā)潛力的豆粕替代品之一。但菜籽餅粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子硫代葡萄糖苷(Glucosinolates,Gls)含量較高,不僅降低了飼料的適口性,而且攝入過多容易引起動物中毒,造成器官組織形態(tài)改變、內(nèi)分泌紊亂及生產(chǎn)性能下降等不良反應(yīng),從而影響動物健康。硫代葡萄糖苷是十字花科植物中重要的次生代謝產(chǎn)物,本身無明顯毒副作用,但被畜禽采食后經(jīng)飼料中芥子酶或胃腸道細(xì)菌酶催化作用,會降解生成異硫氰酸(isothiocyanates,ITC)鹽、唑烷酮(5-vinyloxazolidine-2-thione,5-VOT)、硫氰酸鹽(sulfocyanicacid,SCN-)和腈等有害物質(zhì)。其中,異硫氰酸鹽產(chǎn)生的苦味嚴(yán)重影響菜籽餅粕的適口性(Mithen等,2000),對動物皮膚、粘膜和消化器官表面具有破壞作用,時也有致甲狀腺腫大效應(yīng);唑烷酮阻礙單胃動物甲狀腺素的合成,引起血液中甲狀腺素濃度下降,促進(jìn)垂體分泌更多的促甲狀腺激素,使甲狀腺細(xì)胞增生,最終導(dǎo)致甲狀腺腫大(Wallig等,2002);硫氰酸鹽抑制碘轉(zhuǎn)換,造成甲狀腺腫大;腈主要對動物健康有影響,其毒性大約為唑烷酮的8倍,造成動物肝臟和腎臟腫大,嚴(yán)重時可引起肝出血和肝壞死(Burel等,2000;Tanii等,2004)。硫代葡萄糖苷的副作用主要取決于其降解產(chǎn)物的含量和組成(Tanii等,2004)。硫代葡萄糖苷在奶畜體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化生成的硫氰酸鹽(SCN-)是國家每年生鮮乳例行監(jiān)測必檢參數(shù),目前,我國還沒有規(guī)定生鮮乳中硫氰酸鹽(SCN-)的限量值,國家食品藥品監(jiān)管總局“2015年食品安全抽檢監(jiān)測項目參考值”中規(guī)定液體乳中SCN含量的參考值是10mg/kg。鑒于以上原因,許多奶畜養(yǎng)殖場禁止飼用菜籽餅粕等十字花科植物,極大限制了菜籽餅粕等的利用。因此,建立菜籽餅粕等十字花科植物飼料中“硫代葡萄糖苷在奶畜體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程”,探明菜籽餅粕等飼料的適宜添加范圍,使得乳中SCN-含量不超過參考限量值10mg/kg勢在必行。三、主要起草過程前期準(zhǔn)備項目申請人近年來在主持國家奶產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估重大專項、國家乳業(yè)技術(shù)創(chuàng)新中心項目、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部生鮮乳例行監(jiān)測、內(nèi)蒙古生鮮乳質(zhì)量安全監(jiān)測項目、內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)創(chuàng)新基金等項目中,對生鮮乳中SCN的風(fēng)險監(jiān)測及與飼料中硫代葡萄糖苷的相關(guān)性開展了大量研究。其中從2009-2018年連續(xù)10年對內(nèi)蒙古地區(qū)10個盟市全部奶罐奶中SCN等風(fēng)險因子進(jìn)行了監(jiān)測,并對2013-2017年連續(xù)5年間內(nèi)蒙古地區(qū)10個盟市2443批次生鮮乳中的SCN含量進(jìn)行了統(tǒng)計分析。同時采集了飼料中含有菜粕的規(guī)?;膛<澳躺窖蝠B(yǎng)殖場飼料樣本及奶罐奶樣品,分析了飼料中硫代葡萄糖苷轉(zhuǎn)化為奶中SCN的轉(zhuǎn)化規(guī)律。前期研究成果如下:獲得獎項3項“生鮮乳質(zhì)量安全控制關(guān)鍵技術(shù)及應(yīng)用”獲得2019年內(nèi)蒙古自治區(qū)科技進(jìn)步二等獎;“生鮮乳質(zhì)量安全風(fēng)險評估示范推廣與應(yīng)用”獲得2018年內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)豐收一等獎;“生鮮乳質(zhì)量安全控制關(guān)鍵技術(shù)及應(yīng)用”獲得國家食品工業(yè)協(xié)會科學(xué)技術(shù)獎二等獎;發(fā)表論文2篇王麗芳,宋潔,李秀萍,張三粉.內(nèi)蒙古地區(qū)生鮮乳中硫氰酸鈉含量的風(fēng)險監(jiān)測[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2019,31(03):1422-1427.楊健,王麗芳,姚一萍,銀永峰.生鮮乳中硫氰酸鈉毒性作用及其機(jī)理[J].畜牧與飼料科學(xué),2017,38(09):44-47.2、組成標(biāo)準(zhǔn)起草組,制定工作方案根據(jù)內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會推進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)化工作安排,內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、呼和浩特市農(nóng)牧技術(shù)推廣中心、國家乳業(yè)技術(shù)創(chuàng)新中心。作為《硫代葡萄糖苷在奶畜體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程》制定的起草單位,組織專業(yè)技術(shù)人員組建了標(biāo)準(zhǔn)制定工作小組,工作組成員都是長期從事動物營養(yǎng)/生鮮乳相關(guān)領(lǐng)域的科研人員,具有較豐富的專業(yè)知識和實踐經(jīng)驗,熟悉業(yè)務(wù),了解標(biāo)準(zhǔn)化工作的相關(guān)規(guī)定并具有較強(qiáng)的文字表達(dá)能力。標(biāo)準(zhǔn)制定工作小組成立后,制定了詳細(xì)的標(biāo)準(zhǔn)起草工作實施方案,明確了內(nèi)部分工及進(jìn)度要求,責(zé)任逐項落實到人。表1標(biāo)準(zhǔn)參與編寫人員及其所做的工作姓名工作單位職稱主要工作內(nèi)容王麗芳內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院研究員項目主持人,負(fù)責(zé)方案設(shè)計,標(biāo)準(zhǔn)編寫、驗證和修訂。李秀萍內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院副研究員主要參加人,負(fù)責(zé)方案設(shè)計,標(biāo)準(zhǔn)編寫,驗證和修訂。楊健呼和浩特市農(nóng)牧技術(shù)推廣中心高級畜牧師主要參加人,負(fù)責(zé)方案設(shè)計,標(biāo)準(zhǔn)編寫,驗證和修訂。宋潔內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院副研究員主要參加人,負(fù)責(zé)方案設(shè)計,標(biāo)準(zhǔn)編寫,驗證和修訂。郭晨陽內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院助理研究員主要參加人,參與標(biāo)準(zhǔn)的方案設(shè)計和指標(biāo)驗證。張騰龍內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院助理研究員主要參加人,參與標(biāo)準(zhǔn)的方案設(shè)計和指標(biāo)驗證。鐘華晨內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院助理研究員主要參加人,參與標(biāo)準(zhǔn)的方案設(shè)計和指標(biāo)驗證。劉嘉琳內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院研究實習(xí)員主要參加人,參與標(biāo)準(zhǔn)的方案設(shè)計和指標(biāo)驗證。張瑩內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院研究實習(xí)員主要參加人,參與標(biāo)準(zhǔn)的方案設(shè)計和指標(biāo)驗證。李琴國家乳業(yè)技術(shù)創(chuàng)新中心高級工程師主要參加人,參與標(biāo)準(zhǔn)的方案設(shè)計和指標(biāo)驗證。羿靜內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院研究員主要參加人,參與標(biāo)準(zhǔn)的方案設(shè)計和指標(biāo)驗證。3、完善標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容,形成標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿在上述工作基礎(chǔ)上,結(jié)合內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院科技人員在不同地區(qū)采集生鮮乳樣本,通過實驗室分析獲得相關(guān)數(shù)據(jù),于2025年7月編制形成了征求意見稿。四、制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù),與現(xiàn)行法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系1、編制原則本標(biāo)準(zhǔn)以實用性、先進(jìn)性、科學(xué)性和經(jīng)濟(jì)可操作性為基本原則,主要技術(shù)指標(biāo)來源于內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院采集不同年份、不同地區(qū)奶牛養(yǎng)殖場的生鮮乳樣本,以及不同畜種(奶牛和奶山羊)規(guī)?;B(yǎng)殖場含有菜粕的全混合日糧及奶罐奶樣本,經(jīng)過實驗室分析所得數(shù)據(jù),同時參考國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)制定。2、編制依據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。以實用性、科學(xué)性和可操作性為基本原則。3、與現(xiàn)行法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系完全符合現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn),無任何與現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)違背之處。目前,我國還沒有標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定生鮮乳中硫氰酸鈉的限量值,僅有國家食品藥品監(jiān)管總局“2015年食品安全抽檢監(jiān)測項目參考值”中規(guī)定液體乳中SCN含量的參考值為10mg/kg。五、主要條款的說明,主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗驗證的論述主要條款說明本標(biāo)準(zhǔn)包含(1)封面;(2)前言;(3)標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容含5章:1范圍、2規(guī)范性引用文件、3術(shù)語和定義、4試驗程序、5資料存檔。(二)主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗論證的論述主要起草人近年來在主持國家奶產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估重大專項和內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)創(chuàng)新基金等項目中,開展了大量相關(guān)研究。由于硫代葡萄糖苷在奶畜體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化生成的硫氰酸鹽是國家每年生鮮乳例行監(jiān)測必檢參數(shù),但我國還沒有規(guī)定生鮮乳中的檢測標(biāo)準(zhǔn)和限量值,僅有國家食品藥品監(jiān)管總局“2015年食品安全抽檢監(jiān)測項目參考值”中規(guī)定液體乳中SCN含量的參考值為10mg/kg。目前,許多奶畜養(yǎng)殖場禁止菜籽餅粕等十字花科植物飼料在奶畜養(yǎng)殖中使用,極大限制了菜籽餅粕等的利用。因此,非常有必要建立“硫代葡萄糖苷在奶畜體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化試驗技術(shù)規(guī)程”,探明菜籽餅粕等十字花科植物飼料的添加量為多少時,乳中SCN含量不超過參考限量值10mg/kg。1內(nèi)蒙古地區(qū)生鮮乳中硫氰酸鈉含量風(fēng)險監(jiān)測內(nèi)蒙古地區(qū)2013-2017年不同年份生鮮乳中SCN含量比較圖1為濃度0.8mg/L的SCN標(biāo)準(zhǔn)溶液在離子色色譜圖上出峰時間,圖2為不同濃度(0.02、0.05、0.08、0.20、0.40、0.60、0.80mg/L)SCN在離子色譜上測得的相應(yīng)面積的相關(guān)曲線圖,相關(guān)系數(shù)(R2)為0.9998,表明標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好,檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。圖1SCN標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.8mg/L)離子色譜圖(氫氧根體系)圖2SCN回歸曲線圖由表1不同年份對比結(jié)果可知,內(nèi)蒙古地區(qū)2013-2017年2443批次生鮮乳中SCN含量均有不同程度地檢出,檢出范圍在0~12.00mg/kg之間。歷年生鮮乳中SCN檢出平均值在1.67~3.79mg/kg之間,其中2013年平均值最高(P<0.05),2017年平均值最低(P<0.05);SCN檢出率在32.20%~99.09%之間??傮w看來,歷年生鮮乳中SCN平均值和檢出率均呈逐年下降趨勢。其原因可能與在國家政策和乳品企業(yè)的正確引導(dǎo)下,奶牛養(yǎng)殖場養(yǎng)殖人員在奶牛飼喂方面采用了科學(xué)的方法,減少了含有SCN前體硫代葡萄糖苷的菜籽餅粕等十字花科植物飼料的使用有關(guān)。表1內(nèi)蒙古地區(qū)2013-2017年生鮮乳中SCN含量平均值的同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。內(nèi)蒙古不同地區(qū)生鮮乳中SCN含量內(nèi)蒙古地區(qū)10個盟市生鮮乳中SCN含量平均值在1.79~5.81mg/kg之間。其中,錫林郭勒盟生鮮乳中SCN含量平均值最高,為5.81mg/kg(P<0.05);呼倫貝爾市生鮮乳中SCN含量檢出的最大值最高,為12.0mg/kg,超過國家食品藥品監(jiān)管總局液體乳中10mg/kg的SCN含量參考值;包頭市和鄂爾多斯市生鮮乳中SCN檢出率最高,為100.0%。進(jìn)一步通過深入分析發(fā)現(xiàn),呼倫貝爾地區(qū)生鮮乳中SCN含量高于其他盟市,最大值為12mg/kg。其可能原因與呼倫貝爾市飼料原料種類有關(guān)。呼倫貝爾市油菜種植面積大且產(chǎn)量高,油菜榨油后的副產(chǎn)物菜籽粕一般用于飼喂奶牛,因此這可能導(dǎo)致乳中SCN含量增加。這也提示,對于奶牛,油菜籽/粕的飼喂應(yīng)該制定相關(guān)的飼喂規(guī)程,以減少生鮮乳中SCN含量超過參考值的風(fēng)險,進(jìn)而影響生鮮乳質(zhì)量安全,引起食品安全問題,對人們的健康產(chǎn)生影響。表2內(nèi)蒙古不同地區(qū)生鮮乳中SCN含量硫代葡萄糖苷在奶畜體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化規(guī)律研究2.1硫代葡萄糖苷在奶牛體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化研究為研究菜粕中硫代葡萄糖苷水平對奶牛生乳硫氰酸鈉含量的影響,選取內(nèi)蒙古地區(qū)規(guī)模化奶牛養(yǎng)殖場(泌乳牛存欄量≥5000頭)作為試驗基地。牧場均采用全混合日糧(TMR)飼喂模式,并將菜粕作為重要的植物蛋白來源均勻加入。試驗期間,泌乳牛群平均產(chǎn)奶量為36-39kg/頭/天,干物質(zhì)采食量(DMI)維持在23.0-27.3kg/頭/天,符合高產(chǎn)奶牛營養(yǎng)需求標(biāo)準(zhǔn)。采集牧場TMR飼料檢測其中硫代葡萄糖苷水平,同時采集奶罐奶樣品(代表數(shù)千頭奶牛的全混合乳樣)分析硫氰酸鈉含量。結(jié)果顯示,TMR飼料中硫代葡萄糖苷含量范圍為0.36μmol/g-0.69μmol/g,奶罐奶樣品中SCN含量為8.98-9.80mg/kg,低于10mg/kg的參考限量值,飼料中硫代葡萄糖苷轉(zhuǎn)化為奶中SCN轉(zhuǎn)化率為34.93%-71.50%(圖3)。圖3飼料硫代葡萄糖苷轉(zhuǎn)化為牛奶中SCN代謝轉(zhuǎn)化規(guī)律研究硫代葡萄糖苷在奶山羊體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化研究為研究菜粕中硫代葡萄糖苷水平對奶山羊生乳硫氰酸鈉含量的影響,選取規(guī)模化奶山羊養(yǎng)殖場(泌乳羊存欄量≥3000頭)作為試驗基地。牧場均采用全混合日糧(TMR)飼喂模式,其中菜粕作為蛋白原料均勻加入。試驗期間,泌乳奶山羊平均產(chǎn)奶量為3.3kg/只/天,干物質(zhì)采食量(DMI)維持在3.0kg/只/天。采集牧場TMR飼料檢測其中硫代葡萄糖苷水平,同時采集奶罐奶樣品(代表數(shù)千頭奶山羊的全混合乳樣)分析硫氰酸鈉含量。結(jié)果顯示,TMR飼料中硫代葡萄糖苷含量為0.44μmol/g,奶罐奶樣品中SCN含量為7.41m

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