ICS67.050DB22DB22/T2992—2019人參中噻菌靈等20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法Determinationof20pesticidesresiduesincludingthiabendazoleetcinginseng-Ultrahighperformanceliquidchromatography-tademmassspectrometry吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布IDB22/T2992—2019本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省農(nóng)業(yè)委員會提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：許煊煒、趙丹、梁爽、孟欣欣、逯洲、張敏、陳穎、朱艷萍、李月茹。DB22/T2992—20191人參中噻菌靈等20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法警示——使用本標(biāo)準(zhǔn)的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本標(biāo)準(zhǔn)并未指出所有可能的安全問題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了人參中噻菌靈等20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于生曬參和紅參中噻菌靈、涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、噻蟲嗪、吡蟲啉、3-羥基克百威、啶蟲脒、涕滅威、克百威、甲萘威、乙霉威、烯酰嗎啉、除蟲脲、滅幼脲、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、二甲戊靈、氟啶脲、噠螨靈和阿維菌素20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定。本標(biāo)準(zhǔn)方法檢出限及定量限參見附錄A。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3原理樣品采用乙腈－水均質(zhì)提取，經(jīng)氨基柱凈化，超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀測定，外標(biāo)法定量。4試驗(yàn)條件環(huán)境條件溫度在18℃~25℃,濕度在25%～75%。5試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。5.1試劑5.1.1水，GB/T6682，一級。5.1.2乙腈（CH3CN，75-05-8）。5.1.3甲醇（CH3OH，67-56-1），色譜純。5.1.4二氯甲烷（CH2Cl2，75-09-2）。5.1.5甲酸銨（HCOONH4，540-69-2），色譜純。2DB22/T2992—20195.1.6氯化鈉（NaCl，7647-14-5）。5.2溶液配制5.2.15mmol/L甲酸銨水溶液，稱取0.315g甲酸銨，用水溶解后稀釋至1000mL。5.2.2二氯甲烷-甲醇混合液（95+5，V1+V2950mL二氯甲烷和50mL甲醇充分混勻。5.2.3甲醇-水混合液（50+50，V1+V2500mL甲醇與500mL水混勻后超聲脫氣15min。5.3標(biāo)準(zhǔn)品20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息見附錄A。5.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制5.4.1標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液分別準(zhǔn)確稱取一定量（精確至0.1mg）農(nóng)藥或相關(guān)化學(xué)品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用甲醇溶解，逐一配成100μg/mL的單一標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，低于-18℃條件下密封保存，使用期為6個月。5.4.2標(biāo)準(zhǔn)中間溶液分別準(zhǔn)確吸取1mL20種標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（5.4.1）于10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，逐一配制成濃度為10μg/mL的20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品的標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，4℃條件下避光保存，使用期5.4.3混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液根據(jù)表A.1中標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，用甲醇-水混合液（5.2.3）將20種農(nóng)藥或相關(guān)化學(xué)品稀釋成系列混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，需現(xiàn)用現(xiàn)配，此標(biāo)準(zhǔn)溶液用于配制基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。5.5材料5.5.1氨基固相萃取小柱，500mg/6mL(或性能相當(dāng)?shù)钠渌滔噍腿≈?。5.5.2微孔濾膜（尼龍），0.22μm。6儀器設(shè)備6.1超高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜儀，配有電噴霧離子源。6.2電子天平，感量0.01g和0.0001g。6.3離心機(jī)，不低于4000r/min。6.4高速粉碎機(jī)。6.5均質(zhì)機(jī)，不低于20000r/min。6.6恒溫水浴鍋。6.7旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。6.8氮吹儀。6.10具塞離心管，50mL。6.11樣品篩，孔徑250μm。6.12濃縮管，50mL。DB22/T2992—201936.13刻度離心管，15mL。7樣品取不少于100g生曬參或紅參樣品用高速粉碎機(jī)（6.4）制成粉末，過250μm篩（6.11充分混勻后裝入樣品密封盒中低于-18℃密封保存，備用。8試驗(yàn)步聚8.1樣品預(yù)處理8.1.1提取稱取2g樣品，精確至0.01g，于50mL具塞離心管（6.10）中，加入10mL水搖勻，浸泡30min，加入20mL乙腈，于均質(zhì)機(jī)中高速均質(zhì)（20000r/min）1min，向離心管中加入2.5g氯化鈉（5.1.6），繼續(xù)均質(zhì)1min，密封后置于離心機(jī)（4000r/min）離心10min。吸取10mL上層有機(jī)相于50mL濃縮管（6.12）中，60℃水浴中氮?dú)獯抵两?，?mL二氯甲烷-甲醇混合液（5.2.2）溶解殘?jiān)?，蓋上鋁箔，待凈化。8.1.2凈化氨基柱固相萃取小柱（5.5.1）用5mL二氯甲烷-甲醇混合液進(jìn)行預(yù)淋洗，當(dāng)溶劑液面下降至填料表面時，再倒入上述濃縮管中待凈化溶液（8.1.1用刻度離心管（6.13）接收，待液面下降至上層填料表面，用10mL二氯甲烷-甲醇混合液分2次沖洗濃縮管并洗脫小柱，將刻度離心管中洗脫液于40℃水浴中氮吹至近干，用甲醇-水混合液（5.2.3）定容至2mL，渦旋混勻過0.22μm濾膜（5.5.2）后轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶中待測。8.1.3基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備稱取7份空白樣品，按8.1.1和8.1.2規(guī)定的方法處理，待洗脫液吹至近干后，分別用7個濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液（表A.1）定容至2mL，過濾膜轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶，用于建立基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。8.2儀器參考條件8.2.1超高效液相色譜條件8.2.1.1色譜柱：XB-C18柱，100mm×2.1mm（id），2.6μm或相當(dāng)者。8.2.1.2流動相：A.5mmol/L甲酸銨水溶液（5.2.1），B.甲醇（5.1.3），梯度洗脫條件見表1。表1超高效液相色譜梯度洗脫條件10526354855565DB22/T2992—201948.2.1.3柱溫：40℃。8.2.1.4進(jìn)樣量：5.0μL。8.2.2質(zhì)譜參考條件8.2.2.1離子化方式：電噴霧離子化。8.2.2.2離子化極性：正模式。8.2.2.3電離電壓：5500V。8.2.2.4霧化氣壓力：0.38MPa。8.2.2.5輔助加熱氣壓力：0.41MPa。8.2.2.6氣簾氣壓力：0.2MPa。8.2.2.7掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。8.2.2.8監(jiān)測離子對、碰撞氣能量和錐孔電壓參見附錄C。8.3標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制分別吸取5.0μL基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作液（8.1.3），以8.2規(guī)定的儀器條件由低濃度到高濃度依次進(jìn)行測定。分別以質(zhì)量濃度（ng/mL）為橫坐標(biāo)，以定量離子峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。8.4測定準(zhǔn)確移取5.0μL制備好的樣品溶液（8.1.2），按照與繪制校準(zhǔn)曲線相同的儀器參考條件進(jìn)行測定，20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品色譜圖參見附錄B。8.5空白試驗(yàn)除不加樣品外，均按8.1～8.4同步進(jìn)行測定。8.6平行試驗(yàn)對同一樣品進(jìn)行2次平行測定。9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理9.1定性分析進(jìn)行樣品測定時，如果被測組分質(zhì)量色譜的保留時間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液保留時間誤差在±2.5%之內(nèi)，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，而且所選擇的離子豐度比與標(biāo)準(zhǔn)品的離子豐度比相一致，且不超過表2規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在此農(nóng)藥或相關(guān)化學(xué)品，如果不能確證，應(yīng)重新進(jìn)樣，以增加其他確證離子的方式或聯(lián)合其他分析儀器輔助確證。表2定性分析時相對離子豐度的最大允許偏差>50%<10%9.2定量分析DB22/T2992—20195做兩份樣品的平行測定。根據(jù)樣液中被測組分的含量情況，用標(biāo)準(zhǔn)曲線對其進(jìn)行分析，對于高濃度樣品須適當(dāng)進(jìn)行系列稀釋。標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣液中被測組分的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)。在上述色譜條件下20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品的保留時間和多反應(yīng)監(jiān)測質(zhì)量色譜圖參見附錄B，外標(biāo)法定量，同時做空白試驗(yàn)。9.3定量計(jì)算樣品中各種農(nóng)藥或化學(xué)品的殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(ωi）計(jì),數(shù)值以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式=×ρ......................ρ——標(biāo)準(zhǔn)曲線校正后所測定該種農(nóng)藥或化學(xué)品的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；V1——提取液中有機(jī)溶劑總體積，單位為毫升（mL）；V2——用于檢測的提取溶液的體積，單位為毫升（mL）；3——樣品溶液定容體積,單位為毫升（mL）；m——稱取樣品的質(zhì)量，單位為克（g）。結(jié)果保留2位有效數(shù)字，10精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率應(yīng)符合附錄D要求。10.2再現(xiàn)性在再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率應(yīng)符合附11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制11.1每20個樣品或每批次（少于20個樣品）樣品應(yīng)至少進(jìn)行一個空白試驗(yàn)，空白值應(yīng)低于方法檢11.2校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.995。11.3每20個樣品或每批次（少于20個樣品）樣品應(yīng)測定一個校準(zhǔn)曲線中間點(diǎn)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，其測定結(jié)果與校準(zhǔn)曲線該點(diǎn)濃度的相對偏差應(yīng)小于20%，否則應(yīng)重新繪制校準(zhǔn)曲線。11.4每20個樣品或每批次（少于20個樣品）應(yīng)至少進(jìn)行一次樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)，回收率應(yīng)在80%~DB22/T2992—2019612試驗(yàn)報告試驗(yàn)報告至少應(yīng)給出以下幾個方面的內(nèi)容：——試驗(yàn)對象；——所使用的標(biāo)準(zhǔn)（包括發(fā)布或出版年號）；——所使用的方法（如果標(biāo)準(zhǔn)中包括幾個方法）；——結(jié)果；——觀察到的異常現(xiàn)象；——試驗(yàn)日期。13特殊情況如果8.4所測定樣品含量超出方法線性范圍，則用甲醇-水混合液（5.2.3）將待測樣品稀釋至線性范圍以內(nèi)，再進(jìn)行測定。DB22/T2992—20197（資料性附錄）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息、檢出限和定量限表A.120種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度、檢出限及定量限CHNS14eCHNOS8CHNOS4CHNOS8CHClNOS28CHClNO5CHNO14CHClN14CHNOS4CHNO2CHNO14CHNO8CHClNO14CHClFNO28CHClNO28CHNO2CHNO28CHClFNO2CHClNOS2CHO4DB22/T2992—20198（資料性附錄）20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品多反應(yīng)監(jiān)測質(zhì)量色譜圖圖B.120種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）質(zhì)量色譜圖DB22/T2992—20199（規(guī)范性附錄）20種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品保留時間及參考質(zhì)譜條件.20藥及相關(guān)化學(xué)品的保留時間及質(zhì)譜條件12