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37MethodfortheseparationandidentificationofepiphyticandendophyticbacteriaofmacroalgaeI本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。2大型海藻附生和內(nèi)生細(xì)菌分離鑒定方法GB/T6682—2008分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和GB/T30744—2014深海微生物樣品前處理技DB37/T4092—2020魚類腸道微生物分離鑒定通用技術(shù)3.13.23.34試劑與耗材4.1.6生理鹽水：0.9％的NaCl溶液。34.1.7保種液。），4.2耗材5.1生化培養(yǎng)箱：培養(yǎng)室溫度能在0℃~60℃范圍5.4玻璃試管：直徑×長(zhǎng)度為18mm×180mm的平口玻璃試管和直徑×長(zhǎng)度為15mm×150mm的平口玻5.7其他生物實(shí)驗(yàn)常規(guī)儀器：超凈工作臺(tái)、漩渦振蕩器、高壓滅菌鍋和酒精燈等。），），4生理鹽水通過(guò)漩渦振蕩器振蕩得到菌懸液。按照GB/T30744相關(guān)規(guī)定，進(jìn)行5GGACTACHVGGGTATCTAAT-5,)對(duì)16SrRNA的V3＋V4區(qū)進(jìn)行擴(kuò)對(duì)擴(kuò)增所得的PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測(cè)，按照DB37/T4092—2020對(duì)檢測(cè)合格的PCR產(chǎn)物進(jìn)行Sanger測(cè)序，測(cè)序結(jié)果與模式菌數(shù)據(jù)庫(kù)EzBioCloud進(jìn)行序列比對(duì)，選取保藏的菌種不能反復(fù)凍融，如取用保藏菌株，需及時(shí)63min5min3min5min10min15min注：“+”代表有菌落長(zhǎng)出；“-”代表無(wú)菌落7

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