高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1山東省菏澤市2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中注意事項(xiàng)：1．本試卷分選擇題和非選擇題兩部分。滿分100分，考試時(shí)間90分鐘。2．答題前，考生務(wù)必將姓名、班級(jí)等個(gè)人信息填寫在答題卡指定位置。3．考生作答時(shí)，請(qǐng)將答案答在答題卡上。選擇題每小題選出答案后，用2B鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑；非選擇題請(qǐng)用直徑0.5毫米黑色墨水簽字筆在答題卡上各題的答題區(qū)域內(nèi)作答。超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效，在試題卷、草稿紙上作答無(wú)效。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求。1.某食品廠采用傳統(tǒng)發(fā)酵工藝制作泡菜，同時(shí)利用現(xiàn)代發(fā)酵工程生產(chǎn)乳酸。對(duì)兩種工藝進(jìn)行比較分析，下列說(shuō)法正確的是（）A.傳統(tǒng)工藝未滅菌，發(fā)酵初期乳酸菌在與雜菌競(jìng)爭(zhēng)中占優(yōu)勢(shì)B.現(xiàn)代工藝需通入無(wú)菌空氣，說(shuō)明乳酸菌為兼性厭氧型微生物C.兩種工藝均需全程嚴(yán)格控制溫度、pH以保障菌種活性D.傳統(tǒng)發(fā)酵以固體發(fā)酵或半固體發(fā)酵為主，發(fā)酵工程以液體發(fā)酵為主【答案】D〖祥解〗（1）泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無(wú)氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗?。?）泡菜的制作流程是：選擇原料、配制鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵。【詳析】A、傳統(tǒng)泡菜發(fā)酵初期，乳酸菌并不一定占優(yōu)勢(shì)，而是隨著發(fā)酵的進(jìn)行，乳酸積累后才會(huì)逐漸占據(jù)主導(dǎo)地位。初期可能以酵母菌、腸桿菌等其他微生物為主，A錯(cuò)誤；B、利用現(xiàn)代發(fā)酵工程生產(chǎn)乳酸，發(fā)酵的主要菌種乳酸菌是厭氧菌，發(fā)酵過(guò)程應(yīng)全程保持無(wú)氧環(huán)境，B錯(cuò)誤；C、傳統(tǒng)發(fā)酵依賴人工經(jīng)驗(yàn)和自然條件調(diào)整，無(wú)需“全程嚴(yán)格控制”（如泡菜制作中，溫度范圍較寬，pH通過(guò)發(fā)酵自然酸化）；而現(xiàn)代發(fā)酵工程通過(guò)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和自動(dòng)化控制，實(shí)現(xiàn)全程精準(zhǔn)管理，C錯(cuò)誤；D、傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主，發(fā)酵工程通常采用單一菌種的液體發(fā)酵，這樣更有利于控制發(fā)酵條件、提高發(fā)酵效率等，D正確。故選D。2.果酒和果醋制作是利用微生物發(fā)酵的傳統(tǒng)技術(shù)。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.制作果酒時(shí)需將葡萄反復(fù)沖洗并滅菌，以避免雜菌污染B.果酒發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)保持無(wú)氧環(huán)境，而轉(zhuǎn)為果醋發(fā)酵時(shí)需通入無(wú)菌空氣C.果醋發(fā)酵階段需將溫度控制在30～35℃，比果酒發(fā)酵的溫度低D.在果酒基礎(chǔ)上制作果醋時(shí)幾乎不產(chǎn)生氣體【答案】D〖祥解〗果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精?！驹斘觥緼、制作果酒時(shí)所需的酵母菌來(lái)源于葡萄表面，因此制作果酒時(shí)無(wú)需將葡萄反復(fù)沖洗并滅菌，A錯(cuò)誤；B、果酒發(fā)酵過(guò)程中先有氧后無(wú)氧，有氧的目的是有利于酵母菌的增殖，果醋發(fā)酵時(shí)需通入無(wú)菌空氣，B錯(cuò)誤；C、果醋發(fā)酵階段需將溫度控制在30～35℃，果酒發(fā)酵的溫度約25～30℃，比果酒發(fā)酵的溫度高，C錯(cuò)誤；D、在果酒基礎(chǔ)上制作果醋時(shí)，是將乙醇氧化為醋酸，幾乎不產(chǎn)生氣體，D正確。故選D。3.紹興黃酒的傳統(tǒng)釀造工藝包括蒸米、拌曲、糖化、發(fā)酵、壓榨等步驟。下列說(shuō)法正確的是（）A.蒸米環(huán)節(jié)有利于微生物獲取豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.糖化階段需密封容器，以促進(jìn)霉菌的無(wú)氧呼吸將淀粉分解為葡萄糖C.發(fā)酵過(guò)程中需定期攪拌，為酵母菌提供氧氣，加快其繁殖D.酒精生成后可用溴麝香草酚藍(lán)溶液檢測(cè)發(fā)酵液中的酒精含量【答案】A〖祥解〗酵母菌是兼性厭氧微生物，在無(wú)氧條件下能進(jìn)行酒精發(fā)酵，可用于釀酒、制作饅頭和面包等。溫度是影響酵母菌生長(zhǎng)的重要因素，釀酒酵母的最適生長(zhǎng)溫度約為28℃。【詳析】A、蒸米的目的可使米粒吸水膨脹，便于后續(xù)的糖化和發(fā)酵，同時(shí)高溫可使細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞，有利于米中的淀粉、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被微生物利用，因此蒸米環(huán)節(jié)有利于微生物獲取豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，A正確；B、由于釀酒酵母不能直接利用淀粉發(fā)酵產(chǎn)生酒精，故糖化過(guò)程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶將淀粉分解為葡萄糖，霉菌產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉分解為葡萄糖不屬于霉菌的無(wú)氧呼吸過(guò)程，B錯(cuò)誤；C、酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精屬于無(wú)氧呼吸過(guò)程，因此發(fā)酵過(guò)程中不需要定期攪拌，C錯(cuò)誤；D、是否生成了酒精可以用酸性的重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)，D錯(cuò)誤。故選A。4.在發(fā)酵工程中，利用谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸。下列說(shuō)法正確的是（）A.優(yōu)良的菌種只能從自然界已有的菌種中選育B.菌種擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)為了防止雜菌污染，可加入大量抗生素C.發(fā)酵過(guò)程中需要嚴(yán)格控制溫度、pH等條件，以保證菌種的生長(zhǎng)和代謝D.在發(fā)酵結(jié)束之后，可采用過(guò)濾、沉淀等方法分離提純谷氨酸【答案】C〖祥解〗發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等方面。發(fā)酵工程以其生產(chǎn)條件溫和、原料來(lái)源豐富且價(jià)格低廉、產(chǎn)物專一、廢棄物對(duì)環(huán)境的污染小和容易處理等特點(diǎn)，在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)和農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，形成了規(guī)模龐大的發(fā)酵工業(yè)?！驹斘觥緼、優(yōu)良的菌種可以從自然界中篩選、可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得，A錯(cuò)誤；B、抗生素主要用于治療細(xì)菌感染，在發(fā)酵工程中一般不使用抗生素來(lái)防止雜菌污染，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵過(guò)程中需要嚴(yán)格控制溫度、pH等發(fā)酵條件，以保證菌種的生長(zhǎng)和代謝，C正確；D、如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可采用過(guò)濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥，而谷氨酸是代謝物，應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)奶崛?、分離和純化措施來(lái)獲取產(chǎn)品，D錯(cuò)誤。故選C。5.某科研小組想要篩選出某種維生素缺陷型菌株，采用與影印法類似的技術(shù)（用無(wú)菌的特殊材質(zhì)的絲絨布覆蓋在長(zhǎng)滿菌落的原培養(yǎng)基上，然后不轉(zhuǎn)動(dòng)角度，“復(fù)印”到新培養(yǎng)基）進(jìn)行初檢。下列關(guān)于該過(guò)程的相關(guān)操作及說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.原培養(yǎng)基上的菌落分布是通過(guò)稀釋涂布平板法獲得的，接種后需靜置待菌液吸收再倒置培養(yǎng)B.進(jìn)行影印操作時(shí)，應(yīng)先“復(fù)印”到不含該維生素的基本培養(yǎng)基上，再“復(fù)印”到含該維生素的完全培養(yǎng)基上C.維生素缺陷型菌株應(yīng)從基本培養(yǎng)基上沒(méi)有菌落生長(zhǎng)，而完全培養(yǎng)基上對(duì)應(yīng)位置有菌落的地方挑選D.絲絨布使用前需滅菌，且每次“復(fù)印”后需重新滅菌以避免不同培養(yǎng)基間的交叉污染【答案】D〖祥解〗運(yùn)用“影印法”將分離的菌株接種到兩種培養(yǎng)基中：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長(zhǎng)，而在完全培養(yǎng)基中氨基酸缺陷型菌株能夠生長(zhǎng)，因此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株?！驹斘觥緼、通過(guò)稀釋涂布平板法是為了獲得均勻分布的菌落，接種后待菌液被吸收后，再倒置培養(yǎng)，以放置雜菌污染，A正確；B、由于維生素缺陷型菌株缺乏合成維生素的能力，所以在基本培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，在完全培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，所以進(jìn)行影印操作時(shí)，應(yīng)先“復(fù)印”到不含該維生素的基本培養(yǎng)基上，再“復(fù)印”到含該維生素的完全培養(yǎng)基上，B正確；C、由于維生素缺陷型菌株缺乏合成維生素的能力，所以在基本培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，在完全培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，即維生素缺陷型菌株應(yīng)從基本培養(yǎng)基上沒(méi)有菌落生長(zhǎng)，而完全培養(yǎng)基上對(duì)應(yīng)位置有菌落的地方挑選，C正確；D、在該操作時(shí)，絲絨布使用前需滅菌，以防止雜菌污染，但為了達(dá)到“復(fù)印”的目的，每次“復(fù)印”后無(wú)需重新滅菌，D錯(cuò)誤。故選D。6.下列有關(guān)菊花組織培養(yǎng)的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有全能性B.誘導(dǎo)形成愈傷組織過(guò)程中不需要光照，但再分化過(guò)程需要光照C.對(duì)外植體進(jìn)行消毒時(shí)先用酒精后用次氯酸鈉溶液依次處理D.培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素的濃度是影響該過(guò)程中植物細(xì)胞發(fā)育方向的關(guān)鍵因素【答案】D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過(guò)程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株?！驹斘觥緼、已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能，植物細(xì)胞的全能性是植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)之一，A正確；B、外植體脫分化形成愈傷組織的過(guò)程一般不需要光照，但愈傷組織再分化形成胚狀體的過(guò)程需要光照，B正確；C、植物組織培養(yǎng)時(shí)外植體用流水充分清洗后用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s，用無(wú)菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉溶液處理30分鐘，立即用無(wú)菌水清洗2-3次，C正確；D、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度和比例等會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向，是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素，D錯(cuò)誤。故選D。7.下列關(guān)于圖示植物細(xì)胞工程相關(guān)操作的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.葉片經(jīng)消毒后需用流水多次沖洗，以避免消毒劑長(zhǎng)時(shí)間作用而產(chǎn)生毒害作用B.步驟②保溫18h可使酶充分發(fā)揮作用還可以讓原生質(zhì)體更好地沉降到培養(yǎng)皿底部C.步驟③吸掉酶液后用清洗培養(yǎng)基清洗原生質(zhì)體，可防止酶對(duì)原生質(zhì)體造成持續(xù)作用D.步驟⑤獲得雜交植株體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性【答案】A〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)指將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)，其過(guò)程為：植物細(xì)胞A與植物細(xì)胞B用纖維素酶和果膠酶處理，得到不含細(xì)胞壁的原生質(zhì)體A和原生質(zhì)體B，運(yùn)用物理方法或是化學(xué)方法誘導(dǎo)融合，形成雜種細(xì)胞，再利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植物體?！驹斘觥緼、葉片經(jīng)消毒后需用無(wú)菌水沖洗，以避免消毒劑長(zhǎng)時(shí)間作用而產(chǎn)生毒害作用，A錯(cuò)誤；B、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素酶和果膠酶，利用纖維素酶和果膠酶處理可獲得原生質(zhì)體，由圖中①→②的過(guò)程可知，步驟②保溫18h可使酶充分發(fā)揮作用還可以讓原生質(zhì)體更好地沉降到培養(yǎng)皿底部，B正確；C、步驟③吸掉酶液后用清洗培養(yǎng)基清洗原生質(zhì)體，可終止酶反應(yīng)，避免持續(xù)損傷原生質(zhì)體，C正確；D、步驟⑤是將雜交細(xì)胞培養(yǎng)為雜種植株，利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，D正確。故選A。8.下圖展示了通過(guò)關(guān)鍵基因表達(dá)將體細(xì)胞重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），并進(jìn)一步分化為不同類型細(xì)胞的過(guò)程。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)需破壞胚胎，還可以避免免疫排斥B.可通過(guò)直接將特定蛋白導(dǎo)入成纖維細(xì)胞的方法制備iPS細(xì)胞C.iPS細(xì)胞具有分化為多種類型細(xì)胞的潛能，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性D.利用iPS細(xì)胞進(jìn)行①②③過(guò)程時(shí)應(yīng)加入分化誘導(dǎo)因子【答案】C〖祥解〗圖示表示將4個(gè)關(guān)鍵基因移植入已分化的體細(xì)胞中并表達(dá)，使這個(gè)細(xì)胞成為具有類似干細(xì)胞的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）。圖中①②③表示細(xì)胞分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。用該技術(shù)得到的新生器官替換供體病變器官，屬于自體移植，不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這可以大大提高器官移植成功率?！驹斘觥緼、iPS技術(shù)不使用胚胎細(xì)胞或卵細(xì)胞，只需對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行操作及適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)即可，無(wú)需破壞胚胎，由于該技術(shù)屬于自體移植，還可以避免免疫排斥，A正確；B、制備iPS細(xì)胞可借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞，也可直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或用小分子化合物等來(lái)誘導(dǎo)，B正確；C、細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍然具有發(fā)育成完整生物體或其他各種細(xì)胞的潛能，iPS細(xì)胞具有分化為多種類型細(xì)胞的潛能，但由于沒(méi)有形成個(gè)體，因此不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，C錯(cuò)誤；D、圖中①②③表示誘導(dǎo)細(xì)胞分化形成不同結(jié)構(gòu)的細(xì)胞，因此利用iPS細(xì)胞進(jìn)行①②③過(guò)程時(shí)應(yīng)加入分化誘導(dǎo)因子，D正確。故選C。9.抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）在癌癥治療中展現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。已知ADC通過(guò)將藥物與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.單克隆抗體制備過(guò)程中通常將免疫后得到的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合B.制備單克隆抗體時(shí)，為獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，需進(jìn)行至少兩次篩選C.ADC以胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，該過(guò)程需要消耗能量D.釋放到腫瘤細(xì)胞內(nèi)的小分子藥物發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞壞死【答案】D〖祥解〗題圖分析：抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)通過(guò)將具有生物活性的小分子藥物與單克隆抗體結(jié)合，被腫瘤細(xì)胞特異性識(shí)別，通過(guò)胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，導(dǎo)致溶酶體裂解，釋放藥物，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。【詳析】A、單克隆抗體制備過(guò)程中通常將免疫后得到B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交B-瘤雜交細(xì)胞，A正確；B、制備單克隆抗體時(shí)，為獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，需進(jìn)行至少兩次篩選，一是通過(guò)HAT培養(yǎng)基獲得雜交瘤細(xì)胞，二是使用抗體檢測(cè)，獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；C、ADC以胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，該過(guò)程需要消耗能量ATP，C正確；D、釋放到腫瘤細(xì)胞內(nèi)的小分子藥物發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡，屬于細(xì)胞凋亡，由溶酶體裂解，釋放藥物，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡，D錯(cuò)誤。故選D。10.科研人員為探究抗CD47的單克隆抗體對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬作用的影響，進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)（如圖）。已知CD47是一種跨膜糖蛋白，可與巨噬細(xì)胞膜上受體結(jié)合并抑制其吞噬作用，多種腫瘤細(xì)胞表面CD47含量高于正常細(xì)胞。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.步驟①用CD47免疫小鼠，是為了得到能分泌抗CD47抗體的B淋巴細(xì)胞B.可用滅活病毒誘導(dǎo)②過(guò)程使兩種細(xì)胞融合C.在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中加入抗CD47抗體可直接抑制腫瘤細(xì)胞的增殖D.該單克隆抗體可能通過(guò)阻斷CD47與巨噬細(xì)胞膜上受體的結(jié)合增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用【答案】C〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥緼、步驟①用CD47免疫小鼠，CD47作為抗原，可以刺激小鼠發(fā)生免疫反應(yīng)，得到能分泌抗CD47抗體的B淋巴細(xì)胞，A正確；B、誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞融合，可以用滅活的病毒，B正確；C、CD47與巨噬細(xì)胞膜上受體結(jié)合并抑制其吞噬作用，所以在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中加入抗CD47抗體不能直接抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，C錯(cuò)誤；D、由題意可知，CD47是一種在多種細(xì)胞中廣泛表達(dá)的跨膜糖蛋白，能夠與巨噬細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，并抑制其吞噬作用，所以該單克隆抗體可能通過(guò)阻斷CD47與巨噬細(xì)胞膜上受體的結(jié)合增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，D正確。故選C。11.某科研團(tuán)隊(duì)從雄鼠身上提取皮膚細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，然后用藥物剔除其中的Y染色體，再向另一細(xì)胞獲取一個(gè)X染色體，并將兩個(gè)X染色體巧妙地“粘”在一起，擁有兩個(gè)X染色體的干細(xì)胞在卵巢類器官中培養(yǎng)變成卵細(xì)胞，當(dāng)這些卵子與正常精子受精后，科學(xué)家們獲得了約600個(gè)胚胎，并將其植入代孕老鼠體內(nèi)。最終，代孕老鼠誕生了7只生物學(xué)意義上“雙父無(wú)母”小鼠幼崽。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.這7只生物學(xué)意義上“雙父無(wú)母”小鼠的性別可以為雌性B.這項(xiàng)技術(shù)可用于繁殖僅存雄性的瀕危哺乳動(dòng)物C.將兩個(gè)X染色體“粘”在一起，可能影響染色體結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，導(dǎo)致細(xì)胞分裂異常D.約600個(gè)胚胎最終只得到7只小鼠幼崽，可能因?yàn)椴僮鞑划?dāng)影響了卵細(xì)胞的質(zhì)量【答案】B〖祥解〗科學(xué)家已嘗試采用多種方法來(lái)制備iPS細(xì)胞，包括借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中，直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來(lái)誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的，后來(lái)發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞?！驹斘觥緼、7只小鼠在生物學(xué)意義上是“雙父無(wú)母”的，但其由卵細(xì)胞和精子結(jié)合得來(lái)，體內(nèi)性染色體組成為XX或XY，因此性別可以為雌性，A正確；B、該項(xiàng)研究成果形成的干細(xì)胞仍需要在卵巢類器官中培養(yǎng)，因此若僅存雄性的瀕危哺乳動(dòng)物的種群，仍然不能繁殖，B錯(cuò)誤；C、將兩個(gè)X染色體“粘”在一起，可能影響著絲粒分裂，導(dǎo)致細(xì)胞分裂異常，C正確；D、約600個(gè)胚胎最終只得到7只小鼠幼崽，可能因?yàn)椴僮鞑划?dāng)影響了卵細(xì)胞的質(zhì)量，導(dǎo)致胚胎發(fā)育成功率低，D正確。故選B。12.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的說(shuō)法，正確的是（）A.以洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B.對(duì)研磨液進(jìn)行離心是為了加速DNA的沉淀C.與家兔血相比，洋蔥更適合用于DNA的粗提取與鑒定D.加入預(yù)冷酒精溶液后離心，取上清液備用【答案】C〖祥解〗DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的?！驹斘觥緼、細(xì)胞生物中都含有DNA，DNA的粗提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、離心研磨液的目的是加速沉淀，離心能夠加速細(xì)胞膜、細(xì)胞器、一些較大雜質(zhì)的沉淀，而不是DNA的沉淀，B錯(cuò)誤；C、家兔為哺乳動(dòng)物，成熟紅細(xì)胞不含細(xì)胞核和細(xì)胞器，而洋蔥中DNA含量較高，因此與家兔血相比，洋蔥更適合用于DNA的粗提取與鑒定，C正確；D、DNA不溶于體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精，因此加入預(yù)冷酒精溶液后靜置2-3分鐘，溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA，D錯(cuò)誤。故選C。13.AI技術(shù)通過(guò)大數(shù)據(jù)分析等方法，為生物醫(yī)藥研究、臨床診斷和治療等帶來(lái)革命性的變化。下列關(guān)于AI技術(shù)在生物醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.AI技術(shù)能預(yù)測(cè)患者體內(nèi)某些蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)并設(shè)計(jì)新藥物，屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)B.AI篩選出與患者某疾病相關(guān)的基因并設(shè)計(jì)相應(yīng)基因編輯方案，屬于基因工程技術(shù)C.蛋白質(zhì)工程可通過(guò)分析蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)新基因，從而改造或制造新的蛋白質(zhì)D.AI根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列推導(dǎo)出的DNA序列不包含啟動(dòng)子和終止子【答案】A〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來(lái)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱為第二代的基因工程。其基本途徑為：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），最終還是回到基因工程上來(lái)解決蛋白質(zhì)的合成。【詳析】A、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，利用AI技術(shù)設(shè)計(jì)新藥物，沒(méi)有對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，不屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，A錯(cuò)誤；B、AI篩選出與患者某疾病相關(guān)的基因并設(shè)計(jì)相應(yīng)基因編輯方案，屬于基因工程技術(shù)中的基因編輯，B正確；C、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求，C正確；D、啟動(dòng)子和終止子位于基因結(jié)構(gòu)中的非編碼區(qū)，基因的編碼區(qū)通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯形成具有一定氨基酸序列的蛋白質(zhì)，因此由氨基酸序列推理的基因序列中不包含啟動(dòng)子和終止子，D正確。故選A。14.下圖為利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的部分過(guò)程示意圖，已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.質(zhì)粒A通常需要經(jīng)過(guò)限制酶處理，以便與目的基因結(jié)合B.工程菌的構(gòu)建過(guò)程中，a點(diǎn)的位置決定了目的基因的插入位置C.將完成導(dǎo)入的細(xì)菌B接種在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上，能生長(zhǎng)的是導(dǎo)入質(zhì)粒A的細(xì)菌D.重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B后，在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)的細(xì)菌是工程菌【答案】D〖祥解〗圖示表示將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的過(guò)程。質(zhì)粒A上含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體后，破壞了質(zhì)粒A的抗氨芐青霉素基因，但抗四環(huán)素基因正常，所以導(dǎo)入重組質(zhì)?；蚱胀ㄙ|(zhì)粒的大腸桿菌都能抗四環(huán)素，但導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能抗氨芐青霉素。【詳析】A、質(zhì)粒A通常需要經(jīng)過(guò)限制酶處理，使其出現(xiàn)與目的基因兩端相同的黏性末端，以便與目的基因結(jié)合，A正確；B、根據(jù)題意可知，a點(diǎn)為目的基因與質(zhì)粒的結(jié)合點(diǎn)，因此工程菌的構(gòu)建過(guò)程中，a點(diǎn)的位置決定了目的基因的插入位置，B正確；C、根據(jù)圖示可知，質(zhì)粒A上含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體后，破壞了質(zhì)粒A的氨芐青霉素抗性基因，但四環(huán)素抗性基因正常，因此將完成導(dǎo)入的細(xì)菌B接種在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上，能生長(zhǎng)的是導(dǎo)入質(zhì)粒A的細(xì)菌，C正確；D、由于質(zhì)粒A和重組質(zhì)粒上都有抗四環(huán)素基因，因此重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B后，在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)的細(xì)菌不一定是工程菌，也可能是導(dǎo)入了質(zhì)粒A的細(xì)菌，D錯(cuò)誤。故選D。15.生物技術(shù)是把雙刃劍，給人類帶來(lái)“福音”的同時(shí)也帶來(lái)了一些爭(zhēng)議。下列觀點(diǎn)正確的是（）A.人類存在多種遺傳疾病，而治療性克隆是治療人類遺傳病的根本措施B.轉(zhuǎn)基因食品的危害性在于過(guò)多食用會(huì)導(dǎo)致人體出現(xiàn)外源性基因C.可以在嚴(yán)格監(jiān)管下進(jìn)行生殖性克隆和治療性克隆研究D.將多種抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞可以延緩棉鈴蟲種群對(duì)抗蟲蛋白產(chǎn)生抗性【答案】D〖祥解〗生物技術(shù)安全性問(wèn)題包括食物安全、生物安全、環(huán)境安全三個(gè)方面。倫理問(wèn)題主要在克隆人的問(wèn)題上出現(xiàn)爭(zhēng)議?！驹斘觥緼、基因治療是治療遺傳病的根本措施，A錯(cuò)誤；B、食用轉(zhuǎn)基因食品后，基因（DNA）會(huì)被消化系統(tǒng)分解為核苷酸，不會(huì)以基因的形式直接進(jìn)入人體細(xì)胞，因此不會(huì)在人體內(nèi)出現(xiàn)外源性基因，B錯(cuò)誤；C、中國(guó)政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)，但不反對(duì)治療性克隆，C錯(cuò)誤；D、將多種抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞可獲得多種不同抗蟲機(jī)制的棉花，可減少單一選擇壓力，延緩害蟲抗性進(jìn)化，即可以延緩棉鈴蟲種群對(duì)抗蟲蛋白產(chǎn)生抗性，D正確。故選D。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個(gè)或多個(gè)選項(xiàng)符合題目要求，全部選對(duì)得3分，選對(duì)但不全的得1分，有選錯(cuò)的得0分。16.某同學(xué)研究植物提取物W的抑菌效果，采用打孔法在試驗(yàn)菌平板上加入W，培養(yǎng)后測(cè)量抑菌圈直徑及平均增幅速率，結(jié)果如表。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）提取物W擴(kuò)散時(shí)間/h2468101214抑菌圈直徑/mm8.012.018.026.036.048.055.0抑菌圈平均增幅速率（mm/h）1.001.502002.503.003.503.50（注：平均增幅速率為單位時(shí)間內(nèi)抑菌圈直徑的增量）A.抑菌圈直徑隨擴(kuò)散時(shí)間延長(zhǎng)持續(xù)增大，表明提取物W的抑菌效果逐漸增強(qiáng)B.抑菌圈平均增幅速率在12小時(shí)達(dá)到最大值，可能因?yàn)樘崛∥镆堰_(dá)最大擴(kuò)散范圍C.實(shí)驗(yàn)操作中，鋼管打孔后需灼燒滅菌以避免雜菌污染D.抑菌圈的形成是由于提取物W抑制了細(xì)菌的分裂，導(dǎo)致菌體死亡【答案】ABD〖祥解〗抑菌圈是以提取物W為圓心的沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)的規(guī)則的圓。分析表中信息可知：在2至14小時(shí)時(shí)段內(nèi)，抑菌圈直徑隨擴(kuò)散時(shí)間延長(zhǎng)持續(xù)增大，表明隨著提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散的范圍增大，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的范圍也隨之?dāng)U大；在2至14小時(shí)時(shí)段內(nèi)，抑菌圈平均增幅速率隨擴(kuò)散時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增大并在12小時(shí)達(dá)到最大值?！驹斘觥緼、抑菌圈直徑隨擴(kuò)散時(shí)間延長(zhǎng)持續(xù)增大，表明提取物W能夠以提取物W為圓心向周圍擴(kuò)散，將周圍一定范圍內(nèi)的細(xì)菌全部殺死，但不能表明提取物W的抑菌效果逐漸增強(qiáng)，A錯(cuò)誤；B、表中信息顯示：抑菌圈平均增幅速率在12小時(shí)達(dá)到最大值，但此時(shí)提取物W還沒(méi)有達(dá)到最大擴(kuò)散范圍，因?yàn)閿U(kuò)散14小時(shí)的抑菌圈直徑大于擴(kuò)散12小時(shí)的抑菌圈直徑，B錯(cuò)誤；C、實(shí)驗(yàn)操作中，在試驗(yàn)菌平板上用鋼管打孔后需灼燒滅菌，以避免雜菌污染，C正確；D、抑菌圈的形成是由于提取物W抑制了細(xì)菌的生長(zhǎng)，導(dǎo)致菌體死亡，但不能說(shuō)明提取物W對(duì)細(xì)菌的分裂有抑制作用，D錯(cuò)誤。故選ABD。17.農(nóng)科人員選取普通小麥與黑麥遠(yuǎn)緣雜交獲得的雜種種子胚，以及普通小麥種子胚、黑麥種子胚的愈傷組織進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)，三種愈傷組織中的生物堿A、B、C和D含量如圖所示，其中生物堿A具有抗菌的功能，生物堿B具有抗炎作用。下列分析正確的是（）A.四種生物堿均屬于植物細(xì)胞的次生代謝物B.雜種胚誘導(dǎo)的愈傷組織細(xì)胞中生物堿A、C和D的含量均高于其他兩種細(xì)胞的C.誘導(dǎo)胚細(xì)胞脫分化形成愈傷組織時(shí)，生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量比例為1D.若需提高生物堿B的產(chǎn)量，選用雜種胚愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)效果最佳【答案】ABC〖祥解〗植物的組織培養(yǎng)指的是在無(wú)菌的條件下，將植物的莖尖、莖段或是葉片等切成小塊，培養(yǎng)在特制的培養(yǎng)基上，通過(guò)細(xì)胞的增殖和分化，使它逐漸發(fā)育成完整的植物體，利用了植物細(xì)胞全能性的特點(diǎn)?！驹斘觥緼、次生代謝不是植物生長(zhǎng)發(fā)育所必需，次生代謝過(guò)程中，所產(chǎn)生的具有生態(tài)或藥理作用的化合物，稱為次生代謝物，四種生物堿均屬于植物細(xì)胞的次生代謝物，A正確；B、據(jù)圖可知，雜種胚誘導(dǎo)的愈傷組織細(xì)胞中生物堿A、C和D的含量均高于其他兩種細(xì)胞的，B正確；C、生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量比例為1，有利于誘導(dǎo)胚細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，C正確；D、據(jù)圖可知，若需提高生物堿B的產(chǎn)量，應(yīng)選用普通小麥胚愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)效果最佳，D錯(cuò)誤。故選ABC。18.實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)（特點(diǎn)：貼壁生長(zhǎng)）的基本過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要一定的氣體環(huán)境，其中CO2主要作用是刺激細(xì)胞的呼吸作用B.丁為傳代培養(yǎng)，培養(yǎng)的細(xì)胞可直接用離心法收集C.貼壁生長(zhǎng)和懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，培養(yǎng)過(guò)程中都會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大而分裂受阻D.小鼠皮膚培養(yǎng)過(guò)程所需培養(yǎng)基為合成培養(yǎng)基，通常還需要加入血清【答案】AB〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制，此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理，再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液?！驹斘觥緼、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，需要一定的氣體環(huán)境，其中CO2?的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，而不是刺激細(xì)胞的呼吸作用。因?yàn)榧?xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物，導(dǎo)致培養(yǎng)液pH下降，CO2?可以與培養(yǎng)液中的緩沖物質(zhì)共同作用，維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定，A錯(cuò)誤；B、丁為傳代培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，此時(shí)需要將細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中分離出來(lái)進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，然后再用離心法收集細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、無(wú)論是貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞還是懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，在培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)細(xì)胞密度過(guò)大時(shí)，細(xì)胞之間的接觸抑制（貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞）或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的缺乏、代謝廢物的積累等因素都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞分裂受阻，C正確；D、小鼠皮膚培養(yǎng)過(guò)程所需培養(yǎng)基為合成培養(yǎng)基，由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全搞清楚，因此通常還需要加入血清等一些天然成分，血清中含有多種細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子等，可以促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，D正確。故選AB。19.研究人員通過(guò)融合兩種雜交瘤細(xì)胞，成功制備出同時(shí)靶向CD19和CD47這兩種抗原的BsAb（雙特異性抗體）。該抗體通過(guò)雙靶向機(jī)制增強(qiáng)對(duì)淋巴瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)出顯著抗腫瘤效果。已知CD19普遍表達(dá)于B細(xì)胞，CD47廣泛分布于正常組織。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.制備該BsAb時(shí)用到了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.BsAb可能通過(guò)阻斷某些信號(hào)通路等方式來(lái)殺傷淋巴瘤細(xì)胞C.BsAb只能通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)發(fā)揮作用，無(wú)法應(yīng)用于體內(nèi)治療D.BsAb能同時(shí)結(jié)合同一淋巴瘤細(xì)胞上的CD19和CD47，無(wú)法體現(xiàn)抗體的特異性【答案】CD〖祥解〗單克隆抗體制備流程為，先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳析】A、題干信息“融合兩種雜交瘤細(xì)胞，成功制備出同時(shí)靶向CD19和CD47這兩種抗原的BsAb”，表明運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，同時(shí)也需要進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，A正確；B、題干信息“BsAb（雙特異性抗體）通過(guò)雙靶向機(jī)制增強(qiáng)對(duì)淋巴瘤細(xì)胞的選擇性殺傷”，BsAb可能通過(guò)阻斷某些信號(hào)通路等方式來(lái)殺傷淋巴瘤細(xì)胞，B正確；C、BsAb通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)發(fā)揮作用之后需要應(yīng)用于體內(nèi)治療殺死淋巴瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、BsAb能同時(shí)結(jié)合同一淋巴瘤細(xì)胞上的CD19和CD47，但是BsAb不能結(jié)合其他的物質(zhì)，體現(xiàn)BsAb的特異性，D錯(cuò)誤。故選CD。20.科研人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將酵母菌的YCF1（鎘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白）基因整合到楊樹(shù)染色體上，培育能富集鎘的轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）限制酶BamHIXmaIBclISmaI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)-G↓GATCC--C↓CCGGG--T↓GATCA--CCC↓GGG-A.利用PCR技術(shù)獲取并克隆YCF1基因時(shí)，需設(shè)計(jì)2種引物B.啟動(dòng)子的作用是為YCF1基因的轉(zhuǎn)錄提供起始密碼子C.若用BclI切割質(zhì)粒，會(huì)破壞質(zhì)粒中的氨芐青霉素抗性基因D.構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，為保留標(biāo)記基因，應(yīng)選擇Smal和Bcll切割質(zhì)?！敬鸢浮緽〖祥解〗PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。PCR過(guò)程要設(shè)計(jì)引物，引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸。用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為20?30個(gè)核苷酸。PCR過(guò)程還需要而高溫的DNA聚合酶，真核細(xì)胞和細(xì)菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活。因此，PCR反應(yīng)緩沖液中一般要添加Mg2+?！驹斘觥緼、PCR反應(yīng)時(shí)DNA兩條鏈都可以作模板，每條模板鏈都需要引物，故若要利用PCR技術(shù)獲取并克隆YCF1基因，需要設(shè)計(jì)2種引物，A正確；B、啟動(dòng)子位于基因的首端，而起始密碼子位于mRNA上，啟動(dòng)子使RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，B錯(cuò)誤；C、據(jù)圖可知，氨芐青霉素抗性基因中含有BclI的切割位點(diǎn)，因此若用BclI切割質(zhì)粒，會(huì)破壞質(zhì)粒中的氨芐青霉素抗性基因，C正確；D、據(jù)圖可知，限制酶切割的YCF1基因一邊為平末端，一邊為黏性末端。XmaⅠ切割質(zhì)粒形成黏性末端，SmaⅠ能切割XmaⅠ識(shí)別的核苷酸序列并形成平末端，故要選擇SmaⅠ。BclⅠ與BamHⅠ切割質(zhì)粒形成的黏性末端均為－CTAG，但選擇BamHⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒中的兩個(gè)標(biāo)記基因，故應(yīng)選擇BclⅠ。因此切割質(zhì)粒需用到的限制酶是SmaⅠ和BclⅠ，D正確。故選B。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.石油污染是常見(jiàn)的環(huán)境問(wèn)題，某些微生物能降解石油中的有機(jī)物。培養(yǎng)基中石油被降解后會(huì)產(chǎn)生透明圈，科研人員擬從油田附近土壤中篩選高效石油降解菌，用于環(huán)境污染修復(fù)。（1）實(shí)驗(yàn)室中對(duì)石油降解菌進(jìn)行純培養(yǎng)的關(guān)鍵是______。應(yīng)從油田附近的污染土壤中取樣，依據(jù)是______。（2）為篩選高效降解菌，制備的選擇培養(yǎng)基中需以_______作為唯一碳源。該培養(yǎng)基滅菌后，通常采用_________接種土壤浸出液。培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)選擇_______的菌落進(jìn)行純化。（3）初步篩選出的菌株需進(jìn)一步測(cè)定其降解效率從而篩選出降解效率最高的菌株，請(qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路（要求：用液體培養(yǎng)基，測(cè)定方法不做要求）_______?！敬鸢浮浚?）①.無(wú)菌操作（或避免雜菌污染）②.長(zhǎng)期受石油污染的土壤中可能富集適應(yīng)性的降解菌（2）①.石油②.稀釋涂布平板法（或平板劃線法）③.透明圈直徑/菌落直徑比值最大（3）將等量菌株分別接種于含相同濃度石油的液體培養(yǎng)基中，在相同條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)基中石油的殘留量，殘留量最少的即為降解效率最高的菌株〖祥解〗分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，這就是菌落。采用平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵?！窘馕觥浚?）實(shí)驗(yàn)室中對(duì)石油降解菌進(jìn)行純培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌操作（或避免雜菌污染），應(yīng)從油田附近的污染土壤中取樣，依據(jù)是長(zhǎng)期受石油污染的土壤中可能富集適應(yīng)性的降解菌。（2）為篩選高效降解菌，制備的選擇培養(yǎng)基中需以石油作為唯一碳源。該培養(yǎng)基滅菌后，通常采用稀釋涂布平板法（或平板劃線法）接種土壤浸出液。透明圈直徑/菌落直徑比值能體現(xiàn)石油降解菌的降解能力的大小，故培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)選擇透明圈直徑/菌落直徑比值最大的菌落進(jìn)行純化。（3）初步篩選出的菌株需進(jìn)一步測(cè)定其降解效率從而篩選出降解效率最高的菌株，實(shí)驗(yàn)思路為將等量菌株分別接種于含相同濃度石油的液體培養(yǎng)基中，在相同條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)基中石油的殘留量，殘留量最少的即為降解效率最高的菌株。22.科研人員通過(guò)不對(duì)稱體細(xì)胞雜交技術(shù)，將野生油菜（2n=18）與X射線處理的擬南芥（2n=10）原生質(zhì)體融合。經(jīng)X射線處理的擬南芥原生質(zhì)體細(xì)胞核部分失活。雜種細(xì)胞中檢測(cè)到擬南芥抗病基因表達(dá)，同時(shí)野生油菜基因表達(dá)受到部分抑制。（1）用X射線處理擬南芥原生質(zhì)體的目的是______。（2）過(guò)程②中將愈傷組織加入含有______的溶液去壁并分離出原生質(zhì)體。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí)，除了可以使用聚乙二醇融合法外，還可用_______融合法進(jìn)行化學(xué)方法的誘導(dǎo)。（3）推測(cè)雜種細(xì)胞中野生油菜基因表達(dá)受到部分抑制的兩個(gè)可能原因_______。（4）科研人員對(duì)獲得的部分植株細(xì)胞進(jìn)行染色體觀察、計(jì)數(shù)和DNA分子標(biāo)記鑒定，結(jié)果如下：后代植株類型染色體數(shù)目、形態(tài)DNA分子標(biāo)記鑒定甲18，形態(tài)與野生油菜染色體相似含雙親DNA片段乙18，形態(tài)與野生油菜染色體相似無(wú)擬南芥DNA片段丙18，形態(tài)與野生油菜染色體相似含雙親DNA片段和新的DNA片段由表可知，后代植株中______類型一定不是所需植株。由此推測(cè)雜種植株的染色體主要來(lái)源于親本野生油菜的染色體，另一方親本的遺傳物質(zhì)可能以_____（填“染色體”或“DNA片段”）的形式進(jìn)行了整合，作出該推測(cè)的依據(jù)是______?！敬鸢浮浚?）使擬南芥細(xì)胞核部分失活，減少其基因組在雜種細(xì)胞中的表達(dá)，同時(shí)保留部分基因的功能（2）①.纖維素酶和果膠酶②.高Ca2+-高pH（3）野生油菜基因的表達(dá)過(guò)程可能受擬南芥遺傳物質(zhì)表達(dá)的干擾；雜種細(xì)胞的核質(zhì)互作可能導(dǎo)致野生油菜基因的表達(dá)受到抑制；野生油菜基因在雜種細(xì)胞中可能被甲基化而無(wú)法正常表達(dá)（4）①.乙②.DNA片段③.甲、丙類型植株細(xì)胞的染色體與野生油菜細(xì)胞中的染色體數(shù)目相同、形態(tài)相似，且含有雙親的DNA片段〖祥解〗植物原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)：首先用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體，然后向原生質(zhì)體中導(dǎo)入抗病基因或含有抗病基因的染色體片段，轉(zhuǎn)移至合適的環(huán)境中，在高爾基體的作用下再生細(xì)胞壁、形成愈傷組織、得到胚狀體，最終發(fā)育成完整的植株?！窘馕觥浚?）用X射線處理擬南芥原生質(zhì)體可使擬南芥細(xì)胞核部分失活，減少其基因組在雜種細(xì)胞中的表達(dá)，同時(shí)保留部分基因的功能。（2）原生質(zhì)體為去除了植物細(xì)胞壁后結(jié)構(gòu)，要獲得原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法有聚乙二醇融合法和高Ca2+-高pH融合法。（3）野生油菜基因的表達(dá)過(guò)程可能受擬南芥遺傳物質(zhì)表達(dá)的干擾；雜種細(xì)胞的核質(zhì)互作可能導(dǎo)致野生油菜基因的表達(dá)受到抑制；野生油菜基因在雜種細(xì)胞中可能被甲基化而無(wú)法正常表達(dá)，導(dǎo)致雜種細(xì)胞中野生油菜基因表達(dá)受到部分抑制。（4）根據(jù)表格信息可知，植株后代乙無(wú)擬南芥DNA片段，說(shuō)明其不是雜種植株。甲、丙類型植株與柴胡細(xì)胞中的染色體數(shù)目相同、形態(tài)相似，且含有雙親的DNA片段，說(shuō)明甲、丙植株屬于雜種植株，它們的染色體主要由柴胡親本來(lái)源的染色體組成，擬南芥親本的遺傳物質(zhì)可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細(xì)胞中，而是以遺傳物質(zhì)（DNA片段）重組的方式整合進(jìn)柴胡的基因組。23.中山大學(xué)眼科中心主任葛堅(jiān)領(lǐng)導(dǎo)研究小組培育成了猴鼠嵌合體——“猴鼠”，期待將成果用于人體角膜等組織或器官的移植。（1）步驟①過(guò)程中體外培養(yǎng)皮膚干細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液需要定期更換的目的是_____。將培養(yǎng)得到的皮膚干細(xì)胞注入到小鼠囊胚的______部位，最終培養(yǎng)成組織或器官。（2）步驟②是胚胎工程中的______技術(shù)。實(shí)驗(yàn)中雌鼠和代孕母鼠需進(jìn)行同期發(fā)情處理的原因是______。（3）在體外受精前精子需進(jìn)行獲能處理，因?yàn)開(kāi)_____。獲能的精子與發(fā)育到______期的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精作用。該時(shí)期的卵母細(xì)胞可作為動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞，但需要去核，所謂的“核”是指___________。（4）人體器官移植面臨的主要問(wèn)題有供體器官短缺和______。研究發(fā)現(xiàn)猴鼠嵌合體器官可替代人體器官，但其表面抗原決定簇仍可引發(fā)排異?？茖W(xué)家通過(guò)導(dǎo)入調(diào)節(jié)因子改造嵌合體基因組，成功抑制排異反應(yīng)。推測(cè)導(dǎo)入調(diào)節(jié)因子的作用是______?！敬鸢浮浚?）①.清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害②.內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（2）①.胚胎移植②.使供體和受體生殖器官的生理變化同步（3）①.剛排出的精子不具備受精能力②.MII（或減數(shù)分裂II中期）③.紡錘體-染色體復(fù)合物（4）①.免疫排斥②.抑制抗原決定簇基因的表達(dá)〖祥解〗過(guò)程①是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，需要的基本條件是：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，具體操作是在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。（2）營(yíng)養(yǎng)，（3）溫度和pH，（4）氣體環(huán)境等?！窘馕觥浚?）①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要定期更換的目的是清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害；將皮膚干細(xì)胞注入到小鼠囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部位，最終培養(yǎng)成組織或器官。（2）由圖可知，步驟②是胚胎工程中的胚胎移植技術(shù)。實(shí)驗(yàn)中雌鼠和代孕母鼠需進(jìn)行同期發(fā)情處理使供體和受體生殖器官的生理變化同步，有利于胚胎的生存和發(fā)育。（3）因?yàn)閯偱懦龅木硬痪邆涫芫芰?，所以在體外受精前精子需進(jìn)行獲能處理。獲能的精子與發(fā)育到MII（或減數(shù)分裂II中期）的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精作用。卵母細(xì)胞去掉的核是指紡錘體-染色體復(fù)合物。（4）人體器官移植面臨的主要問(wèn)題有供體器官短缺和免疫排斥。研究發(fā)現(xiàn)猴鼠嵌合體的器官可替代人體器官，但其表面的某些抗原決定簇仍可引起排異。科學(xué)家在猴鼠嵌合體基因組中導(dǎo)入調(diào)節(jié)因子的作用是抑制抗原決定簇基因的表達(dá)。24.研究人員通過(guò)PCR擴(kuò)增質(zhì)粒pDNR-LIB中的sacB基因（蔗糖敏感基因，其表達(dá)產(chǎn)物會(huì)在含有蔗糖的平板上抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)），并將其插入質(zhì)粒pAH162中，構(gòu)建重組質(zhì)粒pAH162-sacB。該質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后，需驗(yàn)證其雙重選擇作用。限制酶位點(diǎn)及質(zhì)粒結(jié)構(gòu)如圖所示。（1）基因工程操作中用到的工具有________，其中限制酶可以使雙鏈DNA分子每一條鏈中特定部位的______鍵斷開(kāi)。由構(gòu)建的pAH162-sacB可推測(cè)，sacB基因上下游分別含有限制酶________、_______的識(shí)別序列。（2）sacB基因在篩選重組質(zhì)粒中的作用是______。（3）若需在分子水平上檢測(cè)sacB基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，可采用_______等技術(shù)；若需檢測(cè)CAR蛋白是否表達(dá)，可采用___________技術(shù)。（4）若要通過(guò)設(shè)計(jì)引物在sacB基因兩側(cè)添加限制酶的識(shí)別序列，應(yīng)該添加在引物的________（填“3′端”或“5′端”）?！敬鸢浮浚?）①.限制酶（限制性內(nèi)切核酸酶）、DNA連接酶、載體②.磷酸二酯③.BamHI④.EcoRI（2）在蔗糖存在時(shí)抑制菌落生長(zhǎng)，用于篩選成功插入外源基因的重組質(zhì)粒（3）①.PCR技術(shù)②.抗原-抗體雜交（4）5'端〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)