專題21發(fā)酵工程

考點(diǎn)十年考情（2016-2025）命題趨勢(shì)

2025·黑吉遼蒙：選擇培養(yǎng)基、微生物接種方法；

江蘇：制備培養(yǎng)基、微生物接種方法；山東：選

擇培養(yǎng)基、平板劃線法；湖南：微生物計(jì)數(shù)和分

離；

2024·江西：微生物的擴(kuò)大培養(yǎng)、代謝產(chǎn)物的提

??；湖南：微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作；

從近10年全國各地的高考試題來

浙江：培養(yǎng)基成分；河北：無菌操作；吉林：微

看，發(fā)酵工程專題以來自生產(chǎn)生活

生物的純培養(yǎng)；全國：甘肅、安徽：微生物的

實(shí)際的實(shí)例為情境考查微生物的

純培養(yǎng)；接種方法；

考點(diǎn)1微生物培養(yǎng)及應(yīng)用、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)、發(fā)酵

2023·北京：培養(yǎng)基的成分、選擇培養(yǎng)基；山東：

的培養(yǎng)與應(yīng)用工程與應(yīng)用；試題側(cè)重考查學(xué)生對(duì)

選擇培養(yǎng)基；

（10年10考）科學(xué)探究和科學(xué)思維及利用所學(xué)

2022·天津、遼寧、江蘇、海南、湖北、浙江、

知識(shí)解決實(shí)際問題能力的考查。此

重慶、河北、北京、廣東、全國

部分內(nèi)容集中在非選擇題部分考

2021·天津、北京、山東、浙江、江蘇、重慶、

察。

湖南

2020·江蘇、山東、浙江、全國

2019·全國、上海、江蘇、北京

2018·浙江、全國、江蘇、海南

2017·江蘇、全國、浙江、上海

2016·四川、上海、江蘇、全國

2025·浙江：傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的參與泡菜、果酒

制作的微生物；江蘇：果醋制作流程、菌種；云

南：酵母菌呼吸方式、擴(kuò)大培養(yǎng)、黃酒制作；

2024·浙江：果酒果醋發(fā)酵流程；湖北：醋酸菌；

2023·浙江：果酒果醋發(fā)酵流程；山東：泡菜制

考點(diǎn)2傳統(tǒng)發(fā)

作歷程、注意事項(xiàng)；

酵技術(shù)與應(yīng)用

2022·湖南、江蘇

（10年10考）

2021·江蘇、海南、湖北、遼寧、山東、浙江

2020·江蘇

2019·江蘇

2018·海南、北京、江蘇

2017·全國、浙江、海南、江蘇

2016·天津、江蘇、全國、四川

2025·陜晉青寧：發(fā)酵工程生產(chǎn)檸檬酸；河南：

果酒果醋發(fā)酵；

2024·江西：發(fā)酵工程的產(chǎn)品；山東：發(fā)酵工程

的PH變化、產(chǎn)物提??；河北、北京：啤酒發(fā)酵；

安徽：發(fā)酵產(chǎn)物提??；

考點(diǎn)3發(fā)酵工2023·山東：酒精發(fā)酵流程、無菌操作、產(chǎn)物提

程與應(yīng)用取方法；

（10年10考）2022·湖北、山東、湖南、浙江、遼寧、廣東

2021·重慶、河北、廣東、全國

2020·天津、浙江、全國

2019·海南、浙江

2018·江蘇、浙江

2017·江蘇、浙江

2016·海南、江蘇

考點(diǎn)1微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

1．（2025·黑吉遼蒙卷·高考真題）科研人員通過稀釋涂布平板法篩選出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）

能力強(qiáng)的菌株，旨在解決金霉素過量使用所導(dǎo)致的環(huán)境污染問題。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A．以金霉素為唯一碳源可制備選擇培養(yǎng)基

B．逐步提高培養(yǎng)基中金霉素的濃度有助于獲得高耐受的菌株

C．配制選擇培養(yǎng)基時(shí)，需確保pH滿足實(shí)驗(yàn)要求

D．用接種環(huán)將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面

2．（2025·江蘇·高考真題）從種植草莓的土壤中分離致病菌，簡易流程如下：制備土壤懸液、分離、純化、

鑒定。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A．制備的培養(yǎng)基可用紫外線照射進(jìn)行滅菌

B．將土樣加入無菌水混勻，梯度稀釋后取懸液加入平板并涂布

C．連續(xù)劃線時(shí)，接上次劃線的起始端開始劃線

D．鑒定后的致病菌，可接種在斜面培養(yǎng)基上，并在室溫下長期保存

3．（2025·山東·高考真題）深海淤泥中含有某種能降解纖維素的細(xì)菌。探究不同壓強(qiáng)下，該細(xì)菌在以纖維

素或淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上的生長情況。其他條件相同且適宜，實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果如表所示。下列說法

正確的是（）

組別壓強(qiáng)纖維素淀粉菌落

①常壓-+-

②常壓+--

③高壓-+-

④高壓+-+

注：“+”表示有；“一”表示無

A．可用平板劃線法對(duì)該菌計(jì)數(shù)

B．制備培養(yǎng)基的過程中，應(yīng)先倒平板再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

C．由②④組可知，在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，該菌可在常壓下生長

D．由③④組可知，高壓下該菌不能在以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長

4．（2025·湖南·高考真題）采集果園土壤進(jìn)行微生物分離或計(jì)數(shù)。下列敘述正確的是（）

A．稀釋涂布平板法和平板劃線法都能用于尿素分解菌的分離和計(jì)數(shù)

B．完成平板劃線后，培養(yǎng)時(shí)需增加一個(gè)未接種的平板作為對(duì)照

C．土壤中分離得到的醋酸菌能在無氧條件下將葡萄糖分離成乙酸

D．用于篩選尿素分解菌的培養(yǎng)基含有蛋白胨、尿素和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)

5．（2024·貴州·高考真題）生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中合理選擇材料和研究方法是順利完成實(shí)驗(yàn)的前提條件。下列敘述

錯(cuò)誤的是（）

A．稀釋涂布平板法既可分離菌株又可用于計(jì)數(shù)

B．進(jìn)行胚胎分割時(shí)通常是在原腸胚期進(jìn)行分割

C．獲取馬鈴薯脫毒苗常選取莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)

D．使用不同的限制酶也能產(chǎn)生相同的黏性末端

6．（2024·江西·高考真題）井岡霉素是我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的一種氨基寡糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變

種（JGs，一種放線菌，菌體呈絲狀生長）發(fā)酵而來，在水稻病害防治等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。下列關(guān)于JGs

發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素的敘述，正確的是（）

A．JGs可發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，因?yàn)樗心軌蚓幋a井岡霉素的基因

B．JGs接入發(fā)酵罐前需要擴(kuò)大培養(yǎng)，該過程不影響井岡霉素的產(chǎn)量

C．提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會(huì)提高井岡霉素的產(chǎn)量

D．稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細(xì)胞數(shù)量的變化

7．（2024·湖南·高考真題）微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是（）

A．①②⑤⑥B．③④⑥⑦C．①②⑦⑧D．①③④⑤

8．（2024·浙江·高考真題）脲酶催化尿素水解，產(chǎn)生的氨可作為細(xì)菌的氮源。脲酶被去除鎳后失去活性。

下列敘述錯(cuò)．誤．的是（）

A．鎳是組成脲酶的重要元素

B．鎳能提高尿素水解反應(yīng)的活化能

C．產(chǎn)脲酶細(xì)菌可在以NH4Cl為唯一氮源的培養(yǎng)基生長繁殖

D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌

9．（2024·河北·高考真題）下列相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作正確的是（）

A．配制PCR反應(yīng)體系時(shí)，加入等量的4種核糖核苷酸溶液作為擴(kuò)增原料

B．利用添加核酸染料的凝膠對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳后，在紫外燈下觀察結(jié)果

C．將配制的酵母培養(yǎng)基煮沸并冷卻后，在酒精燈火焰旁倒平板

D．將接種環(huán)燒紅，迅速蘸取酵母菌液在培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，獲得單菌落

10．（2024·山東·高考真題）酵母菌在合成色氨酸時(shí)需要3種酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分別為相應(yīng)酶

的編碼基因突變的色氨酸依賴型突變體。已知3種酶均不能進(jìn)出細(xì)胞，而色氨酸合成途徑的中間產(chǎn)物積累

到一定程度時(shí)可分泌到胞外。將這3種突變體均勻劃線接種到含有少量色氨酸的培養(yǎng)基上，生長情況如圖。

據(jù)圖分析，3種酶在該合成途徑中的作用順序?yàn)椋ǎ?/p>

A．X→Y→ZB．Z→Y→XC．Y→X→ZD．Z→X→Y

11．（2023·北京·高考真題）高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，下列實(shí)驗(yàn)操作能達(dá)成所述目標(biāo)的是（）

A．用高濃度蔗糖溶液處理成熟植物細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離

B．向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水形成內(nèi)部無菌環(huán)境

C．在目標(biāo)個(gè)體集中分布的區(qū)域劃定樣方調(diào)查種群密度

D．對(duì)外植體進(jìn)行消毒以杜絕接種過程中的微生物污染

12．（2023·山東·高考真題）平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（）

A．不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)

B．平板涂布時(shí)涂布器使用前必須進(jìn)行消毒

C．接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄

D．利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物

13．（2023·廣東·高考真題）研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱

菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線（如圖）和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷，下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合

是（）

A．a(chǎn)點(diǎn)時(shí)取樣、尿素氮源培養(yǎng)基

B．b點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基

C．b點(diǎn)時(shí)取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基

D．c點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基

14．（2023·浙江·高考真題）某同學(xué)想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：取泡菜汁樣品，劃

線接種于一定NaCl濃度梯度的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)得到了單菌落。下列敘述正確的是（）

A．培養(yǎng)基pH需偏堿性B．泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種

C．需在無氧條件下培養(yǎng)D．分離得到的微生物均為乳酸菌

15．（2022·天津·高考真題）下圖所示實(shí)驗(yàn)方法的應(yīng)用或原理，不．?。?dāng)．的是（）

實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)用原理

A．分離綠葉中的色素B．不同色素在層析液中溶解度不同

C．細(xì)菌計(jì)數(shù)D．逐步稀釋

A．AB．BC．CD．D

16．（2022·遼寧·高考真題）為避免航天器在執(zhí)行載人航天任務(wù)時(shí)出現(xiàn)微生物污染風(fēng)險(xiǎn)，需要對(duì)航天器及潔

凈的組裝車間進(jìn)行環(huán)境微生物檢測(cè)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A．航天器上存在適應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)匱乏等環(huán)境的極端微生物

B．細(xì)菌形成菌膜粘附于航天器設(shè)備表面產(chǎn)生生物腐蝕

C．在組裝車間地面和設(shè)備表面采集環(huán)境微生物樣品

D．采用平板劃線法等分離培養(yǎng)微生物，觀察菌落特征

17．（2022·江蘇·高考真題）航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動(dòng)的視頻。下列

相關(guān)敘述正確的是（）

A．培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B．培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳

C．心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖

D．心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)的支配下跳動(dòng)

18．（2022·江蘇·高考真題）下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)方法的描述合理的是（）

A．將一定量胡蘿卜切碎，加適量水、石英砂，充分研磨，過濾，獲取胡蘿卜素提取液

B．適當(dāng)濃度蔗糖溶液處理新鮮黑藻葉裝片，可先后觀察到細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)與質(zhì)壁分離現(xiàn)象

C．檢測(cè)樣品中的蛋白質(zhì)時(shí)，須加熱使雙縮脲試劑與蛋白質(zhì)發(fā)生顯色反應(yīng)

D．用溴麝香草酚藍(lán)水溶液檢測(cè)發(fā)酵液中酒精含量的多少，可判斷酵母菌的呼吸方式

19．（2022·江蘇·高考真題）下列是某同學(xué)分離高產(chǎn)脲酶菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，不合理的是（）

A．選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分離目的菌株

B．在選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源

C．適當(dāng)稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落

D．可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌

20．（2022·海南·高考真題）為探究校內(nèi)植物園土壤中的細(xì)菌種類，某興趣小組采集園內(nèi)土壤樣本并開展相

關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)．誤．的是（）

A．采樣時(shí)應(yīng)隨機(jī)采集植物園中多個(gè)不同地點(diǎn)的土壤樣本

B．培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，可選用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基

C．土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落

D．鑒定細(xì)菌種類時(shí)，除形態(tài)學(xué)鑒定外，還可借助生物化學(xué)的方法

21．（2022·湖北·高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是（）

A．動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行

B．微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌

D．可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌

22．（2021·天津·高考真題）下列操作能達(dá)到滅菌目的的是（）

A．用免洗酒精凝膠擦手B．制作泡菜前用開水燙洗容器

C．在火焰上灼燒接種環(huán)D．防疫期間用石炭酸噴灑教室

23．（2021·北京·高考真題）野生草本植物多具有根系發(fā)達(dá)、生長較快、抗逆性強(qiáng)的特點(diǎn)，除用于生態(tài)治理

外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收獲后剩余的菌渣可作肥料或飼料。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A．種植此類草本植物可以減少水土流失

B．菌渣作為農(nóng)作物的肥料可實(shí)現(xiàn)能量的循環(huán)利用

C．用作培養(yǎng)基的草本植物給食用菌提供碳源和氮源

D．菌渣作飼料實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)在植物、真菌和動(dòng)物間的轉(zhuǎn)移

24．（2021·北京·高考真題）人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學(xué)擬從中分離出葡萄球菌。下述操作不

正確的是（）

A．對(duì)配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B．使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣

C．用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布

D．觀察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步判斷

25．（2021·山東·高考真題）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會(huì)

使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培

養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯(cuò)誤的是（）

A．甲菌屬于解脂菌

B．實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源

C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比

D．該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力

26．（2021·浙江·高考真題）下列關(guān)于原生質(zhì)體和細(xì)胞計(jì)數(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A．測(cè)定植物原生質(zhì)體的密度時(shí)，可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板

B．紅墨水不能進(jìn)入活細(xì)胞，可用于檢測(cè)細(xì)胞的存活狀態(tài)并計(jì)數(shù)

C．涂布分離法和劃線分離法均能得到單菌落，都可用于細(xì)胞計(jì)數(shù)

D．酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后，可用比濁計(jì)測(cè)定其密度

27．（2021·山東·高考真題）含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以

與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運(yùn)動(dòng)能力，用穿

刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度

相等，下列說法錯(cuò)誤的是（）

A．乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng)

B．為不影響菌的運(yùn)動(dòng)需選用液體培養(yǎng)基

C．該實(shí)驗(yàn)不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量

D．穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染

28．（2020·江蘇·高考真題）為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。

下列敘述正確的是（）

A．倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整

B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落

C．該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的

D．菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色

29．（2020·江蘇·高考真題）甲、乙兩個(gè)實(shí)驗(yàn)小組分別進(jìn)行了“酵母細(xì)胞固定化技術(shù)”的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖所

示。出現(xiàn)乙組實(shí)驗(yàn)結(jié)果的原因可能為（）

A．CaCl2溶液濃度過高B．海藻酸鈉溶液濃度過高

C．注射器滴加速度過慢D．滴加時(shí)注射器出口浸入到CaCl2溶液中

30．（2020·山東·高考真題）野生型大腸桿菌可以在基本培養(yǎng)基上生長，發(fā)生基因突變產(chǎn)生的氨基酸依賴型

菌株需要在基本培養(yǎng)基上補(bǔ)充相應(yīng)氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨(dú)

接種在基本培養(yǎng)基上時(shí)，均不會(huì)產(chǎn)生菌落。某同學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，將M、N菌株混合培養(yǎng)一段時(shí)間，充

分稀釋后再涂布到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后出現(xiàn)許多由單個(gè)細(xì)菌形成的菌落，將這些菌落分別接種到基本培

養(yǎng)基上，培養(yǎng)后均有菌落出現(xiàn)。該同學(xué)對(duì)這些菌落出現(xiàn)原因的分析，不合理的是（）

A．操作過程中出現(xiàn)雜菌污染

B．M、N菌株互為對(duì)方提供所缺失的氨基酸

C．混合培養(yǎng)過程中，菌株獲得了對(duì)方的遺傳物質(zhì)

D．混合培養(yǎng)過程中，菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變

31．（2020·浙江·高考真題）下列關(guān)于微生物培養(yǎng)及利用的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A．利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物

B．配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pH

C．酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒

D．適宜濃度的酒精可使醋化醋桿菌活化

32．（2020·浙江·高考真題）下列關(guān)于淀粉酶的敘述，錯(cuò)誤的是

A．植物、動(dòng)物和微生物能產(chǎn)生淀粉酶

B．固相淀粉酶比水溶液中的淀粉酶穩(wěn)定性更高

C．枯草桿菌淀粉酶的最適溫度比唾液淀粉酶的高

D．淀粉被淀粉酶水解形成的糊精遇碘-碘化鉀溶液不顯色

33．（2019·江蘇·高考真題）下列關(guān)于加酶洗滌劑的敘述，錯(cuò)．誤．的是

A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶

B．用加酶洗滌劑能減少洗滌時(shí)間并節(jié)約用水

C．含纖維素酶洗滌劑可以洗滌印花棉織物

D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相對(duì)耐高溫的

34．（2019·江蘇·高考真題）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運(yùn)用的敘述，不．合．理．的是

A．篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)

B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌

C．在分離平板上長出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力

D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價(jià)值

35．（2019·江蘇·高考真題）下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)．誤．的是

A．培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒

C．接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染

D．菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基

36．（2019·北京·高考真題）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細(xì)菌能分

解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表。

菌種菌落直徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C

細(xì)菌Ⅰ5.111.22.2

細(xì)菌Ⅱ8.113.01.6

有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)．誤．的是

A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)

B．篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí)，菌液應(yīng)稀釋后涂布

C．以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外

D．H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異

37．（2018·海南·高考真題）將相等數(shù)量的硝化細(xì)菌和大腸桿菌分別接種到含銨鹽的無機(jī)鹽培養(yǎng)液中，在適

宜溫度下振蕩培養(yǎng)。若用虛線表示大腸桿菌的生長趨勢(shì)，實(shí)線表示硝化細(xì)菌的生長趨勢(shì)，則下圖中能正確

表示兩種菌體生長趨勢(shì)的是（）

A．B．

C．D．

38．（2018·江蘇·高考真題）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，

下列敘述正確的是

A．為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30min

B．過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化

C．過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體

D．過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上

39．（2019年上海市黃浦區(qū)高考生物二模試卷）硝化細(xì)菌廣泛存在于通氣性較好的土壤中，其部分代謝反

應(yīng)如圖所示，下列關(guān)于硝化細(xì)菌的培養(yǎng)條件的描述正確的是（）

A．碳源為葡萄糖B．培養(yǎng)時(shí)需隔絕空氣

C．氮源是氨氣D．培養(yǎng)時(shí)需冷藏

40．（2017·上?！じ呖颊骖}）在培養(yǎng)基配制和微生物接種的過程中，確保無雜菌污染被稱為無菌操作。圖中，

符合無菌操作要求的有

A．①②③④B．①②③⑤C．①③④⑤D．②③④⑤

41．（2016·江蘇·高考真題）漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是

分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A．生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品

B．篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落

C．在涂布平板上長出的菌落，在通過劃線進(jìn)一步純化

D．在適宜溫度下，接種后的斜面培養(yǎng)基上菌落長成后，可在低溫下臨時(shí)保存菌株

二、多選題

42．（2025·河北·高考真題）隱甲藻是一種好氧的異養(yǎng)真核微藻。多在海水中腐爛的植物葉片上生長繁殖，

是工業(yè)生產(chǎn)DHA（一種功能性脂肪酸）的藻類之一、從海洋中篩選獲得的高產(chǎn)油脂隱甲藻，可用于DHA的

發(fā)酵生產(chǎn)。下列敘述正確的是（）

A．隱甲藻可從腐爛的葉片獲得生長必需的碳源

B．采集海水中腐爛的葉片，濕熱滅菌后接種到固體培養(yǎng)基，以獲得隱甲藻

C．選擇培養(yǎng)基中可加入抑制細(xì)菌生長的抗生素，以減少雜菌生長

D．適當(dāng)提高發(fā)酵時(shí)的通氣量和攪拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA產(chǎn)量

43．（2024·吉林·高考真題）某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病，其篩選流程及抗性檢測(cè)

如圖。下列操作正確的是（）

A．在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從感病植株上采集樣品

B．將采集的樣品充分消毒后，用蒸餾水沖洗，收集沖洗液進(jìn)行無菌檢測(cè)

C．將無菌檢測(cè)合格的樣品研磨，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落

D．判斷內(nèi)生菌的抗性效果需比較有無接種內(nèi)生菌的平板上的病原菌菌斑大小

44．（2021·江蘇·高考真題）為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基

上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是（）

A．將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率

B．涂布用的菌濃度應(yīng)控制在30~300個(gè)/mL

C．需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)考察輻射時(shí)間對(duì)存活率的影響，以確定最佳誘變時(shí)間

D．挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進(jìn)行降解效率分析

45．（2016·江蘇·高考真題）為了使牛仔褲呈現(xiàn)“穿舊”效果，在工業(yè)洗衣機(jī)中用酶洗代替?zhèn)鹘y(tǒng)的浮石擦洗，

是目前重要的生產(chǎn)手段（工藝流程見下圖）。下列敘述中錯(cuò)誤的是

A．纖維素酶在仿舊中的作用機(jī)理與其在洗衣粉中去污的機(jī)理相似

B．在上述工藝中，為重復(fù)使用纖維素酶，可選用適當(dāng)?shù)陌駝┕潭ɑ?/p>

C．在上述工藝中，通過調(diào)節(jié)溫度、酸堿度、處理時(shí)間可控制仿舊顏色的深淺

D．纖維素酶催化葡萄糖殘基間磷酸二酯鍵的水解分解纖維素

三、解答題

46．（2025·安徽·高考真題）稻瘟病是一種真菌病害，水稻葉片某些內(nèi)生放線菌對(duì)該致病菌有抑制作用?？?/p>

研小組分離篩選出內(nèi)生放線菌，并開展了相關(guān)研究?；卮鹣铝袉栴}。

(1)采集有病斑的水稻葉片，經(jīng)表面消毒、研磨處理，制備研磨液。此后，采用（填方法）將研磨

液接種于不同的選擇培養(yǎng)基，分別置于不同溫度下培養(yǎng)，目的是。

(2)經(jīng)篩選獲得一株內(nèi)生放線菌，該菌株高效合成鐵載體小分子，能輔助內(nèi)生放線菌吸收鐵離子。R基因是

合成鐵載體的關(guān)鍵基因之一?？蒲行〗M構(gòu)建R基因敲除株，探究鐵載體的功能。主要步驟如下：首先克隆R

基因的上游片段R-U和下游片段R-D；然后構(gòu)建重組質(zhì)粒；最后利用重組質(zhì)粒和內(nèi)生放線菌DNA片段中同

源區(qū)段可發(fā)生交換的原理，對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行敲除。如圖1所示。

采用PCR技術(shù)鑒定R基因的敲除結(jié)果。PCR通過變性、復(fù)性和延伸三步，反復(fù)循環(huán)，可實(shí)現(xiàn)基因片段

的。R基因敲除過程中，可發(fā)生多種形式的同源區(qū)段交換，PCR檢測(cè)結(jié)果如圖2所示，其中R基因

敲除株為菌落（填序號(hào)），出現(xiàn)菌落④的可能原因是。

(3)內(nèi)生放線菌和稻瘟病致病菌的生長均需要鐵元素?？蒲行〗M推測(cè)該內(nèi)生放線菌通過對(duì)鐵離子的競爭性利

用，從而抑制稻瘟病致病菌生長。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該推測(cè)，簡要寫出實(shí)驗(yàn)思路。

47．（2024·江西·高考真題）聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一種聚酯塑料，會(huì)造成環(huán)境污染。磷脂酶可

催化PET降解。為獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物，研究人員試驗(yàn)了2種方法?；卮鹣铝袉栴}：

(1)方法1從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯（一種磷脂類物質(zhì)）為唯一碳源

制備培養(yǎng)基，可提高該方法的篩選效率。除碳源外，該培養(yǎng)基中至少還應(yīng)該有、、

等營養(yǎng)物質(zhì)。

(2)方法2采用技術(shù)定向改造現(xiàn)有微生物，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物。除了編碼磷脂酶的基因外，

該技術(shù)還需要、、等“分子工具”。

(3)除了上述2種方法之外，還可以通過技術(shù)非定向改造現(xiàn)有微生物，篩選獲得能夠高產(chǎn)磷脂酶的微

生物。

(4)將以上獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂粉和適量的卵黃磷

脂）平板上培養(yǎng)，可以通過觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物產(chǎn)磷脂酶的能力，但不能以水解

圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酶能力的唯一依據(jù)。從平板制作的角度分析，其原因可能是。

48．（2024·甘肅·高考真題）源于細(xì)菌的纖維素酶是一種復(fù)合酶，能降解纖維素。為了提高纖維素酶的降解

效率，某課題組通過篩選高產(chǎn)纖維素酶菌株，克隆表達(dá)降解纖維素的三種酶（如下圖），研究了三種酶混

合的協(xié)同降解作用，以提高生物質(zhì)資源的利用效率。回答下列問題。

(1)過程①②采用以羧甲基纖維素鈉為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選菌株X，能起到篩選作用的原因是。高

產(chǎn)纖維素酶菌株篩選時(shí)，剛果紅培養(yǎng)基上的菌落周圍透明圈大小反映了。

(2)過程④擴(kuò)增不同目的基因片段需要的關(guān)鍵酶是。

(3)過程⑤在基因工程中稱為，該過程需要的主要酶有。

(4)過程⑥大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有。該過程用Ca2+處理細(xì)胞，使其處于一種的生理狀

態(tài)。

(5)課題組用三種酶及酶混合物對(duì)不同生物質(zhì)原料進(jìn)行降解處理，結(jié)果如下表。表中協(xié)同系數(shù)存在差異的原

因是（答出兩點(diǎn)）。

生降解率（%）協(xié)同系數(shù)

物

質(zhì)

原酶A酶B酶C混1混2混1混2

料

小

麥

7.086.038.198.6126.9874.33114.64

秸

稈

玉

2.621.483.763.929.8824.9877.02

米

秸

稈

玉

米0.620.480.860.986.791.8211.34

芯

注：混1和混2表示三種酶的混合物

題干關(guān)鍵信息所學(xué)知識(shí)信息加工

該過程溫度相對(duì)較高，

圖中④是目的原理是DNA的半保留復(fù)

所需的關(guān)鍵酶是耐高溫

基因的擴(kuò)增制

的DNA聚合酶

圖中⑤是基因

其實(shí)質(zhì)是不同DNA片段該過程需要的關(guān)鍵酶有

表達(dá)載體的構(gòu)

的切割和連接限制酶和DNA連接酶

建

其受體細(xì)胞是原核細(xì)

圖中⑥是將目胞，常用Ca2+處理受體

根據(jù)受體細(xì)胞的不同，導(dǎo)

的基因?qū)胧芗?xì)胞，使其處于易于吸

入方法有一定的差異

體細(xì)胞收周圍DNA的狀態(tài)，即

感受態(tài)

49．（2024·安徽·高考真題）丁二醇廣泛應(yīng)用于化妝品和食品等領(lǐng)域。興趣小組在已改造的大腸桿菌中引入

合成丁二醇的關(guān)鍵基因X，以提高丁二醇的產(chǎn)量?；卮鹣铝袉栴}。

(1)擴(kuò)增X基因時(shí)，PCR反應(yīng)中需要使用TaqDNA聚合酶，原因是。

(2)使用BamHI和SalI限制酶處理質(zhì)粒和X基因，連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌，并涂布在無抗生素平板上（如圖）。

在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步篩選含目的基因菌株的實(shí)驗(yàn)思路是。

、

(3)研究表明，碳源和氮源的種類、濃度及其比例會(huì)影響微生物生長和發(fā)酵產(chǎn)物積累。如果培養(yǎng)基中碳源相

對(duì)過多，容易使其氧化不徹底，形成較多的，引起發(fā)酵液pH值下降。興趣小組通過

單因子實(shí)驗(yàn)確定了木薯淀粉和酵母粉的最適濃度分別為100g.L-1和15g.L-1。在此基礎(chǔ)上，設(shè)置不同濃度的木

薯淀粉（90g.L-1、100g.L-1、110g.L-1）和酵母粉（12g.L-1、15g.L-1、18g.L-1）篩選碳源和氮源濃度的最佳組合，

以獲得較高發(fā)酵產(chǎn)量，理論上應(yīng)設(shè)置（填數(shù)字）組實(shí)驗(yàn)（重復(fù)組不計(jì)算在內(nèi)）。

(4)大腸桿菌在發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行高密度發(fā)酵時(shí)，溫度會(huì)升高，其原因是。

(5)發(fā)酵工業(yè)中通過菌種選育、擴(kuò)大培養(yǎng)和發(fā)酵后，再經(jīng)，最終獲得發(fā)酵產(chǎn)品。

50．（2023·北京·高考真題）自然界中不同微生物之間存在著復(fù)雜的相互作用。有些細(xì)菌具有溶菌特性，能

夠破壞其他細(xì)菌的結(jié)構(gòu)使細(xì)胞內(nèi)容物釋出?？茖W(xué)家試圖從某湖泊水樣中分離出有溶菌特性的細(xì)菌。

(1)用于分離細(xì)菌的固體培養(yǎng)基包含水、葡萄糖、蛋白胨和瓊脂等成分，其中蛋白胨主要為細(xì)菌提供

和維生素等。

(2)A菌通常被用做溶菌對(duì)象。研究者將含有一定濃度A菌的少量培養(yǎng)基傾倒在固體培養(yǎng)平板上，凝固形成

薄層。培養(yǎng)一段時(shí)間后，薄層變渾濁（如圖），表明。

(3)為分離出具有溶菌作用的細(xì)菌，需要合適的菌落密度，因此應(yīng)將含菌量較高的湖泊水樣后，

依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培養(yǎng)一段時(shí)間后，能溶解A菌的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)。采用這

種方法，研究者分離、培養(yǎng)并鑒定出P菌。

(4)為探究P菌溶解破壞A菌的方式，請(qǐng)?zhí)岢鲆粋€(gè)假設(shè)，該假設(shè)能用以下材料和設(shè)備加以驗(yàn)證（主要實(shí)驗(yàn)材

料和設(shè)備：P菌、A菌、培養(yǎng)基、圓形濾紙小片、離心機(jī)和細(xì)菌培養(yǎng)箱）。

51．（2022·重慶·高考真題）研究發(fā)現(xiàn)柑橘精油可抑制大腸桿菌的生長。某興趣小組采用水蒸氣蒸餾法和壓

榨法提取了某種橘皮的精油（分別簡稱為HDO和CPO），并研究其抑菌效果的差異。

(1)為便于精油的提取，壓榨前需用浸泡橘皮一段時(shí)間。在兩種方法收集的油水混合物中均加入NaCl，

其作用是；為除去油層中的水分，需加入。

(2)無菌條件下，該小組制備了兩個(gè)大腸桿菌平板，用兩片大小相同的無菌濾紙分別蘸取HDO和CPO貼于含

菌平板上，37℃培養(yǎng)24h，抑菌效果見如圖。有同學(xué)提出該實(shí)驗(yàn)存在明顯不足：①未設(shè)置對(duì)照，設(shè)置本實(shí)

驗(yàn)對(duì)照的做法是，其作用是；②不足之處還有（答兩點(diǎn)）。

(3)若HDO的抑菌效果低于CPO，從提取方法的角度分析，主要原因是。

52．（2022·河北·高考真題）番茄灰霉病菌嚴(yán)重影響番茄生產(chǎn)，枯草芽孢桿菌可以產(chǎn)生對(duì)多種病原菌具有抑

制作用的蛋白質(zhì)。為探究枯草芽孢桿菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。回答下

列問題：

(1)檢測(cè)枯草芽孢桿菌對(duì)番茄灰霉病菌的抑制作用時(shí)，取適量菌液涂布于固體培養(yǎng)基上，將無菌濾

紙片（直徑5mm）在菌液中浸泡后覆蓋于固體培養(yǎng)基中心，數(shù)秒后取出濾紙片，培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)

后測(cè)量大小以判定抑菌效果。

(2)枯草芽孢桿菌為好氧微生物，液體培養(yǎng)時(shí)應(yīng)采用（填“靜置”或“搖床震蕩”）培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中抽

樣檢測(cè)活菌數(shù)量時(shí)，應(yīng)采用（填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計(jì)數(shù)法”），其原因是。

(3)電泳分離蛋白質(zhì)混合樣品的原理是。利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定枯草芽孢桿菌的抗菌蛋

白分子量時(shí)，SDS的作用是。

(4)枯草芽孢桿菌長期保藏時(shí)，常以其作為保藏對(duì)象。

53．（2022·北京·高考真題）人體細(xì)胞因表面有可被巨噬細(xì)胞識(shí)別的“自體”標(biāo)志蛋白C，從而免于被吞噬。

某些癌細(xì)胞表面存在大量的蛋白C，更易逃脫吞噬作用。研究者以蛋白C為靶點(diǎn)，構(gòu)建了可感應(yīng)群體密度而

裂解的細(xì)菌菌株，擬用于制備治療癌癥的“智能炸彈”。

(1)引起群體感應(yīng)的信號(hào)分子A是一種脂質(zhì)小分子，通常以的方式進(jìn)出細(xì)胞。細(xì)胞內(nèi)外的A隨細(xì)菌密

度的增加而增加，A積累至一定濃度時(shí)才與胞內(nèi)受體結(jié)合，調(diào)控特定基因表達(dá)，表現(xiàn)出細(xì)菌的群體響應(yīng)。

(2)研究者將A分子合成酶基因、A受體基因及可使細(xì)菌裂解的L蛋白基因同時(shí)轉(zhuǎn)入大腸桿菌，制成AL菌株。

培養(yǎng)的AL菌密度變化如圖1。其中，AL菌密度驟降的原因是：AL菌密度增加引起A積累至臨界濃度并與受

體結(jié)合，。

(3)蛋白K能與蛋白C特異性結(jié)合并阻斷其功能。研究者將K基因轉(zhuǎn)入AL菌，制成ALK菌株，以期用于腫瘤

治療。為驗(yàn)證ALK菌能產(chǎn)生蛋白K，應(yīng)以菌株裂解的上清液為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)從下列選項(xiàng)中選取

所需材料與試劑的序號(hào)，完善實(shí)驗(yàn)組的方案。

實(shí)驗(yàn)材料與試劑：①ALK菌裂解的上清液②帶熒光標(biāo)記的K的抗體③帶熒光標(biāo)記的C的抗體④腫瘤細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)步驟：先加入保溫后漂洗，再加入保溫后漂洗，檢測(cè)熒光強(qiáng)度。

(4)研究者向下圖2所示小鼠左側(cè)腫瘤內(nèi)注射ALK菌后，發(fā)現(xiàn)ALK菌只存在于該側(cè)腫瘤內(nèi)，兩周內(nèi)即觀察到

雙側(cè)腫瘤生長均受到明顯抑制。而向腫瘤內(nèi)單獨(dú)注射蛋白K或AL菌，對(duì)腫瘤無明顯抑制作用。請(qǐng)應(yīng)用免疫

學(xué)原理解釋“智能炸彈”ALK菌能有效抑制對(duì)側(cè)腫瘤生長的原因。

54．（2022·廣東·高考真題）研究深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對(duì)于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號(hào)”考

察船對(duì)中國南海科考中，中國科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的

微生物菌株并進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性。

回答下列問題：

(1)研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培

養(yǎng)一段時(shí)間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用

法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以為碳源時(shí)生長狀況最好。

(2)研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測(cè)其原因可

能是。（答一點(diǎn)即可）

(3)藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會(huì)聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度

考慮，擬桿菌對(duì)深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是。

(4)深海冷泉環(huán)境特殊，推測(cè)此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其

特性可能還有。

55．（2022·全國乙卷·高考真題）化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)、用菌株C可生產(chǎn)S，S的

產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過實(shí)驗(yàn)比較不同碳源對(duì)菌體生長和S產(chǎn)量的影

響，結(jié)果見表。

碳源細(xì)胞干重（g/L）S產(chǎn)量（g/L）

葡萄糖3.120.15

淀粉0.010.00

制糖廢液2.300.18

回答下列問題。

(1)通常在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，需要對(duì)所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，滅菌的方法有（答出2點(diǎn)即可）。

(2)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，菌株C生長的最適碳源是；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是。菌株C的生

長除需要碳源外，還需要（答出2點(diǎn)即可）等營養(yǎng)物質(zhì)。

(3)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，碳源為淀粉時(shí)菌株C不能生長，其原因是。

(4)若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)簡要寫出實(shí)

驗(yàn)思路：。

(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實(shí)現(xiàn)廢物利用，其意義是（答出1點(diǎn)即可）。

56．（2022·全國甲卷·高考真題）某同學(xué)從被石油污染的土壤中分離得到A和B兩株可以降解石油的細(xì)菌，

在此基礎(chǔ)上采用平板培養(yǎng)法比較二者降解石油的能力，并分析兩個(gè)菌株的其他生理功能。

實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基成分如下。

培養(yǎng)基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。

培養(yǎng)基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。

操作步驟：

①將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培養(yǎng)基Ⅰ中培養(yǎng)，得到A、B菌液；

②液體培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ中添加瓊脂，分別制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按圖中所示在平板上打甲、乙兩孔。

回答下列問題。

透明圈大小

菌株

平板Ⅰ平板Ⅱ

A+++++

B++-

(1)實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中作為碳源的成分是。培養(yǎng)基中NH4NO3的作用是為菌株的生長提供氮源，

氮源在菌體內(nèi)可以參與合成（答出2種即可）等生物大分子。

(2)步驟①中，在資源和空間不受限制的階段，若最初接種N0個(gè)A細(xì)菌，繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量

是。

(3)為了比較A、B降解石油的能力，某同學(xué)利用步驟②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表所示（“+”

表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示無透明圈），推測(cè)該同學(xué)的實(shí)驗(yàn)思路是。

(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，根據(jù)上表所示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，治理石油污染應(yīng)選用的菌株是，

理由是。

57．（2021·浙江·高考真題）回答下列（一）、（二）小題：

（一）某環(huán)保公司從淤泥中分離到一種高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備了固定化菌株。

（1）從淤泥中分離細(xì)菌時(shí)常用劃線分離法或法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成。對(duì)

分離的菌株進(jìn)行誘變、和鑒定，從而獲得能高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的菌株。該菌株只能在

添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖。

（2）固定化菌株的制備流程如下；①將菌株與該公司研制的特定介質(zhì)結(jié)合；②用蒸餾水去除；

③檢驗(yàn)固定化菌株的。菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和共價(jià)偶聯(lián)法，可以采用的2

種方法是。

（3）對(duì)外，只提供固定化菌株有利于保護(hù)該公司的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，推測(cè)其原因是。

（二）三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對(duì)生長環(huán)境要求非常苛刻，以及生態(tài)環(huán)境的

破壞和過度的采挖，目前我國野生三葉青已十分珍稀。

（1）為保護(hù)三葉青的多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用技

術(shù)，實(shí)現(xiàn)了三葉青的林下種植。

（2）依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類化合物，誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿

菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成和限制性核酸內(nèi)切酶等，進(jìn)而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的

DNA片段（T-DNA）。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上，T-DNA上rol系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的植

物激素，促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成，再分化形成毛狀根。

（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭孢類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主

要目的是。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過控制搖床的和

溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。

58．（2021·重慶·高考真題）為了研究PDCD4基因?qū)π∈笞訉m內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響，進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

(1)取小鼠子宮時(shí)，為避免細(xì)菌污染，手術(shù)器具應(yīng)進(jìn)行處理；子宮取出剪碎后，用處理一定時(shí)

間，可獲得分散的子宮內(nèi)膜組織細(xì)胞，再分離獲得基質(zhì)細(xì)胞用于培養(yǎng)。

(2)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)有（填寫兩種）；培養(yǎng)箱中CO2濃度為5%，其主要作用是。

(3)在含PDCD4基因的表達(dá)載體中，啟動(dòng)子的作用是。為了證明PDCD4基因?qū)|(zhì)細(xì)胞

凋亡的作用，以含PDCD4基因的表達(dá)載體和基質(zhì)細(xì)胞的混合培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)組，還應(yīng)設(shè)立兩個(gè)對(duì)照組，分別

為。經(jīng)檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組中PDCD4表達(dá)水平和細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組，

說明該基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡具有（填“抑制”或“促進(jìn)”）作用。

59．（2021·浙江·高考真題）回答下列（一）、（二）小題：

（一）回答與甘蔗醋制作有關(guān)的問題：

（1）為了獲得釀造甘蔗醋的高產(chǎn)菌株，以自然發(fā)酵的甘蔗渣為材料進(jìn)行篩選。首先配制醋酸菌選擇培養(yǎng)基：

將適量的葡萄糖、KH2PO4、MgSO4溶解并定容，調(diào)節(jié)pH，再高壓蒸汽滅菌，經(jīng)后加入3%體積的

無水乙醇。然后將10g自然發(fā)酵的甘蔗渣加入選擇培養(yǎng)基，振蕩培養(yǎng)24h。用將少量上述培養(yǎng)

液涂布到含CaCO3的分離培養(yǎng)基上，在30℃培養(yǎng)48h。再挑取分離培養(yǎng)基上具有的單菌落若干，

分別接種到與分離培養(yǎng)基成分相同的培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后，置于4℃冰箱中保存。

（2）優(yōu)良產(chǎn)酸菌種篩選。將冰箱保存的菌種分別接入選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)一段時(shí)間后，取合適接種量的菌液

在30℃、150r/min條件下振蕩培養(yǎng)。持續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)液中醋酸濃度不再上升，或者培養(yǎng)液中含量

達(dá)到最低時(shí)，發(fā)酵結(jié)束。篩選得到的優(yōu)良菌種除了產(chǎn)酸量高外，還應(yīng)有（答出2點(diǎn)

即可）等特點(diǎn)。

（3）制醋過程中，可將甘蔗渣制作成固定化介質(zhì)，經(jīng)后用于發(fā)酵。其固定化方法為。

（二）斑馬魚是一種模式動(dòng)物，體外受精發(fā)育，胚胎透明、便于觀察，可用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)，基因功能分析以

及藥物毒性與安全性評(píng)價(jià)等。

（1）由于人類活動(dòng)產(chǎn)生的生活污水日益增多，大量未經(jīng)處理的污水直接排入河流、湖泊會(huì)引起水

體，導(dǎo)致藻類大量繁殖形成水華。取水樣喂養(yǎng)斑馬魚，可用斑馬魚每周的體重和死亡率等指標(biāo)

監(jiān)測(cè)水體污染程度。

（2）為了研究某基因在斑馬魚血管發(fā)育過程中的分子調(diào)控機(jī)制，用DNA連接酶將該基因連接到質(zhì)粒載體

形成，導(dǎo)入到大腸桿菌菌株DH5α中。為了能夠連接上該目的基因、并有利于獲得含該目的基因的

DH5α陽性細(xì)胞克隆，質(zhì)粒載體應(yīng)含有（答出2點(diǎn)即可）。提取質(zhì)粒后，采用法，將該基因

導(dǎo)入到斑馬魚受精卵細(xì)胞中，培養(yǎng)并觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚胚胎血管的發(fā)育情況。

（3）為了獲取大量斑馬魚胚胎細(xì)胞用于藥物篩選，可用分散斑馬魚囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，取分散細(xì)

胞作為初始材料進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加成纖維細(xì)胞作為，以提高斑馬魚胚胎細(xì)胞

克隆的形成率。

60．（2021·湖南·高考真題）大熊貓是我國特有的珍稀野生動(dòng)物，每只成年大熊貓每日進(jìn)食竹子量可達(dá)12~38kg。

大熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖維素分解菌。

回答下列問題：

（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即。為篩選纖維素分解菌，將大

熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基從功能上分類

屬于培養(yǎng)基。

（2）配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理，目的是。檢測(cè)固體培養(yǎng)基滅菌效果的常

用方法是。

（3）簡要寫出測(cè)定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)的實(shí)驗(yàn)思路。

（4）為高效降解農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物，研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌，在37℃條件下進(jìn)

行玉米秸稈降解實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株，理由是。

菌株秸稈總重(g)秸稈殘重(g)秸稈失重（%）纖維素降解率（%）

A2.001.5124.5016.14

B2.001.5323.5014.92

C2.001.4229.0023.32

消毒滅菌

使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的

概念

的部分微生物（不包芽孢和孢子）微生物（包括芽孢和孢子）

常用煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線

灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌

方法消毒法

適用

操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

對(duì)象

61．（2020·江蘇·高考真題）產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開展

了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問題：

（1）常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中，下列物品及其滅菌方法錯(cuò)．誤．的是（填編號(hào)）。

編號(hào)①②③④

物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器

滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧

（2）稱取1．0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)后，獲得細(xì)胞密度不同

的菌懸液。分別取0．1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個(gè)酵

母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌個(gè)。

（3）為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對(duì)分離所得的菌株，采用射線輻照進(jìn)行育種。將輻照處

理后的酵母菌涂布在以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行

初篩，選擇直徑的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。

（4）在處理含油廢水的同時(shí)，可獲得單細(xì)胞蛋白，實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評(píng)價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能，

進(jìn)行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究，理由是。

62．（2020·全國I卷·高考真題）某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，

只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程

中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y。

回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的