高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1浙江省臺(tái)州市六校聯(lián)盟2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中選擇題部分一、選擇題（本大題共20小題，每小題2分，共40分。每小題列出的四個(gè)備選項(xiàng)中只有一個(gè)是符合題目要求的，不選、多選、錯(cuò)選均不得分）1.生物工程技術(shù)如同一把雙刃劍，既給人類帶來了便利，同時(shí)也引發(fā)了人們對其安全性的擔(dān)憂。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.我國禁止發(fā)展試管嬰兒等輔助性生殖技術(shù)B.生物武器會(huì)對人類安全造成極大威脅C.研究轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物時(shí)應(yīng)防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播D.胚胎移植前無需對受體進(jìn)行免疫檢查【答案】A〖祥解〗①我國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)；②生物武器是指有意識(shí)的利用致病微生物、毒素、昆蟲侵襲敵人的軍隊(duì)、人口、農(nóng)作物或牲畜等目標(biāo)，以達(dá)到戰(zhàn)爭目的的一類武器。【詳析】A、我國支持發(fā)展試管嬰兒等輔助性生殖技術(shù)，但反對任何生殖性克隆，A錯(cuò)誤；B、生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜，毀壞植物的武器，會(huì)給人類的生存安全造成嚴(yán)重威脅，應(yīng)嚴(yán)格禁止生產(chǎn)和使用，B正確；C、研究轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物時(shí)應(yīng)防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播，以防止基因污染的發(fā)生，C正確；D、進(jìn)行胚胎移植時(shí)，受體一般不會(huì)對移入子宮的外來胚胎發(fā)生免疫排斥，所以不必進(jìn)行免疫檢查，D正確。故選A。2.某種土壤細(xì)菌可將尿素（CH4N2O）分解為CO2和NH3，但分解產(chǎn)物CO2不能為該菌提供營養(yǎng)。若欲篩選出該種土壤細(xì)菌，僅考慮碳源和氮源，下列培養(yǎng)基設(shè)置合理的是（）A.僅尿素就可以，既是碳源也是氮源 B.僅葡萄糖就可以，可以從空氣中固氮C.尿素為氮源，需要葡萄糖作為碳源 D.牛肉膏蛋白胨含C和N，可以滿足【答案】C〖祥解〗各種培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)?！驹斘觥緼、尿素中雖然含有碳和氮，但是碳元素不能被該細(xì)菌利用，所以不能作為土壤細(xì)菌的碳源，只能作為氮源，A錯(cuò)誤；B、分離純化的土壤細(xì)菌只能利用土壤中的氮源，不能從空氣中固氮，B錯(cuò)誤；C、尿素為氮源，需要葡萄糖作為碳源，C正確；D、牛肉膏蛋白胨雖然含有碳和氮，但是不能用作篩選該種土壤細(xì)菌的培養(yǎng)基的碳源和氮源，D錯(cuò)誤。故選C。3.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染可接種蒸餾水來培育檢測B.接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋獲得單個(gè)菌落C.利用稀釋涂布平板法可對微生物進(jìn)行純化、分離和計(jì)數(shù)D.利用高濃度NaCl的培養(yǎng)基篩選抗鹽突變菌株【答案】A〖祥解〗（1）微生物的分離：①利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質(zhì)的“嗜好”，專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質(zhì)，使該微生物大量增殖。這些物質(zhì)主要是一些特殊的碳源、氮源，如纖維素可用來富集纖維素分解微生物，尿素可用來富集尿素分解微生物；②利用該分離對象對某種抑制物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物質(zhì)，經(jīng)培養(yǎng)后，由于原來占優(yōu)勢的它種微生物的生長受到抑制，而分離對象卻可趁機(jī)大量增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢。如篩選酵母菌和霉菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素，因青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的細(xì)胞壁的合成，從而抑制兩類微生物的生長，而酵母菌和霉菌正常生長增殖。（2）接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法?！驹斘觥緼、檢測培養(yǎng)基被污染的方法是將未接種的培養(yǎng)基或接種無菌水，在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，A錯(cuò)誤；B、接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個(gè)菌落，B正確；C、稀釋涂布平板法和平板劃線法是常用的兩種菌種分離的方法，稀釋涂布平板法還能對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，C正確；D、在高濃度的NaCl培養(yǎng)基中，不具抗鹽性狀的菌株不能生存，所以可以利用高NaCl的培養(yǎng)基篩選抗鹽突變菌株，D正確。故選A4.枇杷果具有滋陰潤肺、化痰止咳的功效，但由于枇杷果肉細(xì)胞中含有大量的多酚氧化酶，在貯存運(yùn)輸過程中，果實(shí)因受擠壓后容易發(fā)生組織褐變。為克服枇杷不易貯存的難題，廠家將其加工成枇杷汁、枇杷酒和枇杷醋，以滿足市場需求。下列關(guān)于工業(yè)生產(chǎn)枇杷酒和枇杷醋的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.枇杷酒和枇杷醋的發(fā)酵菌種不同，但代謝類型相同B.工業(yè)生產(chǎn)枇杷酒時(shí)，需要人工接種酵母菌C.利用枇杷酒制作枇杷醋時(shí)，需通入無菌空氣D.對醋桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，通常接種至液體培養(yǎng)基【答案】A〖祥解〗果酒制作的原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厭氧微生物，在缺氧條件下進(jìn)行無氧呼吸，在氧氣充足的條件下進(jìn)行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的細(xì)胞核，屬于真核生物，適宜酵母菌生長的溫度范圍是18~30℃；果醋制作的原理是在氧氣充足的條件下，醋酸菌將葡萄糖或者乙醇轉(zhuǎn)化成醋酸，醋酸菌無核膜包被的細(xì)胞核，是原核生物，屬于好氧菌，醋酸菌適宜生長的溫度范圍是30-35°C。【詳析】A、枇杷酒和枇杷醋的發(fā)酵菌種不同，前者是酵母菌，后者是醋酸菌，代謝類型不同，前者為兼性厭氧型，后者為需氧型，A錯(cuò)誤；B、工業(yè)生產(chǎn)枇杷酒時(shí)，需要人工接種酵母菌，同時(shí)選擇優(yōu)良的酵母菌種，可提枇杷酒的產(chǎn)量和品質(zhì)，B正確；C、利用枇杷酒制作枇杷醋時(shí)，需通入無菌空氣，因?yàn)榇姿岚l(fā)酵的菌種是醋酸桿菌，該菌為好氧菌，C正確；D、對醋桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，通常使用液體培養(yǎng)基，因?yàn)槭褂靡后w培養(yǎng)基能促進(jìn)培養(yǎng)液和菌種的接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，D正確。故選A。5.藿香是一種重要的中草藥，《本草綱目》記載“豆葉曰藿，其葉似之，故名”?？蒲腥藛T利用藿香的葉片為外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)過程如圖所示。下列說法正確的是（）A.①過程需將外植體剪碎并用胰酶分散為單細(xì)胞后接種B.②過程給予光照處理的目的是促進(jìn)外植體的脫分化C.③過程轉(zhuǎn)移至④過程需提高培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素的含量D.可用射線處理愈傷組織細(xì)胞并篩選后獲得優(yōu)良突變體【答案】D〖祥解〗在植物組織培養(yǎng)時(shí)，需要添加植物激素，其中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序及用量的比例等，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。生長素與細(xì)胞分裂素的用量比值高時(shí)，有利于根的分化，抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成，比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成。植物組織培養(yǎng)的流程為：制備MS培養(yǎng)基-外植體消毒-接種-培養(yǎng)-移栽-栽培?！驹斘觥緼、胰酶用來處理動(dòng)物細(xì)胞，①過程可直接接種，也可以用果膠酶處理分散得到單細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、②過程為脫分化，不需要光照處理，B錯(cuò)誤；C、植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)基生長素用量比細(xì)胞分裂素用量，比值高時(shí)，誘導(dǎo)生根，比值低時(shí)，誘導(dǎo)生芽，③過程轉(zhuǎn)移至④過程需提高培養(yǎng)基中生長素的含量，C錯(cuò)誤；D、愈傷組織細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，容易受射線或環(huán)境（某些試劑）影響而產(chǎn)生突變，故可用射線處理愈傷組織細(xì)胞以獲得優(yōu)良突變體，D正確。故選D。6.以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物。下列敘述正確的是（）A.在培養(yǎng)基中加入聚乙二醇，可獲得染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞B.以綠色葉片和白色花瓣作為外植體，進(jìn)行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗C.來自同一植株不同部位的細(xì)胞，它們的全能性表達(dá)難易程度一般相同D.若用某一植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，則該細(xì)胞必須有完整的細(xì)胞核和葉綠體【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。植物細(xì)胞具有全能性，即已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能?！驹斘觥緼、在培養(yǎng)基中加入聚乙二醇，其作用通常是誘導(dǎo)細(xì)胞融合，而不是獲得染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞。秋水仙素可以抑制紡錘體的形成，從而獲得染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞都具有該植物的全套遺傳物質(zhì)，以它們作為外植體，在適宜的條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗，B正確；C、來自同一植株不同部位的細(xì)胞，其分化程度不同，全能性表達(dá)難易程度一般不同。例如，幼嫩的細(xì)胞全能性相對容易表達(dá)，而高度分化的細(xì)胞全能性表達(dá)較困難，C錯(cuò)誤；D、若用某一植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，該細(xì)胞必須有完整的細(xì)胞核，因?yàn)榧?xì)胞核是遺傳信息庫，是細(xì)胞代謝和遺傳的控制中心。但不一定需要葉綠體，例如植物的根細(xì)胞沒有葉綠體，也能進(jìn)行組織培養(yǎng)形成完整植株，D錯(cuò)誤。故選B。7.樹莓果實(shí)營養(yǎng)豐富，應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量優(yōu)質(zhì)種苗，實(shí)現(xiàn)樹莓的工廠化生產(chǎn)。下列與樹莓組織培養(yǎng)相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）外植體→愈傷組織→叢生芽→試管苗A.培養(yǎng)基中加入抗生素可降低雜菌的污染B.試管苗形成后需經(jīng)煉苗后將其移栽入土壤中生長C.將叢生芽切割后進(jìn)行組織培養(yǎng)可實(shí)現(xiàn)快速繁殖D.將外植體莖尖的形態(tài)學(xué)上端朝上，并完全插入到培養(yǎng)基中【答案】D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。【詳析】A、抗生素用于抑制細(xì)菌污染，因此培養(yǎng)基中加入抗生素可降低雜菌的污染，A正確；B、欲將試管苗移栽前應(yīng)將其在培養(yǎng)箱中打開封口膜幾天進(jìn)行煉苗，再用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基（避免被污染）后進(jìn)行，B正確；C、叢生芽分生能力強(qiáng)，適合擴(kuò)繁，因此將叢生芽切割后進(jìn)行組織培養(yǎng)可實(shí)現(xiàn)快速繁殖，C正確；D、以莖尖作為外植體進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)將其形態(tài)學(xué)上端朝上，形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基中，但不是完全插入到培養(yǎng)基中，D錯(cuò)誤。故選D。8.病毒感染果蔬后，會(huì)借助胞間連絲等結(jié)構(gòu)擴(kuò)散，導(dǎo)致果蔬產(chǎn)量和品質(zhì)退化。通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)，利用莖尖可以快速培育出脫毒苗。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.配制MS固體培養(yǎng)基時(shí)，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后再調(diào)pHB.植株莖尖細(xì)胞中不含病毒的原因可能是該組織胞間連絲不發(fā)達(dá)C.切取的植株莖尖用70%的酒精消毒后，需放在清水中反復(fù)清洗D.脫毒苗培育是否成功，最終還需要通過接種病毒進(jìn)行個(gè)體水平的檢測【答案】B〖祥解〗MS培養(yǎng)基是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的，其特點(diǎn)是無機(jī)鹽和離子濃度較高，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適，能滿足植物細(xì)胞的營養(yǎng)和生理需要，因而適用范圍比較廣，多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基?！驹斘觥緼、配制MS固體培養(yǎng)基時(shí)，先調(diào)pH再高壓蒸汽滅菌，否則容易引起雜菌污染，A錯(cuò)誤；B、病毒感染果蔬后，會(huì)借助胞間連絲等結(jié)構(gòu)擴(kuò)散，植株莖尖細(xì)胞中不含病毒的原因可能是該組織胞間連絲不發(fā)達(dá)，B正確；C、切取的植株莖尖用70%的酒精消毒后，需放在無菌水中反復(fù)清洗，C錯(cuò)誤；D、通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗，是用莖尖等沒有被病毒感染的組織培養(yǎng)植株，可以提高產(chǎn)量，其基因并沒有改變，所以不可能有抗病毒的性狀，脫毒苗培育是否成功，不需要通過接種病毒進(jìn)行個(gè)體水平的檢測，D錯(cuò)誤。故選B。9.某研究小組為測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞（中）和正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是（）A.制備肝細(xì)胞懸液時(shí)能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶處理肝組織B.恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5%左右，以促進(jìn)細(xì)胞呼吸C.為了保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的無毒環(huán)境，需大量添加各種抗生素D.本實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，以檢測藥物對甲、乙的毒性大小【答案】D〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng).。培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）適宜的溫度和pH。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH值）?！驹斘觥緼、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)制備細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)用胰蛋白酶進(jìn)行處理，不能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶處理肝組織，因胃蛋白酶需要酸性環(huán)境，而在該環(huán)境中細(xì)胞會(huì)死亡，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，濃度為5%的CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，B錯(cuò)誤；C、抗生素是用來殺菌的，不是殺病毒的，C錯(cuò)誤；D、為了檢測藥物對甲、乙的毒性大小，應(yīng)設(shè)置培養(yǎng)液中不加該藥物的對照實(shí)驗(yàn)，D正確。故選D。10.培育“試管山羊”的基本過程如下圖所示。若要培育成功，下列敘述正確的是（）A.甲過程需注射促性腺激素來獲取大量的卵母細(xì)胞B.乙過程的目的之一是促進(jìn)卵母細(xì)胞和精子的成熟C.丁過程中早期胚胎需移植到與供體性狀相同的代孕母羊子宮內(nèi)D.為提高胚胎的利用率，可選擇發(fā)育良好的原腸胚進(jìn)行均等分割【答案】A〖祥解〗體外受精指的是將卵子和精子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程，再將早期胚胎移植到母體子宮內(nèi)發(fā)育的技術(shù)。受精卵→卵裂期（細(xì)胞數(shù)量增加，總體積基本不變）→桑椹胚（細(xì)胞數(shù)32個(gè)左右，全能性高）→囊胚（出現(xiàn)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層細(xì)胞和囊胚腔，開始分化）→原腸胚（形成內(nèi)中外三胚層）?！驹斘觥緼、在甲過程中，為了獲取大量卵母細(xì)胞，通常會(huì)給良種母山羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵，A正確；B、乙過程是體外受精過程，其目的是使精子和卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵，而不是促進(jìn)卵母細(xì)胞和精子的成熟，B錯(cuò)誤；C、丁過程中早期胚胎需移植到與供體生理狀態(tài)相同的代孕母羊子宮內(nèi)，而不是性狀相同，生理狀態(tài)相同才能保證胚胎的著床和發(fā)育，C錯(cuò)誤；D、為提高胚胎的利用率，可選擇發(fā)育良好的桑椹胚或囊胚進(jìn)行均等分割，原腸胚細(xì)胞已經(jīng)開始分化，不適合進(jìn)行胚胎分割，D錯(cuò)誤。故選A。11.某生物實(shí)驗(yàn)小組同學(xué)利用洋蔥進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)。下列操作正確的是（）A.為使洋蔥細(xì)胞更快裂解，可在研磨過程中加入纖維素酶B.向粗提取的DNA中加入2mol·L-1的SDS溶液可溶解DNAC.在沉淀中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精可使DNA沉淀析出D.用二苯胺對DNA進(jìn)行鑒定時(shí)需在常溫下進(jìn)行，以保持DNA結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定【答案】A〖祥解〗（1）DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。（2）DNA粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)中，不同操作步驟中加水的作用不同，破碎細(xì)胞獲取含DNA的濾液時(shí)，加蒸餾水的目的是使血細(xì)胞漲破；出去濾液中的雜質(zhì)時(shí)，加蒸餾水的目的是降低NaCl溶液濃度使DNA析出。【詳析】A、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，纖維素酶可以分解細(xì)胞壁中的纖維素，使細(xì)胞壁破壞，從而使洋蔥細(xì)胞更快裂解，A正確；B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在2mol·L-1的NaCl溶液中DNA的溶解度較大，所以向粗提取的DNA中加入2mol·L-1的NaCl溶液可溶解DNA，B錯(cuò)誤；C、DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，所以在上清液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精可使DNA沉淀析出，C錯(cuò)誤；D、用二苯胺對DNA進(jìn)行鑒定時(shí)需要沸水浴加熱，而不是在常溫下進(jìn)行。在沸水浴條件下，DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色，常溫下該反應(yīng)無法有效進(jìn)行，D錯(cuò)誤。故選A。12.下列關(guān)于基因工程敘述，錯(cuò)誤的是()A.目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或微生物B.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)【答案】D【詳析】A.目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因，可來自動(dòng)、植物或微生物，受體細(xì)胞是指表達(dá)目的基因的細(xì)胞，可來自動(dòng)、植物或微生物，A正確；B.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶在獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體必要的工具酶，B正確；C.大腸桿菌屬于原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對核糖體上合成的人胰島素原進(jìn)行加工修飾，所以胰島素原沒有生物活性，C正確；D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，但不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)，D錯(cuò)誤；因此，本題答案選D?？键c(diǎn)：本題考查基因工程的知識(shí)。點(diǎn)評：本題難度中等，屬于考綱理解層次。解答本題的關(guān)鍵是理解載體上的抗性基因的目的是用于檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，即用于篩選含重組DNA的細(xì)胞。13.某校學(xué)習(xí)小組進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)，甲、乙、丙三名同學(xué)分別以酵母菌為材料，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，各取20ul產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳，得到的結(jié)果如下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.凝膠a端靠近電泳槽的負(fù)極接線柱B.甲同學(xué)設(shè)置的PCR循環(huán)次數(shù)可能比乙同學(xué)多C.丙同學(xué)所用的引物可能與甲乙同學(xué)的不一樣D.丙同學(xué)擴(kuò)增得到的片段比甲乙同學(xué)的要大【答案】D〖祥解〗利用PCR可以在體外進(jìn)行DNA片段的擴(kuò)增。PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。DNA具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷。在電場的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng)，這個(gè)過程就是電泳。PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)?！驹斘觥緼、在a端點(diǎn)樣孔，DNA分子帶負(fù)電荷，在電場的作用下會(huì)向正極移動(dòng)，故凝膠a端靠近電泳槽的負(fù)極接線柱，A正確；B、甲同學(xué)的電泳條帶比乙同學(xué)條帶寬，說明甲同學(xué)擴(kuò)增的DNA產(chǎn)物多于乙同學(xué)，故甲同學(xué)設(shè)置的PCR循環(huán)次數(shù)可能比乙同學(xué)多，B正確；C、由圖可知，丙同學(xué)擴(kuò)增出來的產(chǎn)物與甲乙同學(xué)產(chǎn)物不同，其DNA不同，其堿基序列可能不同，故丙同學(xué)所用的引物可能與甲乙同學(xué)的不一樣，C正確；D、丙同學(xué)擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳條帶比甲乙條帶位置距離點(diǎn)樣孔更遠(yuǎn)，說明丙同學(xué)擴(kuò)增的DNA分子小，速率快，D錯(cuò)誤。故選D。14.食品工業(yè)以紅薯粉為原料經(jīng)黑曲霉（一種絲狀真菌）發(fā)酵獲得檸檬酸，如圖為生產(chǎn)檸檬酸的簡要流程圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.優(yōu)良菌種可通過誘變育種或基因工程育種獲得B.培養(yǎng)過程1需蘸取菌液3次，灼燒4次C.提供中性偏酸的培養(yǎng)環(huán)境更利于提高檸檬酸的產(chǎn)量D.可通過過濾、沉淀等方法分離發(fā)酵罐中的黑曲霉菌【答案】B〖祥解〗純化菌種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法?！驹斘觥緼、誘變育種可通過物理、化學(xué)等因素誘導(dǎo)基因突變，從而獲得優(yōu)良性狀的菌種；基因工程育種能定向地將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，培育出優(yōu)良菌種。所以優(yōu)良菌種可通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；B、在平板劃線操作中，每次劃線前后都要灼燒接種環(huán)。第一次劃線前灼燒是為了殺死接種環(huán)上原有的微生物；每次劃線結(jié)束后灼燒是為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者。接種環(huán)蘸取菌液1次，進(jìn)行第一次劃線，之后每次劃線都從上一次劃線的末端開始，共進(jìn)行3次劃線，所以需灼燒4次，B錯(cuò)誤；C、黑曲霉發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸，提供中性偏酸的培養(yǎng)環(huán)境更利于提高檸檬酸的產(chǎn)量，C正確；D、黑曲霉菌絲體較大，可通過過濾、沉淀等固液分離的方法將其從發(fā)酵罐中分離出來，D正確。故選B。15.在“探究酵母菌種群數(shù)量動(dòng)態(tài)變化”實(shí)驗(yàn)中，酵母菌用臺(tái)盼藍(lán)染色。實(shí)驗(yàn)所用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板如圖甲，一個(gè)計(jì)數(shù)室如圖乙，顯微鏡下一個(gè)小方格中酵母菌菌體分布如圖丙，丙中有2個(gè)（方格內(nèi)）酵母菌被染成藍(lán)色。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.用臺(tái)盼藍(lán)染色的依據(jù)是死細(xì)胞膜的通透性增加，可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色B.對酵母菌計(jì)數(shù)應(yīng)采用抽樣檢測的方法：先蓋蓋玻片，然后吸取培養(yǎng)液滴于計(jì)數(shù)室上C.如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，可尋找菌體數(shù)量適中的小方格計(jì)數(shù)D.若觀察的小方格中酵母菌活菌平均數(shù)如丙，則估算活酵母菌的總數(shù)為2×107個(gè)/mL【答案】BC〖祥解〗探究酵母菌種群數(shù)量的變化實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)流程為：（1）酵母菌培養(yǎng)（液體培養(yǎng)基，無菌條件）→（2）振蕩培養(yǎng)基（酵母菌均勻分布于培養(yǎng)基中）→（3）觀察并計(jì)數(shù)→重復(fù)（2）、（3）步驟（每天計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量的時(shí)間要固定）→繪圖分析?！驹斘觥緼、由于活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，臺(tái)盼藍(lán)只能給死細(xì)胞染色，故實(shí)驗(yàn)中被臺(tái)盼藍(lán)溶液染成藍(lán)色的酵母菌為死細(xì)胞，A正確；B、對酵母菌計(jì)數(shù)采用抽樣檢測法，操作時(shí)先蓋蓋玻片，再吸取培養(yǎng)液滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入計(jì)數(shù)室，B錯(cuò)誤；C、如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，可將其進(jìn)行稀釋后再計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、分析丙圖可知，觀察的小方格中酵母菌活菌平均數(shù)為7個(gè)，其中有2個(gè)酵母菌被染成藍(lán)色，即該小方格的活菌數(shù)為5個(gè)，由此估算1mL培養(yǎng)液中活酵母菌的總數(shù)=（5×400）/（1×1×0.1×10-3）=2×107個(gè)/mL，D正確。故選BC。16.高效生產(chǎn)酒精的優(yōu)良酵母菌菌種需具備耐高糖和耐酸的特性，釀酒酵母產(chǎn)酒精能力強(qiáng)，但沒有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精發(fā)酵能力弱?？蒲腥藛T進(jìn)行了下圖所示的酵母菌種改良實(shí)驗(yàn)。下列關(guān)于菌種改良過程的敘述，正確的是（）A.可用纖維素酶和果膠酶處理去除細(xì)胞壁，獲得兩種酵母菌的原生質(zhì)體B.可在反應(yīng)體系中加入過量的無菌水稀釋來終止聚乙二醇（PEG）的作用C.培養(yǎng)基X是以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，用來篩選出雜種酵母D.若對目標(biāo)酵母進(jìn)行耐酒精的篩選，可在含較高酒精濃度的培養(yǎng)基中多次繼代培養(yǎng)【答案】D〖祥解〗選擇培養(yǎng)基是指通過添加特定成分（如化學(xué)物質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)）或調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件（如pH、溫度），僅允許目標(biāo)微生物生長而抑制其他微生物的培養(yǎng)基。【詳析】A、酵母菌細(xì)胞壁的主要成分是幾丁質(zhì)，而不是纖維素和果膠，所以不能用纖維素酶和果膠酶處理去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；B、加入過量無菌水會(huì)使酵母菌吸水漲破，不能用這種方式終止PEG的作用，B錯(cuò)誤；C、糖化酵母能合成淀粉酶可利用淀粉生長，釀酒酵母不能合成淀粉酶無法利用淀粉生長，而雜種酵母具備糖化酵母合成淀粉酶的特性以及釀酒酵母的其他特性，所以可篩選出雜種酵母，培養(yǎng)基X是以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，能篩選出雜種酵母和糖化酵母，但無法進(jìn)一步區(qū)分，C錯(cuò)誤；D、若對目標(biāo)酵母進(jìn)行耐酒精的篩選，在含較高酒精濃度的培養(yǎng)基中多次繼代培養(yǎng)，能在此環(huán)境中生存的酵母即為耐酒精的目標(biāo)酵母，D正確。故選D。17.胎牛血清（FBS）是天然的培養(yǎng)基，能夠在多種動(dòng)物卵母細(xì)胞的成熟過程中提供足夠的營養(yǎng)物質(zhì)，起到非常好的促進(jìn)效果。下表是后期胚胎培養(yǎng)液（CR2后液）中添加不同濃度FBS對牛核移植胚胎發(fā)育的影響情況，下列敘述正確的是（）胎牛血清（FBS）的不同濃度對牛核移植胚胎發(fā)育的影響組別培養(yǎng)液卵裂率/%囊胚率/%對照組CR2后液59.17±1.3413.53±2.04實(shí)驗(yàn)組110%FBS+CR2后液62.14±1.7813.78±2.77實(shí)驗(yàn)組220%FBS+CR2后液68.95±4.1526.09±2.20實(shí)驗(yàn)組330%FBS+CR2后液62.02±8.648.78±3.20A.胚胎培養(yǎng)液成分包含無機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等B.若統(tǒng)計(jì)每組實(shí)驗(yàn)的桑葚胚率，其數(shù)值應(yīng)小于囊胚率C.添加20%FBS是促進(jìn)核移植胚胎發(fā)育的最適濃度D.添加不同濃度的FBS對卵裂率和囊胚率均有促進(jìn)作用【答案】A〖祥解〗早期胚胎發(fā)育：受精卵→卵裂期（細(xì)胞數(shù)量增加，總體積基本不變）→桑椹胚（細(xì)胞數(shù)32個(gè)左右，全能性高）→囊胚（出現(xiàn)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層細(xì)胞和囊胚腔，開始分化）→原腸胚（形成內(nèi)中外三胚層）?！驹斘觥緼、胚胎培養(yǎng)液成分通常包含無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，還需要加入血清等天然成分，A正確。B、胚胎發(fā)育過程中，桑葚胚發(fā)育在前，囊胚發(fā)育在后，一般情況下桑葚胚率應(yīng)大于囊胚率，B錯(cuò)誤。C、僅根據(jù)表中給出的10%、20%、30%這三種FBS濃度對牛核移植胚胎發(fā)育的影響，不能確定20%FBS就是促進(jìn)核移植胚胎發(fā)育的最適濃度，可能還有更合適的濃度未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，C錯(cuò)誤。D、從表中數(shù)據(jù)看，實(shí)驗(yàn)組3（30%FBS+CR2后液）的囊胚率8.78±3.20低于對照組的13.53±2.04，說明添加30%FBS對囊胚率起抑制作用，并非添加不同濃度的FBS對卵裂率和囊胚率均有促進(jìn)作用，D錯(cuò)誤。故選A。18.單克隆抗體在多種疾病的診斷和治療中發(fā)揮重要作用，下圖是利用小鼠制備單克隆抗體的過程，以下敘述錯(cuò)誤的是（）A.已免疫的小鼠脾臟中，每個(gè)B淋巴細(xì)胞只產(chǎn)生1種抗體B.在特定培養(yǎng)基中篩選出的細(xì)胞M為雜交瘤細(xì)胞C.將2種B淋巴細(xì)胞融合可得到持續(xù)產(chǎn)生雙抗的漿細(xì)胞D.經(jīng)過上圖細(xì)胞篩選過程之后的細(xì)胞還需進(jìn)行進(jìn)一步篩選【答案】C〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在經(jīng)過兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。兩次抗體檢測：專一抗體檢驗(yàn)陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細(xì)胞。最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體?！驹斘觥緼、一般而言，一種B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，A正確；B、利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在特定培養(yǎng)基中篩選出的細(xì)胞M為雜交瘤細(xì)胞，B正確；C、漿細(xì)胞不能分裂，將2種B淋巴細(xì)胞融合不可得到持續(xù)產(chǎn)生雙抗的漿細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、經(jīng)過上圖細(xì)胞篩選過程之后的細(xì)胞還需進(jìn)行進(jìn)一步篩選，即進(jìn)行專一抗體陽性檢測：根據(jù)抗原—抗體特異性結(jié)合原理，檢測時(shí)取培養(yǎng)液滴加相應(yīng)抗原出現(xiàn)反應(yīng)為目標(biāo)細(xì)胞，D正確。故選C。19.埃博拉病毒是一種引起人類產(chǎn)生埃博拉出血熱的單鏈RNA病毒，腺病毒是一類侵染動(dòng)物細(xì)胞的DNA病毒，某研究團(tuán)隊(duì)利用埃博拉病毒跨膜表面糖蛋白（GP），以人復(fù)制缺陷腺病毒為載體研發(fā)了埃博拉病毒疫苗。下圖為部分研制流程示意圖，下列敘述正確的是（）A.埃博拉病毒中分離的GP基因經(jīng)限制酶切割后，通過DNA連接酶與質(zhì)粒相連接B.病毒的擴(kuò)大培養(yǎng)過程中需要使用CO2培養(yǎng)箱調(diào)節(jié)pHC.疫苗在人體內(nèi)發(fā)揮作用的過程中，腺病毒不斷增殖D.在重組腺病毒中，GP基因上游必須有啟動(dòng)子以驅(qū)動(dòng)其復(fù)制和表達(dá)【答案】B〖祥解〗基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與表達(dá)。其中，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心?！驹斘觥緼、埃博拉病毒是RNA病毒，GP基因的本質(zhì)是RNA，而質(zhì)粒的本質(zhì)是DNA，故GP基因經(jīng)限制酶切割后，不能通過DNA連接酶與質(zhì)粒相連接，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)過程中CO2的作用是調(diào)節(jié)pH，B正確；C、腺病毒為復(fù)制缺陷腺病毒，故疫苗在人體內(nèi)發(fā)揮作用的過程中，腺病毒不會(huì)增殖，C錯(cuò)誤；D、啟動(dòng)子是轉(zhuǎn)錄的起點(diǎn)，故在重組腺病毒中，GP基因上游必須有啟動(dòng)子以驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄，D錯(cuò)誤。故選B。20.CRISPR/Cas9是一種生物學(xué)工具，能夠通過“剪切和粘貼”DNA序列的機(jī)制來編輯基因組。CRISPR-Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向?qū)NA和Cas9蛋白組成，向?qū)NA識(shí)別并結(jié)合靶基因DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端。這兩個(gè)末端通過“斷裂修復(fù)”重新連接時(shí)通常會(huì)有個(gè)別堿基對的插入或缺失，從而實(shí)現(xiàn)基因敲除，如圖所示。下列敘述正確的是（）A.Cas9蛋白的功能與限制酶類似，能作用于脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵B.向?qū)NA具有能與目標(biāo)DNA發(fā)生堿基互補(bǔ)配對的結(jié)構(gòu)C.對不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，使用Cas9蛋白和相同的向?qū)NA進(jìn)行基因編輯D.通過該基因編輯技術(shù)引起的變異屬于基因重組【答案】B〖祥解〗由題意可知，CRISPR-Cas9體系是由靶基因的向?qū)NA和Cas9蛋白構(gòu)成的復(fù)合體。向?qū)NA在基因組中負(fù)責(zé)尋找靶基因并與其結(jié)合；Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復(fù)的過程中容易隨機(jī)引起一些堿基對的插入或缺失，導(dǎo)致基因功能改變?！驹斘觥緼、Cas9蛋白識(shí)別并切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端，相當(dāng)于限制酶，能作用于磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；B、向?qū)NA具有能與目標(biāo)DNA發(fā)生堿基互補(bǔ)配對的結(jié)構(gòu)，向?qū)NA識(shí)別并結(jié)合靶基因DNA，B正確；C、在對不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，應(yīng)使用Cas9蛋白和不同向?qū)NA對不同基因的編輯，C錯(cuò)誤；D、通過該基因編輯技術(shù)引起個(gè)別堿基對的插入或缺失，引起的變異屬于基因突變，D錯(cuò)誤。故選B。非選擇題部分二、非選擇題（本大題共5小題；共60分）21.某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉栴}：（1）培養(yǎng)基中物質(zhì)S的作用是_____，甲、乙培養(yǎng)基均屬于_____培養(yǎng)基（按功能分類）。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是______。（2）在4個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種同一稀釋倍數(shù)的稀釋液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為25、172、183、188。已知原樣品中菌體濃度為1.81×108個(gè)/ml，則接種稀釋液的稀釋倍數(shù)為_____倍。此法測得結(jié)果與真實(shí)值出現(xiàn)偏差的原因是__________。（3）經(jīng)步驟⑤篩選得到的菌種可接種至_____培養(yǎng)基中保存。在篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是____________?！敬鸢浮浚?）①.提供碳源和氮源②.選擇③.瓊脂##凝固劑（2）①.105②.當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上顯示的只有一個(gè)菌落（3）①.斜面②.S的濃度超過某一值時(shí)培養(yǎng)液滲透壓過高，導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞滲透失水過多，抑制菌株的生長〖祥解〗由題圖信息分析可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是分離獲得高效降解S的細(xì)菌菌株，S是含C、H、N的有機(jī)物，可在培養(yǎng)基中提供碳源和氮源，甲培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，乙是固體培養(yǎng)基，二者的組分差別在于Y，這說明Y是凝固劑，是瓊脂?！窘馕觥浚?）由題干信息可知，物質(zhì)S含有C、H、N，則在兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)S可以提供氮源和碳源；甲、乙培養(yǎng)基均屬于選擇培養(yǎng)基，用以分離能降解S的微生物；甲、乙兩種培養(yǎng)基配方中相差的是Y，其中甲是液體培養(yǎng)基，乙是固體培養(yǎng)，這說明乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是瓊脂（或凝固劑）。（2）結(jié)合題干實(shí)驗(yàn)過程可知，該過程采取了稀釋涂布平板法，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在4個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種同一稀釋倍數(shù)的溶液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為25、172、183和188，其中172、183和188三個(gè)平板符合計(jì)數(shù)要求，菌落平均數(shù)=（172+183+188）÷3=181，設(shè)稀釋倍數(shù)為x，所以每毫升土樣品中的細(xì)菌數(shù)量=181÷0.1×x=1.81×108個(gè)/ml，計(jì)算得x為105，故接種稀釋液的稀釋倍數(shù)為105倍。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上顯示的只有一個(gè)菌落，測得菌落數(shù)比真實(shí)值往往偏低，故此法測得結(jié)果與真實(shí)值會(huì)出現(xiàn)偏差。（3）經(jīng)步驟⑤篩選得到的菌種可接種至斜面培養(yǎng)基中保存。在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對S的降解量反而下降，可能由于S的濃度超過某一值時(shí)培養(yǎng)液滲透壓過高，會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞滲透失水過多，抑制菌株的生長，從而導(dǎo)致S濃度過高時(shí)菌株降解S的量下降。22.狼爪瓦松是一種具有觀賞價(jià)值的野生花卉，其生產(chǎn)的黃酮類化合物可入藥。狼爪瓦松野生資源有限，難以滿足市場化需求。因此，目前一般通過植物細(xì)胞工程手段進(jìn)行培養(yǎng)，具體過程如圖所示，其中的數(shù)字序號(hào)代表處理或生理過程?；卮鹣铝袉栴}：（1）進(jìn)行過程①時(shí)，先用流水充分沖洗植株甲幼葉，然后酒精消毒，再用____消毒10min，最后用_____沖洗。（2）過程②表示____，產(chǎn)生過程③的原因是_________。狼爪瓦松植株乙、丙、丁的獲得都需要利用__________技術(shù)，④過程選用愈傷組織的細(xì)胞進(jìn)行誘變的原因是____________。（3）從育種的角度看，植物組織培養(yǎng)與有性生殖相比，優(yōu)勢主要有________（答出2點(diǎn)即可）。（4）培養(yǎng)某一種雜合體時(shí)，若要快速獲得與原植株基因型和表型都相同的植株，不能采用花粉粒作為外植體的原因是____________?！敬鸢浮浚?）①.10%次氯酸鈉（次氯酸鈣）②.無菌水（2）①.脫分化②.植物細(xì)胞具有全能性③.植物組織培養(yǎng)（離體培養(yǎng)）④.愈傷組織細(xì)胞分化程度低，分裂能力強(qiáng)（3）繁殖速度快、能保持品種的優(yōu)良性狀（4）對雜合體的植株來說，花粉粒細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂得到，其基因型與體細(xì)胞的基因型不同，用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到的植株基因型不同于原植株〖祥解〗植物組織培養(yǎng)是指將離體的物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)?！窘馕觥浚?）接種前將外植體用酒精消毒后，還需要用10%次氯酸鈉（次氯酸鈣）消毒10min，最后用無菌水沖洗。（2）過程②誘導(dǎo)形成愈傷組織，即過程②為脫分化過程。愈傷組織誘導(dǎo)生芽生根體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性。狼爪瓦松植株乙、丙、丁的獲得都需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。選擇愈傷組織進(jìn)行誘變的原因是愈傷組織細(xì)胞分化程度低，分裂能力強(qiáng)。（3）從育種的角度看，植物組織培養(yǎng)與有性生殖相比，優(yōu)勢主要有繁殖速度快、能保持品種的優(yōu)良性狀。（4）培養(yǎng)某一種雜合體時(shí)，若要快速獲得與原植株基因型和表型都相同的植株，不能采用花粉粒作為外植體的原因是對雜合體的植株來說，花粉粒細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂得到，其基因型與體細(xì)胞的基因型不同，用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到的植株基因型不同于原植株。23.人的血清白蛋白通常從人血液中提取?，F(xiàn)應(yīng)用一定的生物工程技術(shù)，將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中，利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)血清白蛋白成為可能。大致過程如下：A．將人體血清白蛋白基因?qū)氪菩阅膛Ｅ咛ゼ?xì)胞，形成細(xì)胞①；B．取出細(xì)胞①的細(xì)胞核，注入去核牛卵母細(xì)胞中，形成細(xì)胞②；C．電脈沖刺激細(xì)胞②促使其形成早期胚胎；D．將胚胎移植到代孕母牛的子宮內(nèi)，最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。請回答下列問題：（1）細(xì)胞①、②中實(shí)現(xiàn)了基因重組的是_____。B過程中需選擇培養(yǎng)至____時(shí)期的卵母細(xì)胞。（2）胚胎干細(xì)胞來源于_______期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。（3）在培育轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí)，應(yīng)將人的血清白蛋白基因與乳腺蛋白基因的______等調(diào)控組件重組在一起，通過______技術(shù)將其導(dǎo)入奶牛的胚胎細(xì)胞中。（4）進(jìn)行胚胎移植前需要進(jìn)行性別鑒定，目前最有效的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是：從被檢測的囊胚中取出幾個(gè)______細(xì)胞，提取DNA進(jìn)行擴(kuò)增，用位于Y染色體上的性別決定基因（即SRY基因）制成的探針進(jìn)行檢測，若未出現(xiàn)雜交鏈，則該胚胎________（填“是”或“否”）用于移植。暫不移植的胚胎可使用________方法保存。（5）若轉(zhuǎn)基因奶牛表達(dá)的人血清白蛋白穩(wěn)定性和生物活性較低，可通過_____在基因水平上實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)中氨基酸序列的改造，來提高穩(wěn)定性和生物活性?！敬鸢浮浚?）①.①②.減數(shù)第二次分裂中期（減數(shù)分裂MⅡ中期）（2）囊胚（3）①.啟動(dòng)子②.顯微注射（4）①.滋養(yǎng)層②.是③.低溫（冷凍、液氮）（5）蛋白質(zhì)工程〖祥解〗分析材料：將人體血清白蛋白基因?qū)氪菩阅膛Ｅ咛ゼ?xì)胞，形成細(xì)胞①，該過程采用了基因工程技術(shù)，其原理是基因重組；取出細(xì)胞①的細(xì)胞核，注入去核牛卵母細(xì)胞中，形成細(xì)胞②，該過程采用了核移植技術(shù)，其原理是動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；要形成轉(zhuǎn)基因克隆奶牛還需要采用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)?！窘馕觥浚?）細(xì)胞①是將人體血清白蛋白基因?qū)氪菩阅膛Ｅ咛ゼ?xì)胞形成的，此過程發(fā)生了基因重組；細(xì)胞②是核移植形成的，沒有發(fā)生基因重組。核移植過程中，B步驟需選擇培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期（MⅡ中期）的卵母細(xì)胞，因?yàn)榇藭r(shí)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。（2）胚胎干細(xì)胞來源于囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。（3）在培育轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí)，應(yīng)將人的血清白蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，啟動(dòng)子可以啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。通過顯微注射技術(shù)將重組基因?qū)肽膛５呐咛ゼ?xì)胞中，顯微注射技術(shù)是將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法。（4）進(jìn)行胚胎移植前需要進(jìn)行性別鑒定，從被檢測的囊胚中取出幾個(gè)滋養(yǎng)層細(xì)胞，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行鑒定不會(huì)影響胚胎的發(fā)育。用位于Y染色體上的性別決定基因（即SRY基因）制成的探針進(jìn)行檢測，若未出現(xiàn)雜交鏈，說明胚胎細(xì)胞中不含Y染色體，則該胚胎是雌性，是用于移植（因?yàn)樾枰氖悄墚a(chǎn)奶的雌性奶牛）。暫不移植的胚胎可使用冷凍（或低溫）方法保存。（5）若轉(zhuǎn)基因奶牛表達(dá)的人血清白蛋白穩(wěn)定性和生物活性較低，可通過蛋白質(zhì)工程在基因水平上實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)中氨基酸序列的改造，來提高穩(wěn)定性和生物活性。蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）。24.人胰島素基因表達(dá)的最初產(chǎn)物是一條肽鏈構(gòu)成的前胰島素原，經(jīng)加工后形成兩條肽鏈（A鏈和B鏈）的有生物活性的胰島素。此后科學(xué)家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的兩種方法：“AB”法是根據(jù)胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段，利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素；“BCA”法是利用人體某細(xì)胞中的mRNA得到胰島素基因，表達(dá)出胰島素原后再用特定酶切掉C肽段。這兩種方法使用同一種質(zhì)粒作為載體。請據(jù)下圖分析并回答下列問題：（1）由于_____，“AB”法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列?！癇CA”法是利用人體_____細(xì)胞中的mRNA，再由mRNA經(jīng)_____得到的胰島素基因，_____（填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”）法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動(dòng)子。（2）研究人員為獲得胰島素基因，設(shè)計(jì)了一些PCR引物，如下表所示，故應(yīng)選用哪對組合的引物?_______________。項(xiàng)目DNA序列（省略了部分核苷酸序列）已知胰島素基因序列5'-AACTATGCGCTCATGA…GCAATGCGTAGCCTCT-3'3'-TTGATACGCGAGTACT…CGTTACGCATCGGAGA-5'PCR引物①5'-AACTATGCGCTCATGA-3'②5'-GCAATGCGTAGCCTCT-3'③5'-AGAGGCTACGCATTGC-3'④5'-TCATGAGCGCATAGTT-3'（3）獲得人的胰島素基因后，需要通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，若計(jì)劃用1個(gè)胰島素基因?yàn)槟０瀚@得m（m大于2）個(gè)胰島素基因，則消耗的引物總量是____個(gè)。PCR反應(yīng)體系成分除模板、2種引物外，還需加入緩沖液、_____、_____酶。（4）PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，下列敘述中正確的有__________。A.PCR反應(yīng)前，在微量離心管中加入相關(guān)成分后離心，目的使反應(yīng)液混合均勻B.待測樣品中DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度等都會(huì)影響DNA在電泳中的遷移速率C.進(jìn)行電泳時(shí)，帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相同的電極移動(dòng)D.瓊脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外燈下被檢測（5）β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。經(jīng)_____（方法）處理大腸桿菌后，與重組質(zhì)?；旌吓囵B(yǎng)一段時(shí)間，將大腸桿菌接種到添加了_______和X-gal的培養(yǎng)基上篩選出_____色的菌落即為工程菌種?！敬鸢浮浚?）①.一種氨基酸可能對應(yīng)多種密碼子②.胰島β③.逆轉(zhuǎn)錄④.AB和BCA（2）①③（3）①.2m-2②.四種脫氧核苷三磷酸##dNTP③.耐高溫的DNA聚合##TaqDNA聚合（4）BD（5）①.鈣離子處理##CaCl2溶液②.氨芐青霉素③.白〖祥解〗PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的簡稱，指在引物指導(dǎo)下由酶催化的對特定模板（克隆或基因組DNA）的擴(kuò)增反應(yīng)，是模擬體內(nèi)DNA復(fù)制過程，在體外特異性擴(kuò)增DNA片段的一種技術(shù)。【解析】（1）由于密碼子的簡并性，一種氨基酸可能對應(yīng)多種密碼子，“AB”法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列。胰島素基因存在于所有細(xì)胞中，但只能在胰島B細(xì)胞中表達(dá)，結(jié)合題意“BCA法是利用人體某細(xì)胞中的mRNA得到胰島素基因，表達(dá)出胰島素原后再用特定酶切掉C肽段”可知，BCA法是從人體胰島B細(xì)胞中獲取mRNA，再由mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程得到的胰島素基因；在基因的結(jié)構(gòu)中，啟動(dòng)子在非編碼區(qū)，是不會(huì)被轉(zhuǎn)錄和翻譯的，結(jié)合題干可在“AB法是根據(jù)胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段，利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素”，故由AB法中的“胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列”，和BCA法中的“胰島B細(xì)胞中的mRNA”得到的目的基因中均不含人胰島素基因啟動(dòng)子。（2）由于DNA復(fù)制時(shí)，子鏈的延伸是從引物的3′端開始的，因此引物需要在模板的3'端開始進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對，即PCR引物應(yīng)該添加在識(shí)別序列的3′端。引物與模板鏈的部分堿基互補(bǔ)配對，因此選擇①③。（3）通過上述方法獲得人的胰島素基因后，需要通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，若計(jì)劃用1個(gè)胰島素基因?yàn)槟０瀚@得m（m大于2）個(gè)胰島素基因，由于子鏈的延伸都需要從引物的3'端開始，即新合成的子鏈中均帶有引物，只有原來的模板鏈上沒有引物連接，故消耗的引物總量是2m-2。PCR反應(yīng)體系成分除模板、2種引物外，還需加入緩沖液、四種脫氧核苷三磷酸（原料）、耐高溫的DNA聚合酶。（4）A、PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶主要在延伸過程起作用，A錯(cuò)誤；B、待測樣品中DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度等都會(huì)影響DNA在電泳中的遷移速率，進(jìn)而影響DNA分子呈現(xiàn)的電泳效果，B正確；C、根據(jù)電荷同性相斥、異性相吸引可推測，進(jìn)行電泳時(shí)，帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)，C錯(cuò)誤；D、凝膠中的DNA分子通過染色才可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，D正確。故選BD。（5）將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中，常用鈣離子處理法。結(jié)合圖示可知，將目的基因的插入的位置是在lacZ基因中，會(huì)破壞lacZ基因的結(jié)構(gòu)，不能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，根據(jù)題干信息“β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)”，故目的基因的插入破壞了lacZ基因的結(jié)構(gòu)，使其不能正常表達(dá)產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，底物X-gal不會(huì)被分解，所以篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌時(shí)，在添加了氨芐青霉素（氨芐青霉素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因）和X-gal的培養(yǎng)基上應(yīng)選擇白色的菌落。25.為使甘藍(lán)具有抗除草能力，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入甘藍(lán)植株，獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因甘藍(lán)。（如圖1，注：BamHI識(shí)別的序列是G↓GATCC；Bg/Ⅱ識(shí)別的序列是A↓GATCT，EcoRI識(shí)別的序列是G↓AATTC）（1）利用PCR擴(kuò)增草甘膦抗性基因時(shí)，需要在引物的________（填“3'端”或“5'端”）添加限制酶識(shí)別序列，若產(chǎn)物中除了目的基因外有其他DNA片段存在，原因可能是_________（答出2點(diǎn)即可）。（2）構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)切割質(zhì)粒應(yīng)選擇______酶切。酶切后的目的基因存在正向與反向兩種連接方式，可用_