天麻33種農(nóng)藥殘留測定實證研究摘要天麻作為一種常用的中草藥，具有補(bǔ)腦益智、平肝息風(fēng)、祛風(fēng)止痛等作用，被廣泛應(yīng)用于臨床，因此天麻的中藥種植產(chǎn)業(yè)也逐漸發(fā)展。為了減少中藥材受到病蟲害的侵?jǐn)_，在中藥的培植過程中，農(nóng)藥使用越發(fā)頻繁，甚至到了不可或缺的程度，但是隨著中藥種植范圍的擴(kuò)大，會產(chǎn)生一定農(nóng)藥殘留問題，影響了中藥的質(zhì)量與安全。因此，本文主要探索不同產(chǎn)地天麻33種農(nóng)藥殘留測定，這對于擴(kuò)大中國優(yōu)質(zhì)中藥種植產(chǎn)業(yè)，提高我國中藥及中藥飲片的質(zhì)量安全具有重要意義。本文以天麻為研究對象，應(yīng)用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法與高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對天麻殘留農(nóng)藥進(jìn)行試驗研究，研究農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)，得出本次檢測中準(zhǔn)確度、精密度、線性與范圍、專屬性、定量限和檢出限均符合要求。關(guān)鍵詞：不同產(chǎn)地；天麻；農(nóng)藥殘留；測定目錄TOC\o"1-3"\h\u278311.前言 .前言1.1研究背景天麻是重要的中藥材，為天麻科植物天麻或云南天麻干燥根所制得的天然高分子聚合物[1]。野生資源豐富，我國對栽培天麻的研究始于明代，在《本草綱目》中有記載天麻“補(bǔ)五臟，安精神”、“益氣力、長肌肉、強(qiáng)筋骨”的作用?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》將天麻列為上品：“久服輕身不老，耐寒暑，耐饑渴，療寒疝痹?！薄渡褶r(nóng)本草經(jīng)》所載野生天麻的功效：“治傷寒邪氣腹痛泄瀉；補(bǔ)中益氣；化痰息風(fēng)。久服輕身不老?！笨梢娫诿鞔郧八幱锰炻槭且环N滋補(bǔ)良藥[2]。然而隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)科技的發(fā)展和人們對藥物毒性和耐藥性越來越重視。農(nóng)藥殘留分析問題研究普遍存在，特別是在蔬菜、水果、茶葉等農(nóng)產(chǎn)品中較為明顯。雖然我國國家明文規(guī)定劇毒、高毒農(nóng)藥不能直接用于防治害蟲，不得用于蔬菜、瓜果、茶葉和中藥材中，但目前我國農(nóng)業(yè)種植蔬菜中，農(nóng)藥大量殘留現(xiàn)象依然十分嚴(yán)重[3]。隨著農(nóng)藥的廣泛使用，出現(xiàn)了農(nóng)藥過量使用、濫用等一系列農(nóng)藥的不合理使用問題，農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留問題日益突出，造成的一系列安全問題和環(huán)境問題引發(fā)了社會的廣泛關(guān)注。農(nóng)藥在對食品安全造成威脅之外，對環(huán)境污染也日益嚴(yán)重。農(nóng)藥中有毒成分是影響食品安全的重要因素之一。目前世界上主要國家都在制定農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全標(biāo)準(zhǔn)時，加入了一些列化學(xué)成分或重金屬污染的指標(biāo)[4]。而我國在2010年頒布了《食品安全法》（征求意見稿）；《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB2763-2011）等三項標(biāo)準(zhǔn)都包含了農(nóng)殘限量要求和殘留限量值等內(nèi)容，但是農(nóng)藥殘留檢測是一項復(fù)雜的系統(tǒng)工程；目前在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上已有很多關(guān)于農(nóng)產(chǎn)品有害成分及農(nóng)藥殘留量標(biāo)準(zhǔn)、檢測方法的研究工作[5]。不同產(chǎn)地天麻農(nóng)藥殘留檢測方法存在差異性：從產(chǎn)地看主要是通過測定各指標(biāo)含量、確定相對含量和進(jìn)行實驗室比對來判斷其安全性以及進(jìn)行有效控制生產(chǎn)過程等；從品種看主要以農(nóng)殘測定和農(nóng)藥篩選為主；從使用范圍來看主要是通過田間藥效試驗、田間評價等對農(nóng)藥殘留進(jìn)行判定及控制生產(chǎn)過程。近年來，天麻市場需求量逐年升高，我國天麻種植區(qū)面積不斷增加，種植區(qū)生態(tài)環(huán)境不同直接影響天麻栽培加工方法，不同的天麻生長環(huán)境在其種植過程中栽培方法可能存在農(nóng)藥污染等問題導(dǎo)致天麻品質(zhì)下降，嚴(yán)重影響天麻產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，危害天麻臨床應(yīng)用[6]。且我國目前沒有對不同產(chǎn)地天麻農(nóng)藥殘留的測定研究，故本實驗通過采用《中藥藥典》2020版2341第五法對貴州、云南、陜西、湖北、甘肅種植區(qū)天麻檢測其中33種農(nóng)藥殘留污染，為天麻及其相關(guān)制劑臨床用藥安全提供了實驗依據(jù)，為我國天麻規(guī)范化種植與栽培提供參考，促進(jìn)天麻產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展。1.2研究現(xiàn)狀1.2.1天麻研究現(xiàn)狀天麻的藥用歷史悠久，已有2500多年。天麻在我國有上千年的栽培歷史。早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中就記載了天麻能“益氣輕身”、“治痿痹腰痛”。據(jù)《本草綱目》記載：“以天麻煎湯服，治風(fēng)眩頭痛”。據(jù)《中國藥典》（2008版）記載：本品可用于治療中風(fēng)后遺癥、頭暈耳鳴、半身不遂等癥[7]。《現(xiàn)代實用中藥》將天麻列為國家基本藥物之一。據(jù)統(tǒng)計中國有1000多家藥材生產(chǎn)企業(yè)，主要分布在西南地區(qū)。云南是天麻的主要產(chǎn)區(qū)之一（云南白藥集團(tuán)有限公司）；廣西也有不少以種植和加工為主的基地和企業(yè)（桂林制藥廠等）；湖北則多以生產(chǎn)天麻飲片為主（武漢蔡甸山醫(yī)藥科技有限公司）；貴州有很多地方種植和加工天麻原料以及相關(guān)產(chǎn)品。此外，貴州還有種植天麻的傳統(tǒng)與習(xí)慣（貴州黔東南苗族侗族自治州劍河縣）。在中藥材生產(chǎn)方面，有一些傳統(tǒng)工藝和設(shè)備：如：“浸種”、“催芽”等方法及生產(chǎn)管理；還有一些技術(shù)和設(shè)備在實踐中得到了發(fā)展與完善；還有一些新技術(shù)新工藝的應(yīng)用等等。此外，隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，許多新品種也不斷涌現(xiàn)出來：如：“天麻素”、“天麻酰胺”等。我國中藥材生產(chǎn)中一直采用人工種植方法的居多，并且以云南為主要產(chǎn)地；而野生中藥材則大多采用林下種植方法來進(jìn)行加工炮制了[8]。隨著人們對健康的追求與關(guān)注，中藥生產(chǎn)技術(shù)也在不斷地更新與改進(jìn)中[9]。從傳統(tǒng)種植到現(xiàn)代化栽培技術(shù)的研究開發(fā)是十分必要的；近年來我國一些地區(qū)由于中藥材種植技術(shù)落后和生產(chǎn)管理粗放等原因?qū)е铝舜罅恐兴幉霓r(nóng)藥殘留問題頻發(fā)。1.2.2農(nóng)藥殘留研究現(xiàn)狀目前，天麻生產(chǎn)主要以化學(xué)農(nóng)藥為殺蟲劑，以化學(xué)除草劑為殺菌劑。隨著農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的不斷完善，已有多種農(nóng)藥殘留檢測方法被應(yīng)用于天麻種植過程中的農(nóng)殘檢測。如GC-MS法、電感耦合等離子體質(zhì)譜法、高效液相色譜法、紫外分光光度法等。其中GC-MS法可對不同種類農(nóng)藥進(jìn)行定性和定量分析，在天麻種植過程中較常用，但操作復(fù)雜，耗時耗力，不適合大規(guī)模的試驗研究[10]。有學(xué)者使用GC-MS法測定不同產(chǎn)地天麻中26種主要農(nóng)藥殘留情況，結(jié)果表明所測定農(nóng)藥主要來自產(chǎn)地不同且不在同一種植區(qū)域內(nèi)的天麻；有的農(nóng)藥在一定條件下可分解轉(zhuǎn)化為有毒物質(zhì)從而導(dǎo)致檢出限增高；另外還發(fā)現(xiàn)天麻中殘留有機(jī)磷類及菊酯一類化合物易導(dǎo)致有毒物質(zhì)的積累和產(chǎn)生耐藥性[11]。隨著農(nóng)藥使用數(shù)量的不斷增加，農(nóng)藥本身及其代謝物的結(jié)構(gòu)越來越復(fù)雜，色譜法對這類具有結(jié)構(gòu)相似的農(nóng)藥分辨能力較差[12]。質(zhì)譜技術(shù)的引入，解決了這一主要問題，利用質(zhì)譜的高分辨能力結(jié)合色譜的分離能力，色譜-質(zhì)譜聯(lián)用被廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測，單次進(jìn)樣即可檢測出樣品中的多種農(nóng)藥殘留物[13]。《中國藥典》2020年版中記載了91種農(nóng)藥的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜和526種農(nóng)藥的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜，色譜-串聯(lián)質(zhì)譜針對中藥材等復(fù)雜樣本有較強(qiáng)的抗基質(zhì)干擾能力，是天麻中農(nóng)藥殘留的主要檢測方法，結(jié)合高效的樣品提取凈化技術(shù)，基本可以滿足日常農(nóng)藥殘留檢測的需求[14]。2.試驗方法2.1儀器與材料2.1.1實驗材料本研究各選取貴州大方、云南昭通、陜西漢中、湖北宜昌、甘肅隴南的天麻藥材依照《中國藥典》2020版四部通則0212禁用農(nóng)藥限量規(guī)定，采用《中藥藥典》2020版2341第五法藥材及飲片（植物類）中禁用農(nóng)藥多殘留測定法進(jìn)行測定。2.1.2試劑表2.1實驗試劑材料規(guī)格來源水超純水默克密理博Integral10純水超純水一體機(jī)乙腈（CH3CN，75-05-8）色譜純默克股份兩合公司氯化鈉（NaCl，7647-14-5）分析純廣州化學(xué)試劑廠無水硫酸鈉（Na2SO4，7757-82-6）分析純廣州化學(xué)試劑廠2.1.3儀器設(shè)備2.2實驗儀器儀器名稱型號生產(chǎn)廠家氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀Trace1300GC&TSQ9000MS/MSThermoFisher電子天平MS204SMettler高速勻漿機(jī)FJ300-SH上海滬析旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RV10IKA固相萃取裝置VISIPREPTMDLSupelco離心機(jī)ST16RThermoFisher移液槍FinnpipetteF3ThermoFisherPrimeHLB固相萃取小柱200mg，6mL美國Waters科技公司2.1.3樣品預(yù)處理（1）乙腈中33種氣質(zhì)農(nóng)殘混標(biāo)溶液：上海安譜實驗科技有限公司，其中含內(nèi)吸磷-O、內(nèi)吸磷-S濃度均為20μg/mL；含滅線磷、殺蟲脒、甲拌磷、氟蟲腈、氟甲腈、氟蟲腈砜、氟蟲腈亞砜、特丁硫磷、甲基對硫磷、對硫磷、甲基異柳磷、苯線磷、治螟磷濃度均為40μg/mL；含久效磷、甲基硫環(huán)磷濃度均為60μg/mL；含α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、艾氏劑、狄氏劑、α-硫丹、β-硫丹、硫丹硫酸酯、p,p'-DDT、o,p'-DDT、p,p'-DDE、p,p'-DDD、水胺硫磷、除草醚、蠅毒磷濃度均為100μg/mL；貨號CDAA-M-490419-TZ-1.2mL，批號R0520200。（2）磷酸三苯酯標(biāo)準(zhǔn)品：德國DR，純度99.43%，批號G172525。（3）標(biāo)準(zhǔn)儲備液：33種氣質(zhì)農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液：精密吸取乙腈中33種氣質(zhì)農(nóng)殘混標(biāo)溶液1.0mL至10mL棕色容量瓶中，加乙腈定容至刻度。配制成濃度為10.0μg/mL（以α-六六六代表）的多農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液，搖勻，即得（-20℃保存6個月）。（4）磷酸三苯酯內(nèi)標(biāo)儲備液的配制：精密稱取磷酸三苯酯標(biāo)準(zhǔn)品10mg至10mL容量瓶中，加乙腈定容至刻度，配制成濃度為1.0mg/mL的內(nèi)標(biāo)儲備液，搖勻，即得（-20℃保存6個月）。（5）磷酸三苯酯內(nèi)標(biāo)中間液的配制：精密吸取磷酸三苯酯標(biāo)準(zhǔn)儲備液10.0μL至100mL容量瓶中，加乙腈定容至刻度，配制成濃度為0.1μg/mL的溶液，搖勻，即得（-20℃保存1個月）。（6）33種氣質(zhì)農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制：精密吸取33種氣質(zhì)農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.0mL至20mL棕色容量瓶中，加乙腈定容至刻度。配制成濃度為500μg/L（以α-六六六代表）的多農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，搖勻，即得（-20℃保存1個月）。（7）33種氣質(zhì)農(nóng)殘基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)系列使用液的配制：分別精密吸取33種氣質(zhì)農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)中間液（2.2.6）10.0μL、20.0μL、50.0μL、100μL、150μL、200μL至1mL容量瓶，加空白基質(zhì)溶液定容刻度，配制成濃度分別為5.00μg/L、10.0μg/L、25.0μg/L、50.0μg/L、75.0μg/L、100μg/L（以α-六六六代表）的氣質(zhì)農(nóng)殘基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)系列使用液，臨用新配。2.2實驗方法2.2.1氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（1）色譜條件用（50%苯基）-甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細(xì)管柱（柱長為30m，柱內(nèi)徑為0.25mm，膜厚度為0.25μm）。進(jìn)樣口溫度250℃，不分流進(jìn)樣。載氣為高純氦氣（He）。進(jìn)樣口為恒壓模式，柱前壓力為146kPa。程序升溫：初始溫度60℃，保持1分鐘，以30℃/min升至120℃，再以每分鐘10℃的速率升溫至160℃，再以每分鐘2℃的速率升溫至230℃，最后以每分鐘15℃的速率升溫至300℃，保持6分鐘。（2）質(zhì)譜條件以三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測；離子源為電子轟擊源（EI），離子源溫度250℃。碰撞氣為氮氣或氬氣。質(zhì)譜傳輸接口溫度250℃。質(zhì)譜監(jiān)測模式為多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），各化合物參考保留時間、監(jiān)測離子對、碰撞電壓（CE）。為提高檢測靈敏度，可根據(jù)保留時間分段監(jiān)測各農(nóng)藥。2.2.2高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（1）2.2.1色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（柱長10cm，內(nèi)徑為2.1mm，粒徑為2.6μm）；以0.1%甲酸溶液（含5mmol/L甲酸銨）為流動相A，以乙腈-0.1%甲酸溶液（含5mmol/L甲酸銨）（95：5）為流動相B，進(jìn)行梯度洗脫；流速為每分鐘0.3ml，柱溫為40℃。（2）質(zhì)譜條件以三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測；離子源為電噴霧（ESI）離子源，正離子掃描模式。監(jiān)測模式為多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），各化合物參考保留時間、監(jiān)測離子對、碰撞電壓（CE）。為提高檢測靈敏度，可根據(jù)保留時間分段監(jiān)測各農(nóng)藥。2.2.3對照溶液的制備（1）混合對照品溶液的制備精密量取禁用農(nóng)藥混合對照品溶液（已標(biāo)示各相關(guān)農(nóng)藥品種的濃度）1ml，置20ml量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，即得。（2）氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析用內(nèi)標(biāo)溶液的制備取磷酸三苯酯對照品適量，精密稱定，加乙腈溶解并制成每1ml含l.0mg的溶液，即得。精密量取適量，加乙腈制成每1ml含0.1μg的溶液。（3）空白基質(zhì)溶液的制備取空白基質(zhì)樣品，同供試品溶液的制備方法處理制成空白基質(zhì)溶液。（4）基質(zhì)混合對照溶液的制備分別精密量取空白基質(zhì)溶液1.0ml（6份），置氮吹儀上，40℃水浴濃縮至約0.6ml，分別加入混合對照品溶液10μl、20μl、50μl、100μl、150μl、200μl，加乙腈稀釋至1ml，渦旋混勻，即得。2.2.4供試品溶液的制備直接提取法取供試品粉末（過三號篩）5g，精密稱定，加氯化鈉1g，立即搖散，再加入乙腈50ml，勻漿處理2分鐘（轉(zhuǎn)速不低于每分鐘12000轉(zhuǎn)），離心（每分鐘4000轉(zhuǎn)），分取上清液，沉淀再加乙腈50ml，勻漿處理1分鐘，離心，合并兩次提取的上清液，減壓濃縮至約3~5ml，放冷，用乙腈稀釋至10.0ml，搖勻，即得。2.2.5方法確證（1）準(zhǔn)確度：精密稱取9份天麻各5g，另1份作為樣品空白。3份樣品分別精密添加33種氣質(zhì)農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)中間液0.1mL，3份樣品分別精密添加35種氣質(zhì)農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)中間液0.5mL，3份樣品分別精密添加33種氣質(zhì)農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)中間液2mL，按2.2.1制備后測定。（2）精密度：精密稱定6份樣品，分別精密添加35種氣質(zhì)農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)中間液0.5mL，按2.2.1制備后測定。（3）線性與范圍：以各農(nóng)藥的濃度為橫坐標(biāo)，以內(nèi)標(biāo)峰面積與各農(nóng)藥的峰面積之比為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，確定線性響應(yīng)范圍，并計算出回歸方程和相關(guān)系數(shù)。（4）專屬性：在確認(rèn)的儀器條件下，分別注入空白溶劑、標(biāo)準(zhǔn)混合溶液、空白樣品溶液、添加有標(biāo)準(zhǔn)品的樣品溶液。（5）檢出限：將1種濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液加至1個空白樣品，按法制備，測定農(nóng)藥化合物信噪比為3:1時，濃度所對應(yīng)的含量即為檢出限。（6）定量限：將1種濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液加至1個空白樣品，按法制備，測定農(nóng)藥化合物信噪比為10:1時，濃度所對應(yīng)的含量即為定量限。3.結(jié)果3.1農(nóng)藥檢測基本情況農(nóng)藥在天麻生產(chǎn)中的應(yīng)用已有悠久歷史，目前已被廣泛用于各種作物、果樹和林木上殺蟲、殺螨、除草等。33種農(nóng)藥殘留的檢測結(jié)果見表1，五個產(chǎn)地均檢出農(nóng)藥殘留，總檢出率21.1%，其中貴州大方和陜西漢中檢出有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留值較高，分別占據(jù)28.7%與25.4%，湖北宜昌與甘肅隴南的天麻農(nóng)藥殘留較低，分別占據(jù)14.5%與15.5%。表3.1不同產(chǎn)地天麻農(nóng)藥殘留檢測情況樣品來源樣品數(shù)檢出類型檢出批次檢出率不合格率檢測值貴州大方108173128.715.70.010-1.50云南昭通120152520.817.780.010-4.52陜西漢中114122925.410.520.010-1.50湖北宜昌10361514.55.710.010-1.50甘肅隴南116101815.58.620.010-1.50總數(shù)5616011821.110.69-3.2殘留農(nóng)藥種類情況除了農(nóng)藥的分解過程外，氣體或固體物質(zhì)的產(chǎn)生還會污染環(huán)境中的空氣、水和土壤，從而影響人體健康。農(nóng)藥殘留主要伴隨食品，直接危害人類健康和食品安全。農(nóng)藥殘留對人體健康的危害是高風(fēng)險、不可逆轉(zhuǎn)的，TM農(nóng)藥作為一種常見的殺菌劑，對人體的毒性不容忽視。它不僅會致癌，還會干擾新陳代謝和內(nèi)分泌系統(tǒng)的生活活動，社會高度重視農(nóng)藥的科學(xué)、低風(fēng)險使用。因此，農(nóng)藥的安全使用和農(nóng)藥殘留的標(biāo)準(zhǔn)化檢測已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和食品安全領(lǐng)域的首要課題，也是科學(xué)研究的方向。殘留農(nóng)藥分布情況最常檢出的農(nóng)藥品種為煙堿、氯氰菊酷、三哩磷、毒死蟀、高效氟氯氰菊酷、除蟲腮、滅幼腮,毗蟲啦、毗蟲清、甲霜靈等，見圖3.1。圖3.1殘留農(nóng)藥種類情況3.3方法驗證3.1.1準(zhǔn)確度各農(nóng)藥回收率在65.81%～128.80%之間，RSD在0.87%～13.47%之間。準(zhǔn)確度符合《中國藥典》2020年版四部通則9101與2341第五法附注（5）的要求（回收率60%～130%）。表3.2試樣加標(biāo)測定結(jié)果序號成分加標(biāo)量本底值（μg/L)加入量（μg/L)實測值(μg/L)回收率平均值RSD%1滅線磷2021.486774.34%87.38%13.47021.943997.20%021.811990.60%100109.268492.68%96.63%4.430109.601396.01%01010.1179101.18%4004039.784599.46%98.62%0.8704039.464398.66%04039.097297.74%2殺蟲脒2021.639281.96%79.65%2.86021.591679.58%021.548177.41%100109.412294.12%103.97%9.5501010.3795103.80%01011.3986113.99%4004043.4995108.75%109.18%0.8404044.0943110.24%04043.4269108.57%3治螟磷2021.897294.86%102.46%7.57022.0432102.16%022.2074110.37%100109.576695.77%101.61%5.4601010.2261102.26%01010.6794106.79%4004039.906899.77%101.79%1.7204041.0816102.70%04041.16102.90%4甲拌磷2021.59979.95%75.45%7.08021.390969.55%021.53776.85%100107.565375.65%83.02%13.130107.786377.86%0109.554695.55%4004031.201478.00%82.83%6.3004032.844682.11%04035.347888.37%5α-六六六5054.530390.61%84.09%12.81054.590.00%053.582571.65%2502522.692890.77%96.41%5.1502525.0322100.13%02524.581498.33%1000100104.0377104.04%101.33%2.650100101.2645101.26%010098.67398.67%6特丁硫磷2022.6747133.74%128.80%3.60022.4904124.52%022.5627128.14%100109.91399.13%105.81%6.3301010.5791105.79%01011.2522112.52%4004042.1163105.29%105.94%2.6104043.5884108.97%04041.4177103.54%7γ-六六六5053.454569.09%76.11%13.25054.383487.67%053.57971.58%2502523.625994.50%96.25%2.2202523.905595.62%02524.657998.63%100010099.527199.53%100.01%2.890100103.1077103.11%010097.396797.40%8氟甲腈2021.905195.26%94.80%5.00021.79789.85%021.986199.31%100108.776787.77%95.82%7.350109.887898.88%01010.0827100.83%4004042.6868106.72%105.97%0.6704042.12105.30%04042.3624105.91%9久效磷3033.457115.23%127.20%10.54033.7404124.68%034.2504141.68%1501515.1229100.82%100.92%3.8201514.56797.11%01515.7237104.82%6006060.2005100.33%101.54%1.7406062.1355103.56%06060.4297100.72%10β-六六六5054.576491.53%95.81%3.95054.936498.73%054.858597.17%2502523.029192.12%98.11%5.7802524.708198.83%02525.8458103.38%1000100101.2316101.23%101.17%1.490100102.6483102.65%010099.638899.64%11艾氏劑5055.1657103.31%102.88%5.09055.3943107.89%054.872197.44%2502522.595790.38%97.28%6.2702525.4979101.99%02524.864599.46%1000100101.3907101.39%102.72%4.280100107.6175107.62%010099.1499.14%12δ-六六六5054.074481.49%83.64%2.23054.233884.68%054.238184.76%2502520.393481.57%89.85%8.0702523.225892.90%02523.767995.07%100010092.519192.52%91.17%1.90010091.775291.78%010089.211589.21%13甲基對硫磷2021.670583.53%77.29%7.87021.427571.38%021.539476.97%100107.837678.38%86.07%9.250108.555485.55%0109.42894.28%4004037.615594.04%98.58%3.9904040.2632100.66%04040.4161101.04%14o,p’-三氯殺螨醇5054.272685.45%88.67%3.29054.47189.42%054.557491.15%2502522.76291.05%98.08%6.3202525.1183100.47%02525.6832102.73%1000100101.4425101.44%102.96%1.380100104.2575104.26%0100103.171103.17%15對硫磷2022.4364121.82%116.81%7.94022.4501122.51%022.1222106.11%1001010.0134100.13%102.62%2.2001010.4526104.53%01010.3211103.21%4004038.174195.44%99.10%3.5404040.9749102.44%04039.766499.42%16氟蟲腈亞砜2021.694884.74%92.28%7.23021.89494.70%021.948197.41%100108.753887.54%96.04%10.120109.39593.95%01010.6627106.63%4004042.0775105.19%103.00%1.8504040.7232101.81%04040.7941101.99%17氟蟲腈2022.5936129.68%119.31%12.87022.0333101.67%022.5315126.58%100109.473694.74%103.26%7.4401010.5386105.39%01010.9644109.64%4004038.266895.67%95.43%3.4904039.454398.64%04036.793291.98%18p,p’-三氯殺螨醇5055.2578105.16%103.41%1.91055.1899103.80%055.0631101.26%2502523.629494.52%101.64%6.1602526.0322104.13%02526.5654106.26%1000100102.5724102.57%102.90%1.580100104.6646104.66%0100101.4575101.46%19甲基異硫磷2022.116105.80%109.05%8.41022.3881119.41%022.0388101.94%1001010.6149106.15%117.63%9.3601012.8087128.09%01011.8657118.66%4004042.5414106.35%105.59%0.9104041.8058104.51%04042.3638105.91%20水胺硫磷5054.288685.77%91.57%8.66054.416788.33%055.0303100.61%2502523.279893.12%101.07%6.9902526.6562106.62%02525.8657103.46%100010098.412198.41%101.63%3.710100105.7809105.78%0100100.705100.71%21α-硫丹5055.0931101.86%94.49%7.45054.391887.84%054.688593.77%2502523.713894.86%99.28%11.6602528.1029112.41%02522.639690.56%100010098.385698.39%99.75%4.440100104.6966104.70%010096.165896.17%22狄士劑5054.226584.53%96.25%12.21054.810196.20%055.4016108.03%2502522.482589.93%102.78%12.1502528.7172114.87%02525.882103.53%1000100101.5828101.58%102.24%5.580100108.2433108.24%010096.882496.88%23氟蟲腈砜2021.34567.25%78.33%12.67021.72886.40%021.62781.35%100108.888.00%81.46%7.250107.65176.51%0107.98679.86%4004035.07887.70%85.39%4.6304035.06287.66%04032.32880.82%24p,p’-DDE5053.22864.56%65.81%1.69053.33466.68%053.3166.20%2502517.58170.32%70.95%0.9902517.70570.82%02517.92771.71%100010074.10674.11%74.28%0.22010074.30974.31%010074.4374.43%25苯線磷4043.40385.08%84.21%1.01043.36784.18%043.33583.38%2002020.026100.13%93.53%6.5502017.60688.03%02018.48592.43%8008067.18383.98%85.21%1.3908069.0786.34%08068.25485.32%26o,p’-DDT5055.8758117.52%119.43%1.43056.0387120.77%056120.00%2502526.3606105.44%114.12%8.0002528.3181113.27%02530.9129123.65%1000100114.5092114.51%114.96%0.980100114.12114.12%0100116.2445116.24%27甲基硫環(huán)磷3032.566985.56%94.61%10.34033.15105.00%032.798393.28%1501513.471789.81%87.09%5.2301512.274181.83%01513.443489.62%6006058.234897.06%93.42%5.9906057.73796.23%06052.18286.97%28除草醚5054.764395.29%93.29%3.91054.775695.51%054.454389.09%2502522.443689.77%99.10%8.6102526.6292106.52%02525.2491101.00%100010099.426599.43%101.80%2.130100103.668103.67%0100102.2979102.30%29p,p’-DDD5054.445988.92%94.08%4.82054.871697.43%054.795295.90%2502523.107292.43%98.45%5.4002525.1106100.44%02525.6222102.49%1000100100.4283100.43%101.46%0.930100101.6753101.68%0100102.2752102.28%30β-硫丹5053.433368.67%64.25%6.67053.199363.99%053.005660.11%2502526.3941105.58%100.53%8.1302522.773791.09%02526.2286104.91%1000100103.9839103.98%107.32%2.700100108.8182108.82%0100109.1713109.17%31p,p’-DDT5054.06181.22%85.25%6.32054.158483.17%054.568891.38%2502521.272985.09%89.92%4.6502523.07292.29%02523.094792.38%100010094.287994.29%93.80%1.27010092.446492.45%010094.671994.67%32硫丹硫酸鹽5053.881977.64%79.57%2.12054.014580.29%054.038780.77%2502521.449885.80%91.35%5.4302523.216592.87%02523.843195.37%100010093.465693.47%92.82%2.89010095.128195.13%010089.874489.87%33蠅毒磷5054.182783.65%91.29%7.72054.877897.56%054.632992.66%2502521.235584.94%97.69%11.5902525.3901101.56%02526.6425106.57%1000100103.4363103.44%102.22%1.100100102.0057102.01%0100101.2142101.21%3.1.2精密度由檢測結(jié)果可知，各農(nóng)藥的RSD在1.38%～14.30%之間，精密度均符合《中國藥典》2020年版四部通則9101的要求（重復(fù)性≤15%）表3.3試樣精密度RSD結(jié)果序號成分樣1（μg/L)樣2（μg/L)樣3（μg/L)樣4（μg/L)樣5（μg/L)樣6（μg/L)平均值（μg/L)RSD%1滅線磷10.5359.52010.0009.57710.18110.0129.973.82殺蟲脒10.14510.0389.81610.28511.32710.07710.285.23治螟磷11.07310.17610.14710.98410.5989.60710.435.44甲拌磷10.2789.4757.9679.6687.1837.7528.7214.35α-六六六23.79627.14824.57726.93125.71224.38425.425.56特丁硫磷10.32010.86910.38510.44510.7969.31910.365.47γ-六六六23.82323.55624.47425.77824.50622.66424.134.378久效磷14.47614.59715.29216.10716.53215.53515.425.279氟甲睛10.2829.9419.75010.43810.0769.82510.052.6610β-六六六24.99124.93024.93926.03825.60424.68825.202.0311艾士劑22.64826.13425.99927.67625.61921.67824.969.2012δ-六六六21.20521.79120.96921.59521.27720.31421.192.4513甲基對硫磷8.9588.3528.3859.7088.4018.9578.796.0314o,p’-三氯殺螨醇24.72126.07526.14725.93724.92425.17625.502.4715對硫磷8.3509.3799.22710.0818.7458.0868.988.1616氟蟲腈亞砜8.66210.07610.2449.87710.3539.7619.836.2317氟蟲腈10.4268.9059.41012.5969.6499.21210.1313.4018p,p’-三氯殺螨醇25.66626.61125.74025.84225.84225.23625.821.7319甲基異硫磷11.45310.30011.09210.67110.67110.38310.764.0720水胺硫磷24.40426.51426.07625.42125.42124.17525.343.6021α-硫丹25.02625.45024.68923.53623.53623.75824.333.4222狄士劑24.39720.48725.05326.51424.19924.70124.238.2923氟蟲腈砜10.34710.25110.16810.12110.84711.96610.626.7024p,p’-DDE25.03325.65625.22525.88025.06525.60525.411.3825苯線磷10.3239.62410.41411.33211.44510.67910.646.3926o,p’-DDT26.83530.25331.33430.15030.34630.32929.875.1927甲基硫環(huán)磷13.88514.31812.65613.83913.37512.31513.405.7828除草醚23.74524.64523.54124.61424.08723.17423.972.4729p,p’-DDD23.95825.44924.27825.77725.13323.79024.733.3630β-硫丹27.91823.77224.00925.81028.85124.36825.798.3531p,p’-DDT21.27021.78921.09922.59321.18719.21721.195.2732硫丹硫酸鹽22.38222.24420.40523.99421.95122.28722.215.1533蠅毒磷22.25525.79524.22526.40126.88724.76025.056.763.1.3線性與范圍由檢測結(jié)果可知，相關(guān)系數(shù)R2在規(guī)定的0.995以上，符合要求。表3.4試樣線性與范圍結(jié)果序號中文名稱S1(μg/L)S2(μg/L)S3(μg/L)S(μg/L)S5(μg/L)S6(μg/L)1滅線磷24102030402殺蟲脒24102030403甲拌磷24102030404a-六六六5102550751005β-六六六5102550751006γ-六六六5102550751007δ-六六六5102550751008氟蟲腈24102030409氟甲腈241020304010氟蟲腈砜241020304011氟蟲腈亞砜241020304012艾氏劑51025507510013狄氏劑51025507510014α-硫丹51025507510015B-硫丹51025507510016硫丹硫酸酯51025507510017p,p'-滴滴涕51025507510018o,p'-滴滴涕51025507510019p,p'-滴滴伊51025507510020p,p'-滴滴滴51025507510021內(nèi)吸磷O241020304022久效磷361530456023特丁硫磷241020304024甲基對硫磷241020304025對硫磷241020304026o,p’三氯殺螨醇51025507510027p,p’三氯殺螨醇51025507510028甲基異柳磷241020304029水胺硫磷51025507510030甲基硫環(huán)磷361530456031除草醚51025507510032蠅毒磷51025507510033苯線磷2410203040圖3.2混合標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度3.1.4專屬性通過結(jié)果可知，各農(nóng)藥化合物離子碎片下未含有干擾其化合物的未知離子碎片，分離效果理想。圖3.3空白溶液圖3.4樣品溶液圖3.5標(biāo)準(zhǔn)溶液圖3.6添加有標(biāo)準(zhǔn)品的樣品溶液3.1.5檢出限由檢測結(jié)果可知，濃度為5μg/L（以α-六六六為代表）混合加標(biāo)樣品溶液中，殺蟲脒的信噪比為20.9:1，大于10：1，對應(yīng)的含量為0.001mg/kg，小于藥典的定量限；濃度為5μg/L（以α-六六六為代表）混合加標(biāo)樣品溶液中，剩余的農(nóng)藥化合物的信噪比遠(yuǎn)大于殺蟲脒的信噪比20.9:1，而且其對應(yīng)的含量比藥典中的定量限小，則本實驗室檢測該33種農(nóng)藥化合物的定量限如下表3.5所示。表3.5各農(nóng)藥化合物定量限序號中文名稱加標(biāo)濃度（μg/L）實驗室定量限mg/kg藥典定量限mg/kg1滅線磷20.0010.022殺蟲脒20.0010.023甲拌磷20.0013種之和0.024α-六六六50.00254種之和0.15β-六六六50.00256γ-六六六50.00257δ-六六六50.00258氟蟲腈20.0014種之和0.029氟甲腈20.00110氟蟲腈砜20.00111氟蟲腈亞砜20.00112艾氏劑50.00250.0513狄氏劑50.00250.0514α-硫丹50.00253種之和0.0515β-硫丹50.002516硫丹硫酸酯50.002517p,p'-滴滴涕50.00254種之和0.118o,p'-滴滴涕50.002519p,p'-滴滴伊50.002520p,p'-滴滴滴50.002521內(nèi)吸磷(O+S)20.0010.0222久效磷30.00150.0323特丁硫磷20.0013種之和0.0224甲基對硫磷20.0010.0225對硫磷20.0010.0226o,p’三氯殺螨醇50.00252種之0.227p,p’三氯殺螨醇50.002528甲基異柳磷20.0010.0229水胺硫磷50.00250.0530甲基硫環(huán)磷30.00150.0331除草醚50.00250.0532蠅毒磷50.00250.0533苯線磷20.0013種之和0.023.1.6定量限由檢測結(jié)果可知，濃度為1μg/L（以α-六六六為代表）混合加標(biāo)樣品溶液中，殺蟲脒的信噪比為4.9:1，大于3：1，對應(yīng)的含量為0.0002mg/kg，剩余的農(nóng)藥化合物的信噪比遠(yuǎn)大于殺蟲脒的信噪比4.9:1，則本實驗室檢測該33種農(nóng)藥化合物的檢出限如下表3.6所示。表3.6各農(nóng)藥化合物檢出限序號中文名稱加標(biāo)濃度（μg/L）檢出限mg/kg1滅線磷0.40.00022殺蟲脒0.40.00023甲拌磷0.40.00024α-六六六1