檢驗(yàn)科常見檢驗(yàn)項(xiàng)目操作規(guī)程演講人：日期:06質(zhì)量控制與安全規(guī)范目錄01引言與概述02血液檢驗(yàn)操作規(guī)程03尿液檢驗(yàn)操作規(guī)程04生化檢驗(yàn)操作規(guī)程05微生物檢驗(yàn)操作規(guī)程01引言與概述檢驗(yàn)科基本職能介紹疾病診斷支持通過血液、體液、組織等樣本的檢測(cè)分析，為臨床醫(yī)生提供客觀的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)，輔助疾病診斷與鑒別診斷，如感染性疾病標(biāo)志物檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物篩查等。01治療效果監(jiān)測(cè)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)患者治療過程中的生化指標(biāo)（如肝腎功能、血糖、電解質(zhì)）或微生物學(xué)結(jié)果（如細(xì)菌藥敏試驗(yàn)），評(píng)估治療方案有效性并及時(shí)調(diào)整策略。健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估開展常規(guī)體檢項(xiàng)目（如血脂、血常規(guī)）及遺傳性疾病的基因檢測(cè)，幫助早期發(fā)現(xiàn)潛在健康問題，實(shí)現(xiàn)預(yù)防性醫(yī)療干預(yù)?？蒲信c質(zhì)量控制參與臨床研究項(xiàng)目的數(shù)據(jù)采集與分析，同時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可比性。020304國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)與指南遵循CLSI（臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)）、ISO15189等國(guó)際規(guī)范，確保檢測(cè)方法、儀器校準(zhǔn)和結(jié)果報(bào)告的標(biāo)準(zhǔn)化。國(guó)家法規(guī)要求依據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》及《醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例》，規(guī)范試劑采購、設(shè)備維護(hù)及生物安全管理流程。循證醫(yī)學(xué)證據(jù)結(jié)合最新醫(yī)學(xué)研究數(shù)據(jù)（如美國(guó)CDC或WHO發(fā)布的檢測(cè)指南），優(yōu)化檢驗(yàn)項(xiàng)目的敏感性與特異性閾值設(shè)定?？剖覍?shí)際條件根據(jù)醫(yī)院檢驗(yàn)科的設(shè)備配置（如全自動(dòng)生化分析儀、PCR儀）和技術(shù)人員能力，制定可操作性強(qiáng)的SOP文件。操作規(guī)程制定依據(jù)項(xiàng)目分類框架說明涵蓋血糖、肝功能（ALT/AST）、腎功能（肌酐/尿素氮）等生化指標(biāo)檢測(cè)，采用分光光度法或酶聯(lián)免疫法等技術(shù)。臨床化學(xué)檢驗(yàn)涉及自身抗體篩查（ANA、RF）、傳染病血清學(xué)檢測(cè)（乙肝兩對(duì)半、梅毒TPPA），常用ELISA或化學(xué)發(fā)光技術(shù)平臺(tái)。免疫學(xué)檢驗(yàn)包括細(xì)菌培養(yǎng)鑒定、藥敏試驗(yàn)及病毒核酸檢測(cè)（如HIVRNA定量），需在生物安全二級(jí)（BSL-2）實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下操作。微生物學(xué)檢驗(yàn)010302通過血細(xì)胞分析儀完成全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC），或人工鏡檢識(shí)別異常細(xì)胞形態(tài)（如瘧原蟲、白血病細(xì)胞）。血液與體液分析0402血液檢驗(yàn)操作規(guī)程采用真空采血管抽取靜脈血，輕柔顛倒混勻抗凝劑，避免溶血或凝血。樣本需在采集后規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè)，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。每日檢測(cè)前需執(zhí)行儀器校準(zhǔn)，同時(shí)運(yùn)行高、中、低值質(zhì)控品，確保白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度等參數(shù)在允許誤差范圍內(nèi)。通過全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板數(shù)量及形態(tài)學(xué)指標(biāo)，重點(diǎn)關(guān)注異常細(xì)胞提示（如幼稚細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞等）。結(jié)合臨床信息審核異常結(jié)果，必要時(shí)人工復(fù)檢或涂片鏡檢，最終簽發(fā)包含參考區(qū)間和異常標(biāo)注的規(guī)范化報(bào)告。血常規(guī)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)步驟樣本采集與處理儀器校準(zhǔn)與質(zhì)控檢測(cè)參數(shù)分析結(jié)果審核與報(bào)告凝血功能測(cè)定方法使用專用枸櫞酸鈉抗凝管，嚴(yán)格按比例采集靜脈血，避免采血不暢或氣泡混入影響凝血因子活性檢測(cè)。樣本采集要求通過凝固法或發(fā)色底物法測(cè)定PT（凝血酶原時(shí)間）、APTT（活化部分凝血活酶時(shí)間）、FIB（纖維蛋白原）及TT（凝血酶時(shí)間），每批檢測(cè)需同步運(yùn)行正常與異常質(zhì)控樣本。檢測(cè)項(xiàng)目流程排除黃疸、脂血、溶血樣本的干擾，對(duì)異常結(jié)果需結(jié)合臨床用藥史（如抗凝治療）進(jìn)行結(jié)果解讀。干擾因素處理對(duì)PT或APTT顯著延長(zhǎng)等危急值，需立即復(fù)核并電話通知臨床醫(yī)師，記錄處理過程。危急值報(bào)告血型鑒定操作流程樣本前處理采集EDTA抗凝全血，離心分離紅細(xì)胞懸液與血漿，分別用于正反定型試驗(yàn)，確保樣本無污染或降解。01020304正定型試驗(yàn)采用單克隆抗A、抗B試劑檢測(cè)紅細(xì)胞表面抗原，通過玻片法或微柱凝膠卡觀察凝集反應(yīng)，判定ABO血型。反定型試驗(yàn)用已知A型、B型紅細(xì)胞檢測(cè)待檢者血漿中的天然抗體，驗(yàn)證正定型結(jié)果的一致性，排除亞型或抗體缺失情況。RhD抗原檢測(cè)使用抗D試劑進(jìn)行Rh血型分型，對(duì)弱D型需進(jìn)一步采用間接抗人球蛋白試驗(yàn)確認(rèn)，避免輸血后溶血風(fēng)險(xiǎn)。03尿液檢驗(yàn)操作規(guī)程尿液標(biāo)本采集規(guī)范采集時(shí)間選擇容器與保存要求清潔消毒流程晨尿?yàn)槭走x標(biāo)本，因其濃縮度高且成分穩(wěn)定；隨機(jī)尿適用于急診檢測(cè)，但需注明采集時(shí)間；24小時(shí)尿用于定量分析（如蛋白、激素），需嚴(yán)格記錄起始和終止時(shí)間并全程冷藏保存。采集前需用無菌生理鹽水或?qū)Ｓ孟緷窠砬鍧嵞虻揽诩爸車つw，避免陰道分泌物或糞便污染，尤其對(duì)女性患者需強(qiáng)調(diào)從前向后擦拭的規(guī)范操作。使用一次性無菌防漏容器，容量≥50mL；采集后2小時(shí)內(nèi)送檢，若延遲需4℃冷藏或添加防腐劑（如甲苯用于化學(xué)成分保護(hù)，甲醛用于有形成分固定）。首先觀察尿液顏色（琥珀色、血尿等）、透明度（清晰、渾濁）、氣味（氨味提示感染），并記錄尿比重（折射儀法參考值1.003-1.030），異常結(jié)果需復(fù)核。尿常規(guī)分析執(zhí)行步驟理學(xué)檢查采用干化學(xué)試紙條法檢測(cè)pH值（正常4.5-8.0）、蛋白質(zhì)（靈敏度30mg/dL）、葡萄糖、酮體、膽紅素等10項(xiàng)指標(biāo)，嚴(yán)格遵循試紙條浸入時(shí)間（1-2秒）和比色時(shí)間（60秒內(nèi)），避免光照或濕度影響結(jié)果?；瘜W(xué)分析每批次檢測(cè)前需運(yùn)行高/低值質(zhì)控品，偏差超過±1個(gè)等級(jí)需校準(zhǔn)儀器；定期校驗(yàn)試紙條有效期及儲(chǔ)存條件（避光干燥，溫度15-30℃）。質(zhì)量控制措施離心處理標(biāo)準(zhǔn)取10mL混勻尿液，以1500rpm離心5分鐘，棄上清保留0.5mL沉渣，輕柔重懸后滴入計(jì)數(shù)板，避免氣泡影響鏡檢視野。尿沉渣檢查技術(shù)要求有形成分識(shí)別高倍鏡（400×）下分類計(jì)數(shù)紅細(xì)胞（＞3/HPF為異常）、白細(xì)胞（＞5/HPF提示炎癥）、管型（透明管型偶見，顆粒管型見于腎實(shí)質(zhì)病變）、結(jié)晶（尿酸結(jié)晶需結(jié)合pH值判斷臨床意義）。自動(dòng)化儀器輔助當(dāng)使用流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀時(shí)，需定期清潔鞘液管路并校準(zhǔn)激光強(qiáng)度，人工復(fù)檢規(guī)則設(shè)置為紅細(xì)胞＞20/μL或白細(xì)胞＞30/μL時(shí)觸發(fā)鏡檢復(fù)核，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。04生化檢驗(yàn)操作規(guī)程采用靜脈采血技術(shù)，使用無抗凝劑真空采血管，采集后需在30分鐘內(nèi)離心分離血清，避免溶血或脂血影響檢測(cè)結(jié)果。01040302肝功能檢驗(yàn)執(zhí)行流程樣本采集與處理包括ALT、AST、ALP、GGT等酶學(xué)指標(biāo)，采用速率法或終點(diǎn)法測(cè)定；總蛋白、白蛋白通過比色法分析；膽紅素檢測(cè)需避光操作，使用重氮法或氧化酶法。檢測(cè)項(xiàng)目與原理每日開機(jī)后需進(jìn)行光電校準(zhǔn)和空白校正，同時(shí)運(yùn)行高、低兩個(gè)濃度質(zhì)控品，確保結(jié)果在允許范圍內(nèi)。儀器校準(zhǔn)與質(zhì)控結(jié)合患者病史及用藥情況，排除干擾因素后簽發(fā)報(bào)告，異常結(jié)果需復(fù)核并標(biāo)注臨床意義。結(jié)果審核與報(bào)告腎功能檢測(cè)操作標(biāo)準(zhǔn)樣本要求采集晨起空腹靜脈血3-5ml，使用肝素抗凝管或促凝管，避免劇烈震蕩導(dǎo)致細(xì)胞破裂影響肌酐和尿素氮數(shù)值。02040301干擾因素控制高膽紅素、溶血樣本需備注并重新采集，糖尿病患者需注明血糖水平以防尿素氮假性降低。關(guān)鍵檢測(cè)技術(shù)肌酐檢測(cè)采用苦味酸法或酶法，尿素氮通過脲酶-谷氨酸脫氫酶偶聯(lián)法測(cè)定，胱抑素C使用免疫比濁法提高早期腎損傷敏感性。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)規(guī)范對(duì)于慢性腎病患者，需建立基線值并定期復(fù)測(cè)，報(bào)告需標(biāo)注eGFR（估算腎小球?yàn)V過率）及分期建議。血糖測(cè)定方法指南快速血糖檢測(cè)使用便攜式血糖儀進(jìn)行指尖采血，操作前需核對(duì)試紙條有效期，采血后15秒內(nèi)上機(jī)檢測(cè)，避免環(huán)境濕度影響結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)流程采用葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法，血清樣本需及時(shí)分離以防糖酵解導(dǎo)致假性低血糖，必要時(shí)添加氟化鈉抑制劑。糖耐量試驗(yàn)規(guī)范患者需空腹8小時(shí)后口服75g葡萄糖，分別在0、30、60、120分鐘采血，全程禁止吸煙及劇烈活動(dòng)，樣本需立即送檢。質(zhì)量控制要點(diǎn)每批次檢測(cè)需包含正常與病理值質(zhì)控品，儀器定期進(jìn)行線性校準(zhǔn)，危急值（＜2.8或＞22.2mmol/L）需立即復(fù)核并通知臨床。05微生物檢驗(yàn)操作規(guī)程嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)范采集臨床樣本（如血液、尿液、痰液等），并依據(jù)樣本類型選擇適宜的預(yù)處理方法（如離心、過濾或均質(zhì)化），確保微生物活性不受破壞。01040302細(xì)菌培養(yǎng)鑒定步驟樣本采集與處理根據(jù)疑似病原菌特性選用選擇性或非選擇性培養(yǎng)基（如血瓊脂、麥康凱瓊脂），采用分區(qū)劃線法或傾注法接種，以分離單一菌落便于后續(xù)分析。培養(yǎng)基選擇與接種將接種后的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱中，設(shè)定適宜溫度（通常35-37℃）及氣體環(huán)境（需氧/厭氧/微需氧），定期觀察菌落形態(tài)、顏色及生長(zhǎng)速度等特征。培養(yǎng)條件控制通過革蘭染色、氧化酶試驗(yàn)、糖發(fā)酵試驗(yàn)等初步鑒定，必要時(shí)采用MALDI-TOF質(zhì)譜或16SrRNA基因測(cè)序進(jìn)行精準(zhǔn)菌種鑒定。生化鑒定與分子檢測(cè)挑取純培養(yǎng)菌落配制0.5麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙?，使用比濁儀或標(biāo)準(zhǔn)比濁管校準(zhǔn)濃度，確保接種菌量符合CLSI或EUCAST指南要求。菌懸液制備與濃度校準(zhǔn)測(cè)量抑菌圈直徑或讀取最低抑菌濃度（MIC），參照最新標(biāo)準(zhǔn)判斷敏感/中介/耐藥等級(jí)，同時(shí)定期以標(biāo)準(zhǔn)菌株（如ATCC25922）進(jìn)行質(zhì)控驗(yàn)證。結(jié)果判讀與質(zhì)量控制選用Mueller-Hinton瓊脂等標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)基，均勻涂布菌液后放置抗生素紙片或使用預(yù)置抗生素的微量稀釋板，確保藥物梯度分布準(zhǔn)確。藥敏平板制備與加樣010302藥敏試驗(yàn)操作規(guī)范針對(duì)MRSA、ESBLs等特殊耐藥表型，需增加苯唑西林篩選試驗(yàn)、雙紙片協(xié)同試驗(yàn)等補(bǔ)充方法，并嚴(yán)格執(zhí)行生物安全防護(hù)。多重耐藥菌檢測(cè)04核酸提取與純化采用磁珠法或柱提法從血清、咽拭子等樣本中提取病毒RNA/DNA，過程中加入內(nèi)標(biāo)監(jiān)控提取效率，避免PCR抑制劑殘留影響結(jié)果?？乖瓩z測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化對(duì)于快速抗原檢測(cè)（如流感膠體金試紙），需規(guī)范樣本處理液用量、反應(yīng)時(shí)間及結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)，避免主觀誤差導(dǎo)致假陽性/陰性。擴(kuò)增體系構(gòu)建設(shè)計(jì)特異性引物探針，配置實(shí)時(shí)熒光PCR反應(yīng)體系（含UNG防污染系統(tǒng)），設(shè)置陽性對(duì)照、陰性對(duì)照及定量標(biāo)準(zhǔn)品，確保擴(kuò)增曲線閾值循環(huán)數(shù)（Ct值）準(zhǔn)確。病毒分離與中和試驗(yàn)采用MDCK、VeroE6等細(xì)胞系進(jìn)行病毒培養(yǎng)，通過細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）觀察或血凝試驗(yàn)確認(rèn)病毒活性，中和試驗(yàn)需使用標(biāo)準(zhǔn)陽性血清進(jìn)行效價(jià)滴定。病毒檢測(cè)技術(shù)要求06質(zhì)量控制與安全規(guī)范質(zhì)量保證控制措施標(biāo)準(zhǔn)化操作流程制定并嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)化檢驗(yàn)操作流程，包括樣本采集、處理、檢測(cè)及結(jié)果分析，確保每個(gè)環(huán)節(jié)的可追溯性和一致性，減少人為誤差。定期校準(zhǔn)與維護(hù)對(duì)檢驗(yàn)儀器設(shè)備進(jìn)行周期性校準(zhǔn)和維護(hù)，確保其性能穩(wěn)定，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，同時(shí)建立校準(zhǔn)記錄檔案以備核查。室內(nèi)質(zhì)控與室間比對(duì)每日開展室內(nèi)質(zhì)控測(cè)試，使用質(zhì)控品監(jiān)測(cè)檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，并定期參與室間質(zhì)量評(píng)價(jià)，與其他實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行結(jié)果比對(duì)，驗(yàn)證檢測(cè)準(zhǔn)確性。人員培訓(xùn)與考核定期組織檢驗(yàn)人員參加專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)和操作考核，確保其熟練掌握檢驗(yàn)項(xiàng)目操作規(guī)程及質(zhì)量控制要點(diǎn)，提升整體檢測(cè)水平。實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)協(xié)議要求實(shí)驗(yàn)人員穿戴符合標(biāo)準(zhǔn)的防護(hù)服、手套、口罩及護(hù)目鏡，接觸傳染性樣本時(shí)需升級(jí)防護(hù)措施，避免職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)。個(gè)人防護(hù)裝備規(guī)范

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制定實(shí)驗(yàn)室意外事故（如樣本泄漏、設(shè)備故障）的應(yīng)急處理流程，配備急救箱、洗眼器等應(yīng)急設(shè)備，并定期組織演練以提升應(yīng)急響應(yīng)能力。緊急事件應(yīng)急預(yù)案根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)劃分實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別，配備相應(yīng)防護(hù)設(shè)施，如生物安全柜、負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室等，確保高風(fēng)險(xiǎn)樣本操作的安全性。生物安全分級(jí)管理嚴(yán)格區(qū)分感染性、化學(xué)性和普通廢棄物，使用專用容器分類存放，并委托專業(yè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行無害化處理，防止交叉污染或環(huán)境危害。廢棄物分類處理誤差處理與報(bào)告機(jī)制結(jié)果復(fù)核與報(bào)告制度對(duì)異?；蚺R界值結(jié)果實(shí)行三級(jí)復(fù)核制度，由操作人員、主管及