吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)技術(shù)考核一、單選題（每題2分，共20題）1.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用的PCR技術(shù)中，以下哪種方法最適合檢測(cè)微量或低豐度模板？A.石蠟包埋組織DNA提取法B.活細(xì)胞基因組DNA提取法C.納米磁珠純化法D.無(wú)內(nèi)酶裂解法2.在基因檢測(cè)樣本采集過(guò)程中，以下哪種情況最可能導(dǎo)致RNA降解？A.樣本采集后立即置于冰上保存B.使用含有EDTA的采血管C.樣本在室溫下放置超過(guò)2小時(shí)D.使用專用RNA保存液3.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)項(xiàng)目中，以下哪種基因檢測(cè)技術(shù)主要用于遺傳病篩查？A.基因芯片雜交技術(shù)B.數(shù)字PCR技術(shù)C.Sanger測(cè)序技術(shù)D.NGS（下一代測(cè)序技術(shù)）4.在基因檢測(cè)數(shù)據(jù)分析中，以下哪種軟件主要用于變異注釋？A.QIIMEB.SPSSC.IngenuityPathwayAnalysis(IPA)D.R語(yǔ)言5.吉安市人民醫(yī)院開(kāi)展腫瘤基因檢測(cè)時(shí)，以下哪種靶向藥物適應(yīng)癥最常與EGFR突變相關(guān)？A.乳腺癌B.非小細(xì)胞肺癌C.結(jié)直腸癌D.白血病6.在基因檢測(cè)樣本運(yùn)輸過(guò)程中，以下哪種條件最有利于保持樣本穩(wěn)定性？A.4℃冷藏運(yùn)輸B.干冰冷凍運(yùn)輸C.室溫運(yùn)輸D.真空冷凍干燥運(yùn)輸7.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，以下哪種設(shè)備主要用于核酸提??？A.流式細(xì)胞儀B.實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀C.高速冷凍離心機(jī)D.基因測(cè)序儀8.在基因檢測(cè)報(bào)告中，以下哪種變異分類通常與疾病相關(guān)性最強(qiáng)？A.轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)變異B.同義突變C.非編碼區(qū)變異D.無(wú)義突變9.吉安市人民醫(yī)院開(kāi)展產(chǎn)前基因檢測(cè)時(shí)，以下哪種方法最常用于檢測(cè)胎兒染色體異常？A.基因芯片KaryotypingB.染色體核型分析C.數(shù)字PCRD.全外顯子組測(cè)序10.在基因檢測(cè)質(zhì)量控制中，以下哪種指標(biāo)用于評(píng)估PCR擴(kuò)增效率？A.Ct值B.RQ值C.Cq值D.ΔCt值二、多選題（每題3分，共10題）1.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，以下哪些方法可用于DNA提取？A.磷酸鈣沉淀法B.無(wú)內(nèi)酶裂解法C.磁珠純化法D.染色體基因組DNA提取法2.在基因檢測(cè)樣本處理過(guò)程中，以下哪些措施有助于防止RNA降解？A.使用RNA酶抑制劑B.樣本采集后立即液氮冷凍C.避免反復(fù)凍融D.使用含有EDTA的采血管3.吉安市人民醫(yī)院開(kāi)展腫瘤基因檢測(cè)時(shí)，以下哪些基因突變與耐藥性相關(guān)？A.KRASB.PIK3CAC.BRCA1D.EGFR4.在基因檢測(cè)數(shù)據(jù)分析中，以下哪些軟件可用于變異篩選？A.GATKB.VarScanC.SAMtoolsD.ANNOVAR5.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，以下哪些設(shè)備用于核酸電泳？A.瓊脂糖凝膠電泳儀B.聚丙烯酰胺凝膠電泳儀C.高速冷凍離心機(jī)D.實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀6.在基因檢測(cè)樣本運(yùn)輸過(guò)程中，以下哪些條件會(huì)影響樣本質(zhì)量？A.室溫運(yùn)輸B.干冰過(guò)度冷凍C.樣本反復(fù)凍融D.4℃冷藏運(yùn)輸7.吉安市人民醫(yī)院開(kāi)展遺傳病檢測(cè)時(shí)，以下哪些樣本類型常用于檢測(cè)？A.外周血B.羊水C.精液D.組織活檢8.在基因檢測(cè)報(bào)告中，以下哪些變異分類通常與疾病相關(guān)性較低？A.同義突變B.轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)變異C.非編碼區(qū)變異D.無(wú)義突變9.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，以下哪些指標(biāo)用于評(píng)估PCR擴(kuò)增特異性？A.產(chǎn)物條帶清晰度B.非特異性條帶C.產(chǎn)物熔解曲線D.Ct值10.在基因檢測(cè)質(zhì)量控制中，以下哪些措施有助于提高檢測(cè)準(zhǔn)確性？A.重復(fù)實(shí)驗(yàn)B.內(nèi)對(duì)照使用C.參考品檢測(cè)D.儀器校準(zhǔn)三、判斷題（每題1分，共10題）1.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，全外顯子組測(cè)序（WES）比全基因組測(cè)序（WGS）成本更低。2.在基因檢測(cè)樣本采集過(guò)程中，使用含有EDTA的采血管可以防止RNA降解。3.吉安市人民醫(yī)院開(kāi)展腫瘤基因檢測(cè)時(shí)，EGFR突變主要見(jiàn)于非小細(xì)胞肺癌患者。4.在基因檢測(cè)數(shù)據(jù)分析中，Sanger測(cè)序技術(shù)主要用于檢測(cè)小片段DNA變異。5.樣本在室溫下放置超過(guò)2小時(shí)會(huì)導(dǎo)致RNA降解。6.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，數(shù)字PCR技術(shù)最適合檢測(cè)微量模板。7.在基因檢測(cè)報(bào)告中，同義突變通常與疾病相關(guān)性較強(qiáng)。8.產(chǎn)前基因檢測(cè)最常用于檢測(cè)胎兒染色體異常。9.在基因檢測(cè)質(zhì)量控制中，Ct值越高，PCR擴(kuò)增效率越高。10.吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，基因芯片雜交技術(shù)主要用于遺傳病篩查。四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共5題）1.簡(jiǎn)述吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，RNA提取的步驟和注意事項(xiàng)。2.簡(jiǎn)述吉安市人民醫(yī)院開(kāi)展腫瘤基因檢測(cè)時(shí)，EGFR突變檢測(cè)的臨床意義。3.簡(jiǎn)述吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，數(shù)字PCR技術(shù)的原理和優(yōu)勢(shì)。4.簡(jiǎn)述吉安市人民醫(yī)院開(kāi)展產(chǎn)前基因檢測(cè)時(shí)，羊水樣本采集的步驟和注意事項(xiàng)。5.簡(jiǎn)述吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，基因檢測(cè)質(zhì)量控制的主要指標(biāo)和方法。五、論述題（每題10分，共2題）1.結(jié)合吉安市人民醫(yī)院的實(shí)際情況，論述基因檢測(cè)技術(shù)在臨床應(yīng)用中的優(yōu)勢(shì)和局限性。2.論述吉安市人民醫(yī)院基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，樣本管理和數(shù)據(jù)隱私保護(hù)的重要性及措施。答案與解析一、單選題答案與解析1.C解析：納米磁珠純化法適用于微量或低豐度模板的提取，效率高且特異性強(qiáng)。其他方法更適合高豐度模板或組織樣本。2.C解析：RNA在室溫下容易降解，樣本在室溫放置超過(guò)2小時(shí)會(huì)導(dǎo)致RNA質(zhì)量下降。3.C解析：Sanger測(cè)序技術(shù)常用于遺傳病篩查，因其靈敏度高且成本較低。4.D解析：R語(yǔ)言（如VariantAnnotation包）常用于變異注釋和功能分析。5.B解析：EGFR突變主要見(jiàn)于非小細(xì)胞肺癌，是靶向藥物的重要適應(yīng)癥。6.A解析：4℃冷藏運(yùn)輸最有利于保持樣本穩(wěn)定性，尤其對(duì)于RNA樣本。7.C解析：高速冷凍離心機(jī)常用于核酸提取，可有效分離核酸。8.D解析：無(wú)義突變會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)翻譯終止，通常與疾病相關(guān)性最強(qiáng)。9.A解析：基因芯片Karyotyping常用于檢測(cè)胎兒染色體異常，靈敏度高。10.B解析：RQ值（相對(duì)定量）用于評(píng)估PCR擴(kuò)增效率。二、多選題答案與解析1.B、C、D解析：無(wú)內(nèi)酶裂解法、磁珠純化法和染色體基因組DNA提取法適用于DNA提取。磷酸鈣沉淀法較少用于臨床樣本。2.A、B、C解析：RNA酶抑制劑、液氮冷凍和避免反復(fù)凍融可有效防止RNA降解。EDTA主要抑制DNA酶活性。3.A、B解析：KRAS和PIK3CA突變與腫瘤耐藥性相關(guān)。BRCA1與乳腺癌相關(guān)，EGFR與肺癌相關(guān)。4.A、B解析：GATK和VarScan常用于變異篩選。SAMtools用于序列比對(duì)，ANNOVAR用于變異注釋。5.A、B解析：瓊脂糖凝膠電泳儀和聚丙烯酰胺凝膠電泳儀用于核酸電泳。6.A、B、C解析：室溫運(yùn)輸、干冰過(guò)度冷凍和反復(fù)凍融都會(huì)影響樣本質(zhì)量。4℃冷藏運(yùn)輸有利于樣本穩(wěn)定。7.A、B、D解析：外周血、羊水和組織活檢常用于遺傳病檢測(cè)。精液主要用于男性遺傳病檢測(cè)。8.A、B、C解析：同義突變、轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)變異和非編碼區(qū)變異通常與疾病相關(guān)性較低。無(wú)義突變與疾病相關(guān)性較高。9.A、C解析：產(chǎn)物條帶清晰度和熔解曲線可用于評(píng)估PCR特異性。非特異性條帶和Ct值與特異性無(wú)關(guān)。10.A、B、C、D解析：重復(fù)實(shí)驗(yàn)、內(nèi)對(duì)照使用、參考品檢測(cè)和儀器校準(zhǔn)都有助于提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。三、判斷題答案與解析1.×解析：WGS比WES成本更高，但覆蓋范圍更廣。2.×解析：EDTA主要抑制DNA酶活性，對(duì)RNA無(wú)保護(hù)作用。3.√解析：EGFR突變主要見(jiàn)于非小細(xì)胞肺癌。4.√解析：Sanger測(cè)序適合檢測(cè)小片段DNA變異。5.√解析：RNA在室溫下易降解。6.√解析：數(shù)字PCR適合檢測(cè)微量模板，靈敏度高。7.×解析：同義突變通常與疾病相關(guān)性較低。8.√解析：羊水樣本常用于產(chǎn)前基因檢測(cè)。9.×解析：Ct值越低，PCR擴(kuò)增效率越高。10.√解析：基因芯片雜交技術(shù)常用于遺傳病篩查。四、簡(jiǎn)答題答案與解析1.RNA提取步驟和注意事項(xiàng)步驟：①樣本采集后立即置于液氮保存；②使用含有RNA酶抑制劑的裂解緩沖液；③通過(guò)組織研磨或細(xì)胞裂解法釋放RNA；④使用磁珠純化法或柱式法純化RNA；⑤檢測(cè)RNA濃度和純度（如通過(guò)NanoDrop）。注意事項(xiàng)：①避免反復(fù)凍融；②使用無(wú)RNA酶的耗材；③RNA提取后立即進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)或保存于-80℃。2.EGFR突變檢測(cè)的臨床意義EGFR突變主要見(jiàn)于非小細(xì)胞肺癌，是靶向藥物（如厄洛替尼、吉非替尼）的重要適應(yīng)癥。檢測(cè)EGFR突變有助于指導(dǎo)治療方案，提高患者生存率。3.數(shù)字PCR技術(shù)的原理和優(yōu)勢(shì)原理：通過(guò)微量反應(yīng)體系進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過(guò)熒光信號(hào)檢測(cè)每個(gè)模板的拷貝數(shù)。優(yōu)勢(shì)：靈敏度高、特異性強(qiáng)、定量準(zhǔn)確，適用于微量樣本檢測(cè)。4.羊水樣本采集步驟和注意事項(xiàng)步驟：①超聲引導(dǎo)下穿刺；②吸取適量羊水；③立即置于無(wú)菌容器中；④標(biāo)本離心后提取RNA或DNA。注意事項(xiàng)：①避免污染；②標(biāo)本保存于4℃或液氮；③及時(shí)送檢。5.基因檢測(cè)質(zhì)量控制指標(biāo)和方法指標(biāo)：①擴(kuò)增效率（Ct值）；②特異性（無(wú)非特異性條帶）；③靈敏度（檢測(cè)到低豐度模板）；④重復(fù)性（實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性）。方法：①內(nèi)對(duì)照使用；②參考品檢測(cè)；③重復(fù)實(shí)驗(yàn)；④儀器校準(zhǔn)。五、論述題答案與解析1.基因檢測(cè)技術(shù)在臨床應(yīng)用中的優(yōu)勢(shì)和局限性優(yōu)勢(shì)：①提高診斷準(zhǔn)確性（如遺