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文檔簡(jiǎn)介
ICS65.150
CCSB52
54
西藏自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)
DB54/T0330—2024
拉薩裸裂尻魚(yú)
2024-04-09發(fā)布2024-05-09實(shí)施
西藏自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局??發(fā)布
DB54/T0330—2024
目次
前言..................................................................................II
1范圍................................................................................1
2規(guī)范性引用文件......................................................................1
3術(shù)語(yǔ)和定義..........................................................................1
4主要形態(tài)結(jié)構(gòu)特征....................................................................1
4.1外部形態(tài)特征....................................................................1
4.2內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征....................................................................3
5生長(zhǎng)與繁殖..........................................................................3
5.1生長(zhǎng)............................................................................3
5.2繁殖............................................................................4
6遺傳學(xué)特性..........................................................................4
6.1細(xì)胞遺傳學(xué)特性..................................................................4
6.2生化遺傳學(xué)特性..................................................................5
7檢測(cè)方法............................................................................5
7.1抽樣............................................................................5
7.2性狀測(cè)定........................................................................5
7.3年齡鑒定........................................................................5
7.4染色體檢測(cè)......................................................................5
7.5血清乳酸脫氫酶(LDH)酶檢測(cè)....................................................6
8檢測(cè)規(guī)則與結(jié)果判定..................................................................6
附錄A(資料性)生長(zhǎng)方程、體長(zhǎng)與體重關(guān)系式............................................7
A.1體長(zhǎng)和體重生長(zhǎng)方程..............................................................7
A.2體長(zhǎng)與體重關(guān)系式................................................................7
附錄B(規(guī)范性)同工酶各種試劑的配置..................................................8
B.1凝膠制備........................................................................8
B.2加樣指示劑......................................................................8
B.3電極緩沖液......................................................................8
B.4染色液的配置....................................................................8
I
DB54/T0330—2024
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定
起草。
本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。
本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。
本文件起草單位:西藏自治區(qū)畜牧總站、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、四川律貝生物技術(shù)有限公司。
本文件的主要起草人:林少卿、覃劍暉、霍斌、段友建、馬徐發(fā)、石維彬、謝從新、周賢君、楊君
輝、尼瑪群宗、拉巴次仁、央珍、邊巴卓瑪、格桑達(dá)瓦、邵儉、尼瑪次仁、蘇中華、黨發(fā)發(fā)、程方方、
次仁卓嘎、馬嬌林、袁齊濤、孫鋒博、于航、樂(lè)地、郭榮明、王潤(rùn)錦、吳海彬、石彬、鄒雨婷、孫建春、
張?chǎng)吾?、胡程鵬。
II
DB54/T0330—2024
拉薩裸裂尻魚(yú)
1范圍
本文件給出了拉薩裸裂尻魚(yú)(Schizopygopsisyounghusbandi)的主要形態(tài)構(gòu)造特征、生長(zhǎng)與繁殖、
遺傳學(xué)特性以及檢測(cè)方法。
本文件適用于拉薩裸裂尻魚(yú)的種質(zhì)監(jiān)測(cè)。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
GB/T18654.1養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)種質(zhì)檢驗(yàn)第1部分:檢驗(yàn)規(guī)則
GB/T18654.2養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)種質(zhì)檢驗(yàn)第2部分:抽樣方法
GB/T18654.3養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)種質(zhì)檢驗(yàn)第3部分:性狀測(cè)定
GB/T18654.4養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)種質(zhì)檢驗(yàn)第4部分:年齡與生長(zhǎng)的測(cè)定
GB/T18654.6養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)種質(zhì)檢驗(yàn)第6部分:繁殖性能的測(cè)定
GB/T18654.12養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)種質(zhì)檢驗(yàn)第12部分:染色體組型分析
GB/T18654.13養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)種質(zhì)檢驗(yàn)第13部分:同工酶電泳分析
3術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。
3.1
學(xué)名
拉薩裸裂尻魚(yú)(Schizopygopsisyounghusbandi)。
3.2
地方名
土魚(yú)。
3.3
分類(lèi)位置
硬骨魚(yú)綱(Osteichthyes),鯉形目(Cypriniformes),鯉科(Cyprinidae),裂腹魚(yú)亞科
(Schizothoracinae),裸裂尻魚(yú)屬(Schizopygopsis)。
4主要形態(tài)結(jié)構(gòu)特征
4.1外部形態(tài)特征
4.1.1外形
1
DB54/T0330—2024
體延長(zhǎng),側(cè)扁,頭錐形,吻鈍圓。口下位,弧形。下頜前緣具銳利角質(zhì),下唇細(xì)窄,不發(fā)達(dá);唇后
溝中斷。無(wú)須。背鰭位于體中點(diǎn)稍前,最后一根不分枝鰭條弱,后緣光滑或鋸齒不甚明顯,十分弱小;
胸鰭末端遠(yuǎn)離腹鰭。腹鰭起點(diǎn)與背鰭第5根~6根分枝鰭條相對(duì),極少有與第4枚分枝鰭條相對(duì)的,腹鰭
末端不達(dá)肛門(mén)。臀鰭起點(diǎn)緊鄰肛門(mén)之后,其末端接近或達(dá)尾鰭基。尾鰭叉形。體表除臀鱗外,在肩胛部
還有2~3行不規(guī)則鱗片,其它部分裸露無(wú)磷;側(cè)線完全,基本平直。鰓耙短小,排列較稀疏。身體背部
灰褐色,腹部灰白色,體側(cè)具不規(guī)則暗斑,頭、背側(cè)明顯具有較大的不規(guī)則黑褐色斑點(diǎn)。
拉薩裸裂尻魚(yú)的外形見(jiàn)圖1。
圖1拉薩裸裂尻魚(yú)外形圖
4.1.2可數(shù)性狀
4.1.2.1背鰭鰭式
D.ii~iii-7~8。
4.1.2.2臀鰭鰭式
A.iii-5。
4.1.2.3第一腮弓腮耙數(shù)
外側(cè)鰓耙數(shù)9~14;內(nèi)側(cè)鰓耙數(shù)15~22。
4.1.3可量性狀
不同體長(zhǎng)組個(gè)體的可量性狀變動(dòng)值見(jiàn)表1。
表1拉薩裸裂尻魚(yú)不同體長(zhǎng)組可量性狀
比例性狀平均值(范圍)比例性狀平均值(范圍)
體長(zhǎng)/體高5.5(5.0-5.9)頭長(zhǎng)/吻長(zhǎng)3.4(3.0-4.1)
體長(zhǎng)/頭長(zhǎng)4.2(3.8-4.5)頭長(zhǎng)/眼徑4.6(3.6-5.6)
2
DB54/T0330—2024
體長(zhǎng)/尾柄長(zhǎng)5.8(5.1-6.3)頭長(zhǎng)/眼間距3.1(2.8-3.3)
體長(zhǎng)/尾柄高13.35(11.43-15.52)尾柄長(zhǎng)/尾柄高2.4(2.1-2.7)
4.2內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征
4.2.1鰾
鰾2室,后室長(zhǎng)筒形,其長(zhǎng)度為前室長(zhǎng)的2.3倍~3.4倍。
4.2.2下咽齒
下咽齒2行,3·4/4·3。下咽齒頂端尖有鉤曲,咀嚼面凹陷,呈匙狀。
4.2.3脊椎骨
脊椎骨總數(shù):44枚~49枚。
4.2.4腹膜
腹膜為黑色。
5生長(zhǎng)與繁殖
5.1生長(zhǎng)
雌魚(yú)的最大年齡為17齡,雄魚(yú)的最大年齡為12齡。依據(jù)606尾樣本估算的各年齡組體長(zhǎng)和體重實(shí)
測(cè)值見(jiàn)表2。生長(zhǎng)方程和體長(zhǎng)與體重關(guān)系式參見(jiàn)附錄A。
表2拉薩裸裂尻魚(yú)各年齡組的體長(zhǎng)和體重實(shí)測(cè)值
雄魚(yú)雌魚(yú)
齡組
體長(zhǎng)(平均±S.D)體重(平均±S.D.)體長(zhǎng)(平均±S.D.)體重(平均±S.D)
齡
mmgmmg
2103.3±22.014.1±7.6106.3±26.417.4±12.6
3162.0±12.456.6±16.6174.0±26.679.5±45.0
4224.2±25.3160.2±48.1244.2±32.7209.7±77.6
5249.8±19.3218.1±49.6272.8±29.7279.6±92.8
6259.1±24.2229.2±55.9292.8±23.4342.0±85.6
7258.3±16.2234.1±51.3303.8±23.1377.1±82.2
8288.5±27.1315.0±88.0314.3±20.2410.9±84.7
9285.3±20.6363.5±80.0330.1±36.3440.2±97.7
10280.5±30.4278.9±41.2332.0±30.2520.0±72.2
12264.0277.7
3
DB54/T0330—2024
13342.7±30.2
17358.0
5.2繁殖
5.2.1成熟年齡
雌魚(yú)7齡,雄魚(yú)4齡。
5.2.2產(chǎn)卵類(lèi)型
性腺一年成熟一次,一次產(chǎn)出。
5.2.3繁殖期
繁殖期為3月~4月,高峰期為3月。
5.2.4懷卵量
依據(jù)69尾樣本估算各年齡組懷卵量見(jiàn)表3。
表3拉薩裸裂尻魚(yú)不同年齡組的懷卵量
年齡組體重范圍絕對(duì)懷卵量相對(duì)懷卵量
齡g粒粒/克
4149.7~366.95712.2~19190.266.1±12.2
5122.5~323.06577.0~20374.766.1±11.1
6205.9~425.18224.0~19578.857.5±16.1
7310.8~603.89207.4~30504.049.3±12.6
8278.2~606.911076.3~46764.358.2±18.2
9295.2~730.812906.8~34244.053.0±14.6
10386.3~839.419110.4~44411.165.9±5.1
11503.4~918.514895.5~51037.358.1±28.2
12627.240339.277.7
13507.620400.453.3
1758922446.046
6遺傳學(xué)特性
6.1細(xì)胞遺傳學(xué)特性
腎細(xì)胞染色體數(shù):2n=90。核型公式:36m+20sm+16st+22t;臂數(shù)(NF):146。
染色體核型見(jiàn)圖2。
4
DB54/T0330—2024
圖2拉薩裸裂尻魚(yú)核型圖
6.2生化遺傳學(xué)特性
血清乳酸脫氫酶(LDH)同工酶電泳圖譜和掃描圖見(jiàn)圖3。
圖3拉薩裸裂尻魚(yú)血清組織乳酸脫氫酶酶帶掃描圖
7檢測(cè)方法
7.1抽樣
按GB/T18654.2的規(guī)定執(zhí)行。
7.2性狀測(cè)定
按GB/T18654.3的規(guī)定執(zhí)行。
7.3年齡鑒定
采用耳石鑒定年齡。方法按GB/T18654.4的規(guī)定執(zhí)行。
7.4染色體檢測(cè)
5
DB54/T0330—2024
按GB/T18654.12的規(guī)定執(zhí)行。
7.5血清乳酸脫氫酶(LDH)酶檢測(cè)
7.5.1試劑及配置方法
同工酶各種試劑的配制見(jiàn)附錄A。
7.5.2樣品的采集與制備
血清制備,從尾靜脈抽取2ml血,于4℃、1000r/min離心6min,取上清備用。
7.5.3制膠
先將混勻的6.5%分離膠液倒入模板約3/4高度,小心在上面注入雙蒸水,置于36℃左右30min。待凝
膠聚合好以后,倒掉上面的水,將混勻的3.0%濃縮膠倒入模板,插好梳子,置于36℃左右30min,待凝
膠聚合好以后,置于冰箱中備用。
7.5.4點(diǎn)樣
點(diǎn)樣量為20μL。吸取20μL樣與2μL~3μL加樣指示劑混勻,一起加到樣孔中。
7.5.5電泳分離
1)采用聚丙烯酰胺凝膠垂直電泳。分離膠濃度6.5%,濃縮膠濃度3.0%。
2)電極緩沖液:pH為8.3的Tris—甘氨酸。
3)電泳:穩(wěn)壓280V(起始電流約18~24mA)電泳0.5h后,將電壓調(diào)到220v,繼續(xù)電泳5h~6h(溴
酚藍(lán)跑出膠后2h以上)。
4)染色:電泳結(jié)束后,放入預(yù)先配好并在37℃恒溫箱中保溫的同工酶染色液中染色。
8檢測(cè)規(guī)則與結(jié)果判定
按GB/T18654.1的規(guī)定執(zhí)行。
6
DB54/T0330—2024
A
A
附錄A
(資料性)
生長(zhǎng)方程、體長(zhǎng)與體重關(guān)系式
A.1體長(zhǎng)和體重生長(zhǎng)方程
雌性和雄性群體的體長(zhǎng)和體重生長(zhǎng)方程分別見(jiàn)式(A.1)、(A.2)、(A.3)和(A.4):
-0.194(t-0.397)
雌魚(yú)Lt=433.9[1-e]………(A.1)
-0.194(t-0.397)2.923
Wt=1050.19[1-e]…………………(A.2)
-0.233(t-0.403)
雄魚(yú)Lt=338.4[1-e]……….(A.3)
-0.233(t-0.403)3.023
Wt=525.92[1-e]……………………(A.4)
式中:
Lt-t齡時(shí)魚(yú)體體長(zhǎng),mm;
Wt-t齡時(shí)魚(yú)體體重,g;
e-自然對(duì)數(shù);
t-魚(yú)的年齡。
A.2體長(zhǎng)與體重關(guān)系式
雌性和雄性群體的體長(zhǎng)與體重關(guān)系式見(jiàn)(A.5)和(A.6):
雌魚(yú)W=2.052×10-5L2.923……………………..(A.5)
雄魚(yú)W=1.187×10-5L3.023…………………….(A.6)
式中:
W-魚(yú)體體重,g;
L-魚(yú)體體長(zhǎng),cm。
7
DB54/T0330—2024
B
B
附錄B
(規(guī)范性)
同工酶各種試劑的配置
B.1凝膠制備
B.1.1凝膠制備溶液配置
各種凝膠制備溶液的配方及配制方法見(jiàn)表B.1。
表B.1各種凝膠制備溶液配方
溶液配制方法
取Tris56.75g加200mL蒸餾水,用濃鹽酸調(diào)pH為8.9,加蒸餾水到250mL。4℃貯
凝膠緩沖液
存。
取丙烯酰胺33.3g,N,N’—亞甲基雙丙烯酰胺0.9g,四甲基乙二胺(TEMED)338μL
凝膠儲(chǔ)液
溶于蒸餾水中定容到150mL。4℃貯存。
AP取過(guò)硫酸銨1.5mg溶解到100mL蒸餾水水中。4℃貯存。
B.1.2分離膠和濃縮膠的制備
用6.5%分離膠和3.0%濃縮膠制成聚丙烯酰胺垂直板凝膠,該凝膠液配方見(jiàn)表B.2。
表B.2凝膠制備配方
6.5?%分離膠3.0?%濃縮膠
凝膠緩沖液,mL1.5凝膠緩沖液,mL0.5
凝膠儲(chǔ)液,mL7.3凝膠儲(chǔ)液,mL1.2
AP,mL1.5AP,mL0.5
TEMED,μL-TEMED,μL4.0
純水,mL14.7純水,mL6.8
總體積,mL25總體積,mL9.0
B.2加樣指示劑
0.15%溴酚藍(lán)-50%甘油:稱(chēng)取0.15g溴酚藍(lán)溶于50mL蒸餾水,再加50mL甘油混勻。
B.3電極緩沖液
取甘氨酸28.80g溶于800mL水,用約4.00g的Tris調(diào)pH至8.3,加
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