細(xì)胞治療細(xì)胞復(fù)蘇考試試卷與答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)常用的水浴溫度是（）A.30℃B.37℃C.40℃D.42℃2.細(xì)胞復(fù)蘇操作中，凍存管從液氮取出后應(yīng)（）A.直接放37℃水浴B.先室溫放置1分鐘C.先在4℃冰箱放置10分鐘D.緩慢升溫3.復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，離心轉(zhuǎn)速一般為（）A.500rpmB.1000rpmC.1500rpmD.2000rpm4.細(xì)胞凍存液中常用的保護(hù)劑是（）A.乙醇B.甘油C.DMSOD.丙酮5.復(fù)蘇后的細(xì)胞培養(yǎng)一般用（）培養(yǎng)基A.低糖DMEMB.高糖DMEMC.RPMI1640D.視細(xì)胞類型而定6.細(xì)胞復(fù)蘇后，判斷細(xì)胞活性常用的方法是（）A.臺(tái)盼藍(lán)染色B.結(jié)晶紫染色C.蘇木精染色D.伊紅染色7.細(xì)胞凍存管應(yīng)標(biāo)記（）A.細(xì)胞名稱、凍存日期B.細(xì)胞數(shù)量C.凍存液配方D.操作人員8.復(fù)蘇細(xì)胞過(guò)程中，以下操作錯(cuò)誤的是（）A.快速解凍B.離心后棄上清C.用預(yù)熱培養(yǎng)基重懸細(xì)胞D.直接將凍存細(xì)胞加入大量培養(yǎng)基9.細(xì)胞復(fù)蘇后培養(yǎng)多久可以進(jìn)行首次換液（）A.4-6小時(shí)B.12-24小時(shí)C.48-72小時(shí)D.一周后10.復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，凍存管在水浴中晃動(dòng)的目的是（）A.讓細(xì)胞受熱均勻B.防止凍存管破裂C.加速融化D.以上都是二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞復(fù)蘇的關(guān)鍵要點(diǎn)包括（）A.快速解凍B.合適的離心轉(zhuǎn)速C.無(wú)菌操作D.選擇合適的培養(yǎng)基2.以下哪些屬于細(xì)胞凍存液的成分（）A.血清B.培養(yǎng)基C.DMSOD.抗生素3.細(xì)胞復(fù)蘇后活性不佳可能的原因有（）A.凍存過(guò)程中降溫速度過(guò)快B.復(fù)蘇操作時(shí)間過(guò)長(zhǎng)C.培養(yǎng)基不合適D.凍存時(shí)間過(guò)久4.復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)用到的實(shí)驗(yàn)器材有（）A.離心機(jī)B.水浴鍋C.移液器D.培養(yǎng)瓶5.細(xì)胞復(fù)蘇后培養(yǎng)過(guò)程中需要注意（）A.觀察細(xì)胞形態(tài)B.定期更換培養(yǎng)基C.控制培養(yǎng)箱條件D.避免污染6.判斷細(xì)胞復(fù)蘇成功的指標(biāo)有（）A.細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)B.細(xì)胞增殖C.細(xì)胞活性良好D.細(xì)胞形態(tài)正常7.細(xì)胞復(fù)蘇操作前需要準(zhǔn)備（）A.預(yù)熱的培養(yǎng)基B.無(wú)菌的離心管C.75%酒精D.酒精燈8.細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的意義在于（）A.保存細(xì)胞資源B.便于細(xì)胞運(yùn)輸C.保證細(xì)胞的穩(wěn)定性D.降低細(xì)胞培養(yǎng)成本9.復(fù)蘇過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題有（）A.凍存管破裂B.細(xì)胞污染C.細(xì)胞復(fù)蘇后不生長(zhǎng)D.離心操作失誤10.以下關(guān)于細(xì)胞復(fù)蘇說(shuō)法正確的是（）A.不同細(xì)胞復(fù)蘇條件可能不同B.復(fù)蘇操作應(yīng)在超凈臺(tái)進(jìn)行C.復(fù)蘇后細(xì)胞需盡快傳代D.復(fù)蘇后的細(xì)胞可以立即凍存三、判斷題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，凍存管在水浴中融化時(shí)間越長(zhǎng)越好。（）2.細(xì)胞復(fù)蘇后離心棄上清的目的是去除凍存液。（）3.所有細(xì)胞復(fù)蘇都可以用相同的培養(yǎng)基。（）4.復(fù)蘇細(xì)胞操作過(guò)程不需要嚴(yán)格無(wú)菌。（）5.細(xì)胞凍存液中DMSO濃度越高越好。（）6.復(fù)蘇后的細(xì)胞如果不貼壁，一定是復(fù)蘇失敗。（）7.可以將多個(gè)凍存管同時(shí)放入水浴鍋進(jìn)行復(fù)蘇。（）8.細(xì)胞復(fù)蘇后培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基顏色變化與細(xì)胞狀態(tài)無(wú)關(guān)。（）9.細(xì)胞凍存和復(fù)蘇操作可以隨意進(jìn)行，不需要記錄。（）10.復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，直接將細(xì)胞接種到培養(yǎng)瓶中即可，不需要離心。（）四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述細(xì)胞復(fù)蘇的基本步驟。2.細(xì)胞凍存液中DMSO的作用是什么？3.細(xì)胞復(fù)蘇后活性低，可能有哪些解決辦法？4.細(xì)胞復(fù)蘇操作中，無(wú)菌操作的重要性體現(xiàn)在哪？五、討論題（每題5分，共4題）1.討論不同細(xì)胞類型對(duì)復(fù)蘇條件的差異及如何優(yōu)化。2.探討細(xì)胞復(fù)蘇過(guò)程中，如何確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。3.分析細(xì)胞凍存和復(fù)蘇技術(shù)在細(xì)胞治療領(lǐng)域的重要性及面臨的挑戰(zhàn)。4.結(jié)合實(shí)際操作，談?wù)劶?xì)胞復(fù)蘇過(guò)程中容易出現(xiàn)的失誤及改進(jìn)措施。答案一、單項(xiàng)選擇題1.B2.A3.B4.C5.D6.A7.A8.D9.B10.A二、多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.ABC9.ABCD10.AB三、判斷題1.×2.√3.×4.×5.×6.×7.√8.×9.×10.×四、簡(jiǎn)答題1.從液氮取出凍存管，迅速放入37℃水浴快速解凍，取出后用75%酒精消毒，轉(zhuǎn)移至超凈臺(tái)，離心棄上清，用預(yù)熱培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種到培養(yǎng)瓶，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2.DMSO是一種細(xì)胞保護(hù)劑，能降低細(xì)胞在凍存過(guò)程中因冰晶形成而造成的損傷，提高細(xì)胞復(fù)蘇后的活性。3.檢查凍存和復(fù)蘇操作是否規(guī)范，更換合適培養(yǎng)基，適當(dāng)調(diào)整血清濃度，添加生長(zhǎng)因子，去除死細(xì)胞，繼續(xù)觀察培養(yǎng)。4.無(wú)菌操作可防止微生物污染細(xì)胞，避免污染導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)異常、死亡，保證復(fù)蘇細(xì)胞的質(zhì)量和后續(xù)實(shí)驗(yàn)的可靠性。五、討論題1.不同細(xì)胞類型對(duì)溫度、培養(yǎng)基成分、復(fù)蘇速度等要求不同。優(yōu)化時(shí)需查閱文獻(xiàn)，開展預(yù)實(shí)驗(yàn)，調(diào)整復(fù)蘇條件，如復(fù)蘇溫度、離心轉(zhuǎn)速等，以提高復(fù)蘇效果。2.嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，使用標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)器材和試劑，詳細(xì)記錄每一步操作，包括時(shí)間、溫度等參數(shù)，多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)取平均值，確保結(jié)果準(zhǔn)確、可重復(fù)。3.重要性在于保存細(xì)胞資源、保證細(xì)胞質(zhì)量穩(wěn)定，