2026屆高考生物二輪精準(zhǔn)復(fù)習(xí)細(xì)胞工程與基因工程課程標(biāo)準(zhǔn)1.植物細(xì)胞工程包括組織培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交等技術(shù)。2.動(dòng)物細(xì)胞工程包括細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、細(xì)胞融合和干細(xì)胞的應(yīng)用等技術(shù)。3.對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子進(jìn)行顯微操作和處理以獲得目標(biāo)個(gè)體。4.基因工程是一種重組DNA技術(shù)。5.蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。6.轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性引發(fā)社會(huì)的廣泛關(guān)注。7.中國(guó)禁止生殖性克隆人。8.世界范圍內(nèi)應(yīng)全面禁止生物武器。課堂學(xué)習(xí)任務(wù)命題點(diǎn)1植物細(xì)胞工程【最新考情】1．(2024·浙江1月選考)山藥在生長(zhǎng)過程中易受病毒侵害導(dǎo)致品質(zhì)和產(chǎn)量下降。采用組織培養(yǎng)技術(shù)得到脫毒苗，可恢復(fù)其原有的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)特性，流程如圖。下列操作不可行的是()外植體→愈傷組織→叢生芽→試管苗A．選擇芽尖作為外植體可減少病毒感染B．培養(yǎng)基中加入抗生素可降低雜菌的污染C．將叢生芽切割后進(jìn)行繼代培養(yǎng)可實(shí)現(xiàn)快速繁殖D．提高生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值可促進(jìn)愈傷組織形成叢生芽2．(2024·湖北選擇考)植物甲抗旱、抗病性強(qiáng)，植物乙分蘗能力強(qiáng)、結(jié)實(shí)性好?？蒲腥藛T通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出兼有甲、乙優(yōu)良性狀的植物丙，過程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．過程①中酶處理的時(shí)間差異，原因可能是兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異B．過程②中常采用滅活的仙臺(tái)病毒或PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．過程④和⑤的培養(yǎng)基中均需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素D．可通過分析植物丙的染色體，來鑒定其是否為雜種植株【歷年考情】(1)(2022·遼寧T14)宜選用藍(lán)莓成熟葉片為材料制備外植體。()(2)(2022·浙江1月T7)農(nóng)作物秸稈的回收利用方式很多，其中之一是將秸稈碎化后作為食用菌的栽培基質(zhì)。碎化秸稈中纖維所起的作用，相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的瓊脂＋蔗糖。()(3)(2021·江蘇T5)植物組織培養(yǎng)過程中，用同一植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗不會(huì)出現(xiàn)變異。()(4)(2020·北京T13)為培育具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的無子柑橘，研究者設(shè)計(jì)如下流程。過程③需應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。()(5)(2020·天津T15節(jié)選)在誘導(dǎo)形成愈傷組織階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是__________________________________________。(6)(經(jīng)典高考題)①植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有_____________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。②用脫毒苗進(jìn)行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物________進(jìn)行組織培養(yǎng)。命題點(diǎn)2動(dòng)物細(xì)胞工程與胚胎工程【最新考情】1．(2024·黑吉遼選擇考)從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，在傳代后的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果如圖。下列敘述正確的是()A．傳代培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)皿需密封防止污染B．選?、俚募?xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比②更合理C．直接用離心法收集細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)D．細(xì)胞增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期可能與細(xì)胞密度過大有關(guān)2．(2024·甘肅選擇考)甘加藏羊是甘肅高寒牧區(qū)的優(yōu)良品種，是季節(jié)性發(fā)情動(dòng)物，每年產(chǎn)羔一次，每胎一羔，繁殖率較低。為促進(jìn)畜牧業(yè)發(fā)展，研究人員通過體外受精、胚胎移植等胚胎工程技術(shù)提高藏羊的繁殖率，流程如下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．藏羊甲需用促性腺激素處理使其卵巢卵泡發(fā)育和超數(shù)排卵B．藏羊乙的獲能精子能與剛采集到的藏羊甲的卵母細(xì)胞受精C．受體藏羊丙需和藏羊甲進(jìn)行同期發(fā)情處理D．后代丁的遺傳物質(zhì)來源于藏羊甲和藏羊乙【歷年考情】(1)(2023·湖南T21)研究人員通過肺上皮干細(xì)胞誘導(dǎo)生成肺類器官，可自組裝或與成熟細(xì)胞組裝成肺類裝配體。肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH、無菌、無毒環(huán)境、含95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境等基本條件。()(2)(2023·北京T12)研究者制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)甲狀旁腺激素(PTH)，制備過程中能篩選分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞。()(3)(2023·廣東T3)科學(xué)家采用體外受精技術(shù)獲得紫羚羊胚胎，并將其移植到長(zhǎng)角羚羊體內(nèi)，使后者成功妊娠并產(chǎn)仔，該工作有助于恢復(fù)瀕危紫羚羊的種群數(shù)量。此過程不涉及精子獲能處理。()(4)(2023·浙江1月T12)胚胎分割技術(shù)提高了移植胚胎的成活率。()(5)(2022·湖北T7)某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢，其原因不可能是血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基。()(6)(2021·江蘇T11)將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞。()(7)(2021·浙江1月T18)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離。()(8)(2023·湖北T22節(jié)選)①添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是________________________________________________________________________________________________________。②在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基)，該培養(yǎng)基對(duì)__________和_________________________________生長(zhǎng)具有抑制作用。③單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，其目的是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(9)(2022·全國(guó)甲T38節(jié)選)①為了實(shí)現(xiàn)體外受精需要采集良種公羊的精液，精液保存的方法是________。在體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理，其原因是_____________________________________________________________。②請(qǐng)以保存的囊胚和相應(yīng)數(shù)量的非繁殖期受體母羊?yàn)椴牧线M(jìn)行操作，以獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的后代。主要的操作步驟是____________________________________________________________________________________________________________________________________。

課后學(xué)習(xí)任務(wù)一、選擇題1．(2024·山東煙臺(tái)高三一模)科學(xué)家用紫外線照射板藍(lán)根原生質(zhì)體，使其部分染色體丟失，將處理后的板藍(lán)根原生質(zhì)體與油菜原生質(zhì)體融合，培育出了只含一條板藍(lán)根染色體和油菜全部染色體的非對(duì)稱雜種植株，該過程運(yùn)用了非對(duì)稱細(xì)胞融合技術(shù)。下列說法正確的是()A．原生質(zhì)體由細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的細(xì)胞質(zhì)組成B．融合原生質(zhì)體需放在無菌水中培養(yǎng)，以防雜菌污染C．非對(duì)稱細(xì)胞融合技術(shù)降低了不同物種間基因表達(dá)的干擾程度D．非對(duì)稱細(xì)胞融合技術(shù)提高了植物細(xì)胞的全能性，屬于細(xì)胞工程2．(2024·湖南長(zhǎng)沙高三聯(lián)考)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述，正確的是()A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的主要作用是刺激細(xì)胞呼吸B．在體外培養(yǎng)條件下，B淋巴細(xì)胞能夠無限增殖C．抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)中單克隆抗體主要發(fā)揮靶向運(yùn)輸作用D．克隆牛技術(shù)涉及體外受精、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等過程3．(2024·廣東惠州高三模擬)水牛養(yǎng)殖是中國(guó)重要的農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)之一。與傳統(tǒng)繁殖方法相比，家畜胚胎工程技術(shù)可以挖掘動(dòng)物的繁殖潛力，提升家畜種質(zhì)資源質(zhì)量。以下選項(xiàng)錯(cuò)誤的是()A．取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析、選育優(yōu)良品種，可以提升水牛種質(zhì)資源B．注射促性腺激素超數(shù)排卵和體外受精可以增加水牛胚胎數(shù)量C．胚胎移植使優(yōu)良母畜免去了冗長(zhǎng)的妊娠期，同時(shí)需要用免疫抑制劑處理代孕母畜D．同一胚胎分割產(chǎn)生的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，是動(dòng)物無性繁殖或克隆的方法之一4．(2024·河北石家莊高三二模)我國(guó)育種專家用普通小麥與耐鹽偃麥草體細(xì)胞雜交獲得耐鹽新品種山融3號(hào)，培育過程如下圖所示。下列敘述正確的是()A．使用胰蛋白酶處理可獲得具有活力的原生質(zhì)體B．用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合與細(xì)胞膜的選擇透過性有關(guān)C．愈傷組織再分化形成的芽產(chǎn)生的生長(zhǎng)素會(huì)抑制愈傷組織生根D．可將獲得的試管苗先移栽至適宜的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間，之后移栽于高鹽土壤中進(jìn)行篩選后再推廣栽培5．(2024·湖南永州高三二模)新冠病毒表面的S蛋白可與宿主細(xì)胞表面受體結(jié)合，介導(dǎo)病毒侵入細(xì)胞。S蛋白的單克隆抗體可有效阻斷新冠病毒的感染。制取新冠病毒S蛋白的單克隆抗體部分過程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．該單克隆抗體制備過程中，為獲得大量免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞，可多次注射S蛋白B．與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法相比，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法為PEG融合法C．經(jīng)過篩選1會(huì)淘汰未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞D．抗體篩選過程應(yīng)用了抗原與抗體特異性結(jié)合的原理6．(2024·湖南大聯(lián)考高三模擬)為獲得導(dǎo)入R基因的轉(zhuǎn)基因小鼠，科研人員進(jìn)行了如下圖所示的操作過程。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．過程①需用促性腺激素處理以獲得更多的卵母細(xì)胞B．過程②操作中通常需多個(gè)表達(dá)載體和多個(gè)受精卵C．過程③需使用藥物抑制雌鼠b對(duì)植入胚胎的免疫排斥D．過程④處理的目的是使多只雌鼠b處于受孕準(zhǔn)備狀態(tài)7．(2024·廣東深圳高三一模)基因工程的發(fā)展離不開理論的突破和技術(shù)的創(chuàng)新。下列科學(xué)研究體現(xiàn)了基因工程正式問世的是()A．艾弗里等人通過肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA可以轉(zhuǎn)移B．沃森和克里克建立了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型并提出遺傳物質(zhì)自我復(fù)制假說C．科學(xué)家利用質(zhì)粒作為載體構(gòu)建重組DNA并導(dǎo)入受體細(xì)胞，使外源基因在原核細(xì)胞中成功表達(dá)D．科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了多種限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶和逆轉(zhuǎn)錄酶8．(2024·遼寧遼陽高三一模)棉花是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物，黃萎病是棉花的最主要病害之一，有棉花的“癌癥”之稱。我國(guó)科學(xué)家在世界上首次獲得轉(zhuǎn)基因抗黃萎病棉花新株系，這將使棉花“癌癥”有望得到根治?？茖W(xué)家將從海島棉中分離出來的抗黃萎病基因At7導(dǎo)入陸地棉中，使陸地棉獲得抗病性狀。下列對(duì)轉(zhuǎn)基因棉的檢測(cè)與鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是()A．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉是否導(dǎo)入基因At7，需要一段能與基因At7互補(bǔ)的短單鏈核酸引物B．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉中的基因At7是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，其原理是抗原與抗體的特異性結(jié)合C．檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因棉表達(dá)出At7蛋白，說明轉(zhuǎn)基因棉中成功導(dǎo)入了基因At7并能表達(dá)D．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉是否抗黃萎病，可接種黃萎病的病原體到轉(zhuǎn)基因棉植株上9．(2024·廣東江門高三一模)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，傳統(tǒng)方法常受限于限制酶識(shí)別序列?？蒲腥藛T研發(fā)了新的DNA重組方法：In-Fusion技術(shù)。該技術(shù)的關(guān)鍵是要在目的基因兩端構(gòu)建與線性化質(zhì)粒末端相同的DNA序列(即同源序列)，然后用In-Fusion酶處理，使同源序列形成黏性末端，最終形成的重組質(zhì)粒會(huì)在受體細(xì)胞內(nèi)形成完整的重組序列。主要操作過程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．推測(cè)In-Fusion酶的作用是識(shí)別同源序列、形成黏性末端、連接磷酸二酯鍵B．載體A端和B端的序列不同，可防止目的基因與質(zhì)粒反向連接及自身環(huán)化C．形成重組質(zhì)粒時(shí)，如果溫度遠(yuǎn)高于50℃，那么黏性末端的堿基不容易互補(bǔ)配對(duì)D．該技術(shù)無需識(shí)別特定切割位點(diǎn)，需識(shí)別目的基因與線性化質(zhì)粒任意同源序列10．(2024·廣東惠州高三模擬)某植物組織培養(yǎng)的最佳激素(濃度單位：μmol/L)配比見下表。下列相關(guān)敘述正確的是()組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素濃度生長(zhǎng)素濃度Ⅰ——誘導(dǎo)形成愈傷組織m1n1Ⅱ——誘導(dǎo)形成幼芽m2n2Ⅲ——誘導(dǎo)生根m3n3A.不同階段m/n值是不同的，此值最大的階段是Ⅲ階段B．在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中只有Ⅱ階段會(huì)發(fā)生基因選擇性表達(dá)C．Ⅰ階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體D．用該技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)時(shí)激素配比最好為m2和n211．(2024·廣東廣州高三一模)抗CD20抗體可用于治療淋巴瘤等疾病。研究人員將表達(dá)抗CD20單克隆抗體的DHFR-CHO雜交瘤細(xì)胞接種于反應(yīng)器中培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中不補(bǔ)充培養(yǎng)液，抽樣檢測(cè)產(chǎn)物濃度和細(xì)胞生長(zhǎng)情況(通過臺(tái)盼藍(lán)染色結(jié)合顯微鏡直接計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)細(xì)胞密度和活性)。下列敘述正確的是()A．雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)過程中需置于37℃、含5%O2的氣體條件下進(jìn)行培養(yǎng)B．顯微鏡下只統(tǒng)計(jì)單位體積中被染色的細(xì)胞數(shù)量，即可得到活細(xì)胞密度C．隨著培養(yǎng)過程的進(jìn)行，產(chǎn)物持續(xù)增多，最高濃度約為95mg·L－1D．培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的減少制約了細(xì)胞的生長(zhǎng)和活性12．(2024·廣東佛山高三二模)為解決跨物種器官移植出現(xiàn)的免疫排斥反應(yīng)，研究者提出了如下思路：剔除豬的某些基因，用豬的器官作為供體。借助CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)可以剔除豬的相關(guān)基因，下圖為Cas9蛋白依據(jù)sgRNA片段切割DNA的示意圖(設(shè)計(jì)特定的sgRNA可以識(shí)別需剔除的DNA序列)。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．上述需要剔除的基因可能是標(biāo)明豬細(xì)胞身份的標(biāo)簽蛋白基因B．上述基因編輯過程還需細(xì)胞內(nèi)的限制酶及DNA連接酶參與C．上述基因編輯技術(shù)能定點(diǎn)切除目標(biāo)基因取決于sgRNAD．可以利用顯微注射技術(shù)將Cas9-sgRNA復(fù)合體導(dǎo)入豬的受精卵二、非選擇題13．(2024·河北保定高三一模)人的血清白蛋白在臨床上需求量很大，為提高其產(chǎn)量，科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)和克隆技術(shù)培育出能分泌血清白蛋白的奶牛，流程如下圖所示，圖中數(shù)字表示相關(guān)的實(shí)驗(yàn)操作步驟。據(jù)圖回答下列問題：(1)為獲得人血清白蛋白基因，首先要從細(xì)胞中獲取總RNA，通過________獲得cDNA，再進(jìn)行PCR獲得人血清白蛋白。進(jìn)行PCR需要設(shè)計(jì)引物，引物的作用是________________________。已知引物3′端和模板間發(fā)生錯(cuò)配時(shí)，不同堿基引發(fā)效率存在著很大的差異，當(dāng)末位的堿基為A時(shí)，即使在錯(cuò)配的情況下，也能有引發(fā)鏈的合成，而當(dāng)末位鏈為T時(shí)，引發(fā)鏈的合成效率大大降低，G、C錯(cuò)配的引發(fā)效率介于A、T之間。為保證PCR得到正確擴(kuò)增產(chǎn)物，引物3′端最好選擇___________________________________________________堿基。(2)同位酶是指識(shí)別相同的序列但切割位點(diǎn)不同的一類限制酶；同尾酶是指識(shí)別不同的序列但產(chǎn)生相同的黏性末端的一類限制酶。為成功構(gòu)建血清白蛋白基因表達(dá)載體，且在一定程度上防止重組質(zhì)粒再次被切割，則可使用________(填“同位酶”或“同尾酶”)對(duì)DNA進(jìn)行切割。人血清白蛋白cDNA中不含限制酶識(shí)別序列，為構(gòu)建基因表達(dá)載體，需在PCR使用的引物的__________(填“3′”或“5′”)端上加入限制酶的識(shí)別序列。(3)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作步驟①時(shí)，需選用__________(填“雄性”或“雌性”)的胚胎細(xì)胞。若用體細(xì)胞取代胚胎細(xì)胞，則經(jīng)過步驟②后得到早期胚胎的成功率會(huì)________，原因是___________________________________________________________________________________________________________。(4)得到細(xì)胞B時(shí)，需將供體細(xì)胞A的細(xì)胞核注入去核的卵母細(xì)胞中，去掉卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的原因是____________________________________________________________________________________________________________。(5)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作步驟③時(shí)，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。實(shí)驗(yàn)操作步驟④涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有______________________________________________________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。14．(2024·河北邯鄲高三一模)某科研團(tuán)隊(duì)首次利用轉(zhuǎn)基因豬的唾液腺作為生物反應(yīng)器，高效合成一種對(duì)人的神經(jīng)性疾病具有良好治療作用的蛋白質(zhì)——人神經(jīng)生長(zhǎng)因子(hNGF)，為生產(chǎn)高活性的人類藥用蛋白提供了一種高效的新技術(shù)，拓展了畜牧動(dòng)物在人類醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用。下圖為該團(tuán)隊(duì)構(gòu)建的基因表達(dá)載體，請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：(1)科研人員曾經(jīng)利用小鼠唾液腺組織中分離純化的鼠源神經(jīng)生