ICS65.020.01

CCSB15

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內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB15/T2086—2021

向日葵抗列當(dāng)田間盆栽接種鑒定技術(shù)規(guī)程

Codeofpracticeforidentificationofsunflowerresistancetobroomrapesinfield

pottinginoculation

2021-01-25發(fā)布2021-02-25實施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T2086—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（SAM/TC20）歸口。

本文件起草單位：赤峰市農(nóng)牧科學(xué)研究院。

本文件主要起草人：薛偉、譚麗萍、張瑋、畢經(jīng)偉、田軍。

I

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向日葵抗列當(dāng)田間盆栽接種鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了田間條件下向日葵抗列當(dāng)田間盆栽接種鑒定的方法和抗性評價標(biāo)準(zhǔn)。

本文件適用于田間條件下向日葵抗列當(dāng)水平的鑒定。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4田間盆栽接種鑒定技術(shù)

4.1列當(dāng)接種物制備

4.1.1列當(dāng)種子采集和清選

采集完熟的的列當(dāng)蒴果壓碎后過篩（篩孔直徑為0.18cm），篩選出列當(dāng)種子備用。

4.1.2列當(dāng)種子活性測定

隨機取備用列當(dāng)種子3份，每份10mg，利用GR24溶液（濃度為1mg/L）作為萌發(fā)刺激物，測定列當(dāng)

種子活性，平均芽率80%以上可用作接種物制備。（見附錄A、B）

4.1.3列當(dāng)生理小種選擇

選擇能代表內(nèi)蒙古不同向日葵種植區(qū)域列當(dāng)?shù)膬?yōu)勢生理小種類型。

4.1.4列當(dāng)種子接種物準(zhǔn)備

按500mg列當(dāng)種子（約10萬粒）兌0.5kg育苗基質(zhì)的比例，將列當(dāng)種子與育苗基質(zhì)混合均勻，制成

接種物備用。

4.2列當(dāng)接種向日葵

4.2.1向日葵對照品種選擇

抗列當(dāng)對照品種選擇同輝31號，感列當(dāng)對照品種選擇赤葵2號。

4.2.2播種前準(zhǔn)備

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取未種植過向日葵的土壤裝入黑色塑料營養(yǎng)缽（規(guī)格為26cm*21cm）五分之四高度，沿營養(yǎng)缽內(nèi)

四周均勻撒施約3g的向日葵專用緩釋復(fù)合肥,然后覆滿土。按每重復(fù)10盆將營養(yǎng)缽成行埋入土中，深度

約20cm，行間距20cm；每品種3次重復(fù)，隨機區(qū)組排列，將種子排序備用。澆水至土壤相對含水量50%～

60%。

4.2.3接種列當(dāng)及鑒定品種播種

在營養(yǎng)缽深5cm～7cm中心處，每盆撒施接種物約20g；在營養(yǎng)缽深2cm～3cm中心處，播種向日

葵種子后覆土，表面撒細(xì)沙。

4.3田間管理

幼苗2對真葉時，去除弱苗，留一壯苗，拔除雜草，生育期間適時澆水、除草。

4.4田間調(diào)查

4.4.1調(diào)查時期

當(dāng)植株達(dá)到8～9片真葉時，進行第一次調(diào)查，之后每隔10d調(diào)查一次直至灌漿末期。

4.4.2調(diào)查及計算方法

記載調(diào)查時植株所處生育時期、小區(qū)內(nèi)向日葵株數(shù)、被寄生株數(shù)、列當(dāng)株數(shù)，計算各品種的平均寄

生率（F）、平均寄生程度（AD）。

計算公式如下：

α

F=×100%……（1）

β

λ

AD=…………（2）

β

式中：

F——寄生率；

α——小區(qū)內(nèi)被寄生向日葵株數(shù)；

β

——小區(qū)內(nèi)向日葵株數(shù)；

AD——寄生程度；

λ——小區(qū)內(nèi)列當(dāng)株數(shù)。

具體列當(dāng)寄生調(diào)查表格見附錄C。

4.5抗性鑒定級別的劃分

以3次重復(fù)的平均寄生率和寄生程度，按表1評定品種的抗性級別。

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表1向日葵列當(dāng)抗性評價標(biāo)準(zhǔn)

級別抗性類型寄生率F/（%）寄生程度（AD）

1免疫（I）F=0.00AD=0

2高抗（HR）0.00＜F≤35.000≤AD≤1

3中抗（R）35.00＜F≤70.001≤AD≤10

4中感（S）70.00＜F≤100.001≤AD≤10

5高感（HS）35.00＜F≤100.00AD>10

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附錄A

（規(guī)范性）

GR24簡介

A.1GR24性狀

化學(xué)中文名稱：(3E,3aR,8bS)-3-[[(2S)-4-甲基-5-氧代-2H-呋喃-2-基]氧基亞甲基]-4,8b-二氫

-3aH-茚并[2,1-d]呋喃-2-酮

化學(xué)英文名稱：（3aR*,8bS*,E）-3-（（（R*）-4-methyl-5-oxo-2,5-dihydrofuran-2-yloxy）

methylene）-3,3a,4,8b-tetrahydro-2H-indeno[1,2-b]furan-2-one

分子式：C17H14O5

分子量：298.29

分子結(jié)構(gòu)：

圖A.1rac-GR24分子結(jié)構(gòu)式

A.2GR24的用途

GR24是獨腳金內(nèi)酯的人工合成類似物，BinneZwanenburg教授(UniversityofNijmegen,

Netherlands)的研究小組是世界上最早合成并提供免費提供給（1mg）世界各個實驗室開展研究工作的

組織，目前可以商業(yè)提供研究人員使用。

獨角金內(nèi)酯(Strigolactones)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種植物激素或其前體，能夠抑制植物的分枝和側(cè)芽

的生長，它與生長素和細(xì)胞分裂素協(xié)同控制植物的分枝（蘗）數(shù)量。作為一種產(chǎn)生于植物根部的類胡蘿

卜素衍生物，獨角金內(nèi)酯可以促進植物和土壤微生物的共生作用。另外，在植物與其寄生植物相互作用

的過程中，獨角金內(nèi)酯還起到信號分子的作用，它可以誘導(dǎo)寄生植物如獨角金屬(Strigaspp.)、列當(dāng)

屬(Orobanchespp.)種子的萌發(fā)。

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附錄B

（資料性）

向日葵列當(dāng)種子活性測定方法

B.1種子活性測定方法

B.1.1列當(dāng)種子表面消毒

將5mL離心管底部切除，包裹上K-49型玻璃纖維濾紙（Ф90mm，阻力≤5.5mmH2O）后放置在小

燒杯中固定。加入向日葵列當(dāng)種子0.1g，加入有效成分1%的次氯酸鈉溶液輕輕震蕩3min后，用無菌

水沖洗3次，然后用75%酒精處理1min，再用無菌水沖洗3次，放在無菌狀態(tài)下晾干備用。

B.1.2向日葵列當(dāng)種子預(yù)培養(yǎng)

在培養(yǎng)皿內(nèi)（Ф90mm，高20mm）重疊放入兩張濾紙，加入5mL濃度0.1mmol/L的赤霉素溶液，然

后在濾紙上均勻放置直徑5mm的玻璃纖維濾紙片約30片。將表面消毒后的向日葵列當(dāng)種子均勻散播在濾

紙片上（每個濾紙片上約20～40粒種子），培養(yǎng)皿用封口膜密封后，外加黑塑料袋，放置在25℃恒溫

培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6d。

B.1.3GR24刺激向日葵列當(dāng)種子發(fā)芽試驗

將預(yù)培養(yǎng)向日葵列當(dāng)種子6d后的培養(yǎng)皿在無菌環(huán)境下打開，用1mg/L的GR24在每個玻璃纖維濾片

上直接加入20uL。用封口膜密封后，放置在25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，5d后在120倍顯微鏡下觀察，如

果芽管長出種皮即認(rèn)為該種子已發(fā)芽，并統(tǒng)計發(fā)芽率。

B.1.4結(jié)果統(tǒng)計表

圖B.1向日葵列當(dāng)種子采集明細(xì)及活性測定表

采集地點采集時間總重量/g純度芽率/%