中國(guó)輔助生殖技術(shù)指南目錄Contents指南制定方法推薦意見(jiàn)及依據(jù)精子處理優(yōu)化操作實(shí)踐細(xì)節(jié)指南制定方法目標(biāo)人群與使用人群指南適用于擬行ART的患者，包括不孕不育夫婦和特殊人群。根據(jù)精液參數(shù)正常與否，推薦不同的采集與處理方法。對(duì)于逆行射精樣本，有條件的實(shí)驗(yàn)室可考慮對(duì)尿液中回收精子進(jìn)行冷凍保存。適用人群使用方法注意事項(xiàng)010203制定指南旨在為輔助生殖技術(shù)人員提供關(guān)于精液采集與處理的臨床實(shí)踐建議，以優(yōu)化ART治療結(jié)果。工作組負(fù)責(zé)匯總現(xiàn)有證據(jù)，評(píng)估不同來(lái)源精子對(duì)ART成功率的影響，并基于專家共識(shí)形成標(biāo)準(zhǔn)化操作流程。由生殖醫(yī)學(xué)專家、臨床醫(yī)生、泌尿科專家和循證醫(yī)學(xué)專家組成的多學(xué)科團(tuán)隊(duì)共同參與指南的編寫(xiě)和審核工作。工作組目標(biāo)工作組職責(zé)工作組組成工作組構(gòu)成取精室設(shè)置精子采集困難應(yīng)對(duì)精液參數(shù)與優(yōu)化處理方法選擇取精室應(yīng)設(shè)在環(huán)境安靜、無(wú)異味的地方，且鄰近精液處理室，以便于空氣消毒和記錄。對(duì)于手淫取精困難的患者，可在男科評(píng)估無(wú)相關(guān)禁忌證后服用5型磷酸二酯酶抑制劑類藥物，并結(jié)合視聽(tīng)刺激或妻子輔助進(jìn)行手淫取精。根據(jù)精液參數(shù)正常與否選擇合適的精子優(yōu)化處理方法，如精液參數(shù)正常的樣本可采用上游法、密度梯度離心法或密度梯度離心后上游法，解凍后精子、少精子癥、畸形精子癥或弱精子癥樣本可考慮使用特定的優(yōu)化處理方法。臨床問(wèn)題遴選推薦意見(jiàn)及依據(jù)環(huán)境要求設(shè)施要求安全要求取精室應(yīng)設(shè)在安靜、無(wú)異味的環(huán)境中，并鄰近精液處理室。室內(nèi)需要保持清潔、通風(fēng)，溫度維持在21~25℃，每天工作結(jié)束后要進(jìn)行消毒處理。配備空氣凈化設(shè)施和洗手設(shè)施，有條件的實(shí)驗(yàn)室可以安裝電子核對(duì)系統(tǒng)以減少識(shí)別錯(cuò)誤和錯(cuò)配。取精室應(yīng)設(shè)有報(bào)警系統(tǒng)以防止意外情況發(fā)生，如操作者對(duì)精子抗體過(guò)高或患者出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)等。取精室設(shè)置要求010203禁欲時(shí)間的推薦取精的最佳時(shí)間取精困難的應(yīng)對(duì)策略指南建議，對(duì)于精子參數(shù)正常的患者，推薦的禁欲時(shí)間是2~4天。禁欲時(shí)間對(duì)精液參數(shù)存在影響，有研究表明禁欲時(shí)間在3~4天時(shí)能顯著增加活動(dòng)精子百分比以及更低的DFI水平。對(duì)于精子采集，最佳的取精時(shí)間是在禁欲后的第2天到第4天之間。這是因?yàn)檫@段時(shí)間內(nèi)，精子數(shù)量和質(zhì)量都相對(duì)較好，有助于提高體外受精的成功率。對(duì)于取精困難的患者，如因心理因素或生理原因?qū)е聼o(wú)法自慰取精，可以考慮使用手術(shù)取精或者卵子凍存的方式。此外，也可以在男科評(píng)估無(wú)相關(guān)禁忌證后服用5型磷酸二酯酶抑制劑類藥物，并結(jié)合視聽(tīng)刺激或妻子輔助的方式手淫取精。禁欲時(shí)間與取精時(shí)間010203取精容器與預(yù)防差錯(cuò)使用無(wú)菌且對(duì)精子無(wú)毒的取精杯，確保精液樣本不受污染。取精容器的無(wú)菌性在取精杯上標(biāo)注患者姓名、病例號(hào)等唯一性標(biāo)識(shí)，防止混淆和誤用。避免差錯(cuò)的標(biāo)識(shí)方法在處理精液前后進(jìn)行手部清潔和消毒，使用一次性手套，避免交叉感染。預(yù)防交叉感染的措施精子處理優(yōu)化對(duì)于精液參數(shù)正常的樣本，推薦使用上游法，該方法能有效提高前向運(yùn)動(dòng)精子率。若精液參數(shù)正常，也可采用密度梯度離心法處理，此法能顯著提高精子回收率，減少非成熟精子數(shù)量。對(duì)于精液參數(shù)正常的樣本進(jìn)行優(yōu)化處理時(shí)，應(yīng)盡快處理以避免精液水分蒸發(fā)和滲透壓改變對(duì)精子活力造成影響。上游法的使用條件密度梯度離心法的處理效果優(yōu)化處理對(duì)精子活力的影響精液參數(shù)正常樣本處理對(duì)于不同來(lái)源的精子，如精液參數(shù)正常的樣本、解凍后精子、少精子癥、畸形精子癥或弱精子癥樣本，推薦使用不同的處理方法，如上游法、密度梯度離心法或密度梯度離心后上游法。針對(duì)逆行射精樣本和附睪穿刺取精樣本等特殊樣本，推薦采用特定的處理方法。例如，逆行射精樣本可以通過(guò)直接離心處理回收精子，而附睪或睪丸穿刺取精樣本則建議進(jìn)行手術(shù)取精。在處理精液樣本時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。這包括對(duì)精液樣本的采集、保存、處理和評(píng)估等各個(gè)環(huán)節(jié)的操作規(guī)范。精液樣本優(yōu)化處理特殊樣本的處理實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程特殊樣本處理方法123離心力與時(shí)間選擇對(duì)于正常液化的精液樣本，推薦使用（300~400）×g，10~20min的離心力和時(shí)間。對(duì)于不液化或不完全液化、黏稠和嚴(yán)重少弱精子癥及隱匿精子癥精液樣本，可以適當(dāng)增加離心力，但需經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證后使用。完全液化的非嚴(yán)重少弱精子癥精液樣本建議使用10~20min的離心時(shí)間，而對(duì)于不液化或不完全液化、黏稠和嚴(yán)重少弱精子癥及隱匿精子癥精液樣本，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間。精液處理時(shí)離心力的選取對(duì)精子質(zhì)量有重要影響。適當(dāng)增加離心力可以有效減少未成熟精子并提高前向運(yùn)動(dòng)精子比例，但也要注意過(guò)大的離心力可能會(huì)對(duì)精子產(chǎn)生損傷。離心力的選擇離心時(shí)間的選擇精液處理與離心力的關(guān)聯(lián)操作實(shí)踐細(xì)節(jié)010203精液采集后應(yīng)盡快進(jìn)行處理，最遲不超過(guò)1小時(shí)，以防止精液水分蒸發(fā)使?jié)B透壓和pH值改變對(duì)精子活力造成影響。優(yōu)化處理后的精子懸液，體外受精前放置時(shí)間最好控制在2小時(shí)以內(nèi)，以減少精子DNA損傷。對(duì)于逆行射精樣本，可以考慮對(duì)尿液中回收的精子進(jìn)行冷凍保存，或者進(jìn)行附睪或睪丸穿刺取精。精液采集后盡快處理優(yōu)化處理后的精子懸液放置時(shí)間逆行射精樣本的處理方式精液收集與處理間隔推薦優(yōu)化處理后的精子懸液在體外受精前放置時(shí)間最好控制在2小時(shí)以內(nèi)，以減少ROS積聚對(duì)精子DNA造成的潛在損傷。建議優(yōu)化處理后的精子懸液應(yīng)在室溫下（21~25℃）進(jìn)行孵育，相較于高溫孵育，這有助于維持精子活力和降低DFI水平。推薦優(yōu)化處理后的精子懸液應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間孵育，最佳時(shí)間控制在2小時(shí)以內(nèi)，以保持精子質(zhì)量并提高受精成功率。處理后精子懸液的放置時(shí)間處理后精子懸液的孵育溫度精子懸液的最佳孵育時(shí)間懸液孵育時(shí)間與溫度01”02”03”尿液樣本的處理冷凍保存逆行射精樣本附睪或睪丸穿刺取精逆行射精樣本處理對(duì)于逆行射精的樣本，應(yīng)立即進(jìn)行離心處理，推薦使用（300~500）×g，