醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室生物安全柜氣流速度校準(zhǔn)記錄細(xì)則一、校準(zhǔn)目的與范圍生物安全柜作為醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的核心設(shè)備，其氣流速度的穩(wěn)定性直接關(guān)系到操作人員、實(shí)驗(yàn)樣品及環(huán)境的安全。本細(xì)則旨在規(guī)范氣流速度校準(zhǔn)的操作流程、記錄標(biāo)準(zhǔn)及結(jié)果判定，確保生物安全柜在日常使用中符合GB19489-2008《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》及YY0569-2011《生物安全柜》的技術(shù)要求。本細(xì)則適用于醫(yī)院檢驗(yàn)科、微生物實(shí)驗(yàn)室、PCR實(shí)驗(yàn)室等場(chǎng)所使用的Ⅱ級(jí)生物安全柜（包括A1、A2、B1、B2型），校準(zhǔn)周期為每半年一次，或在設(shè)備維修、移位、濾膜更換后補(bǔ)充校準(zhǔn)。二、校準(zhǔn)環(huán)境要求（一）環(huán)境條件溫度：校準(zhǔn)期間實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)控制在15℃~30℃，波動(dòng)范圍不超過(guò)±2℃/h。相對(duì)濕度：30%~75%，避免因濕度異常導(dǎo)致氣流速度測(cè)量偏差。大氣壓力：86kPa~106kPa，若實(shí)驗(yàn)室位于高原地區(qū)，需記錄實(shí)際氣壓值并在校準(zhǔn)報(bào)告中注明。環(huán)境潔凈度：生物安全柜所在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)達(dá)到8級(jí)潔凈度（ISO14644-1標(biāo)準(zhǔn)），校準(zhǔn)前1小時(shí)內(nèi)應(yīng)停止地面清掃、設(shè)備移動(dòng)等可能產(chǎn)生揚(yáng)塵的操作。氣流干擾：關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室門(mén)窗，避免空調(diào)出風(fēng)口、排風(fēng)扇直吹安全柜，校準(zhǔn)期間禁止人員在安全柜周?chē)焖僮邉?dòng)或進(jìn)行其他產(chǎn)生氣流擾動(dòng)的活動(dòng)。（二）設(shè)備狀態(tài)生物安全柜應(yīng)提前開(kāi)機(jī)運(yùn)行30分鐘以上，確保氣流達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。安全柜內(nèi)不得放置任何實(shí)驗(yàn)物品，工作臺(tái)面保持空曠、水平，必要時(shí)使用水平儀校準(zhǔn)柜體水平度。檢查安全柜外觀，確認(rèn)玻璃觀察窗密封完好、送風(fēng)/排風(fēng)高效過(guò)濾器無(wú)破損，風(fēng)機(jī)運(yùn)行無(wú)異常噪音。三、校準(zhǔn)用儀器與工具（一）主要儀器風(fēng)速儀：類(lèi)型：應(yīng)選用熱球式或熱線式風(fēng)速儀，精度不低于±0.05m/s，量程覆蓋0.1m/s~5m/s。校準(zhǔn)要求：風(fēng)速儀需經(jīng)法定計(jì)量機(jī)構(gòu)檢定合格，且在有效期內(nèi)（每年檢定一次），校準(zhǔn)前需使用標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速發(fā)生器進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)核查。溫度計(jì)與濕度計(jì)：精度分別為±0.5℃和±5%RH，用于記錄環(huán)境溫濕度。秒表：精度0.1秒，用于測(cè)量風(fēng)速儀探頭移動(dòng)速度。卷尺/激光測(cè)距儀：最小分度值1mm，用于測(cè)量采樣點(diǎn)間距及安全柜尺寸。（二）輔助工具水平儀、記號(hào)筆、不干膠標(biāo)簽（用于標(biāo)記采樣點(diǎn)位置）；無(wú)塵布、異丙醇（用于清潔風(fēng)速儀探頭及安全柜工作臺(tái)面）；校準(zhǔn)記錄表（格式見(jiàn)附件1）、簽字筆、計(jì)算機(jī)（用于數(shù)據(jù)計(jì)算與處理）。四、校準(zhǔn)項(xiàng)目與操作流程（一）校準(zhǔn)前準(zhǔn)備儀器檢查：開(kāi)機(jī)檢查風(fēng)速儀是否正常工作，探頭線纜有無(wú)破損，顯示屏讀數(shù)穩(wěn)定后進(jìn)行“調(diào)零”操作（將探頭置于無(wú)氣流環(huán)境中，按“調(diào)零”鍵至讀數(shù)為0.00m/s）。采樣點(diǎn)標(biāo)記：送風(fēng)氣流速度采樣：在安全柜工作臺(tái)面上方100mm處（即送風(fēng)高效過(guò)濾器出風(fēng)口平面），沿安全柜寬度方向均勻劃分采樣線。對(duì)于寬度≤1000mm的安全柜，劃分5條采樣線（間距200mm）；寬度>1000mm時(shí)，每增加200mm增設(shè)1條采樣線，每條采樣線上均勻分布5個(gè)采樣點(diǎn)（間距≤200mm），確保采樣點(diǎn)覆蓋過(guò)濾器整個(gè)出風(fēng)面。排風(fēng)氣流速度采樣：前窗操作口進(jìn)風(fēng)速度：在安全柜前窗操作口（即“前格柵”）平面，沿高度方向劃分3條采樣線（上、中、下各1條，間距約為操作口高度的1/4），每條采樣線上均勻分布5個(gè)采樣點(diǎn)（橫向間距≤150mm），采樣點(diǎn)應(yīng)位于操作口內(nèi)側(cè)5mm處，避免接觸外界氣流。排風(fēng)高效過(guò)濾器入口速度：對(duì)于B2型生物安全柜，需在排風(fēng)高效過(guò)濾器入口處設(shè)置采樣點(diǎn)，方法同送風(fēng)氣流采樣點(diǎn)布置，采樣平面距過(guò)濾器100mm。（二）送風(fēng)氣流速度校準(zhǔn)將風(fēng)速儀探頭固定于支架上，保持探頭軸線垂直于送風(fēng)氣流方向（即垂直于工作臺(tái)面）。從安全柜左側(cè)第一條采樣線開(kāi)始，依次測(cè)量各采樣點(diǎn)風(fēng)速，每個(gè)點(diǎn)測(cè)量3次，每次讀數(shù)穩(wěn)定后記錄（讀數(shù)間隔≥5秒），取算術(shù)平均值作為該點(diǎn)風(fēng)速值。移動(dòng)風(fēng)速儀時(shí)，保持探頭移動(dòng)速度≤0.1m/s，避免因移動(dòng)過(guò)快擾動(dòng)氣流。全部采樣點(diǎn)測(cè)量完成后，計(jì)算送風(fēng)氣流平均速度（所有采樣點(diǎn)風(fēng)速的算術(shù)平均值），同時(shí)記錄最大風(fēng)速、最小風(fēng)速及風(fēng)速不均勻度（計(jì)算公式：不均勻度=（最大風(fēng)速-最小風(fēng)速）/平均風(fēng)速×100%）。（三）前窗操作口進(jìn)風(fēng)速度校準(zhǔn)調(diào)整玻璃觀察窗高度至安全柜規(guī)定的“操作位置”（通常為200mm，具體以設(shè)備說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)），使用卷尺測(cè)量并固定高度。將風(fēng)速儀探頭水平放置于前窗操作口內(nèi)側(cè)5mm處，探頭軸線平行于操作口平面（即與進(jìn)風(fēng)方向一致）。按“從左到右、從上到下”順序測(cè)量各采樣點(diǎn)風(fēng)速，每個(gè)點(diǎn)測(cè)量3次，取平均值記錄。計(jì)算前窗進(jìn)風(fēng)平均速度及不均勻度，同時(shí)檢查是否存在局部風(fēng)速為零或反向氣流的異常點(diǎn)。（四）其他項(xiàng)目校準(zhǔn)（按需進(jìn)行）下降氣流均勻性：在工作臺(tái)面上方不同高度（如50mm、150mm、250mm）重復(fù)送風(fēng)氣流速度測(cè)量，評(píng)估垂直氣流在不同高度的穩(wěn)定性。氣流方向：使用煙霧發(fā)生器（如丁烷煙霧筆）在前窗操作口及工作臺(tái)面邊緣釋放煙霧，觀察煙霧流動(dòng)方向是否符合設(shè)計(jì)要求（如前窗煙霧應(yīng)垂直向下進(jìn)入安全柜，無(wú)外溢；工作臺(tái)面邊緣煙霧應(yīng)向內(nèi)側(cè)流動(dòng)）。五、數(shù)據(jù)記錄與處理（一）原始數(shù)據(jù)記錄校準(zhǔn)人員需在《生物安全柜氣流速度校準(zhǔn)記錄表》中逐項(xiàng)填寫(xiě)以下內(nèi)容：基本信息：校準(zhǔn)日期、實(shí)驗(yàn)室名稱(chēng)、安全柜型號(hào)/序列號(hào)、生產(chǎn)廠家、安裝日期、上次校準(zhǔn)日期；環(huán)境參數(shù)：校準(zhǔn)期間的溫度、相對(duì)濕度、大氣壓力，每30分鐘記錄一次；儀器信息：風(fēng)速儀型號(hào)、編號(hào)、檢定證書(shū)編號(hào)及有效期；采樣點(diǎn)數(shù)據(jù)：按采樣點(diǎn)編號(hào)依次記錄送風(fēng)/排風(fēng)各點(diǎn)風(fēng)速的3次測(cè)量值、平均值，同時(shí)繪制采樣點(diǎn)分布圖（標(biāo)明坐標(biāo)位置）。（二）數(shù)據(jù)計(jì)算平均風(fēng)速：[\bar{v}=\frac{\sum_{i=1}^{n}v_i}{n}]（其中(v_i)為單個(gè)采樣點(diǎn)風(fēng)速平均值，(n)為采樣點(diǎn)總數(shù)）風(fēng)速不均勻度：[U=\frac{v_{\text{max}}-v_{\text{min}}}{\bar{v}}\times100%]前窗操作口進(jìn)風(fēng)速度修正：若實(shí)際測(cè)量時(shí)前窗高度與標(biāo)準(zhǔn)高度（200mm）不一致，需按以下公式修正：[v_{\text{修正}}=v_{\text{實(shí)測(cè)}}\times\frac{H_{\text{標(biāo)準(zhǔn)}}}{H_{\text{實(shí)測(cè)}}}]（(H_{\text{標(biāo)準(zhǔn)}}=200mm)，(H_{\text{實(shí)測(cè)}})為實(shí)際前窗高度）（三）結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)送風(fēng)氣流速度：A1/A2型安全柜：平均風(fēng)速應(yīng)在0.36m/s~0.54m/s范圍內(nèi)；B1型安全柜：送風(fēng)平均風(fēng)速≥0.3m/s；B2型安全柜：送風(fēng)平均風(fēng)速≥0.4m/s。前窗操作口進(jìn)風(fēng)速度：A1型：平均風(fēng)速0.38m/s~0.51m/s；A2型：平均風(fēng)速0.5m/s~0.65m/s；B1型：平均風(fēng)速0.7m/s~0.8m/s；B2型：平均風(fēng)速0.7m/s~1.0m/s。風(fēng)速不均勻度：送風(fēng)氣流≤20%，前窗進(jìn)風(fēng)氣流≤15%。氣流方向：煙霧應(yīng)無(wú)外溢、無(wú)渦流，符合安全柜氣流模式設(shè)計(jì)要求。若以上任一指標(biāo)不達(dá)標(biāo)，判定為“校準(zhǔn)不合格”，需暫停使用安全柜并進(jìn)行維修調(diào)試，重新校準(zhǔn)合格后方可投入使用。六、校準(zhǔn)結(jié)果報(bào)告與文件管理（一）校準(zhǔn)報(bào)告內(nèi)容校準(zhǔn)完成后應(yīng)出具《生物安全柜氣流速度校準(zhǔn)報(bào)告》，至少包含以下信息：報(bào)告編號(hào)、校準(zhǔn)日期、委托單位、校準(zhǔn)地點(diǎn)；安全柜基本信息（型號(hào)、序列號(hào)、安裝位置）及環(huán)境參數(shù)記錄；校準(zhǔn)儀器信息（風(fēng)速儀型號(hào)、檢定證書(shū)編號(hào)）；采樣點(diǎn)分布圖、原始數(shù)據(jù)記錄表、計(jì)算結(jié)果；校準(zhǔn)結(jié)論（合格/不合格，若不合格需注明具體超差項(xiàng)目）；校準(zhǔn)員、復(fù)核員簽字，校準(zhǔn)單位蓋章（若為第三方校準(zhǔn)）。（二）文件存檔校準(zhǔn)報(bào)告應(yīng)一式兩份，實(shí)驗(yàn)室存檔一份，生物安全柜使用部門(mén)留存一份，保存期限不少于5年。原始校準(zhǔn)記錄表、風(fēng)速儀檢定證書(shū)復(fù)印件、設(shè)備維修記錄等應(yīng)作為附件與校準(zhǔn)報(bào)告一并存檔。建立生物安全柜校準(zhǔn)臺(tái)賬，記錄歷次校準(zhǔn)日期、結(jié)果及不合格處理情況，便于追溯管理。七、注意事項(xiàng)與質(zhì)量控制（一）人員要求校準(zhǔn)操作人員需經(jīng)專(zhuān)門(mén)培訓(xùn)，熟悉生物安全柜結(jié)構(gòu)原理及風(fēng)速儀操作方法，持有實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)合格證書(shū)，操作時(shí)應(yīng)佩戴無(wú)塵手套、口罩，避免污染安全柜內(nèi)部環(huán)境。（二）安全防護(hù)校準(zhǔn)過(guò)程中若需打開(kāi)安全柜前窗，應(yīng)確保柜內(nèi)無(wú)生物危害物質(zhì)，必要時(shí)提前進(jìn)行消毒處理。風(fēng)速儀探頭清潔時(shí)需使用異丙醇擦拭，禁止用水或有機(jī)溶劑直接沖洗。若校準(zhǔn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)安全柜存在氣流外溢風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)立即停止操作，關(guān)閉安全柜并報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。（三）質(zhì)量控制措施平行樣測(cè)量：對(duì)送風(fēng)氣流和前窗進(jìn)風(fēng)速度各選取3個(gè)代表性采樣點(diǎn)進(jìn)行平行測(cè)量，相對(duì)偏差應(yīng)≤5%，否則需重新校準(zhǔn)。校準(zhǔn)結(jié)果驗(yàn)證：每年至少進(jìn)行一次校準(zhǔn)結(jié)果比對(duì)（如實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部校準(zhǔn)與第三方校準(zhǔn)結(jié)果比對(duì)），偏差應(yīng)在±0.05m/s范圍內(nèi)。異常情況處理：若校準(zhǔn)數(shù)據(jù)出現(xiàn)顯著波動(dòng)（如某一區(qū)域風(fēng)速突然下降），需檢查高效過(guò)濾器是否堵塞或風(fēng)機(jī)是否故障，排除故障后重新校準(zhǔn)。（四）校準(zhǔn)周期調(diào)整若生物安全柜頻繁出現(xiàn)風(fēng)速不合格情況，或使用環(huán)境（如空調(diào)系統(tǒng)改造、實(shí)驗(yàn)室布局調(diào)整）發(fā)生重大變化，應(yīng)縮短校準(zhǔn)周期至每3個(gè)月一次。設(shè)備停用超過(guò)3個(gè)月后重新啟用時(shí)，需進(jìn)行一次全面校準(zhǔn)。八、附錄附件1：生物安全柜氣流速度校準(zhǔn)記錄表（格式）采樣點(diǎn)編號(hào)送風(fēng)風(fēng)速（m/s）前窗進(jìn)風(fēng)風(fēng)速（m/s）備注1-1（3次測(cè)量值及平均值）（3次測(cè)量值及平均值）左上角采樣點(diǎn)1-2.....................環(huán)境參數(shù)溫度：℃，濕度：%RH，氣壓：____kPa測(cè)量時(shí)間：____附件2：常見(jiàn)故障處理指南故障現(xiàn)象可能原因處理方