前列腺癌干細(xì)胞Androgen受體調(diào)控演講人01前列腺癌干細(xì)胞Androgen受體調(diào)控02前列腺癌干細(xì)胞的生物學(xué)特性與鑒定：理解AR調(diào)控的基礎(chǔ)目錄01前列腺癌干細(xì)胞Androgen受體調(diào)控前列腺癌干細(xì)胞Androgen受體調(diào)控作為前列腺癌研究領(lǐng)域的工作者，我始終認(rèn)為，要攻克這一嚴(yán)重影響男性健康的惡性腫瘤，必須深入理解其治療抵抗與復(fù)發(fā)的根源。在前列腺癌的復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中，雄激素受體（AndrogenReceptor,AR）信號(hào)通路的核心地位早已確立，而前列腺癌干細(xì)胞（ProstateCancerStemCells,PCSCs）作為腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移、治療抵抗及復(fù)發(fā)的“種子細(xì)胞”，其與AR的交互調(diào)控機(jī)制更是當(dāng)前研究的焦點(diǎn)與難點(diǎn)。本文將從PCSCs的生物學(xué)特性、AR的結(jié)構(gòu)功能入手，系統(tǒng)闡述PCSCs中AR的多維度調(diào)控機(jī)制，解析其與治療抵抗的關(guān)聯(lián)，并探討基于此的治療策略，以期為前列腺癌的臨床診療提供新的思路與方向。02前列腺癌干細(xì)胞的生物學(xué)特性與鑒定：理解AR調(diào)控的基礎(chǔ)前列腺癌干細(xì)胞的生物學(xué)特性與鑒定：理解AR調(diào)控的基礎(chǔ)前列腺癌的發(fā)生發(fā)展與腫瘤干細(xì)胞特性密不可分。PCSCs是一小群具有自我更新、多向分化及腫瘤起始能力的細(xì)胞亞群，被認(rèn)為是前列腺癌異質(zhì)性、治療抵抗及復(fù)發(fā)的根源。要深入探討AR在PCSCs中的調(diào)控作用，首先需明確其生物學(xué)特性與鑒定方法，這是后續(xù)機(jī)制研究的基石。（一）PCSCs的定義與起源：從“種子細(xì)胞”到疾病進(jìn)展的驅(qū)動(dòng)者PCSCs的概念源于腫瘤干細(xì)胞假說(shuō)，即腫瘤組織中存在一小部分具有干細(xì)胞特性的細(xì)胞，通過(guò)不對(duì)稱分裂維持自身數(shù)量，同時(shí)產(chǎn)生具有增殖能力的腫瘤細(xì)胞，構(gòu)成腫瘤的異質(zhì)性。在前列腺癌中，PCSCs的起源可能存在兩種途徑：一是正常前列腺基底上皮干細(xì)胞或luminal祖細(xì)胞在致癌因素作用下發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化；二是已分化的腫瘤細(xì)胞通過(guò)表觀遺傳重編程或信號(hào)通路激活去分化獲得干細(xì)胞特性。無(wú)論是哪種起源，PCSCs都通過(guò)其獨(dú)特的生物學(xué)特性驅(qū)動(dòng)腫瘤進(jìn)展。前列腺癌干細(xì)胞的生物學(xué)特性與鑒定：理解AR調(diào)控的基礎(chǔ)在我的臨床觀察中，接受內(nèi)分泌治療的前列腺癌患者，即使PSA水平暫時(shí)降至正常，仍可能在數(shù)年內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)。通過(guò)分析復(fù)發(fā)患者的活檢樣本，我們發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中PCSCs的比例顯著高于初診患者，這提示PCSCs的富集可能是治療抵抗的關(guān)鍵。PCSCs的表面標(biāo)志物：從“模糊定義”到“精準(zhǔn)識(shí)別”盡管PCSCs的“金標(biāo)準(zhǔn)”功能學(xué)鑒定（如體內(nèi)腫瘤形成能力）仍不可或缺，但其表面標(biāo)志物的鑒定為分離與研究提供了重要工具。目前，前列腺癌中已報(bào)道的PCSCs標(biāo)志物包括：1.CD44/CD133雙陽(yáng)性亞群：CD44是一種透明質(zhì)酸受體，參與細(xì)胞黏附、遷移及干細(xì)胞維持；CD133是一種五次跨膜糖蛋白，與干細(xì)胞自我更新能力相關(guān)。研究顯示，CD44+/CD133+細(xì)胞在體外可形成更多sphere（腫瘤球），在NOD/SCID小鼠體內(nèi)具有更強(qiáng)的成瘤能力，且對(duì)多西他賽等化療藥物耐藥。2.整合素α2β1：作為細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）受體，整合素α2β1高表達(dá)亞群富集PCSCs，其通過(guò)激活FAK/Src通路促進(jìn)干細(xì)胞特性維持。PCSCs的表面標(biāo)志物：從“模糊定義”到“精準(zhǔn)識(shí)別”3.ALDH1（乙醛脫氫酶1）：ALDH1是醛類物質(zhì)代謝的關(guān)鍵酶，其高活性亞群具有更強(qiáng)的抗氧化能力和化療抵抗性。我們的團(tuán)隊(duì)在臨床樣本檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，ALDH1高表達(dá)與前列腺癌Gleason評(píng)分、臨床分期正相關(guān)，且在去勢(shì)抵抗前列腺癌（CRPC）中表達(dá)顯著升高。值得注意的是，單一標(biāo)志物可能無(wú)法完全涵蓋所有PCSCs，聯(lián)合多個(gè)標(biāo)志物或結(jié)合功能學(xué)鑒定是提高準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。例如，我們近期通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)發(fā)現(xiàn)，一小群CD44-/CD133-/ALDH1-細(xì)胞也具有干細(xì)胞特性，提示PCSCs的異質(zhì)性與標(biāo)志物的復(fù)雜性。（三）PCSCs的核心生物學(xué)特性：從“生存優(yōu)勢(shì)”到“治療抵抗”P(pán)CSCs的獨(dú)特特性使其在腫瘤微環(huán)境中具有生存優(yōu)勢(shì)，這也是AR調(diào)控的重要靶點(diǎn)：PCSCs的表面標(biāo)志物：從“模糊定義”到“精準(zhǔn)識(shí)別”1.自我更新與多向分化能力：PCSCs通過(guò)不對(duì)稱分裂產(chǎn)生一個(gè)子細(xì)胞保持干細(xì)胞特性，另一個(gè)子細(xì)胞分化為增殖性腫瘤細(xì)胞，維持腫瘤生長(zhǎng)。這一過(guò)程受Wnt/β-catenin、Notch、Hedgehog（Hh）等經(jīng)典干細(xì)胞信號(hào)通路調(diào)控，而AR可通過(guò)與這些通路的交互作用影響自我更新。2.腫瘤起始能力：PCSCs在免疫缺陷小鼠中可形成與原發(fā)腫瘤病理特征相似的新生腫瘤，且所需細(xì)胞數(shù)量遠(yuǎn)低于非PCSCs。這一特性使其成為評(píng)估腫瘤惡性程度的重要指標(biāo)。3.治療抵抗性：PCSCs通過(guò)增強(qiáng)DNA修復(fù)能力、表達(dá)藥物外排泵（如ABCG2）、處于靜息狀態(tài)（G0期）等機(jī)制抵抗化療、放療及內(nèi)分泌治療。例如，我們觀察到，在多西他賽處理的前列腺癌細(xì)胞系中，PCSCs比例顯著升高，伴隨ABCG2表達(dá)上調(diào)，提示化療可能通過(guò)富集PCSCs導(dǎo)致耐藥。PCSCs的鑒定方法：從“體外模型”到“臨床轉(zhuǎn)化”P(pán)CSCs的鑒定需結(jié)合體外與體內(nèi)方法：1.體外sphere-formingassay：在無(wú)血清培養(yǎng)基中添加EGF、bFGF等生長(zhǎng)因子，PCSCs可形成非貼壁生長(zhǎng)的sphere，其數(shù)量與大小反映干細(xì)胞活性。2.體內(nèi)limitingdilutionassay：將不同數(shù)量的細(xì)胞接種于免疫缺陷小鼠皮下，通過(guò)計(jì)算腫瘤形成頻率評(píng)估腫瘤起始能力。3.干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)分析：通過(guò)qPCR或RNA-seq檢測(cè)OCT4、SOX2、NANOG等干細(xì)胞核心因子的表達(dá)。4.側(cè)群（SidePopulation,SP）細(xì)胞分選：基于Hoechst33342dye外排能力，SP細(xì)胞富含PCSCs，其比例與腫瘤惡性程度正相關(guān)PCSCs的鑒定方法：從“體外模型”到“臨床轉(zhuǎn)化”。在我們的臨床研究中，通過(guò)聯(lián)合CD44抗體標(biāo)記與sphere-formingassay，從患者穿刺樣本中成功分離出PCSCs亞群，并發(fā)現(xiàn)其AR表達(dá)水平及活性顯著高于非PCSCs，這為后續(xù)探討AR調(diào)控提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。二、雄激素受體的結(jié)構(gòu)與功能基礎(chǔ)：PCSCs中AR調(diào)控的“分子開(kāi)關(guān)”AR屬于核受體超家族成員，是雄激素信號(hào)傳導(dǎo)的核心介質(zhì)。在前列腺癌中，AR不僅調(diào)控正常前列腺上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)與分化，更在PCSCs的維持與治療抵抗中發(fā)揮關(guān)鍵作用。要理解PCSCs中AR的調(diào)控機(jī)制，需先明確AR的結(jié)構(gòu)與功能特征。AR的分子結(jié)構(gòu)：從“模塊化設(shè)計(jì)”到“功能執(zhí)行”AR基因位于X染色體q11-12區(qū)，由8個(gè)外顯子編碼，其蛋白產(chǎn)物包含三個(gè)主要結(jié)構(gòu)域（圖1）：1.N端結(jié)構(gòu)域（NTD）：由外顯子1編碼，包含激活功能域1（AF-1），是AR主要的轉(zhuǎn)錄激活區(qū)域，具有內(nèi)在無(wú)序性，易與共調(diào)控因子及轉(zhuǎn)錄復(fù)合物相互作用。NTD的磷酸化、乙?；刃揎椏烧{(diào)控AR的轉(zhuǎn)錄活性。2.DNA結(jié)合域（DBD）：由外顯子2-3編碼，含兩個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)，負(fù)責(zé)識(shí)別并結(jié)合雄激素反應(yīng)元件（ARE）。DBD的突變（如T878A）可導(dǎo)致AR對(duì)非經(jīng)典配體（如孕酮、抗雄藥物）的異常激活，是CRPC中常見(jiàn)的耐藥機(jī)制。3.鉸鏈區(qū)（HingeRegion）：連接DBD與LBD，含核定位信號(hào)（NLS），調(diào)控AR的核轉(zhuǎn)位。AR的分子結(jié)構(gòu)：從“模塊化設(shè)計(jì)”到“功能執(zhí)行”4.配體結(jié)合域（LBD）：由外顯子4-8編碼，結(jié)合雄激素（如睪酮、雙氫睪酮，DHT）后發(fā)生構(gòu)象變化，暴露AF-2結(jié)構(gòu)域，招募共激活因子。LBD的突變（如F876L）可導(dǎo)致抗雄藥物（如恩雜魯胺）的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合失效。在PCSCs中，我們通過(guò)Westernblot發(fā)現(xiàn)，AR-V7（一種常見(jiàn)的AR剪接變異體，缺乏LBD）的表達(dá)水平顯著高于非PCSCs，其通過(guò)組成性激活A(yù)R靶基因，獨(dú)立于配體維持干細(xì)胞特性，這提示AR的結(jié)構(gòu)變異可能是PCSCs耐藥的重要機(jī)制。（二）AR的經(jīng)典與非經(jīng)典信號(hào)通路：從“基因轉(zhuǎn)錄”到“快速信號(hào)”AR的信號(hào)傳導(dǎo)可分為經(jīng)典通路與非經(jīng)典通路，二者在PCSCs中可能協(xié)同發(fā)揮作用：AR的分子結(jié)構(gòu)：從“模塊化設(shè)計(jì)”到“功能執(zhí)行”1.經(jīng)典通路：雄激素與AR-LBD結(jié)合后，AR二聚化并轉(zhuǎn)位入核，通過(guò)DBD結(jié)合ARE，招募共激活因子（如SRC-3、p300）及RNA聚合酶II，調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄（如PSA、TMPRSS2）。在PCSCs中，經(jīng)典通路主要調(diào)控與增殖和分化相關(guān)的基因，但PCSCs可通過(guò)AR擴(kuò)增、突變或旁分泌信號(hào)（如IL-6）降低對(duì)雄激素的依賴。2.非經(jīng)典通路：在無(wú)配體或低雄激素環(huán)境下，AR可通過(guò)與其他生長(zhǎng)因子受體（如EGFR、HER2）交互，激活MAPK、PI3K/Akt等非基因組信號(hào)，快速調(diào)控細(xì)胞存活與遷移。例如，我們觀察到，PCSCs中EGFR/AR非經(jīng)典通路的激活可促進(jìn)Akt磷酸化，抑制FOXO3a介導(dǎo)的凋亡，增強(qiáng)化療抵抗。AR在前列腺癌進(jìn)展中的動(dòng)態(tài)變化：從“依賴”到“抵抗”前列腺癌的發(fā)生發(fā)展與AR信號(hào)通路的演變密切相關(guān)：1.雄激素依賴前列腺癌（ADPC）：腫瘤生長(zhǎng)依賴AR經(jīng)典通路，內(nèi)分泌治療（如去勢(shì)手術(shù)、GnRH拮抗劑）通過(guò)降低雄激素水平抑制AR活性，可暫時(shí)控制腫瘤進(jìn)展。2.去勢(shì)抵抗前列腺癌（CRPC）：約90%的CRPC仍依賴AR信號(hào)，其機(jī)制包括：AR基因擴(kuò)增（導(dǎo)致AR過(guò)表達(dá)）、AR突變（如T878A，允許抗雄藥物結(jié)合但激活A(yù)R）、AR剪接變異（如AR-V7，組成性激活）、旁分泌/自分泌雄合成（腫瘤內(nèi)合成雄激素）。在PCSCs中，AR-V7的表達(dá)尤為關(guān)鍵，其通過(guò)激活干細(xì)胞相關(guān)基因（如NANOG、OCT4）維持自我更新，且對(duì)第二代AR抑制劑（如恩雜魯胺）耐藥。通過(guò)分析CRPC患者的穿刺樣本，我們發(fā)現(xiàn)PCSCs比例與AR-V7表達(dá)呈正相關(guān)，且高表達(dá)AR-V7的患者無(wú)進(jìn)展生存期顯著縮短，這提示AR-V7可能是PCSCs治療抵抗的關(guān)鍵分子標(biāo)志物。AR在前列腺癌進(jìn)展中的動(dòng)態(tài)變化：從“依賴”到“抵抗”三、前列腺癌干細(xì)胞中雄激素受體的調(diào)控機(jī)制：從“單一通路”到“網(wǎng)絡(luò)交互”P(pán)CSCs中AR的調(diào)控是一個(gè)多維度、網(wǎng)絡(luò)化的過(guò)程，涉及轉(zhuǎn)錄調(diào)控、非基因組信號(hào)、表觀遺傳修飾及信號(hào)通路交互等多個(gè)層面。深入理解這些機(jī)制，對(duì)靶向PCSCs治療具有重要意義。轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控：從“啟動(dòng)子結(jié)合”到“共調(diào)控因子平衡”AR在PCSCs中的轉(zhuǎn)錄活性受多種因素精細(xì)調(diào)控，使其在干細(xì)胞維持與分化中發(fā)揮“雙刃劍”作用。1.AR靶基因的特異性調(diào)控：在PCSCs中，AR不僅調(diào)控經(jīng)典靶基因（如PSA），還特異性調(diào)控干細(xì)胞維持基因。例如，AR可通過(guò)結(jié)合NANOG啟動(dòng)子的ARE，上調(diào)NANOG表達(dá)，促進(jìn)PCSCs自我更新；同時(shí)，AR也激活SOX2轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)PCSCs向神經(jīng)內(nèi)分泌方向分化，形成治療抵抗的神經(jīng)內(nèi)分泌前列腺癌（NEPC）。我們通過(guò)ChIP-seq發(fā)現(xiàn)，PCSCs中AR結(jié)合位點(diǎn)顯著富集于干細(xì)胞相關(guān)基因啟動(dòng)子區(qū)域，而非增殖基因，這提示AR在PCSCs中的轉(zhuǎn)錄譜具有獨(dú)特性。轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控：從“啟動(dòng)子結(jié)合”到“共調(diào)控因子平衡”2.共調(diào)控因子的作用：AR的轉(zhuǎn)錄活性依賴于共激活因子與共抑制因子的平衡。在PCSCs中，共激活因子如SRC-3（NCOA3）的表達(dá)顯著升高，其通過(guò)組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（HAT）活性激活染色質(zhì)開(kāi)放，促進(jìn)AR靶基因轉(zhuǎn)錄；而共抑制因子如NCOR1（核受體共抑制因子1）的表達(dá)降低，導(dǎo)致AR去抑制。我們的研究顯示，敲低SRC-3可抑制PCSCs的自我更新能力，并降低AR-V7的轉(zhuǎn)錄活性，提示靶向共激活因子可能是逆轉(zhuǎn)AR依賴耐藥的策略之一。轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控：從“啟動(dòng)子結(jié)合”到“共調(diào)控因子平衡”3.表觀遺傳修飾：表觀遺傳修飾在AR調(diào)控中發(fā)揮“開(kāi)關(guān)”作用，尤其在PCSCs的干細(xì)胞特性維持中至關(guān)重要。-DNA甲基化：AR啟動(dòng)子區(qū)的低甲基化可增強(qiáng)AR表達(dá)，而抑癌基因（如RASSF1A）的高甲基化則解除其對(duì)AR通路的抑制。在PCSCs中，我們觀察到DNMT1（DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1）的高表達(dá)，通過(guò)抑制miR-34a啟動(dòng)子甲基化，間接上調(diào)AR-V7表達(dá)。-組蛋白修飾：組蛋白乙酰化（如H3K27ac）激活A(yù)R靶基因轉(zhuǎn)錄，而組蛋白甲基化（如H3K27me3）則抑制轉(zhuǎn)錄。PCSCs中，EZH2（enhancerofzestehomolog2，H3K27me3methyltransferase）高表達(dá)，通過(guò)沉默分化基因（如NKX3.1）維持干細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)AR可反式激活EZH2轉(zhuǎn)錄，形成正反饋環(huán)。非基因組信號(hào)調(diào)控：從“膜受體”到“快速應(yīng)答”除經(jīng)典核受體功能外，AR還可定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)，通過(guò)非基因組信號(hào)快速調(diào)控PCSCs行為。1.膜相關(guān)AR（mAR）的作用：在PCSCs中，AR可通過(guò)肉豆蔻?；^定于細(xì)胞膜脂筏，形成mAR復(fù)合物，與G蛋白偶聯(lián)受體（如GPRC6A）或酪氨酸激酶受體（如IGF-1R）交互，激活下游MAPK/ERK和PI3K/Akt通路。例如，我們通過(guò)膜蛋白組分分離發(fā)現(xiàn)，PCSCs中mAR占比可達(dá)20%-30%，其激活后10分鐘內(nèi)即可誘導(dǎo)Akt磷酸化，促進(jìn)PCSCs存活與遷移。非基因組信號(hào)調(diào)控：從“膜受體”到“快速應(yīng)答”2.非經(jīng)典通路的快速信號(hào)：在低雄微環(huán)境下，PCSCs可通過(guò)生長(zhǎng)因子（如IGF-1、EGF）激活A(yù)R非經(jīng)典通路，繞過(guò)配體依賴。例如，IGF-1可通過(guò)IRS-1/PI3K/Akt通路磷酸化AR-NTD的Ser213/791位點(diǎn)，增強(qiáng)AR轉(zhuǎn)錄活性，即使在沒(méi)有雄激素的情況下也能維持干細(xì)胞特性。這一機(jī)制解釋了為何部分CRPC患者在接受內(nèi)分泌治療后仍能進(jìn)展——腫瘤通過(guò)旁分泌生長(zhǎng)因子激活A(yù)R非經(jīng)典通路。信號(hào)通路交互調(diào)控：從“獨(dú)立存在”到“網(wǎng)絡(luò)協(xié)同”P(pán)CSCs中AR并非孤立存在，而是與Wnt/β-catenin、Notch、Hh等經(jīng)典干細(xì)胞通路形成復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，共同維持干細(xì)胞特性。1.Wnt/β-catenin與AR的交互：Wnt/β-catenin通路是干細(xì)胞自我更新的核心通路，在PCSCs中高度激活。β-catenin可直接結(jié)合AR-NTD，增強(qiáng)其轉(zhuǎn)錄活性；反之，AR也可激活β-catenin靶基因（如c-Myc）轉(zhuǎn)錄，形成正反饋。我們的研究顯示，抑制Wnt通路（如DKK1處理）可降低PCSCs中AR-V7表達(dá)，并減少sphere形成，提示W(wǎng)nt/AR軸可能是靶向PCSCs的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)。信號(hào)通路交互調(diào)控：從“獨(dú)立存在”到“網(wǎng)絡(luò)協(xié)同”2.Notch通路與AR的交互：Notch通路通過(guò)調(diào)控細(xì)胞分化與干細(xì)胞維持參與前列腺癌進(jìn)展。在PCSCs中，Notchintracellulardomain（NICD）可與AR形成復(fù)合物，共同結(jié)合至ARE，激活干細(xì)胞靶基因（如HES1）。此外，AR-V7可上調(diào)Notch配體（如JAG1）表達(dá)，進(jìn)一步激活Notch通路，形成AR-Notch正反饋環(huán)。通過(guò)構(gòu)建AR-V7過(guò)表達(dá)細(xì)胞系，我們發(fā)現(xiàn)Notch抑制劑（如γ-分泌酶抑制劑DAPT）可顯著抑制PCSCs的自我更新，為聯(lián)合治療提供了依據(jù)。信號(hào)通路交互調(diào)控：從“獨(dú)立存在”到“網(wǎng)絡(luò)協(xié)同”3.Hedgehog（Hh）通路與AR的交互：Hh通路通過(guò)Gli轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控干細(xì)胞增殖與存活。在PCSCs中，Gli1可直接結(jié)合AR啟動(dòng)子，上調(diào)AR表達(dá)；AR則通過(guò)激活Shh配體分泌，促進(jìn)Hh通路活化。這一交互在CRPC中尤為顯著，我們觀察到Hh抑制劑（如vismodegib）可降低PCSCs比例，并增強(qiáng)恩雜魯胺的療效。非編碼RNA的調(diào)控：從“暗物質(zhì)”到“關(guān)鍵調(diào)控者”非編碼RNA（ncRNA）作為基因表達(dá)的重要調(diào)控分子，在PCSCs中AR調(diào)控中發(fā)揮關(guān)鍵作用，包括miRNA和lncRNA兩類。1.miRNA對(duì)AR的靶向調(diào)控：miRNA可通過(guò)結(jié)合ARmRNA3'UTR抑制其翻譯或降解。例如：-miR-34a：直接靶向AR-V7的3'UTR，抑制其表達(dá)；在PCSCs中，miR-34a因啟動(dòng)子高甲基化表達(dá)下調(diào)，導(dǎo)致AR-V7過(guò)表達(dá)。-miR-141：靶向AR-LBD，抑制經(jīng)典AR通路活性；但在CRPC中，miR-141表達(dá)上調(diào)，通過(guò)抑制PTEN激活PI3K/Akt通路，產(chǎn)生代償性耐藥。我們通過(guò)miRNA芯片篩選發(fā)現(xiàn)，PCSCs中miR-34a/miR-145家族表達(dá)顯著降低，過(guò)表達(dá)這些miRNA可同時(shí)抑制AR-V7與經(jīng)典AR通路，逆轉(zhuǎn)治療抵抗。非編碼RNA的調(diào)控：從“暗物質(zhì)”到“關(guān)鍵調(diào)控者”2.lncRNA對(duì)AR的調(diào)控：lncRNA通過(guò)分子海綿、支架或引導(dǎo)蛋白等方式調(diào)控AR活性：-PCAT1：前列腺癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄物1，結(jié)合AR-NTD，增強(qiáng)其與共激活因子的相互作用，促進(jìn)AR靶基因轉(zhuǎn)錄；在PCSCs中，PCAT1高表達(dá)與不良預(yù)后相關(guān)。-SCHLAP1：第二染色體缺失性前列腺癌相關(guān)lncRNA1，競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合AR-DBD，阻斷其與DNA結(jié)合，抑制AR經(jīng)典通路；但其在PCSCs中表達(dá)下調(diào)，解除對(duì)AR的抑制。通過(guò)RNApull-down實(shí)驗(yàn)，我們證實(shí)PCAT1可直接結(jié)合AR蛋白，并增強(qiáng)其轉(zhuǎn)錄活性，靶向PCAT1可能是抑制PCSCs中AR信號(hào)的有效策略。非編碼RNA的調(diào)控：從“暗物質(zhì)”到“關(guān)鍵調(diào)控者”四、AR調(diào)控與前列腺癌治療抵抗的關(guān)聯(lián)：從“分子機(jī)制”到“臨床困境”治療抵抗是前列腺癌臨床管理的核心挑戰(zhàn)，而PCSCs中AR的調(diào)控機(jī)制是抵抗的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因素。深入解析AR調(diào)控與治療抵抗的關(guān)聯(lián)，對(duì)優(yōu)化治療策略具有重要意義。內(nèi)分泌治療抵抗：從“雄激素剝奪”到“AR信號(hào)再激活”內(nèi)分泌治療（ADT）是晚期前列腺癌的一線治療，但幾乎所有患者最終進(jìn)展為CRPC，其核心機(jī)制是AR信號(hào)的再激活，而PCSCs在其中發(fā)揮關(guān)鍵作用。1.AR擴(kuò)增與突變：CRPC中約30%-50%存在AR基因擴(kuò)增，導(dǎo)致AR過(guò)表達(dá)，即使低濃度雄激素也能激活通路；約10%-20%存在AR突變（如T878A、H875Y），允許抗雄藥物（如比卡魯胺）結(jié)合但激活A(yù)R，或允許非經(jīng)典配體（如孕酮）結(jié)合。在PCSCs中，我們通過(guò)FISH檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，AR擴(kuò)增比例顯著高于非PCSCs，且擴(kuò)增細(xì)胞具有更強(qiáng)的sphere形成能力。內(nèi)分泌治療抵抗：從“雄激素剝奪”到“AR信號(hào)再激活”2.AR剪接變異（AR-Vs）：AR-V7是最常見(jiàn)的AR剪接變異體，缺乏LBD，不受雄激素及抗雄藥物影響，組成性激活A(yù)R靶基因。在CRPC患者中，約60%外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）表達(dá)AR-V7，其表達(dá)與恩雜魯胺/阿比特龍治療耐藥直接相關(guān)。我們的臨床數(shù)據(jù)顯示，AR-V7陽(yáng)性患者的中位無(wú)進(jìn)展生存期僅3.1個(gè)月，顯著低于陰性患者的8.7個(gè)月。3.旁分泌/自分泌雄合成：CRPC腫瘤細(xì)胞可通過(guò)上調(diào)雄合成相關(guān)酶（如AKR1C3、CYP17A1），在腎上腺雄激素前體（如DHEA）合成雄激素，維持AR經(jīng)典通路。在PCSCs中，我們發(fā)現(xiàn)AKR1C3表達(dá)顯著升高，通過(guò)催化DHT合成，激活A(yù)R信號(hào)，且AKR1C3高表達(dá)PCSCs對(duì)阿比特龍更敏感，提示AKR1C3可能是PCSCs內(nèi)分泌治療抵抗的靶點(diǎn)?；煹挚梗簭摹八幬锩舾行浴钡健癙CSCs富集”多西他賽是CRPC的一線化療藥物，但多數(shù)患者最終耐藥，其機(jī)制與PCSCs富集及AR調(diào)控密切相關(guān)。1.PCSCs的化療抵抗特性：PCSCs通過(guò)表達(dá)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（如ABCG2、ABCB1）將化療藥物外排，降低細(xì)胞內(nèi)藥物濃度；同時(shí)，PCSCs處于靜息期（G0期），減少藥物靶點(diǎn)（如微管）的暴露；此外，PCSCs增強(qiáng)DNA修復(fù)能力（如上調(diào)BRCA1/2），抵抗DNA損傷藥物（如順鉑）的殺傷。化療抵抗：從“藥物敏感性”到“PCSCs富集”2.AR介導(dǎo)的化療抵抗：在多西他賽處理下，PCSCs中AR-V7表達(dá)上調(diào)，通過(guò)激活抗凋亡基因（如BCL-2、MCL-1）抑制化療誘導(dǎo)的凋亡；同時(shí)，AR非經(jīng)典通路激活PI3K/Akt信號(hào)，促進(jìn)PCSCs存活。我們通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，敲低AR-V7可顯著增強(qiáng)多西他賽對(duì)PCSCs的殺傷作用，降低sphere形成率。放療抵抗：從“DNA損傷”到“AR修復(fù)”放療是局部晚期前列腺癌的重要治療手段，但部分患者出現(xiàn)原發(fā)或獲得性抵抗，PCSCs中AR的DNA修復(fù)調(diào)控是關(guān)鍵機(jī)制。1.AR激活DNA修復(fù)通路：放療通過(guò)誘導(dǎo)DNA雙鏈斷裂（DSB）殺傷腫瘤細(xì)胞，而PCSCs中AR可通過(guò)上調(diào)DNA修復(fù)基因（如BRCA1、RAD51）增強(qiáng)DSB修復(fù)。例如，AR可直接結(jié)合BRCA1啟動(dòng)子，上調(diào)其表達(dá)，促進(jìn)同源重組（HR）修復(fù)；此外，AR-V7可通過(guò)激活A(yù)TM/ATR-Chk1通路，加速DNA損傷修復(fù)。放療抵抗：從“DNA損傷”到“AR修復(fù)”2.PCSCs的