免疫學(xué)研究方法一、免疫學(xué)研究方法概述

免疫學(xué)研究方法是指在免疫學(xué)領(lǐng)域內(nèi)，用于研究免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能、調(diào)節(jié)及其與疾病相關(guān)性的系統(tǒng)性技術(shù)手段。這些方法涵蓋了從分子水平到整體生物體的多層次研究，旨在揭示免疫應(yīng)答的機(jī)制、免疫相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理，并開發(fā)新的免疫診斷和治療策略。

二、免疫學(xué)研究方法分類

（一）體外研究方法

1.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

(1)原代細(xì)胞培養(yǎng)：從組織或體液中分離細(xì)胞，進(jìn)行短期或長期培養(yǎng)，用于研究細(xì)胞增殖、分化和功能。

(2)細(xì)胞系培養(yǎng)：使用永生化細(xì)胞系（如HeLa、Jurkat），進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)，常用于信號通路和藥物篩選。

(3)共培養(yǎng)系統(tǒng)：將不同類型的免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞與抗原呈遞細(xì)胞）共培養(yǎng)，研究細(xì)胞間相互作用。

2.分子生物學(xué)技術(shù)

(1)PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）：用于檢測或定量特定基因片段，如mRNA表達(dá)分析。

(2)WesternBlot：檢測細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì)表達(dá)水平，常用于驗(yàn)證抗體特異性。

(3)流式細(xì)胞術(shù)：通過熒光標(biāo)記抗體檢測細(xì)胞表面或內(nèi)部標(biāo)記物，分析細(xì)胞亞群比例和功能狀態(tài)。

（二）體內(nèi)研究方法

1.動物模型

(1)基礎(chǔ)免疫模型：如小鼠的免疫缺陷模型（SCID小鼠），用于研究免疫應(yīng)答的缺失或異常。

(2)腫瘤免疫模型：使用原位或異位移植腫瘤，評估免疫治療（如CAR-T）的療效。

(3)炎癥模型：如LPS誘導(dǎo)的急性炎癥，研究免疫細(xì)胞的激活和信號傳導(dǎo)。

2.人類樣本研究

(1)血液樣本分析：通過流式細(xì)胞術(shù)或ELISA檢測免疫細(xì)胞亞群和細(xì)胞因子水平。

(2)組織樣本檢測：使用免疫組化（IHC）或免疫熒光（IF）觀察組織中的免疫細(xì)胞浸潤情況。

(3)基因組測序：分析免疫相關(guān)基因（如HLA、IR基因）的多態(tài)性與疾病易感性的關(guān)系。

（三）體外診斷技術(shù)

1.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

-通過抗體-抗原結(jié)合，檢測樣本中的目標(biāo)蛋白或細(xì)胞因子，靈敏度高，廣泛應(yīng)用于臨床檢測。

2.免疫熒光技術(shù)

-使用熒光標(biāo)記抗體檢測細(xì)胞或組織切片中的目標(biāo)蛋白，適用于高分辨率成像和分析。

3.微流控芯片技術(shù)

-將多種生物反應(yīng)單元集成在芯片上，實(shí)現(xiàn)快速、高通量的免疫分析，如病原體檢測。

三、免疫學(xué)研究方法的應(yīng)用

（一）疾病診斷與監(jiān)測

1.通過血液或組織樣本中的免疫指標(biāo)（如炎癥因子、免疫細(xì)胞比例），輔助診斷自身免疫病或感染性疾病。

2.動態(tài)監(jiān)測治療過程中的免疫應(yīng)答變化，如癌癥免疫治療的療效評估。

（二）藥物研發(fā)

1.使用體外細(xì)胞模型篩選免疫調(diào)節(jié)劑（如JAK抑制劑），優(yōu)化藥物靶點(diǎn)和作用機(jī)制。

2.在動物模型中驗(yàn)證藥物安全性，如免疫抑制劑的副作用評估。

（三）疫苗開發(fā)

1.利用體外細(xì)胞培養(yǎng)檢測疫苗抗原的免疫原性，如T細(xì)胞表位的篩選。

2.在動物模型中評估疫苗的保護(hù)效力，如病毒載體疫苗的免疫保護(hù)實(shí)驗(yàn)。

四、免疫學(xué)研究方法的未來趨勢

（一）高通量測序技術(shù)

-結(jié)合單細(xì)胞測序技術(shù)，解析免疫細(xì)胞的異質(zhì)性和功能調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

（二）人工智能與機(jī)器學(xué)習(xí)

-利用算法分析大規(guī)模免疫數(shù)據(jù)，預(yù)測疾病風(fēng)險(xiǎn)和免疫治療反應(yīng)。

（三）精準(zhǔn)免疫治療

-基于個(gè)體免疫特征，開發(fā)靶向性免疫療法（如個(gè)性化CAR-T細(xì)胞治療）。

**一、免疫學(xué)研究方法概述**

免疫學(xué)研究方法是指在免疫學(xué)領(lǐng)域內(nèi)，用于研究免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能、調(diào)節(jié)及其與疾病相關(guān)性的系統(tǒng)性技術(shù)手段。這些方法涵蓋了從分子水平到整體生物體的多層次研究，旨在揭示免疫應(yīng)答的機(jī)制、免疫相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理，并開發(fā)新的免疫診斷和治療策略。免疫學(xué)研究方法具有多樣性、交叉性和復(fù)雜性，需要根據(jù)具體的研究目標(biāo)選擇合適的組合。其核心在于能夠精確地操作、檢測和分析免疫細(xì)胞、分子和通路，從而為理解生命現(xiàn)象和疾病提供科學(xué)依據(jù)。

**二、免疫學(xué)研究方法分類**

（一）體外研究方法

1.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

(1)原代細(xì)胞培養(yǎng)：

-**定義**：從體內(nèi)組織或體液中直接分離細(xì)胞，并在體外條件下進(jìn)行培養(yǎng)。

-**操作步驟**：

1.組織獲?。焊鶕?jù)實(shí)驗(yàn)需求，從特定來源（如外周血、淋巴結(jié)、脾臟、骨髓）獲取組織樣本。

2.解離處理：使用酶（如膠原酶、Dispase）或機(jī)械方法（如研磨、酶解法）消化組織，使細(xì)胞分離。

3.篩選純化：通過密度梯度離心（如Ficoll-Paque）或細(xì)胞粘附方法（如尼龍毛柱過濾）去除非目標(biāo)細(xì)胞。

4.培養(yǎng)維持：將純化后的細(xì)胞接種于培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中，加入含血清、抗生素等成分的完全培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

-**應(yīng)用**：用于研究細(xì)胞的天然狀態(tài)、增殖分化的基礎(chǔ)條件，以及與病原體或外源分子的直接相互作用。但原代細(xì)胞壽命有限，通常用于短期研究。

(2)細(xì)胞系培養(yǎng)：

-**定義**：從原代細(xì)胞或腫瘤組織中分離，經(jīng)過無限次傳代后獲得的穩(wěn)定細(xì)胞系。

-**常見細(xì)胞系**：如HeLa（宮頸癌）、Jurkat（T淋巴細(xì)胞）、B細(xì)胞系（如Raji、Namalwa）。

-**優(yōu)勢**：生長穩(wěn)定、遺傳背景均一、易于操作和保存，適合進(jìn)行大規(guī)模、標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)。

-**操作步驟**：

1.細(xì)胞復(fù)蘇：將凍存的細(xì)胞系解凍，接種于培養(yǎng)皿中。

2.培養(yǎng)傳代：待細(xì)胞貼壁生長至80%-90%融合度時(shí)，用胰蛋白酶消化，重新計(jì)數(shù)并接種于新的培養(yǎng)容器中。

3.藥物處理：在培養(yǎng)過程中加入待測藥物或刺激因子，觀察細(xì)胞表型、活力或分泌產(chǎn)物的變化。

-**應(yīng)用**：廣泛用于信號通路研究、藥物篩選、病毒感染機(jī)制、細(xì)胞因子功能分析等。

(3)共培養(yǎng)系統(tǒng)：

-**定義**：將兩種或多種不同類型的免疫細(xì)胞共同培養(yǎng)，以研究細(xì)胞間的相互作用。

-**常見類型**：

-T細(xì)胞與抗原呈遞細(xì)胞（APC）共培養(yǎng)：研究T細(xì)胞的活化、增殖和分化。

-免疫細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)：模擬體內(nèi)微環(huán)境，研究免疫細(xì)胞的遷移和功能。

-不同免疫細(xì)胞亞群共培養(yǎng)：研究細(xì)胞間的抑制或促進(jìn)作用。

-**操作步驟**：

1.細(xì)胞準(zhǔn)備：分別分離和純化目標(biāo)免疫細(xì)胞。

2.共培養(yǎng)設(shè)置：在培養(yǎng)容器中設(shè)置不同距離或接觸方式（直接接觸、間接接觸、距離依賴性接觸），加入必要的刺激物。

3.培養(yǎng)監(jiān)測：通過流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞因子檢測、共刺激分子表達(dá)分析等方法，評估細(xì)胞間的相互作用和功能變化。

-**應(yīng)用**：研究免疫應(yīng)答的啟動和調(diào)節(jié)機(jī)制，開發(fā)免疫治療策略，如構(gòu)建人工淋巴組織模型。

2.分子生物學(xué)技術(shù)

(1)PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）：

-**原理**：利用DNA聚合酶在體外擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù)。

-**操作步驟**：

1.DNA提?。簭募?xì)胞或組織中提取總DNA。

2.引物設(shè)計(jì)：根據(jù)目標(biāo)序列設(shè)計(jì)特異性引物。

3.反應(yīng)體系準(zhǔn)備：包含DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等。

4.PCR擴(kuò)增：在PCR儀上進(jìn)行變性-退火-延伸循環(huán)。

5.結(jié)果分析：通過凝膠電泳、熒光定量PCR等方法檢測擴(kuò)增產(chǎn)物。

-**應(yīng)用**：基因表達(dá)分析（mRNA反轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行qPCR）、基因分型、病原體檢測、基因克隆等。

(2)WesternBlot：

-**原理**：通過抗體特異性識別目標(biāo)蛋白，并進(jìn)行化學(xué)發(fā)光或熒光檢測的技術(shù)。

-**操作步驟**：

1.蛋白提?。簭募?xì)胞或組織中提取總蛋白。

2.SDS電泳：將蛋白樣品進(jìn)行凝膠電泳分離。

3.轉(zhuǎn)膜：將分離的蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF或NC膜上。

4.封閉：用封閉液（如BSA、脫脂奶粉）封閉膜上的非特異性位點(diǎn)。

5.一抗孵育：用特異性抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合。

6.二抗孵育：用標(biāo)記有酶或熒光劑的二抗結(jié)合一抗。

7.化學(xué)發(fā)光/熒光檢測：使用化學(xué)發(fā)光底物或熒光成像系統(tǒng)檢測信號。

-**應(yīng)用**：檢測蛋白表達(dá)水平、驗(yàn)證抗體特異性、研究蛋白修飾（如磷酸化）等。

(3)流式細(xì)胞術(shù)：

-**原理**：通過激光激發(fā)細(xì)胞表面的熒光標(biāo)記物，并檢測散射光和熒光信號，進(jìn)行細(xì)胞定量和分選的技術(shù)。

-**操作步驟**：

1.細(xì)胞制備：收集并制備單細(xì)胞懸液。

2.熒光標(biāo)記：用特異性熒光抗體標(biāo)記細(xì)胞表面的抗原或內(nèi)部分子。

3.上機(jī)檢測：將細(xì)胞懸液注入流式細(xì)胞儀，通過激光照射和檢測系統(tǒng)獲取數(shù)據(jù)。

4.數(shù)據(jù)分析：使用流式軟件（如FlowJo）對數(shù)據(jù)進(jìn)行門選、統(tǒng)計(jì)分析，繪制細(xì)胞亞群比例、細(xì)胞表面標(biāo)志物表達(dá)等圖表。

-**應(yīng)用**：檢測免疫細(xì)胞亞群比例、細(xì)胞表面和內(nèi)部標(biāo)記物表達(dá)、細(xì)胞活力、細(xì)胞周期分析等。

（二）體內(nèi)研究方法

1.動物模型

(1)基礎(chǔ)免疫模型：

-**SCID小鼠模型**：

-**定義**：嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（SevereCombinedImmunodeficiency）小鼠，因缺乏T細(xì)胞、B細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞，可用于研究免疫缺陷或外源免疫細(xì)胞的存活。

-**操作**：將人源細(xì)胞或組織移植到SCID小鼠體內(nèi)，觀察其生長和功能。

-**應(yīng)用**：研究免疫細(xì)胞發(fā)育、腫瘤免疫逃逸機(jī)制、異種移植等。

-**裸鼠模型**：

-**定義**：缺乏功能性胸腺和部分B細(xì)胞，免疫抑制能力較弱，主要用于腫瘤學(xué)研究。

-**操作**：將腫瘤細(xì)胞移植到裸鼠體內(nèi)，觀察腫瘤生長和免疫治療反應(yīng)。

-**應(yīng)用**：腫瘤模型構(gòu)建、免疫治療藥物篩選、皮膚移植研究等。

(2)腫瘤免疫模型：

-**原位腫瘤模型**：

-**定義**：將腫瘤細(xì)胞直接接種到小鼠的特定組織（如皮下、原位結(jié)腸）中，模擬體內(nèi)腫瘤生長環(huán)境。

-**操作**：通過手術(shù)或微注射技術(shù)將腫瘤細(xì)胞接種到目標(biāo)部位。

-**應(yīng)用**：研究腫瘤免疫微環(huán)境、免疫治療（如PD-1/PD-L1抑制劑）的療效評估、腫瘤疫苗開發(fā)等。

-**異種移植腫瘤模型**：

-**定義**：將人源腫瘤細(xì)胞移植到免疫缺陷小鼠（如SCID、NOD/SCID）體內(nèi)。

-**操作**：將人源腫瘤細(xì)胞皮下接種到小鼠體內(nèi)。

-**應(yīng)用**：研究腫瘤的免疫原性、免疫治療藥物的藥效學(xué)和藥代動力學(xué)。

(3)炎癥模型：

-**LPS誘導(dǎo)的急性炎癥模型**：

-**定義**：脂多糖（Lipopolysaccharide）是革蘭氏陰性菌的主要成分，注射LPS可以快速激活免疫細(xì)胞，引發(fā)炎癥反應(yīng)。

-**操作**：通過腹腔注射或腳墊注射LPS，收集血液或組織樣本，檢測炎癥因子水平或炎癥細(xì)胞浸潤情況。

-**應(yīng)用**：研究炎癥反應(yīng)的機(jī)制、藥物抗炎作用篩選、免疫細(xì)胞功能分析等。

-**膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型**：

-**定義**：通過注射Freund's不完全佐劑（含膠原和佐劑）引發(fā)免疫介導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎。

-**操作**：將特定膠原（如牛型II型膠原）與佐劑混合后免疫動物，觀察關(guān)節(jié)腫脹和功能障礙。

-**應(yīng)用**：研究類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制、藥物療效評估、免疫治療策略開發(fā)等。

2.人類樣本研究

(1)血液樣本分析：

-**檢測內(nèi)容**：

-免疫細(xì)胞亞群：通過流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血中淋巴細(xì)胞（T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞）、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞等比例和表面標(biāo)志物。

-細(xì)胞因子：通過ELISA、multiplex檢測等方法檢測血液中的炎癥因子（如IL-6、TNF-α）、免疫調(diào)節(jié)因子（如IL-10、TGF-β）水平。

-其他指標(biāo)：如免疫球蛋白水平、補(bǔ)體成分等。

-**應(yīng)用**：疾病診斷、疾病分期、療效監(jiān)測、免疫狀態(tài)評估等。

(2)組織樣本檢測：

-**檢測方法**：

-免疫組化（Immunohistochemistry,IHC）：使用特異性抗體檢測組織切片中目標(biāo)蛋白的定位和表達(dá)水平。

-免疫熒光（Immunofluorescence,IF）：使用熒光標(biāo)記抗體進(jìn)行染色，觀察組織切片中目標(biāo)蛋白的表達(dá)和細(xì)胞定位。

-免疫熒光雙標(biāo)/多標(biāo)：同時(shí)檢測多種蛋白，分析蛋白間的共定位和相互作用。

-**應(yīng)用**：研究免疫細(xì)胞在組織中的浸潤模式、腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞分布、炎癥相關(guān)蛋白的表達(dá)等。

(3)基因組測序：

-**檢測內(nèi)容**：

-HLA基因分型：檢測人類白細(xì)胞抗原（HLA）基因型，研究其與疾病易感性、移植排斥反應(yīng)的關(guān)系。

-免疫相關(guān)基因表達(dá)譜分析：通過RNA-Seq等技術(shù)檢測組織或細(xì)胞中的基因表達(dá)水平，研究免疫應(yīng)答的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

-突變檢測：通過全外顯子組測序（WES）或全基因組測序（WGS）檢測免疫相關(guān)基因的突變，研究其與疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

-**應(yīng)用**：疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測、個(gè)體化免疫治療、免疫機(jī)制研究等。

（三）體外診斷技術(shù)

1.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

-**原理**：基于抗原抗體特異性結(jié)合，通過酶標(biāo)記抗體或抗原，在底物作用下產(chǎn)生顯色反應(yīng)，進(jìn)行定量或定性分析。

-**操作步驟**：

1.包被：將捕獲抗體或抗原包被在微孔板表面，4℃過夜孵育。

2.封閉：用封閉液封閉未結(jié)合位點(diǎn)，防止非特異性吸附。

3.加樣：加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和酶標(biāo)抗體/抗原，室溫孵育。

4.洗滌：用洗滌液清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)。

5.底物顯色：加入酶底物，避光孵育，產(chǎn)生顏色信號。

6.終止反應(yīng)：加入終止液，終止酶反應(yīng)。

7.讀板：使用酶標(biāo)儀檢測吸光度值，進(jìn)行定量分析。

-**應(yīng)用**：廣泛應(yīng)用于臨床檢測，如傳染病標(biāo)志物（如乙肝病毒標(biāo)志物）、腫瘤標(biāo)志物（如癌胚抗原）、激素水平、細(xì)胞因子等。

2.免疫熒光技術(shù)

-**原理**：利用熒光標(biāo)記的抗體或核酸探針，在顯微鏡下觀察細(xì)胞或組織切片中目標(biāo)分子的定位和表達(dá)。

-**操作步驟**：

1.樣本制備：制備細(xì)胞涂片或組織切片。

2.固定：用甲醇、乙醇或甲醛等固定劑固定樣本，使蛋白質(zhì)變性。

3.封閉：用封閉液封閉內(nèi)源性過氧化物酶或堿性磷酸酶，以及非特異性位點(diǎn)。

4.一抗孵育：用特異性熒光抗體與目標(biāo)分子結(jié)合。

5.二抗孵育：用標(biāo)記有熒光染料的二抗結(jié)合一抗（如果一抗是直接標(biāo)記的，則此步省略）。

6.成像：使用熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡觀察熒光信號，并進(jìn)行圖像采集和分析。

-**應(yīng)用**：細(xì)胞生物學(xué)研究、免疫組織化學(xué)、病原體檢測、藥物作用機(jī)制研究等。

3.微流控芯片技術(shù)

-**原理**：將生物反應(yīng)單元（如細(xì)胞培養(yǎng)、檢測）集成在芯片上，通過微通道實(shí)現(xiàn)樣品的精確操控和高通量分析。

-**操作步驟**：

1.芯片制備：通過光刻、軟刻蝕等技術(shù)制備具有微通道和反應(yīng)室的芯片。

2.樣品加載：將樣本通過注射器或泵加載到芯片的微通道中。

3.反應(yīng)：在微通道中發(fā)生生物反應(yīng)，如細(xì)胞培養(yǎng)、酶促反應(yīng)等。

4.檢測：通過芯片上的檢測單元（如電化學(xué)傳感器、光學(xué)傳感器）檢測反應(yīng)產(chǎn)物或細(xì)胞狀態(tài)。

5.數(shù)據(jù)分析：收集檢測數(shù)據(jù)，進(jìn)行定量或定性分析。

-**應(yīng)用**：疾病診斷、藥物篩選、生物傳感器、細(xì)胞分析等，具有快速、靈敏、微型化、自動化等優(yōu)點(diǎn)。

**三、免疫學(xué)研究方法的應(yīng)用**

（一）疾病診斷與監(jiān)測

1.**自身免疫病診斷**：

-通過檢測血液或組織中自身抗體的存在（如ANA、RF），以及T細(xì)胞對自身抗原的應(yīng)答，輔助診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫病。

-應(yīng)用方法：ELISA、WesternBlot、流式細(xì)胞術(shù)、自身抗體譜檢測等。

2.**感染性疾病監(jiān)測**：

-通過檢測病原體特異性抗體或細(xì)胞因子，評估感染的嚴(yán)重程度和免疫狀態(tài)。

-應(yīng)用方法：血清學(xué)檢測（抗體檢測）、細(xì)胞因子檢測、病原體核酸檢測等。

3.**腫瘤免疫治療療效評估**：

-監(jiān)測治療前后免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞、NK細(xì)胞）的數(shù)量、功能狀態(tài)和腫瘤相關(guān)抗原特異性應(yīng)答的變化。

-應(yīng)用方法：流式細(xì)胞術(shù)、ELISPOT、腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TIL）檢測等。

（二）藥物研發(fā)

1.**免疫調(diào)節(jié)劑篩選**：

-使用體外細(xì)胞模型（如巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞）篩選具有免疫調(diào)節(jié)活性的化合物，評估其抗炎、免疫抑制或免疫激活作用。

-應(yīng)用方法：細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞因子檢測、信號通路分析等。

2.**藥物安全性評估**：

-在動物模型中評估免疫抑制劑或其他藥物的免疫毒性，觀察其對免疫系統(tǒng)功能的影響。

-應(yīng)用方法：動物模型（如免疫缺陷小鼠、轉(zhuǎn)基因小鼠）、血液學(xué)指標(biāo)檢測、免疫器官指數(shù)分析等。

（三）疫苗開發(fā)

1.**免疫原性評價(jià)**：

-使用體外細(xì)胞模型（如樹突狀細(xì)胞、T細(xì)胞）檢測候選疫苗抗原的免疫原性，評估其誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的能力。

-應(yīng)用方法：細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞因子檢測、表型分析等。

2.**免疫保護(hù)力評估**：

-在動物模型中評估疫苗的保護(hù)效力，觀察其預(yù)防或減輕疾病感染的能力。

-應(yīng)用方法：動物模型（如感染模型）、抗體水平檢測、組織病理學(xué)分析等。

**四、免疫學(xué)研究方法的未來趨勢**

（一）高通量測序技術(shù)

-**單細(xì)胞測序技術(shù)**：

-**技術(shù)**：Single-cellRNAsequencing(scRNA-seq),Single-cellDNAsequencing,Single-cellATAC-seq等。

-**應(yīng)用**：解析免疫細(xì)胞的異質(zhì)性、揭示免疫細(xì)胞的發(fā)育和分化軌跡、研究腫瘤免疫微環(huán)境中的細(xì)胞間相互作用、開發(fā)個(gè)體化免疫治療策略。

-**發(fā)展方向**：提高測序精度、降低成本、開發(fā)新的分析算法、結(jié)合空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)等技術(shù)。

（二）人工智能與機(jī)器學(xué)習(xí)

-**應(yīng)用領(lǐng)域**：

-數(shù)據(jù)分析：利用機(jī)器學(xué)習(xí)算法分析大規(guī)模免疫數(shù)據(jù)（如測序數(shù)據(jù)、流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)），識別潛在的生物標(biāo)志物和免疫機(jī)制。

-模型預(yù)測：開發(fā)預(yù)測模型，預(yù)測疾病的易感性、免疫治療的反應(yīng)、疫苗的免疫效果等。

-藥物設(shè)計(jì)：利用人工智能輔助設(shè)計(jì)新型免疫藥物，優(yōu)化藥物靶點(diǎn)和作用機(jī)制。

-**發(fā)展方向**：開發(fā)更精準(zhǔn)的算法、整合多組學(xué)數(shù)據(jù)、提高模型的可解釋性、推動人工智能在免疫學(xué)研究中的深度應(yīng)用。

（三）精準(zhǔn)免疫治療

-**技術(shù)**：

-CAR-T細(xì)胞治療：通過基因工程技術(shù)改造患者自身的T細(xì)胞，使其表達(dá)針對腫瘤抗原的嵌合抗原受體（CAR），用于治療血液腫瘤和實(shí)體瘤。

-TCR治療：將患者自身的T細(xì)胞受體（TCR）移植到其他患者體內(nèi)，用于治療腫瘤或感染性疾病。

-免疫檢查點(diǎn)抑制劑：靶向免疫檢查點(diǎn)分子（如PD-1、PD-L1），解除免疫抑制，增強(qiáng)抗腫瘤免疫應(yīng)答。

-**應(yīng)用**：治療難治性癌癥、感染性疾病、自身免疫病等。

-**發(fā)展方向**：提高治療的safety和efficacy、開發(fā)新的治療靶點(diǎn)、實(shí)現(xiàn)個(gè)體化治療方案的制定和實(shí)施、探索新的治療模式（如聯(lián)合治療、預(yù)防性治療）。

一、免疫學(xué)研究方法概述

免疫學(xué)研究方法是指在免疫學(xué)領(lǐng)域內(nèi)，用于研究免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能、調(diào)節(jié)及其與疾病相關(guān)性的系統(tǒng)性技術(shù)手段。這些方法涵蓋了從分子水平到整體生物體的多層次研究，旨在揭示免疫應(yīng)答的機(jī)制、免疫相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理，并開發(fā)新的免疫診斷和治療策略。

二、免疫學(xué)研究方法分類

（一）體外研究方法

1.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

(1)原代細(xì)胞培養(yǎng)：從組織或體液中分離細(xì)胞，進(jìn)行短期或長期培養(yǎng)，用于研究細(xì)胞增殖、分化和功能。

(2)細(xì)胞系培養(yǎng)：使用永生化細(xì)胞系（如HeLa、Jurkat），進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)，常用于信號通路和藥物篩選。

(3)共培養(yǎng)系統(tǒng)：將不同類型的免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞與抗原呈遞細(xì)胞）共培養(yǎng)，研究細(xì)胞間相互作用。

2.分子生物學(xué)技術(shù)

(1)PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）：用于檢測或定量特定基因片段，如mRNA表達(dá)分析。

(2)WesternBlot：檢測細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì)表達(dá)水平，常用于驗(yàn)證抗體特異性。

(3)流式細(xì)胞術(shù)：通過熒光標(biāo)記抗體檢測細(xì)胞表面或內(nèi)部標(biāo)記物，分析細(xì)胞亞群比例和功能狀態(tài)。

（二）體內(nèi)研究方法

1.動物模型

(1)基礎(chǔ)免疫模型：如小鼠的免疫缺陷模型（SCID小鼠），用于研究免疫應(yīng)答的缺失或異常。

(2)腫瘤免疫模型：使用原位或異位移植腫瘤，評估免疫治療（如CAR-T）的療效。

(3)炎癥模型：如LPS誘導(dǎo)的急性炎癥，研究免疫細(xì)胞的激活和信號傳導(dǎo)。

2.人類樣本研究

(1)血液樣本分析：通過流式細(xì)胞術(shù)或ELISA檢測免疫細(xì)胞亞群和細(xì)胞因子水平。

(2)組織樣本檢測：使用免疫組化（IHC）或免疫熒光（IF）觀察組織中的免疫細(xì)胞浸潤情況。

(3)基因組測序：分析免疫相關(guān)基因（如HLA、IR基因）的多態(tài)性與疾病易感性的關(guān)系。

（三）體外診斷技術(shù)

1.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

-通過抗體-抗原結(jié)合，檢測樣本中的目標(biāo)蛋白或細(xì)胞因子，靈敏度高，廣泛應(yīng)用于臨床檢測。

2.免疫熒光技術(shù)

-使用熒光標(biāo)記抗體檢測細(xì)胞或組織切片中的目標(biāo)蛋白，適用于高分辨率成像和分析。

3.微流控芯片技術(shù)

-將多種生物反應(yīng)單元集成在芯片上，實(shí)現(xiàn)快速、高通量的免疫分析，如病原體檢測。

三、免疫學(xué)研究方法的應(yīng)用

（一）疾病診斷與監(jiān)測

1.通過血液或組織樣本中的免疫指標(biāo)（如炎癥因子、免疫細(xì)胞比例），輔助診斷自身免疫病或感染性疾病。

2.動態(tài)監(jiān)測治療過程中的免疫應(yīng)答變化，如癌癥免疫治療的療效評估。

（二）藥物研發(fā)

1.使用體外細(xì)胞模型篩選免疫調(diào)節(jié)劑（如JAK抑制劑），優(yōu)化藥物靶點(diǎn)和作用機(jī)制。

2.在動物模型中驗(yàn)證藥物安全性，如免疫抑制劑的副作用評估。

（三）疫苗開發(fā)

1.利用體外細(xì)胞培養(yǎng)檢測疫苗抗原的免疫原性，如T細(xì)胞表位的篩選。

2.在動物模型中評估疫苗的保護(hù)效力，如病毒載體疫苗的免疫保護(hù)實(shí)驗(yàn)。

四、免疫學(xué)研究方法的未來趨勢

（一）高通量測序技術(shù)

-結(jié)合單細(xì)胞測序技術(shù)，解析免疫細(xì)胞的異質(zhì)性和功能調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

（二）人工智能與機(jī)器學(xué)習(xí)

-利用算法分析大規(guī)模免疫數(shù)據(jù)，預(yù)測疾病風(fēng)險(xiǎn)和免疫治療反應(yīng)。

（三）精準(zhǔn)免疫治療

-基于個(gè)體免疫特征，開發(fā)靶向性免疫療法（如個(gè)性化CAR-T細(xì)胞治療）。

**一、免疫學(xué)研究方法概述**

免疫學(xué)研究方法是指在免疫學(xué)領(lǐng)域內(nèi)，用于研究免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能、調(diào)節(jié)及其與疾病相關(guān)性的系統(tǒng)性技術(shù)手段。這些方法涵蓋了從分子水平到整體生物體的多層次研究，旨在揭示免疫應(yīng)答的機(jī)制、免疫相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理，并開發(fā)新的免疫診斷和治療策略。免疫學(xué)研究方法具有多樣性、交叉性和復(fù)雜性，需要根據(jù)具體的研究目標(biāo)選擇合適的組合。其核心在于能夠精確地操作、檢測和分析免疫細(xì)胞、分子和通路，從而為理解生命現(xiàn)象和疾病提供科學(xué)依據(jù)。

**二、免疫學(xué)研究方法分類**

（一）體外研究方法

1.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

(1)原代細(xì)胞培養(yǎng)：

-**定義**：從體內(nèi)組織或體液中直接分離細(xì)胞，并在體外條件下進(jìn)行培養(yǎng)。

-**操作步驟**：

1.組織獲?。焊鶕?jù)實(shí)驗(yàn)需求，從特定來源（如外周血、淋巴結(jié)、脾臟、骨髓）獲取組織樣本。

2.解離處理：使用酶（如膠原酶、Dispase）或機(jī)械方法（如研磨、酶解法）消化組織，使細(xì)胞分離。

3.篩選純化：通過密度梯度離心（如Ficoll-Paque）或細(xì)胞粘附方法（如尼龍毛柱過濾）去除非目標(biāo)細(xì)胞。

4.培養(yǎng)維持：將純化后的細(xì)胞接種于培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中，加入含血清、抗生素等成分的完全培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

-**應(yīng)用**：用于研究細(xì)胞的天然狀態(tài)、增殖分化的基礎(chǔ)條件，以及與病原體或外源分子的直接相互作用。但原代細(xì)胞壽命有限，通常用于短期研究。

(2)細(xì)胞系培養(yǎng)：

-**定義**：從原代細(xì)胞或腫瘤組織中分離，經(jīng)過無限次傳代后獲得的穩(wěn)定細(xì)胞系。

-**常見細(xì)胞系**：如HeLa（宮頸癌）、Jurkat（T淋巴細(xì)胞）、B細(xì)胞系（如Raji、Namalwa）。

-**優(yōu)勢**：生長穩(wěn)定、遺傳背景均一、易于操作和保存，適合進(jìn)行大規(guī)模、標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)。

-**操作步驟**：

1.細(xì)胞復(fù)蘇：將凍存的細(xì)胞系解凍，接種于培養(yǎng)皿中。

2.培養(yǎng)傳代：待細(xì)胞貼壁生長至80%-90%融合度時(shí)，用胰蛋白酶消化，重新計(jì)數(shù)并接種于新的培養(yǎng)容器中。

3.藥物處理：在培養(yǎng)過程中加入待測藥物或刺激因子，觀察細(xì)胞表型、活力或分泌產(chǎn)物的變化。

-**應(yīng)用**：廣泛用于信號通路研究、藥物篩選、病毒感染機(jī)制、細(xì)胞因子功能分析等。

(3)共培養(yǎng)系統(tǒng)：

-**定義**：將兩種或多種不同類型的免疫細(xì)胞共同培養(yǎng)，以研究細(xì)胞間的相互作用。

-**常見類型**：

-T細(xì)胞與抗原呈遞細(xì)胞（APC）共培養(yǎng)：研究T細(xì)胞的活化、增殖和分化。

-免疫細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)：模擬體內(nèi)微環(huán)境，研究免疫細(xì)胞的遷移和功能。

-不同免疫細(xì)胞亞群共培養(yǎng)：研究細(xì)胞間的抑制或促進(jìn)作用。

-**操作步驟**：

1.細(xì)胞準(zhǔn)備：分別分離和純化目標(biāo)免疫細(xì)胞。

2.共培養(yǎng)設(shè)置：在培養(yǎng)容器中設(shè)置不同距離或接觸方式（直接接觸、間接接觸、距離依賴性接觸），加入必要的刺激物。

3.培養(yǎng)監(jiān)測：通過流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞因子檢測、共刺激分子表達(dá)分析等方法，評估細(xì)胞間的相互作用和功能變化。

-**應(yīng)用**：研究免疫應(yīng)答的啟動和調(diào)節(jié)機(jī)制，開發(fā)免疫治療策略，如構(gòu)建人工淋巴組織模型。

2.分子生物學(xué)技術(shù)

(1)PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）：

-**原理**：利用DNA聚合酶在體外擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù)。

-**操作步驟**：

1.DNA提?。簭募?xì)胞或組織中提取總DNA。

2.引物設(shè)計(jì)：根據(jù)目標(biāo)序列設(shè)計(jì)特異性引物。

3.反應(yīng)體系準(zhǔn)備：包含DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等。

4.PCR擴(kuò)增：在PCR儀上進(jìn)行變性-退火-延伸循環(huán)。

5.結(jié)果分析：通過凝膠電泳、熒光定量PCR等方法檢測擴(kuò)增產(chǎn)物。

-**應(yīng)用**：基因表達(dá)分析（mRNA反轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行qPCR）、基因分型、病原體檢測、基因克隆等。

(2)WesternBlot：

-**原理**：通過抗體特異性識別目標(biāo)蛋白，并進(jìn)行化學(xué)發(fā)光或熒光檢測的技術(shù)。

-**操作步驟**：

1.蛋白提取：從細(xì)胞或組織中提取總蛋白。

2.SDS電泳：將蛋白樣品進(jìn)行凝膠電泳分離。

3.轉(zhuǎn)膜：將分離的蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF或NC膜上。

4.封閉：用封閉液（如BSA、脫脂奶粉）封閉膜上的非特異性位點(diǎn)。

5.一抗孵育：用特異性抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合。

6.二抗孵育：用標(biāo)記有酶或熒光劑的二抗結(jié)合一抗。

7.化學(xué)發(fā)光/熒光檢測：使用化學(xué)發(fā)光底物或熒光成像系統(tǒng)檢測信號。

-**應(yīng)用**：檢測蛋白表達(dá)水平、驗(yàn)證抗體特異性、研究蛋白修飾（如磷酸化）等。

(3)流式細(xì)胞術(shù)：

-**原理**：通過激光激發(fā)細(xì)胞表面的熒光標(biāo)記物，并檢測散射光和熒光信號，進(jìn)行細(xì)胞定量和分選的技術(shù)。

-**操作步驟**：

1.細(xì)胞制備：收集并制備單細(xì)胞懸液。

2.熒光標(biāo)記：用特異性熒光抗體標(biāo)記細(xì)胞表面的抗原或內(nèi)部分子。

3.上機(jī)檢測：將細(xì)胞懸液注入流式細(xì)胞儀，通過激光照射和檢測系統(tǒng)獲取數(shù)據(jù)。

4.數(shù)據(jù)分析：使用流式軟件（如FlowJo）對數(shù)據(jù)進(jìn)行門選、統(tǒng)計(jì)分析，繪制細(xì)胞亞群比例、細(xì)胞表面標(biāo)志物表達(dá)等圖表。

-**應(yīng)用**：檢測免疫細(xì)胞亞群比例、細(xì)胞表面和內(nèi)部標(biāo)記物表達(dá)、細(xì)胞活力、細(xì)胞周期分析等。

（二）體內(nèi)研究方法

1.動物模型

(1)基礎(chǔ)免疫模型：

-**SCID小鼠模型**：

-**定義**：嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（SevereCombinedImmunodeficiency）小鼠，因缺乏T細(xì)胞、B細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞，可用于研究免疫缺陷或外源免疫細(xì)胞的存活。

-**操作**：將人源細(xì)胞或組織移植到SCID小鼠體內(nèi)，觀察其生長和功能。

-**應(yīng)用**：研究免疫細(xì)胞發(fā)育、腫瘤免疫逃逸機(jī)制、異種移植等。

-**裸鼠模型**：

-**定義**：缺乏功能性胸腺和部分B細(xì)胞，免疫抑制能力較弱，主要用于腫瘤學(xué)研究。

-**操作**：將腫瘤細(xì)胞移植到裸鼠體內(nèi)，觀察腫瘤生長和免疫治療反應(yīng)。

-**應(yīng)用**：腫瘤模型構(gòu)建、免疫治療藥物篩選、皮膚移植研究等。

(2)腫瘤免疫模型：

-**原位腫瘤模型**：

-**定義**：將腫瘤細(xì)胞直接接種到小鼠的特定組織（如皮下、原位結(jié)腸）中，模擬體內(nèi)腫瘤生長環(huán)境。

-**操作**：通過手術(shù)或微注射技術(shù)將腫瘤細(xì)胞接種到目標(biāo)部位。

-**應(yīng)用**：研究腫瘤免疫微環(huán)境、免疫治療（如PD-1/PD-L1抑制劑）的療效評估、腫瘤疫苗開發(fā)等。

-**異種移植腫瘤模型**：

-**定義**：將人源腫瘤細(xì)胞移植到免疫缺陷小鼠（如SCID、NOD/SCID）體內(nèi)。

-**操作**：將人源腫瘤細(xì)胞皮下接種到小鼠體內(nèi)。

-**應(yīng)用**：研究腫瘤的免疫原性、免疫治療藥物的藥效學(xué)和藥代動力學(xué)。

(3)炎癥模型：

-**LPS誘導(dǎo)的急性炎癥模型**：

-**定義**：脂多糖（Lipopolysaccharide）是革蘭氏陰性菌的主要成分，注射LPS可以快速激活免疫細(xì)胞，引發(fā)炎癥反應(yīng)。

-**操作**：通過腹腔注射或腳墊注射LPS，收集血液或組織樣本，檢測炎癥因子水平或炎癥細(xì)胞浸潤情況。

-**應(yīng)用**：研究炎癥反應(yīng)的機(jī)制、藥物抗炎作用篩選、免疫細(xì)胞功能分析等。

-**膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型**：

-**定義**：通過注射Freund's不完全佐劑（含膠原和佐劑）引發(fā)免疫介導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎。

-**操作**：將特定膠原（如牛型II型膠原）與佐劑混合后免疫動物，觀察關(guān)節(jié)腫脹和功能障礙。

-**應(yīng)用**：研究類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制、藥物療效評估、免疫治療策略開發(fā)等。

2.人類樣本研究

(1)血液樣本分析：

-**檢測內(nèi)容**：

-免疫細(xì)胞亞群：通過流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血中淋巴細(xì)胞（T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞）、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞等比例和表面標(biāo)志物。

-細(xì)胞因子：通過ELISA、multiplex檢測等方法檢測血液中的炎癥因子（如IL-6、TNF-α）、免疫調(diào)節(jié)因子（如IL-10、TGF-β）水平。

-其他指標(biāo)：如免疫球蛋白水平、補(bǔ)體成分等。

-**應(yīng)用**：疾病診斷、疾病分期、療效監(jiān)測、免疫狀態(tài)評估等。

(2)組織樣本檢測：

-**檢測方法**：

-免疫組化（Immunohistochemistry,IHC）：使用特異性抗體檢測組織切片中目標(biāo)蛋白的定位和表達(dá)水平。

-免疫熒光（Immunofluorescence,IF）：使用熒光標(biāo)記抗體進(jìn)行染色，觀察組織切片中目標(biāo)蛋白的表達(dá)和細(xì)胞定位。

-免疫熒光雙標(biāo)/多標(biāo)：同時(shí)檢測多種蛋白，分析蛋白間的共定位和相互作用。

-**應(yīng)用**：研究免疫細(xì)胞在組織中的浸潤模式、腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞分布、炎癥相關(guān)蛋白的表達(dá)等。

(3)基因組測序：

-**檢測內(nèi)容**：

-HLA基因分型：檢測人類白細(xì)胞抗原（HLA）基因型，研究其與疾病易感性、移植排斥反應(yīng)的關(guān)系。

-免疫相關(guān)基因表達(dá)譜分析：通過RNA-Seq等技術(shù)檢測組織或細(xì)胞中的基因表達(dá)水平，研究免疫應(yīng)答的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

-突變檢測：通過全外顯子組測序（WES）或全基因組測序（WGS）檢測免疫相關(guān)基因的突變，研究其與疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

-**應(yīng)用**：疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測、個(gè)體化免疫治療、免疫機(jī)制研究等。

（三）體外診斷技術(shù)

1.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

-**原理**：基于抗原抗體特異性結(jié)合，通過酶標(biāo)記抗體或抗原，在底物作用下產(chǎn)生顯色反應(yīng)，進(jìn)行定量或定性分析。

-**操作步驟**：

1.包被：將捕獲抗體或抗原包被在微孔板表面，4℃過夜孵育。

2.封閉：用封閉液封閉未結(jié)合位點(diǎn)，防止非特異性吸附。

3.加樣：加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和酶標(biāo)抗體/抗原，室溫孵育。

4.洗滌：用洗滌液清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)。

5.底物顯色：加入酶底物，避光孵育，產(chǎn)生顏色信號。

6.終止反應(yīng)：加入終止液，終止酶反應(yīng)。

7.讀板：使用酶標(biāo)儀檢測吸光度值，進(jìn)行定量分析。

-**應(yīng)用**：廣泛應(yīng)用于臨床檢測，如傳染病標(biāo)志物（如乙肝病毒標(biāo)志物）、腫瘤標(biāo)志物（如癌胚抗原）、激素水平、細(xì)胞因子等。

2.免疫熒光技術(shù)

-**原理**：利用熒光標(biāo)記的抗體或核酸探針，在顯微鏡下觀察細(xì)胞或組織切片中目標(biāo)分子的定位和表達(dá)。

-**操作步驟**：

1.樣本制備：制備細(xì)胞涂片或組織切片。

2.固定：用甲醇、乙醇或甲醛等固定劑固定樣本，使蛋白質(zhì)變性。

3.封閉：用封閉液封閉內(nèi)源性過氧化物酶或堿性磷酸酶，以及非特異性位點(diǎn)。

4.一抗孵育：用特異性熒光抗體與目標(biāo)分子結(jié)合。

5.二抗孵育：用標(biāo)記有熒光染料的二抗結(jié)合一抗（如果一抗是直接標(biāo)記的，則此步省略）。

6.成像：使用熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡觀察熒光信號，并進(jìn)行圖像采集和分析。

-**應(yīng)用**：細(xì)胞生物學(xué)研究、免疫組織化學(xué)、病原體檢測、藥物作用機(jī)制研究等。

3.微流控芯片技術(shù)

-**原理**：將生物反應(yīng)單元（如細(xì)胞培養(yǎng)、檢測）集成在芯片上，通過微通道實(shí)現(xiàn)樣品的精確操控和高通量分析。

-**操作步驟**：

1.芯片制備：通過光刻、軟刻蝕等技術(shù)制備具有微通道和反應(yīng)室的芯片。

2.樣品加載：將樣本通過注射器或泵加載到芯片的微通道中。

3.反應(yīng)：在微通道中發(fā)生生物反應(yīng)，如細(xì)胞培養(yǎng)、酶促反應(yīng)等。

4.檢測：通過芯片上的檢測單元（如電化學(xué)傳感器、光學(xué)傳感器）檢測反應(yīng)產(chǎn)物或細(xì)胞狀態(tài)。

5.數(shù)據(jù)分析：收集檢測數(shù)據(jù)，進(jìn)行定量或定性分析。

-**應(yīng)用**：疾病診斷、藥物篩選、生物傳感器、細(xì)胞分析等，具有快速、靈敏、微型化、自動化等優(yōu)點(diǎn)。

**三、