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文檔簡(jiǎn)介
專題13生物育種
考情分析:真題考點(diǎn)分布+命題趨勢(shì)+備考策略+命題預(yù)測(cè)
培優(yōu)講練:考點(diǎn)梳理+解題秘籍+對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練
考點(diǎn)01育種原理
考點(diǎn)02基因編輯技術(shù)與育種
考點(diǎn)03雄性不育與育種
提升沖關(guān):題型過(guò)關(guān)練(2大題型)+能力提升練
【高考真題考點(diǎn)分布】
高考考點(diǎn)三年考情
育種原理2025?全國(guó),2025?江蘇,2023?江蘇
基因編輯在育種
2025?湖北,2024?新課標(biāo)II,2023?江蘇
中的應(yīng)用
雄性不育在育種
2025?全國(guó)I,2024?全國(guó)甲,2023?海南
中的應(yīng)用
【命題趨勢(shì)】
1.真實(shí)科研情境深度融入,考查復(fù)雜問(wèn)題解決能力
近年高考生物育種題呈現(xiàn)“高情境化”特征,題目背景多源于水稻、小麥等作物的實(shí)際育種研究,如
三系法雜交水稻、光溫敏不育系應(yīng)用等。例如,2024年全國(guó)甲卷以雄性不育水稻為素材,要求考生結(jié)
合細(xì)胞質(zhì)遺傳規(guī)律分析育性恢復(fù)機(jī)制;2025年重慶卷則通過(guò)全色盲遺傳病案例,考查基因編輯技術(shù)在
醫(yī)學(xué)育種中的應(yīng)用。這類題目要求學(xué)生從復(fù)雜圖文信息中提取關(guān)鍵數(shù)據(jù),結(jié)合遺傳規(guī)律、分了?機(jī)制進(jìn)行
邏輯推理,對(duì)信息獲取與科學(xué)思維能力提出了更高要求。
2.核心技術(shù)與前沿?zé)狳c(diǎn)結(jié)合,強(qiáng)化綜合應(yīng)用能力
基因編輯技術(shù)(如CRISPR/Cas9)已成為命題熱點(diǎn),常結(jié)合傳統(tǒng)育種方法綜合考查。例如,2025年江
蘇卷要求考生分析CRISPR/Cas9系統(tǒng)切割DNA的機(jī)制,以及基因編輯技術(shù)在抗豬瘟病毒豬培育中的應(yīng)
用。此外,合成生物學(xué)、表觀遺傳等新興領(lǐng)域開(kāi)始滲透,如水稻生物反應(yīng)器生產(chǎn)疫苗、細(xì)胞質(zhì)基因與核
基因互作調(diào)控育性等案例,需考生將基礎(chǔ)原理與前沿技術(shù)有機(jī)結(jié)合。
3.能力考查維度升級(jí),聚焦高階思維培養(yǎng)
除傳統(tǒng)遺傳規(guī)律應(yīng)用外,高考更注重考查實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、批判性思維等高階能力。例如,2025年山東卷要
求考生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證基因編輯對(duì)番茄果色的影響,并分析不同育種方案的優(yōu)缺點(diǎn)。部分題目還涉及數(shù)據(jù)
建模與概率計(jì)算,如三體植物自交后代比例推導(dǎo)、基因頻率變化分析等,需考生具備扎實(shí)的數(shù)學(xué)邏輯基
礎(chǔ)。
4.跨學(xué)科融合趨勢(shì)顯著,強(qiáng)調(diào)知識(shí)遷移能力
育種題常與生態(tài)學(xué)、生物工程等學(xué)科交叉,如太空育種結(jié)合輻射誘變與微重力環(huán)境分析,基因編輯涉及
倫理風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等。2025年北京卷通過(guò)竹子進(jìn)化史案例,要求考生結(jié)合染色體組分析與化石證據(jù),綜合
判斷物種形成機(jī)制,體現(xiàn)了“大概念統(tǒng)領(lǐng)、多模塊融合”的命題導(dǎo)向。
【備考策略】
1.回歸教材,構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)
夯實(shí)核心概念:系統(tǒng)椅理雜交育種、單倍體育種、某因工程等技術(shù)的原理、流程及優(yōu)缺點(diǎn),明確不同育
種方法的適用場(chǎng)景。例如,對(duì)比雜交育種與基因工程的基因重組機(jī)制,理解單倍體育種“縮短育種年
限”的本質(zhì)。
突破易錯(cuò)易混點(diǎn):針對(duì)易混淆概念(如誘變育種的“盲目性”與基因編輯的“定向性”)、實(shí)驗(yàn)操
作細(xì)節(jié)(如花藥離體培養(yǎng)與莖尖組織培養(yǎng)的區(qū)別)進(jìn)行專項(xiàng)辨析。
2.對(duì)接科研,強(qiáng)化情境化訓(xùn)練
剖析經(jīng)典案例:以水稻、小麥等作物育種為載體,分析三系法雜交、光溫敏不育系應(yīng)用等實(shí)際問(wèn)題,總
結(jié)“題干信息提取一原理應(yīng)用一邏輯推導(dǎo)”的解題路徑。
拓展前沿知識(shí):補(bǔ)充CRISPR/Cas9技術(shù)在作物改良中的最新進(jìn)展(如抗蟲(chóng)棉、抗病番茄培育),結(jié)合
教材基因工程內(nèi)容,理解“靶向編輯”“基因敲除”等核心操作。
3.聚焦能力,針對(duì)性突破瓶頸
提升實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力:通過(guò)模擬題訓(xùn)練,掌握''提出問(wèn)題一設(shè)計(jì)方案一預(yù)期結(jié)果”的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)框架。
例如,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證某基因突變對(duì)作物抗逆性的影響,并選擇合適的育種方法進(jìn)行改良。
強(qiáng)化數(shù)據(jù)處理與建模:針對(duì)三體遺傳、基因頻率計(jì)算等難點(diǎn),結(jié)合概率統(tǒng)計(jì)知識(shí)進(jìn)行專題突破。如2025
年黑吉遼蒙卷三體自交比例推導(dǎo)題,需通過(guò)配子類型及受精率分析,建立數(shù)學(xué)模型求解。
4.關(guān)注熱點(diǎn),滲透社會(huì)責(zé)任教育
追蹤科技動(dòng)態(tài):關(guān)注我國(guó)超級(jí)稻畝產(chǎn)突破、基因編輯作物商業(yè)化進(jìn)程等熱點(diǎn),引導(dǎo)學(xué)生辯證分析生物技
術(shù)的利弊。例如,討論基因編輯食品的安全性與倫理爭(zhēng)議,培養(yǎng)科學(xué)思維與社會(huì)責(zé)任感。
【命題預(yù)測(cè)】
1.高頻考點(diǎn):基因編輯技術(shù)(CRISPR/Cas9)的原理與應(yīng)用、細(xì)抱質(zhì)遺傳與核基因互作(如雄性不育系)、
多倍體育種與染色體組分析、遺傳圖譜與育種方案設(shè)計(jì)。
2.創(chuàng)新方向:合成生物學(xué)(如人工設(shè)計(jì)代謝通路改良作物品質(zhì))、表觀遺傳調(diào)控(如DNA甲基化對(duì)作物
性狀的影響)、跨物種基因轉(zhuǎn)移(如動(dòng)物基因?qū)胫参锟鼓嬗N)。
3.題型趨勢(shì):長(zhǎng)題干綜合分析題、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果預(yù)測(cè)題、數(shù)據(jù)圖表解讀題(如電泳圖譜、遺傳系譜圖)。
卜培優(yōu)講練
考點(diǎn)01育種原理
考點(diǎn)梳理
1.育種原理
育種原
育種方法
理
雜交育基因重
雜交f自交f篩選f連續(xù)自交至純合。
種組
誘變育基因突
傳統(tǒng)輻射、化學(xué)藥劑處理或太空育種
種變
育種
單倍體
技術(shù)染色體染色體雜交一花藥離體培養(yǎng)一秋水仙素處理一純合子。
育種
變異育數(shù)目變
多倍體萌發(fā)的種子或幼苗一秋水仙素處理f多倍體:或多
種異
育種倍體雜交)f多倍體
轉(zhuǎn)基因獲取目的基因f構(gòu)建表達(dá)載體f導(dǎo)入受體細(xì)胞f
基因工基因重育種檢測(cè)與鑒定。
程育種組基因編基因挖掘與篩選一基因編輯與轉(zhuǎn)化一分子標(biāo)記輔
現(xiàn)代
輯育種助篩選一品種培育與推廣
生物
細(xì)胞膜
技術(shù)
流動(dòng)性
育種細(xì)胞工酶解獲得原生質(zhì)體一誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合一獲得雜種細(xì)胞f雜
植物細(xì)
程育種種細(xì)胞組織培養(yǎng)一雜種植株
胞全能
性
2.部分育種方式對(duì)照表
核心原理關(guān)鍵步驟優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)
基因工程育種可定向改造性狀,誘變育種和雜交育種均為不定向;“克服遠(yuǎn)緣雜交不親和”:植物體細(xì)
胞雜交和基因工程育種可實(shí)現(xiàn),雜交育種無(wú)法突破物種界限。
【典例1】(2025?全國(guó))為獲得作物新品種,可采用不同的育種技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是()
A.三倍體西瓜的培育需先通過(guò)秋水仙素處理二倍體幼苗獲得四倍體
B.雜交育種可將兩個(gè)物種的優(yōu)良性狀集中在一起
C.航天育種利用太空中的輻射、微重力等因索誘導(dǎo)基因突變
I).基因工程育種可定向改造生物的遺傳性狀
【典例2】(2025?江蘇,多選)
圖示部分竹子的進(jìn)化發(fā)展史,其中A?D和H代表不同的染色體組。下列敘述正確的有()
z_________________……草本竹
/丁-HH
[由;;/一飛---BBCC
7孕\(zhòng)/'、二古熱帶木本竹
[AABBCC
率/HPF-]............:;―溫帶木本竹
---------------------CCDD
A.新熱帶木本竹(BBCC)與溫帶木本竹(CCDD)雜交,F(xiàn)1為六倍體
B.竹子的染色體數(shù)目變異是可遺傳的
C.四種類群的竹子共同組成進(jìn)化的基本單位
D.竹子化石為研究其進(jìn)化提供直接證據(jù)
【典例3】(2023?江蘇)
科學(xué)家將異源多倍體的抗葉銹病基因轉(zhuǎn)移到普通小麥中,育種過(guò)程如圖所示。圖中A、B、C、D表示4
個(gè)不同的染色體組,C組含抗病基因?;卮鹣旅娴膯?wèn)題:
“雜交后代Q)1
AAHHDI)?含抗病基因的染色體
(2)雜交后代③的抗病基因穩(wěn)定遺傳的方法是________。
易錯(cuò)提醒?。。?/p>
易錯(cuò)點(diǎn)1:將雜交育種和基因工程育種的“基因重組”等同,或?qū)伪扼w育種的原理歸為“基因重組”。
雜交育種的基因重組發(fā)生在有性生殖過(guò)程中,是同一物種內(nèi)原有基因的重新組合?;蚬こ逃N的基因
重組是外源基因?qū)耄蚱屏宋锓N界限,基因來(lái)源不同。
易錯(cuò)點(diǎn)2:?jiǎn)伪扼w育種和多倍體育種中,秋水仙素處理對(duì)象相同。單倍體育種:處理對(duì)象是單倍體幼苗
(單倍體高度不育,無(wú)種子)。多倍體育種:處理對(duì)象是萌發(fā)的種子或幼苗(多倍體可產(chǎn)生種子,如三
倍體無(wú)子西瓜需年年制種)。
易錯(cuò)點(diǎn)3:認(rèn)為所有育種產(chǎn)生的變異都是“定向”的,或認(rèn)為“無(wú)籽果實(shí)”的性狀不可遺傳。定向
改造:只有基因工程育種能定向改變性狀,其他育種均依賴變異的不定向性,需人工篩選??蛇z傳變異:
只要育種過(guò)程改變了遺傳物質(zhì)(如基因突變、染色體變異、基因重組),即使性狀無(wú)法通過(guò)種子傳遞(如
三倍體無(wú)子西瓜),其變異仍屬于可遺傳變異。
:對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練
1.下列關(guān)于雜交育種的敘述,錯(cuò)誤的是()
A.可將多個(gè)優(yōu)良性狀集中在一個(gè)個(gè)體上
B.需連續(xù)自交多代以獲得穩(wěn)定遺傳的純合子
C.可用于培育顯性和隱性純合子
D.只能利用已有的基因進(jìn)行重組
2.下列關(guān)于生物變異與育種的敘述,正確的是()
A.基因重組僅發(fā)生在減數(shù)第一次分裂后期
B.單倍體育種需用秋水仙素處理萌發(fā)的種子
C.多倍體植株的染色體組數(shù)加倍,結(jié)實(shí)率降低
D.誘變育種可定向產(chǎn)生有利變異
3.栽培稻甲產(chǎn)量高、品質(zhì)好,但每年只能收獲一次;野生稻乙種植一次可連續(xù)收獲多年,但產(chǎn)量低??茖W(xué)
家利用甲和乙雜交,培育出兼具兩者優(yōu)點(diǎn)的品系丙。
(1)該育種方法的原理是0
(2)品系丙的成功培育體現(xiàn)了牛物多樣性的價(jià)俏。
【答案】(1)基因重組(2)直接
【解析】(1)雜交育種通過(guò)基因重組將不同親本的優(yōu)良性狀集中,原理為減數(shù)分裂過(guò)程中的基因自由
組合或交叉互換。
(2)培育新品系用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn),體現(xiàn)生物多樣性的直接價(jià)值(如食用、科研等)。
4.研究者將簇毛麥(2n=M)的優(yōu)良性狀導(dǎo)入普通小麥(2n=42)中,通過(guò)雜交獲得含28條染色體的雜種
植株?;卮鹣旅娴膯?wèn)題:
(1)簇毛麥與普通小爰雜交存在,需通過(guò)技術(shù)獲得雜種植株。
(2)雜種植株的染色體數(shù)目為,減數(shù)分裂時(shí)染色體(能/不能)正常聯(lián)會(huì)。
5.無(wú)子西瓜是由二倍體(2n=22)與同源四倍體雜交后形成的三倍體?;卮鹣旅娴膯?wèn)題:
(1)四倍體植株上產(chǎn)生的雌配子含條染色體,三倍體植株的染色體數(shù)目為。
(2)三倍體無(wú)子的原因是。
考點(diǎn)02基因編輯在育種中的應(yīng)用
考點(diǎn)梳理
1.基因編輯技術(shù)核心原理
(1)CRISPR-Cas9系統(tǒng)組成
gRNA:識(shí)別靶DNA序列(20nt),需鄰近PAM序列(如NGG)。
Cas9蛋白:核酸內(nèi)切酶,切割DNA雙鏈形成DSB。
修復(fù)機(jī)制:NHEJ(非同源末端連接):易產(chǎn)生插入/缺失突變,用于基因敲除,HDR(同源定向修復(fù)):
需供體DNA模板,實(shí)現(xiàn)精確編輯(如點(diǎn)突變、基因敲入)。
(2)技術(shù)對(duì)比
特異性操作復(fù)雜度成本應(yīng)用場(chǎng)景
CRISPR-Cas9較高低低大規(guī)模多基因編輯
TALEN/ZFN高高高單基因精準(zhǔn)編輯
堿基編輯極高中等中等單堿基替換(如C-T)
2.育種應(yīng)用方向
(1)作物改良
A.抗病蟲(chóng):敲除感病基因(如水稻Pi-ta基因抗稻瘟?。?。
B.抗逆性:編輯ABA信號(hào)通路基因提高耐旱性。
C.品質(zhì)提升:編輯淀粉合成能基因改良水稻口感。
(2)動(dòng)物育種
A.抗病性:敲除豬的CD163基因抵抗藍(lán)耳病。
B.生產(chǎn)性能:編輯肌肉生長(zhǎng)抑制素(MSTN)基因增加家畜瘦肉率。
3.技術(shù)優(yōu)勢(shì)與挑戰(zhàn)
(1)優(yōu)勢(shì)
A.精準(zhǔn)性:靶向單個(gè)堿基或多基因同時(shí)編輯。
B.高效性:育種周期從傳統(tǒng)10年縮短至1-2年。
C.安全性:不引入外源基因,部分國(guó)家(如美國(guó))將其視為非轉(zhuǎn)基因作物。
(2)挑戰(zhàn)
A.脫靶效應(yīng):Cas9切割非目標(biāo)位點(diǎn),需通過(guò)全基因組測(cè)序檢測(cè)。
B.嵌合體現(xiàn)象:部分細(xì)胞未編輯,需篩選純合子。
C.倫理爭(zhēng)議:基因驅(qū)動(dòng)可能影響生態(tài)平衡,需嚴(yán)格監(jiān)管。
解翹秘籍
大招詳解
1.選擇題
CRISPR核心元件:gRNA識(shí)別靶序列,PAM序列(如NGG)是Cas9結(jié)合的必要條件。
修復(fù)機(jī)制選擇:敲除基因用NHEJ,精確替換用HDRo
技術(shù)區(qū)分:基因編輯(定向修飾內(nèi)源基因)W轉(zhuǎn)基因(插入外源基因)。
易錯(cuò)陷阱
脫靶效應(yīng):無(wú)法完全避免,只能通過(guò)優(yōu)化gRNA設(shè)計(jì)降低。
堿基編輯:無(wú)需供體DNA,直接替換單堿基(如C-T)。
嵌合體現(xiàn)象:動(dòng)物和植物均可能發(fā)生,需通過(guò)克隆或自交純化。
2.簡(jiǎn)答題
(1)技術(shù)原理類
CRISPR-Cas9工作流程:①gRNA與靶DNA互補(bǔ)配對(duì):②Cas9切割雙鏈;③通過(guò)NHEJ/HDR修復(fù)實(shí)
現(xiàn)編輯。
堿基編輯優(yōu)勢(shì):無(wú)需DSB,減少基因組不穩(wěn)定風(fēng)險(xiǎn),適用于單核甘酸遺傳病治療。
(2)應(yīng)用分析類
案例設(shè)計(jì):若改良水稻抗蟲(chóng)性,可敲除害蟲(chóng)識(shí)別受體基因(如0sSWEET14),通過(guò)NHEJ實(shí)現(xiàn)基因失活。
優(yōu)缺點(diǎn)比較:傳統(tǒng)雜交育種周期長(zhǎng)但遺傳穩(wěn)定性高,基因編輯精準(zhǔn)但需驗(yàn)證脫靶風(fēng)險(xiǎn)。
3.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題
(1)編輯效率驗(yàn)證
分子水平:PCR擴(kuò)增靶區(qū)域,測(cè)序檢測(cè)突變位點(diǎn)。
表型水平:觀察編輯后植株的抗病性或產(chǎn)量變化。
(2)脫靶效應(yīng)檢測(cè)
全基因組測(cè)序:與野生型對(duì)比,篩選潛在脫靶位點(diǎn)。
Digenome-seq:體外切割基因組DNA后測(cè)序,預(yù)測(cè)脫靶風(fēng)險(xiǎn)。
【典例1】(2025?湖北)治疔瘧疾的藥物育蒿素主要從植物黃花蒿中提取,但含量低。為培育育蒿素
含量高的黃花篙新品種,科研工作者開(kāi)展了相關(guān)研究,發(fā)現(xiàn)壽蒿素主要在葉片的腺毛中合成與積累,并
受到如水楊酸(SA)和茉莉酸甲酯(\IcJA)等植物激素的調(diào)節(jié)。研究表明,SA和McJA通過(guò)調(diào)控miR160
的表達(dá)量(miR16()是一種微小RNA,能與靶mRNA結(jié)合,引起后者降解),影響黃花蒿腺毛密度和青蒿
素含量。miR160的一種靶mRNA編碼ARFI蛋白,該蛋白影響青蒿素合成關(guān)鍵酶基因DBR2的表達(dá)。研究
結(jié)果如圖所示。
處示構(gòu)經(jīng)片換
A表,再應(yīng)
J將替,
e”中;甲
M術(shù)時(shí)
|組段技段
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積調(diào)_小,。
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與R:該,向
成量接B育某B
D)u甲方
合達(dá)直培)株.
過(guò)和系)段3
中表0種卷2菌-
通6關(guān)IB片.
毛的01一(到5是
0:6R控標(biāo)的
腺61i出株得物鍵
1是m調(diào)課因,
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、,新基組
片m影m1間的N示化
,,F(xiàn)料?因
葉的R員4素含表的
知料A材2基
:在景成0維得一割
材、述2的切
題要可含A各(纖獲1,
主析述S上解B酶
阱題
孟闿*問(wèn)素示割示
miR160上出據(jù)】制
列素分蒿顯2降切入所
于寫(xiě)根限
下蒿圖青,例效酹插圖
基請(qǐng)請(qǐng))
答青據(jù)對(duì)))制)典高制甲如1
(
回⑴⑵理3(4(抑5(【建限段區(qū)
將MI與M2片段分別插入質(zhì)粒I和n、in和N酶切位點(diǎn)之間,原因是o
(2)CRISPR-Cas9技術(shù)可以切割細(xì)菌B1基因組中與向?qū)NA結(jié)合的DNA。向?qū)NA與B1基因組DNA
互補(bǔ)配對(duì)可以形成堿基對(duì)有G-C和<,
(3)用引物P1和P2進(jìn)行PCR可驗(yàn)證片段甲插入了細(xì)菌B1基因組,所用的模板是;若用該模板
與引物P3和P4進(jìn)行PCR,實(shí)驗(yàn)結(jié)果是o
(4)與秸稈焚燒相比,利用高效降解纖維索的細(xì)菌處理粘稈的優(yōu)點(diǎn)是(答出2點(diǎn)即可)
【典例3】(2023?江蘇)為了將某納米抗體和綠色熒光蛋白基因融合表達(dá),運(yùn)用重組酶技術(shù)構(gòu)建質(zhì)粒,
如圖1所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
注:EGFP熒光蛋白
擬構(gòu)建的720bp390bp
基因結(jié)構(gòu)—AnBl納米抗體
EGFPAnBl
巳士F2片段
沖F1片段?PCR弓I物及目
的產(chǎn)物片段
F2-R
-HDFkR
[線性質(zhì)粒
T7啟動(dòng)子
基因重組Am/f載體
克隆流程
PCR產(chǎn)物片段與
市組酶
線性載體混合
注:—表不PCR用物;
轉(zhuǎn)化相同背景方框表示
同源序列
(1)分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增片段F1與片段卜'2時(shí)?,配制的兩個(gè)反應(yīng)體系中不同的有,擴(kuò)增程序中最主
要的不同是o
(2)有關(guān)基因序列如圖2,引物F2-F、F1-R應(yīng)在下列選項(xiàng)中選用。
EGFP基因序列:5'ATGGTGAGCAAGGGC-------GACGAGCTGTACAAG3!
AnBl基因序列:5CATGTCCAGCTGCAG-----CCAAAACCACAACCA3,
TG------CAACCA
B.TGGTTG------CACCAT
C.GACGAG------CTGCAG
D.CTGCAG-CTCGTC
(3)將PCR產(chǎn)物片段與線性質(zhì)粒載體混合后,在重組的作用下可形成環(huán)化質(zhì)粒,直接用于轉(zhuǎn)化細(xì)菌。這
一過(guò)程與傳統(tǒng)重組質(zhì)粒構(gòu)建過(guò)程相比,無(wú)需使用的酶主要有o
⑷轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌需采用含有抗生素的培養(yǎng)基篩選,下列敘述笛誤的有。
A.稀釋涂布平板需控制每個(gè)平板30^300個(gè)菌落
B.抗性平板上未長(zhǎng)出菌落的原因一般是培養(yǎng)基溫度太高
C.抗性平板上常常會(huì)出現(xiàn)大量雜菌形成的菌落
I).抗性平板上長(zhǎng)出的單菌落無(wú)需進(jìn)一步劃線純化
(5)為了驗(yàn)證平板上菌落中的質(zhì)粒是否符合設(shè)計(jì),用不同菌落的質(zhì)粒為模板,用引物門-F和F2-R進(jìn)行
了PCR擴(kuò)增,質(zhì)粒P1~P4的擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖3.根據(jù)圖中結(jié)果判斷,可以舍棄的質(zhì)粒有o
IFMPlP2P3P4
3000—
2000—
1OOO———
500——
250--
50~
圖3
(6)對(duì)?于PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果符合預(yù)期的質(zhì)粒,通常需進(jìn)一步通過(guò)基因測(cè)序確認(rèn),原因是。
易錯(cuò)提醒?。?!
1.基因編輯與轉(zhuǎn)基因:基因編輯:僅修飾內(nèi)源基因(如敲除、替換),不引入外源DNA;轉(zhuǎn)基因:插入外
源基因(如Bt抗蟲(chóng)基因),可能引發(fā)生態(tài)爭(zhēng)議。
2.脫靶效應(yīng)與嵌合體:脫靶效應(yīng):Cas9切割非目標(biāo)位點(diǎn),導(dǎo)致非預(yù)期突變;嵌合體:同一生物體內(nèi)部分
細(xì)胞編輯成功,部分未編輯,常見(jiàn)于早期胚胎編輯。
3.技術(shù)細(xì)節(jié)誤區(qū):PAM序列作用-靶DNA需包含PAM(如NGG),位于gRNA互補(bǔ)序列的3'端,是Cas9
結(jié)合的前提;HDR的局限性-HDR依賴細(xì)胞分裂期的同源模板,非分裂細(xì)胞中效率極低,需通過(guò)化學(xué)誘
導(dǎo)或病毒載體遞送模板。
:對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練
1.青蒿素是治療瘧疾的重要藥物,主要從黃花蒿葉片的腺毛中合成。研究發(fā)現(xiàn),水楊酸(SA)和茉莉酸甲
酯(MeJA)通過(guò)調(diào)控miR160的表達(dá)量影響青荒素含量。miR160的靶mRNA編碼ARF1蛋白,ARF1蛋
白影響青蒿素合成關(guān)鍵酶基囚DBR2的表達(dá)。回答下面的問(wèn)題:
(1)青蒿素在腺毛中合成的根本原因是。
(2)miR160的表達(dá)量與青蒿素含量呈—相關(guān)性,推測(cè)MeJA處理的影響。
(3)miR160直接調(diào)控的分子是o
(4)請(qǐng)寫(xiě)出SA、miR160、ARFl、DBR2的調(diào)控通路(用一和一|表示)。
(5)提出一種培育青蒿素高含量品種的基因編輯思路。
2.纖維素能基因(N)插入細(xì)菌B1的基因組中。首先構(gòu)建含N基因和細(xì)菌同源片段MUM2的重組質(zhì)粒,
通過(guò)限制酶切割獲得片段甲(M1-N-M2),再利用CRISPR-Cas9將片段甲替換B1基因組中的特定區(qū)域,
獲得高效降解纖維素的菌株B2。
(1)限制酶切割的化學(xué)鍵,Ml和M2的作汨是o
(2)向?qū)NA與DNA互補(bǔ)配對(duì)的堿基對(duì)有。
(3)用引物P1/P2和P3/P4分別PCR檢測(cè)B2,結(jié)果是。
(4)與秸稈焚燒相比,牛物處理的優(yōu)點(diǎn)是。
3.科研人員利用CRISPR-Cas9技術(shù)編輯水稻耐鹽負(fù)調(diào)控基因OsEILl和OsEIL2。敲除這兩個(gè)基因后,水
稻在鹽脅迫下的存活率顯著提高。測(cè)序發(fā)現(xiàn),突變基因在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)后插入1個(gè)堿基,導(dǎo)致蛋白質(zhì)
翻譯提前終止?;卮鹣旅娴膯?wèn)題。
(1)基因編輯的原理是O
(2)插入堿基導(dǎo)致蛋白質(zhì)變短的原因是。
(3)如何在個(gè)體水平驗(yàn)證耐巒性.
(4)與傳統(tǒng)雜交育種相比,基因編輯的優(yōu)勢(shì)是<,
考點(diǎn)03雄性不育在育種中的應(yīng)用
考點(diǎn)梳理
雄性不育在雜交育種中圍繞“去雄”步驟的替代方案展開(kāi),是高考對(duì)“育種原理與實(shí)踐”考查的高頻
切入點(diǎn)。
1.核心概念:雄性不育的定義
雄性不育是指植物花粉敗育、不能產(chǎn)生正常可育花粉,但雌蕊發(fā)育正常、可接受外來(lái)花粉受精結(jié)實(shí)的現(xiàn)
象。其價(jià)值在于避免人工去雄的繁瑣操作,大幅提高雜交育種效率,尤其適用于水稻、玉米等花小、人
工去雄困難的作物。
2.關(guān)鍵類型:三類不育及其遺傳特點(diǎn)
高考聚焦質(zhì)核互作型雄性不育,需明確三類不育的遺傳差異,避免混淆。
高考考查
遺傳控制育性恢復(fù)方式
頻率
細(xì)胞質(zhì)雄性不育無(wú)法通過(guò)細(xì)胞核基因恢復(fù),應(yīng)
細(xì)胞質(zhì)基因(S)控制低
(CMS)用受限
細(xì)胞核雄性小育
細(xì)胞核隱性基因(ms)控制顯性基因(Ms)可恢復(fù)育性中
(GMS)
質(zhì)核互作型雄性不細(xì)胞質(zhì)基因(S)+細(xì)胞核隱性基因細(xì)胞核顯性基因(Ms)可恢復(fù)
高
育(msms)育性
3.核心應(yīng)用:三系法與兩系法(高考重點(diǎn))
兩者均基于質(zhì)核互作型或核不育型設(shè)計(jì),是解決“不育系繁殖”和“雜交種生產(chǎn)”的關(guān)鍵技術(shù)。
(1)三系法(經(jīng)典方法)需配套三個(gè)品系,核心是“不育系的繁殖”和“雜交種的生產(chǎn)”兩步操
作。
A.不育系(A):基因型S(msnis),作為母本,花粉不育。
B.保持系(B):基因型N(msnis),與不育系雜交,后代仍為不育系(S(nisms)),用于保持不育系的
穩(wěn)定遺傳。
C.恢復(fù)系(R):基因型N(MsMs)或S(MsMs),與不育系雜交,后代基因型為S(Msms),花粉可育
(恢復(fù)育性),即為生產(chǎn)上使用的雜交種。
三系法雜交水稻系統(tǒng)如下圖所示
鎏殖不育系繁殖保持系
(2)兩系法(簡(jiǎn)化方法)利用光溫敏核不育系(基因型msnis),其育性由環(huán)境條件(光照時(shí)長(zhǎng)、溫
度)控制:
A.長(zhǎng)日照/富溫條件下:表現(xiàn)為雄性不育,可作為母本與父本雜交生產(chǎn)雜交種。
B.短日照/低溫條件下:表現(xiàn)為可育,可自交繁殖不育系,無(wú)需保持系,簡(jiǎn)化了育種流程。
兩系法雜交系統(tǒng)如下圖所示
光敏不育系
短日照長(zhǎng)日照
條件下條件下
雄性可育雄性不育X恢復(fù)系
T
光敏不育系R雜交種
解題秘籍)
解題大招
大招1:“三系法”基因型與雜交組合速判
第一步:鎖定核心品系一一不育系(A)不育系基因型固定為S(msms)(質(zhì)核互作型),是所有雜交
的母本(因花粉不育,只能接受花粉)。
第二步:區(qū)分保持系與恢復(fù)系:若某品系與不育系(A)雜交,后代仍為不育系(A),則該品系為保持
系(B),基因型必為N(msms)(細(xì)胞質(zhì)提供N,細(xì)胞核提供ms,后代細(xì)胞質(zhì)隨母本為S,細(xì)胞核為msms,
仍不育)。
若某品系與不育系(A)雜交,后代育性恢復(fù)(可育),則該品系為恢復(fù)系(R
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