—3—《動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的快速測(cè)定過(guò)濾式凈化結(jié)合液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法》（征求意見(jiàn)稿）編制說(shuō)明一、標(biāo)準(zhǔn)制定的目的和意義獸藥是指用于預(yù)防、治療、診斷動(dòng)物疾病或者有目的地調(diào)節(jié)動(dòng)物生理機(jī)能的物質(zhì)，包括但不限于：抗菌素類、抗寄生蟲(chóng)類、抗真菌類和支氣管擴(kuò)張類，對(duì)于動(dòng)物疾病的預(yù)防和治療等方面有著非常重要的作用。由于它們具有無(wú)數(shù)的好處，因此，部分養(yǎng)殖者為提高經(jīng)濟(jì)效益或缺乏對(duì)藥物危害的認(rèn)知和科學(xué)用藥的指導(dǎo)而頻現(xiàn)不合理用藥的現(xiàn)象，甚至有時(shí)還非法濫用違禁藥物。這些獸藥在動(dòng)物體內(nèi)殘留，通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體，從而危害人類身體健康。因此，中國(guó)、歐盟、美國(guó)等均制定了動(dòng)物源性食品中獸藥最大殘留限量（MRL），在超標(biāo)的情況下，各國(guó)均會(huì)啟動(dòng)法律程序，為達(dá)到監(jiān)測(cè)的目的和監(jiān)管的要求，提供準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，研究和開(kāi)發(fā)可靠、有效的獸藥殘留量檢測(cè)方法非常必要。獸藥主要以難揮發(fā)的極性或弱極性化合物為主，不適合應(yīng)用氣相或氣質(zhì)的方法檢測(cè)，單純的液相色譜法對(duì)獸藥及其代謝物的對(duì)于不同種類獸藥的同時(shí)檢測(cè)存在很大局限性。因此，近年來(lái)，液相色譜法已逐漸被選擇性更好、檢測(cè)效率更高的色譜串聯(lián)質(zhì)譜—4—法取代。并且，獸藥的檢測(cè)，最具挑戰(zhàn)性的步驟是提取、凈化樣phaseextraction，SPE）、液液萃取法（Liquid-liquidextraction，LLE）以及近年來(lái)被廣泛應(yīng)用的快速、簡(jiǎn)單、廉價(jià)、高效、安全的前處理方法（Quickeasycheapeffectiveruggedandsafe已成為對(duì)獸藥殘留分析具有很強(qiáng)適用性的前處理方法，并且，由于檢測(cè)設(shè)備的改進(jìn)，也大大增加了同時(shí)檢測(cè)獸藥的數(shù)量，但是，其基于QuEChERS前處理分析同一基質(zhì)，在分析多種類基質(zhì)時(shí)還是顯示了局限性，也存在雖能檢測(cè)多種基質(zhì)，卻不能定量等難題。與此同時(shí)，獸藥通常在食物中以微克甚至毫微克重量存在，對(duì)動(dòng)物源性食品中的殘留量檢測(cè)提出了極大挑戰(zhàn)。由于畜禽產(chǎn)品含有大量脂肪和蛋白質(zhì)及其他大分子量物質(zhì)，基質(zhì)極為復(fù)雜，也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。因此，樣品制備始終是檢測(cè)動(dòng)物源性食品中獸藥殘留的一個(gè)具有挑戰(zhàn)性的過(guò)程。本次團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制定所涉及的檢測(cè)方法，采用新型高分子材料制備而成的Clean-upLPAS柱，快速過(guò)濾凈化多種動(dòng)物源性食品，結(jié)合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法建立了一種可以同時(shí)快速、準(zhǔn)確、高效檢測(cè)20余種磺胺類、近10種喹諾酮類、近10種β-受體激動(dòng)劑、4種四環(huán)素類、4種酰胺醇類、3種大環(huán)內(nèi)酯類、2種鎮(zhèn)靜類、2種林可胺類抗生素以及硝基咪唑類、抗球蟲(chóng)類、皮質(zhì)—5—類激素、青霉素類、抗病毒藥物各1種等多種類獸藥殘留的高通通過(guò)驗(yàn)證，該方法得到了很好驗(yàn)證效果，包括正確度、精密度、檢測(cè)限、定量限、線性范圍和基質(zhì)效應(yīng)在內(nèi)的方法性能均得g/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，決定系數(shù)（R2）≥0.992，總體檢出限g/kg）三個(gè)水平下54種藥物的平均回收率為70.45%～118.1%，標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.01%～9.9%；對(duì)于豬肉、豬肝、雞肉、雞范圍內(nèi)線性良好，決定系數(shù)（R2）≥0.995，在高、中、低（5μ基質(zhì)樣本中均得到了滿意的回收效率，總體回收率為70.9%~μg/kg。該方法已成功應(yīng)用于700余份實(shí)際樣本的檢測(cè)，成為了調(diào)查養(yǎng)殖畜禽產(chǎn)品中獸藥殘留安全狀況的重要依據(jù)。目前，該檢測(cè)方法已在雅安、內(nèi)江、宜賓、甘孜等地實(shí)現(xiàn)了不同區(qū)域同類樣本試驗(yàn)的覆蓋和推廣使用。同時(shí)，該檢測(cè)方法在前處理中減少了用鹽反萃、液體轉(zhuǎn)移、二次離心等步驟，更為簡(jiǎn)單快捷，且其中—6—的凈化法所消耗試劑、耗材、儀器設(shè)備更少，卻能同時(shí)檢測(cè)不同動(dòng)物食品中的多種類獸藥，大大降低了檢測(cè)的經(jīng)濟(jì)成本和時(shí)間成本，減少了廢液的產(chǎn)生，對(duì)環(huán)境和檢測(cè)人員健康更加友好，對(duì)人員專業(yè)要求更低。綜上，本次團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制定所涉及的檢測(cè)方法經(jīng)過(guò)了不同地區(qū)多輪若干次的重復(fù)性、再現(xiàn)性、準(zhǔn)確性、靈敏度/檢查限等方法性能的驗(yàn)證試驗(yàn)和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，具備方法標(biāo)準(zhǔn)制定的必要性、可行性，對(duì)現(xiàn)實(shí)的獸藥殘留量測(cè)定工作具有很好的指導(dǎo)意義。二、任務(wù)來(lái)源為配合上級(jí)相關(guān)農(nóng)產(chǎn)品部分農(nóng)藥殘留量日常抽檢中使用的常規(guī)測(cè)定方法較為復(fù)雜且時(shí)間長(zhǎng)等現(xiàn)實(shí)困難的協(xié)調(diào)解決，通過(guò)專項(xiàng)研究分析得到了對(duì)應(yīng)的快速方法，擬將該快速方法確立為常規(guī)方法的并行驗(yàn)證方法，成為輔助性的補(bǔ)充方法，2025年4-5月，雅安市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心牽頭相關(guān)單位向四川省品牌建設(shè)促進(jìn)會(huì)提出團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的快速測(cè)定過(guò)濾式凈化結(jié)合液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法》制定項(xiàng)目立項(xiàng)計(jì)劃申請(qǐng)。同期，按照《四川省品牌建設(shè)促進(jìn)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理辦法（試行）》要求，經(jīng)論證，四川省品牌建設(shè)促進(jìn)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)化工作委員會(huì)同意批準(zhǔn)該團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)?！?—三、工作簡(jiǎn)況（一）成立標(biāo)準(zhǔn)起草組2025年5月，由雅安市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心、內(nèi)江市動(dòng)植物疫病防控和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)中心、自貢市鄉(xiāng)村振興發(fā)展服務(wù)中心、四川省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心、四川碩耘達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司分別派員共同組成了標(biāo)準(zhǔn)起草組（以下簡(jiǎn)稱“起草組”）。2025年6-8月，起草組根據(jù)雅安市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心前期專題研究課題項(xiàng)目中分析取得的相關(guān)測(cè)定方法的成果，在對(duì)應(yīng)論文《過(guò)濾式凈化結(jié)合LC-MS/MS同時(shí)測(cè)定動(dòng)物源食品中61種獸藥殘留》對(duì)測(cè)定全過(guò)程進(jìn)行總結(jié)的基礎(chǔ)上，形成了標(biāo)準(zhǔn)草案。（三）擬定征求意見(jiàn)稿2025年9-11月，起草組廣泛收集與動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的快速測(cè)定方法相關(guān)法律法規(guī)、政策文件、標(biāo)準(zhǔn)、研究報(bào)告等文獻(xiàn)資料，結(jié)合動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的快速測(cè)定工作的實(shí)際情況，確定了標(biāo)準(zhǔn)基本框架和結(jié)構(gòu)。隨后，起草組內(nèi)部組織討論，進(jìn)行了多次討論和修改。同時(shí)，征求了獸藥殘留檢驗(yàn)檢測(cè)及標(biāo)準(zhǔn)化相關(guān)領(lǐng)域?qū)＜业囊庖?jiàn)，并根據(jù)一致的意見(jiàn)建議對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行修改完善，形成了征求意見(jiàn)稿?！?—四、編制原則和依據(jù)（一）標(biāo)準(zhǔn)編制原則標(biāo)準(zhǔn)編制遵循“落實(shí)法律政策要求、遵循檢驗(yàn)方法原理、吸納工作實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)、確保內(nèi)容科學(xué)先進(jìn)”的原則，著力增強(qiáng)動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的快速測(cè)定方法的科學(xué)性、先進(jìn)性、規(guī)范性和可操作性。1.科學(xué)性。本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容結(jié)合實(shí)際、凸顯動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的快速測(cè)定工作的特色，在保持與現(xiàn)行法律法規(guī)和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致的前提下，遵循以提高方法的選擇性、定量限、準(zhǔn)確度和分析效率為總原則。2.先進(jìn)性。在本標(biāo)準(zhǔn)制定過(guò)程中，廣泛收集國(guó)家、省、市相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)以及動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的快速測(cè)定工作3.規(guī)范性。標(biāo)準(zhǔn)的編寫(xiě)應(yīng)按照國(guó)家、省市以及促進(jìn)會(huì)對(duì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理的相關(guān)規(guī)定，規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)格式。4.可操作性。充分考慮動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的提高標(biāo)準(zhǔn)普適性，增強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)可操作性。（二）標(biāo)準(zhǔn)編制依據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)的編制主要依據(jù)和參考了以下法律法規(guī)和文件：GB/T21317-2007動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法與高效液相色譜法—9—SN/T2748-2010進(jìn)出口動(dòng)物源性食品中多肽類獸藥殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法SN/T2222-2008進(jìn)出口動(dòng)物源性食品中糖皮質(zhì)激素類獸藥殘留量檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法007-2020動(dòng)物源性食品中多獸藥殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法廣東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)T/GDNB254-2024動(dòng)物源性食品中多類獸藥殘留的測(cè)定及混檢快篩法河北省食品工業(yè)協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)T/HBFIA0023-2021動(dòng)物源性食品及飼料中多種類獸藥殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法廈門市食品安全工作聯(lián)合會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)T/XMSSAL0145-2025供廈食品動(dòng)物源性食品中129種獸藥藥殘留的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法五、標(biāo)準(zhǔn)框架和內(nèi)容說(shuō)明（一）標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)GB1.1《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》、GB/T20001.4-2015《標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則第4部分：試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)》、GB/T27404-2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢號(hào)）等相關(guān)文件的要求和規(guī)定，依據(jù)動(dòng)物源性食品中多種類獸藥—10—?dú)埩袅康目焖贉y(cè)定的實(shí)際情況及需求，從范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語(yǔ)和定義、原理、試劑和材料、儀器、試樣制備、分析步驟、結(jié)果計(jì)算、精密度和其他等11個(gè)方面，為保障動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的快速測(cè)定方法的實(shí)施提出了明確的要求，充分體現(xiàn)了本標(biāo)準(zhǔn)的前瞻性和引導(dǎo)性。本標(biāo)準(zhǔn)框架結(jié)構(gòu)和主要技術(shù)內(nèi)容見(jiàn)下表。1類、β-受體激動(dòng)劑、四環(huán)素類、酰胺醇類、大環(huán)內(nèi)酯類、2345678—11—9（二）標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容1.標(biāo)準(zhǔn)的范圍本文件動(dòng)物肌肉、內(nèi)臟、蛋等動(dòng)物源性食品中多種類獸藥殘留量的測(cè)定，其他動(dòng)物源性食品可參照?qǐng)?zhí)行。2.規(guī)范性引用文件明確本標(biāo)準(zhǔn)所引用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和文件。3.術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒(méi)有術(shù)語(yǔ)和定義。4.原理提出了方法原理為試樣用8mL0.2%甲酸乙腈水溶液提取，經(jīng)過(guò)濾和離心后，上清液通過(guò)在分散萃取和固相萃取的基礎(chǔ)上采用針筒式凈化柱過(guò)濾凈化處理，凈化液用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量分析。5.試劑和材料列出檢測(cè)方法所需的試劑、溶液配制、標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)溶液配—12—（1）試劑：提出了監(jiān)測(cè)方法所需試劑甲醇、甲酸、乙腈、乙酸銨、甲酸銨及其具體要求。的5mmol/L乙酸銨溶液及其具體要求。（3）標(biāo)準(zhǔn)品：提出了磺胺類、喹諾酮類、β-受體激動(dòng)劑、硝基咪唑類、抗球蟲(chóng)類、皮質(zhì)類激素、青霉素類、抗病毒藥物等標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)品及其具體要求，并要求純度≥95%。（4）標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：提出了標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1mg/mL）、中間溶液及其具體要求。（5）材料：提出了棕色容量瓶、棕色儲(chǔ)液瓶、具塞離心管、Clean-upcolumn凈化柱、有機(jī)濾頭、進(jìn)樣瓶及其具體要求。6.儀器列出檢測(cè)方法所需的儀器要求，包括了液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、分析天平、組織搗碎機(jī)、高速冷凍離心機(jī)、漩渦混合器、超聲波清洗器、超純水機(jī)及其具體參數(shù)。7.試樣制備給出檢測(cè)方法中豬肉、豬肝、雞肉、雞蛋、牛肉樣品抽取、制備和保存應(yīng)按NY/T3304-2018中畜禽產(chǎn)品類樣品制備與保存8.分析步驟—13—從前處理（提取、凈化、配制機(jī)制匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液）、測(cè)定（液相色譜參考條件、質(zhì)譜參考條件）、繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線、定性及定量、試樣溶液的測(cè)定、平行試驗(yàn)、空白試驗(yàn)等方面提出具體檢測(cè)方法及步驟要求。9.結(jié)果計(jì)算列出試樣中各化合物的殘留量（以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)）的計(jì)算公式。10.精密度提出重復(fù)性限（r）和再現(xiàn)性限（R）的資料性要求。11.其他列出檢測(cè)方法對(duì)豬肉、豬肝、雞肉、雞蛋、牛肉中多種類獸藥化合物的定量限。六、重大意見(jiàn)分歧的處理本標(biāo)準(zhǔn)的編寫(xiě)過(guò)程無(wú)重大分歧意見(jiàn)產(chǎn)生。七、采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)情況未采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。八、與現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系目前雖有與本標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但是，這些標(biāo)準(zhǔn)涉及的方法因各自的樣品前處理、提取、凈化以及檢測(cè)方法等過(guò)程存在不同，檢測(cè)結(jié)果也不盡相同。本次團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制定所涉及的檢測(cè)方法，采用新型高分子材料制備而成的Clean-upLPAS柱，快速過(guò)濾凈化多種動(dòng)物源性食品，結(jié)合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法建立了一種可以同時(shí)快速、準(zhǔn)確、高效檢測(cè)22種磺胺類、9種喹—14—諾酮類、9種β-受體激動(dòng)劑、4種四環(huán)素類、4種酰胺醇類、3種大環(huán)內(nèi)酯類、2種鎮(zhèn)靜類、2種林可胺類抗生素以及硝基咪唑類、抗球蟲(chóng)類、皮質(zhì)類激素、青霉素類、抗病毒藥物各1種，共13種類61種獸藥殘留的高通量檢測(cè)方法。該檢測(cè)方法在前處理中減少了用鹽反萃、液體轉(zhuǎn)移、二次離心等步驟，更為簡(jiǎn)單快捷，且其中的凈化法所消耗試劑、耗材、儀器設(shè)備更少，卻能同時(shí)檢測(cè)不同動(dòng)物食品中的多種類獸藥，大大降低了檢測(cè)的經(jīng)濟(jì)成本和時(shí)間成本，減少了廢液的產(chǎn)生，對(duì)環(huán)境和檢測(cè)人員健康更加友好，對(duì)人