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第第頁人教版高考生物總復習《動物細胞工程》專項測試卷帶答案動物細胞融合技術與單克隆抗體Ⅰ.必備知識,緊扣教材1.參考教材P48-相關信息,滅活是指用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力,但并不破壞它們的抗原結構。滅活病毒誘導細胞融合的原理是什么?圖2-16米爾斯坦和科勒制備單克隆抗體過程的示意圖圖2-16米爾斯坦和科勒制備單克隆抗體過程的示意圖2.參考圖2-15和圖2-16米爾斯坦和科勒制備單克隆抗體過程的示意圖,請嘗試描述96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞的原理是什么?3.閱讀資料,結合圖片,回答以下問題。資料1用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”,在妊娠第8天就可以作出診斷,這比原來的診斷方法提前了10d左右,可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對胎兒造成不利影響。該方法檢測的準確率在90%以上。資料2使用高效的細胞毒素類藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞。但細胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害,這限制了它在臨床上的應用??贵w一藥物偶聯(lián)物(antibody-drugconjugates,ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合,實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成,它的作用機制如下圖所示。(1)ADC的抗體和藥物各具有什么作用?(2)除了細胞毒素,還有哪些物質理論上可以作為ADC偶聯(lián)的藥物?(3)單克隆抗體診斷試劑盒和ADC在臨床應用上各具有什么優(yōu)勢?4.下列關于動物細胞融合與植物體細胞雜交比較的敘述,錯誤的是()A.它們的原理都涉及細胞膜的流動性B.都可以用電融合法或PEG融合法誘導融合C.融合前都需用纖維素酶或果膠酶處理細胞D.前者主要為了獲得細胞產(chǎn)品,后者主要為了獲得雜種植株5.科學家以SARS病毒的核衣殼蛋白為抗原,制備出了單克隆抗體。下列相關敘述,正確的是()A.利用該單克隆抗體可以診斷是否感染SARS病毒B.體外培養(yǎng)單個B淋巴細胞可以獲得針對SARS病毒的單克隆抗體C.將等量B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合,經(jīng)誘導后融合的細胞即為雜交瘤細胞D.將純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內,從小鼠血清中分離出的抗體為單克隆抗體Ⅱ、真題演練,提升能力1.(2023·北京)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH,有關制備過程的敘述不正確的是()A.需要使用動物細胞培養(yǎng)技術B.需要制備用PTH免疫的小鼠C.利用抗原-抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞2.(多選·2025·黑吉遼蒙卷)下圖是制備抗白細胞介素-6(IL-6)單克隆抗體的示意圖。下列敘述錯誤的是(
)A.步驟①給小鼠注射IL-6后,應從脾中分離篩選T淋巴細胞B.步驟②在脾組織中加入胃蛋白酶,制成單細胞懸液C.步驟③加入滅活病毒或PEG誘導細胞融合,體現(xiàn)了細胞膜的流動性D.步驟④經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測篩選出了雜交瘤細胞3.(2025·甘肅)腫瘤壞死因子α(TNF-α)是一種細胞因子,高濃度時可以引發(fā)疾病。研究者利用細胞工程技術制備了TNF-α的單克隆抗體,用于治療由TNF-α引發(fā)的疾病,制備流程如下圖。下列敘述正確的是()A.①是從小鼠的血液中獲得的骨髓瘤細胞B.②含未融合細胞、同種核及異種核融合細胞C.③需用特定培養(yǎng)基篩選得到大量的雜交瘤細胞D.④需在體外或小鼠腹腔進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測Ⅲ.自主作業(yè),個性發(fā)展1.根據(jù)你的理解,繪制本節(jié)內容的概念圖。2.可以從近5年全國各地真題卷中尋找一道你認為最經(jīng)典的與本節(jié)內容相關的題,嘗試分析考查的必備知識是什么?參考答案Ⅰ.必備知識,緊扣教材1.病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細胞互相凝聚,細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布,細胞膜打開,細胞發(fā)生融合。2.細胞DNA合成一般有兩條途徑。主途徑是由糖和氨基酸合成核苷酸,進而合成DNA,葉酸作為重要的輔酶參與這一合成過程。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)次黃嘌呤磷酸核糖轉化酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)的催化作用合成DNA。細胞融合的選擇培養(yǎng)基中有三種關鍵成分:次黃嘌呤(hypoxanthine,H)、氨基蝶呤(aminopterin,A)和胸腺嘧啶核苷(thymidine,T),所以取三者的字頭稱為HAT培養(yǎng)基。氨基蝶呤是葉酸的拮抗劑,可阻斷瘤細胞利用正常途徑合成DNA,而融合所用的瘤細胞是經(jīng)毒性培養(yǎng)基選出的HGPRT-細胞株,所以不能在該培養(yǎng)基中生長。只有融合細胞具有親代雙方的遺傳性能,可在HAT培養(yǎng)基中長期存活與繁殖。3.(1)抗體主要發(fā)揮靶向運輸作用,即通過特異性結合靶細胞表面的抗原,將連接的藥物輸送到靶細胞;藥物發(fā)揮治療效應,如殺傷靶細胞。(2)可以用放射性同位素標記單克隆抗體進行靶向放療。一些作用于細胞信號轉導通路的藥物可以通過阻斷腫瘤細胞的信號通路來抑制其生長,理論上也可以將這些藥物與單克隆抗體結合進行治療。(3)單克隆抗體診斷試劑盒中的單克隆抗體只與特定的抗原反應,因此檢測的特異性和靈敏度大大提高;生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細胞可以傳代培養(yǎng)、冷凍保存和復蘇利用,有利于控制產(chǎn)品的質量和標準化生產(chǎn)診斷試劑盒。ADC能夠協(xié)同發(fā)揮抗體特異性識別的靶向作用和細胞毒素對腫瘤細胞的殺傷作用,因此它在臨床上具有靶點清楚、毒副作用小等優(yōu)點。4.C5.AⅡ、真題演練,提升能力1.【答案】D【分析】單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應,之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞,誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?!驹斀狻緼、單克隆抗體制備過程中需要對骨髓瘤細胞等進行培養(yǎng),即需要使用動物細胞培養(yǎng)技術,A正確;B、該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測PTH,故應用PTH刺激小鼠,使其產(chǎn)生相應的B細胞,B正確;C、抗原與抗體的結合具有特異性,可利用抗原-抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞,C正確;D、由于一種B細胞經(jīng)分化形成漿細胞后通常只能產(chǎn)生一種抗體,故篩選出的單個雜交瘤細胞無法分泌多種抗體,D錯誤。故選D。2.【答案】ABD【分析】單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應,之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞;誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?!驹斀狻緼、步驟①給小鼠注射IL-6后,應從小鼠的脾中獲取B淋巴細胞,A錯誤;B、步驟②需要在組織中加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶,使其成為單細胞,進而制成懸液,B錯誤;C、步驟③是誘導細胞融合過程,該過程可加入滅活病毒或PEG誘導,細胞融合的過程體現(xiàn)了細胞膜的流動性,C正確;D、步驟④是在選擇培養(yǎng)基上篩選得到的雜交瘤細胞,該過程得到的雜交瘤細胞不一定能產(chǎn)生所需抗體,步驟⑤經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測篩選出了分泌所需抗體的雜交瘤細胞,D錯誤。故選ABD。3.【答案】B【分析】單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應,之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞;誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?!驹斀狻緼、骨髓瘤細胞應該從骨髓中獲
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