畜禽重大疫病膠體金免疫層析快速檢測(cè)技術(shù)規(guī)范范圍本文件規(guī)定了畜禽重大疫病膠體金免疫層析快速檢測(cè)技術(shù)的技術(shù)要求、檢測(cè)步驟、結(jié)果判定及質(zhì)量控制等內(nèi)容。本文件適用于豬瘟、豬藍(lán)耳病、禽流感、雞傳染性法氏囊病等畜禽重大疫病的快速篩查檢測(cè)。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T27405-2024實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范動(dòng)物疫病診斷GB/T35823-2024動(dòng)物疫病檢測(cè)試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)要求SN/T5488-2024進(jìn)出口動(dòng)物疫病診斷技術(shù)規(guī)程膠體金免疫層析法ISO17025:2023檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。膠體金免疫層析技術(shù)（ColloidalGoldImmunochromatography）以硝酸纖維素膜為固相載體，通過(guò)毛細(xì)作用使樣本中的抗原或抗體與膜上包被的特異性抗體或抗原結(jié)合，再通過(guò)膠體金標(biāo)記物顯色，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物質(zhì)快速檢測(cè)的技術(shù)。檢測(cè)線(xiàn)（TestLine,T線(xiàn)）硝酸纖維素膜上包被的特異性抗原或抗體區(qū)域，用于捕獲樣本中的目標(biāo)物質(zhì)。質(zhì)控線(xiàn)（ControlLine,C線(xiàn)）硝酸纖維素膜上包被的二抗或其他控制物質(zhì)區(qū)域，用于驗(yàn)證檢測(cè)過(guò)程的有效性。假陽(yáng)性率（FalsePositiveRate）檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，但實(shí)際樣本中不含目標(biāo)物質(zhì)的概率。假陰性率（FalseNegativeRate）檢測(cè)結(jié)果為陰性，但實(shí)際樣本中含有目標(biāo)物質(zhì)的概率?；疽髾z測(cè)環(huán)境檢測(cè)環(huán)境對(duì)于畜禽重大疫病膠體金免疫層析快速檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。檢測(cè)應(yīng)在符合GB19489要求的生物安全二級(jí)（BSL-2）實(shí)驗(yàn)室或同等條件下開(kāi)展。生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室具備一系列嚴(yán)格的防護(hù)設(shè)施和規(guī)范的操作流程，能夠有效控制生物危害。在這樣的環(huán)境中進(jìn)行檢測(cè)，可最大程度避免不同樣本之間、樣本與外界環(huán)境之間的交叉污染。因?yàn)樾笄菀卟颖究赡軘y帶各種病原體，一旦發(fā)生交叉污染，會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差，無(wú)法真實(shí)反映樣本情況，進(jìn)而影響疫病的診斷和防控，所以嚴(yán)格的環(huán)境要求是保障檢測(cè)質(zhì)量的基礎(chǔ)。人員要求檢測(cè)人員的專(zhuān)業(yè)素養(yǎng)和操作技能直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢測(cè)人員應(yīng)具備獸醫(yī)或生物學(xué)相關(guān)專(zhuān)業(yè)背景，這是因?yàn)樾笄菀卟z測(cè)涉及到動(dòng)物病理學(xué)、免疫學(xué)等多方面的專(zhuān)業(yè)知識(shí)，具備相關(guān)專(zhuān)業(yè)背景的人員能夠更好地理解檢測(cè)原理和流程。同時(shí)，檢測(cè)人員必須接受過(guò)膠體金免疫層析技術(shù)操作培訓(xùn)。通過(guò)系統(tǒng)培訓(xùn)，他們能夠熟練掌握檢測(cè)卡的使用方法、樣本處理技巧、結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)等關(guān)鍵操作環(huán)節(jié)。只有經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)的人員，才能?chē)?yán)格按照規(guī)范進(jìn)行檢測(cè)，減少人為誤差，確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性和一致性，為畜禽疫病的精準(zhǔn)防控提供有力支持。設(shè)備與材料合適的設(shè)備與材料是順利完成畜禽重大疫病膠體金免疫層析快速檢測(cè)的保障。設(shè)備與材料主要包括膠體金免疫層析檢測(cè)卡（含配套試劑），它是檢測(cè)的核心工具，其質(zhì)量和性能直接影響檢測(cè)效果。移液器（10μL～1000μL）用于準(zhǔn)確量取樣本和試劑，保證各成分的比例準(zhǔn)確，避免因量取不準(zhǔn)確而影響檢測(cè)結(jié)果。離心機(jī)（相對(duì)離心力≥1000×g）可對(duì)樣本進(jìn)行離心處理，去除雜質(zhì)，使樣本更純凈，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。生物安全柜或超凈工作臺(tái)能為檢測(cè)操作提供一個(gè)相對(duì)無(wú)菌的環(huán)境，防止外界微生物污染樣本和試劑。計(jì)時(shí)器則用于精確控制檢測(cè)時(shí)間，確保每個(gè)檢測(cè)步驟在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成，保證檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。檢測(cè)原理膠體金免疫層析技術(shù)整體原理膠體金免疫層析技術(shù)是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合反應(yīng)的快速檢測(cè)技術(shù)。它以硝酸纖維素膜作為固相載體，利用其良好的吸附性能和毛細(xì)作用。在檢測(cè)過(guò)程中，樣本在毛細(xì)作用下沿著硝酸纖維素膜向前移動(dòng)。樣本中的抗原或抗體在移動(dòng)過(guò)程中，會(huì)與膜上預(yù)先包被的特異性抗體或抗原發(fā)生特異性結(jié)合。同時(shí)，膠體金顆粒作為標(biāo)記物，與相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合形成復(fù)合物。當(dāng)這些復(fù)合物移動(dòng)到檢測(cè)線(xiàn)（T線(xiàn)）時(shí)，若樣本中存在目標(biāo)物質(zhì)，就會(huì)與檢測(cè)線(xiàn)上的包被物質(zhì)進(jìn)一步結(jié)合，使膠體金顆粒聚集，從而顯示出肉眼可見(jiàn)的顏色變化，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物質(zhì)的快速檢測(cè)。而質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）則通過(guò)與特定的二抗或其他控制物質(zhì)結(jié)合，驗(yàn)證整個(gè)檢測(cè)過(guò)程的有效性，確保檢測(cè)結(jié)果的可靠。抗原-抗體結(jié)合機(jī)制抗原-抗體結(jié)合是膠體金免疫層析技術(shù)的核心基礎(chǔ)?？乖悄軌虼碳C(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體內(nèi)外結(jié)合的物質(zhì)?？贵w則是機(jī)體免疫系統(tǒng)受抗原刺激后，由淋巴細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白。在檢測(cè)卡中，硝酸纖維素膜上包被的特異性抗體或抗原具有高度的特異性，只能與對(duì)應(yīng)的目標(biāo)抗原或抗體結(jié)合。這種特異性結(jié)合是基于抗原和抗體分子表面的空間結(jié)構(gòu)和化學(xué)基團(tuán)的互補(bǔ)性，就像鑰匙和鎖的關(guān)系一樣，只有匹配的抗原和抗體才能緊密結(jié)合，從而保證了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和特異性，能夠準(zhǔn)確識(shí)別樣本中的目標(biāo)物質(zhì)。膠體金顯色原理膠體金是由氯金酸（HAuCl?）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。膠體金顆粒表面帶有負(fù)電荷，能夠與蛋白質(zhì)等生物大分子通過(guò)靜電作用相結(jié)合。在膠體金免疫層析技術(shù)中，膠體金標(biāo)記的特異性抗體或抗原隨著樣本在膜上移動(dòng)。當(dāng)?shù)竭_(dá)檢測(cè)線(xiàn)或質(zhì)控線(xiàn)時(shí)，與相應(yīng)的物質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，使膠體金顆粒聚集。由于金顆粒具有獨(dú)特的顏色，大量聚集后會(huì)呈現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的紅色或紫紅色線(xiàn)條。通過(guò)觀(guān)察檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)的顯色情況，就可以判斷樣本中是否存在目標(biāo)物質(zhì)以及檢測(cè)過(guò)程是否有效，為畜禽重大疫病的快速篩查提供了直觀(guān)、便捷的檢測(cè)手段。檢測(cè)材料與試劑檢測(cè)卡應(yīng)包含以下組件：樣本墊樣本墊作為檢測(cè)卡的關(guān)鍵組件，其選材和制作工藝都極為講究。它多由特殊的多孔材料精心制成，這種材料具有獨(dú)特的孔隙結(jié)構(gòu)，能夠快速且均勻地吸收樣本。當(dāng)樣本接觸到樣本墊時(shí)，憑借其內(nèi)部精細(xì)的纖維結(jié)構(gòu)以及特定的化學(xué)性質(zhì)，可以高效地過(guò)濾樣本里的細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)沉淀等各類(lèi)雜質(zhì)。這些雜質(zhì)若不加以去除，會(huì)干擾后續(xù)的檢測(cè)反應(yīng)，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。經(jīng)過(guò)樣本墊的過(guò)濾，保證了后續(xù)檢測(cè)樣本的純凈度，為準(zhǔn)確檢測(cè)畜禽重大疫病筑牢了基礎(chǔ)，使得檢測(cè)結(jié)果能夠真實(shí)、可靠地反映畜禽的健康狀況。結(jié)合墊結(jié)合墊在檢測(cè)卡中發(fā)揮著舉足輕重的作用。它預(yù)先通過(guò)特殊工藝包被了用膠體金標(biāo)記的特異性抗體。這些特異性抗體具有高度的識(shí)別精準(zhǔn)度，能夠特異性地識(shí)別并結(jié)合樣本中的目標(biāo)抗原。當(dāng)樣本流經(jīng)結(jié)合墊時(shí)，目標(biāo)抗原與膠體金標(biāo)記的特異性抗體迅速發(fā)生特異性結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物。這一復(fù)合物的形成是后續(xù)在檢測(cè)線(xiàn)上發(fā)生顯色反應(yīng)的必要前提條件。只有成功形成復(fù)合物，才能在檢測(cè)線(xiàn)上通過(guò)特定的化學(xué)反應(yīng)呈現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的顏色變化，從而判斷樣本中是否存在目標(biāo)抗原。硝酸纖維素膜硝酸纖維素膜堪稱(chēng)檢測(cè)卡的核心區(qū)域，其表面經(jīng)過(guò)精心處理，包被有檢測(cè)線(xiàn)（T線(xiàn)）和質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）。檢測(cè)線(xiàn)的設(shè)計(jì)是為了捕獲抗原-抗體復(fù)合物，當(dāng)復(fù)合物流經(jīng)檢測(cè)線(xiàn)時(shí)，會(huì)與檢測(cè)線(xiàn)上預(yù)先包被的物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，通過(guò)顯色反應(yīng)直觀(guān)地判斷樣本中是否存在目標(biāo)抗原。如果檢測(cè)線(xiàn)顯色，說(shuō)明樣本中可能存在目標(biāo)抗原；若不顯色，則可能不存在。而質(zhì)控線(xiàn)的作用至關(guān)重要，它用于驗(yàn)證整個(gè)檢測(cè)過(guò)程是否有效。只有當(dāng)質(zhì)控線(xiàn)正常顯色時(shí)，才表明檢測(cè)卡處于正常工作狀態(tài)，檢測(cè)結(jié)果是可信的。若質(zhì)控線(xiàn)不顯色，意味著檢測(cè)過(guò)程可能出現(xiàn)了問(wèn)題，檢測(cè)結(jié)果不可靠。吸水墊吸水墊位于檢測(cè)卡的末端，看似簡(jiǎn)單，卻有著不可或缺的功能。在樣本流經(jīng)檢測(cè)卡的過(guò)程中，吸水墊能夠迅速吸收多余的樣本和試劑。它就像一個(gè)精準(zhǔn)的“引導(dǎo)者”，引導(dǎo)樣本和試劑有序地向前流動(dòng)，防止樣本和試劑出現(xiàn)回流或者溢出的情況。一旦發(fā)生回流或溢出，不僅會(huì)干擾檢測(cè)過(guò)程，還可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。同時(shí)，吸水墊還能維持檢測(cè)卡內(nèi)部的濕度平衡，為檢測(cè)反應(yīng)提供一個(gè)穩(wěn)定的環(huán)境，進(jìn)一步保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。配套試劑樣本提取液樣本提取液是檢測(cè)過(guò)程中不可或缺的配套試劑，其成分和配比都經(jīng)過(guò)精心研究和優(yōu)化。它的主要作用是裂解樣本中的病毒顆粒。樣本中可能存在的病毒被一層堅(jiān)固的外殼包裹著，樣本提取液中的特定化學(xué)成分能夠破壞病毒的結(jié)構(gòu)，就像一把精準(zhǔn)的“鑰匙”打開(kāi)病毒的“外殼”，釋放出其中的抗原。這些抗原一旦被釋放出來(lái)，就能夠與檢測(cè)卡上的特異性抗體結(jié)合，從而被檢測(cè)出來(lái)。樣本提取液的質(zhì)量直接影響到抗原的釋放效果，進(jìn)而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，為準(zhǔn)確診斷畜禽是否感染重大疫病提供了關(guān)鍵依據(jù)。陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照是含有已知濃度目標(biāo)物質(zhì)的樣本，在檢測(cè)過(guò)程中扮演著重要的驗(yàn)證角色。使用陽(yáng)性對(duì)照可以全面驗(yàn)證檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度和準(zhǔn)確性。靈敏度是指檢測(cè)系統(tǒng)能夠檢測(cè)到的最小目標(biāo)物質(zhì)濃度，準(zhǔn)確性則是指檢測(cè)結(jié)果與真實(shí)情況的符合程度。如果陽(yáng)性對(duì)照能夠按照預(yù)期在檢測(cè)卡上顯示出清晰、明顯的相應(yīng)結(jié)果，說(shuō)明檢測(cè)系統(tǒng)工作正常，能夠有效地檢測(cè)出目標(biāo)物質(zhì)。這就為實(shí)際樣本的檢測(cè)結(jié)果提供了一個(gè)可靠的參考標(biāo)準(zhǔn)，讓我們可以更加準(zhǔn)確地判斷實(shí)際樣本中是否存在目標(biāo)物質(zhì)以及其濃度大致范圍。陰性對(duì)照陰性對(duì)照是不含目標(biāo)物質(zhì)的樣本，在檢測(cè)時(shí)使用陰性對(duì)照主要是為了排除假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)。假陽(yáng)性結(jié)果是指樣本中實(shí)際上不存在目標(biāo)物質(zhì)，但檢測(cè)結(jié)果卻顯示為陽(yáng)性，這會(huì)給后續(xù)的診斷和處理帶來(lái)極大的困擾。如果陰性對(duì)照在檢測(cè)卡上未顯示出任何陽(yáng)性反應(yīng)，表明檢測(cè)過(guò)程沒(méi)有受到非特異性因素的干擾。非特異性因素可能包括樣本中的其他雜質(zhì)、檢測(cè)環(huán)境的污染等。這說(shuō)明檢測(cè)系統(tǒng)具有良好的特異性，能夠準(zhǔn)確區(qū)分含有目標(biāo)物質(zhì)的樣本和不含目標(biāo)物質(zhì)的樣本，從而確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性，為畜禽疫病的準(zhǔn)確診斷提供有力保障。檢測(cè)步驟樣本采集與處理血液樣本在采集畜禽血液樣本時(shí)，精準(zhǔn)選取合適的靜脈部位至關(guān)重要。一般常選頸部靜脈或翅靜脈等，采血人員需具備熟練的操作技巧，避免因多次穿刺給畜禽造成不必要的傷害。采集完成后，要迅速將血液置于離心機(jī)中，以合適的轉(zhuǎn)速和時(shí)間進(jìn)行離心操作，利用離心力的作用實(shí)現(xiàn)血清與血細(xì)胞的分離。待分離結(jié)束后，需格外小心地吸取上層澄清的血清，此血清純凈度高，能有效避免血細(xì)胞等雜質(zhì)對(duì)后續(xù)檢測(cè)的干擾，將其作為檢測(cè)樣本可確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。組織樣本針對(duì)組織樣本的采集，要仔細(xì)選取畜禽具有病變特征的組織部位，如出現(xiàn)腫塊、變色等異常的區(qū)域。將采集到的組織放入干凈且滅菌的容器中，加入適量合適的樣本提取液，提取液的成分和比例需根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目和要求精準(zhǔn)調(diào)配。然后利用勻漿設(shè)備充分研磨，使組織破碎并與提取液充分混合，讓組織中的目標(biāo)物質(zhì)充分釋放到提取液中。隨后進(jìn)行離心處理，離心后取上層澄清液體，該液體中目標(biāo)物質(zhì)含量相對(duì)較高，可作為檢測(cè)使用的樣本。拭子樣本使用無(wú)菌拭子采集樣本時(shí)，要分別針對(duì)畜禽的口腔、鼻腔或泄殖腔等部位，動(dòng)作輕柔地蘸取分泌物，避免損傷畜禽黏膜。采集完成后，將帶有分泌物的拭子迅速浸入樣本提取液中，通過(guò)反復(fù)擠壓、攪拌等方式，使分泌物充分溶解于提取液中，確保目標(biāo)物質(zhì)能最大程度地轉(zhuǎn)移到提取液里。之后進(jìn)行離心，取離心后的上清液作為最終的檢測(cè)樣本，上清液較為純凈，能提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。檢測(cè)操作首先將檢測(cè)卡從冷藏環(huán)境中取出，放置在室溫下一段時(shí)間，使其恢復(fù)至室溫，避免溫度差異對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。打開(kāi)包裝，取出檢測(cè)卡平放于干凈、平整的桌面。用移液器準(zhǔn)確吸取處理后的樣本上清液100μL，緩慢且均勻地滴加至檢測(cè)卡的加樣孔中，防止液體濺出。滴加完成后，將檢測(cè)卡在室溫下靜置10-15分鐘，此過(guò)程中要避免震動(dòng)檢測(cè)卡。最后仔細(xì)觀(guān)察檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)的顯色情況，根據(jù)顯色結(jié)果判斷檢測(cè)樣本是否含有目標(biāo)物質(zhì)。結(jié)果判定陽(yáng)性結(jié)果當(dāng)檢測(cè)工作完成后觀(guān)察檢測(cè)卡，若發(fā)現(xiàn)檢測(cè)卡上的檢測(cè)線(xiàn)（T線(xiàn)）與質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）均清晰且明顯地顯色，并且經(jīng)過(guò)仔細(xì)比對(duì)，T線(xiàn)呈現(xiàn)出的顏色深度大于或等于C線(xiàn)時(shí)，就可以明確判定該檢測(cè)樣本的檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。這一結(jié)果有著重要的指示意義，它表明樣本中很可能存在目標(biāo)病原體或者抗原。不過(guò)，陽(yáng)性結(jié)果也并非絕對(duì)，后續(xù)可能還需要結(jié)合畜禽的臨床癥狀、流行病學(xué)調(diào)查以及其他相關(guān)檢測(cè)方法進(jìn)行綜合分析和確認(rèn)，以排除假陽(yáng)性的可能，從而更準(zhǔn)確地判斷畜禽是否真的感染了相應(yīng)疫病。陰性結(jié)果在查看檢測(cè)卡時(shí)，如果僅看到質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）出現(xiàn)顯色，而檢測(cè)線(xiàn)（T線(xiàn)）沒(méi)有任何顯色反應(yīng)，那么就可以判定該檢測(cè)樣本的檢測(cè)結(jié)果為陰性。這一結(jié)果意味著樣本中大概率不存在目標(biāo)病原體或抗原，畜禽感染相關(guān)疫病的可能性較低。但同樣需要注意的是，陰性結(jié)果也不能完全排除感染的可能性。因?yàn)榭赡艽嬖跇颖静杉划?dāng)、樣本中病原體或抗原含量過(guò)低低于檢測(cè)限等情況，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性。所以，對(duì)于陰性結(jié)果，也需要結(jié)合畜禽的實(shí)際情況進(jìn)行綜合評(píng)估。無(wú)效結(jié)果要是檢測(cè)卡上質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）未出現(xiàn)顯色情況，無(wú)論檢測(cè)線(xiàn)（T線(xiàn)）有沒(méi)有顯色，都要判定此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。質(zhì)控線(xiàn)的作用至關(guān)重要，它相當(dāng)于檢測(cè)過(guò)程的“質(zhì)檢員”，只有質(zhì)控線(xiàn)正常顯色，才能說(shuō)明檢測(cè)卡正常工作、檢測(cè)流程規(guī)范可靠。當(dāng)質(zhì)控線(xiàn)未顯色時(shí)，意味著檢測(cè)過(guò)程可能出現(xiàn)了問(wèn)題，比如檢測(cè)卡過(guò)期、保存不當(dāng)、操作失誤等。此時(shí)，需要重新采集樣本，并嚴(yán)格按照規(guī)范流程再次進(jìn)行檢測(cè)，以確保能夠得到準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)結(jié)果。質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)控為切實(shí)保障檢測(cè)質(zhì)量，在每次開(kāi)展檢測(cè)工作之際，都必須同步進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照檢測(cè)。陽(yáng)性對(duì)照的選取十分關(guān)鍵，要確保其含有已知且濃度適宜的目標(biāo)物質(zhì)。在檢測(cè)過(guò)程中，陽(yáng)性對(duì)照必須清晰顯色，這一結(jié)果能夠有力驗(yàn)證檢測(cè)系統(tǒng)具備有效檢出目標(biāo)物質(zhì)的能力，說(shuō)明檢測(cè)卡、試劑以及操作流程等各個(gè)環(huán)節(jié)均能正常發(fā)揮作用。而陰性對(duì)照則要確保不含有目標(biāo)物質(zhì)，其必須不顯色，以此防止出現(xiàn)非特異性反應(yīng)，避免因假陽(yáng)性結(jié)果干擾對(duì)樣本真實(shí)情況的判斷。倘若對(duì)照結(jié)果不符合上述要求，那么本次檢測(cè)結(jié)果應(yīng)視為無(wú)效，需重新進(jìn)行檢測(cè)，直至對(duì)照結(jié)果符合標(biāo)準(zhǔn)。室間質(zhì)控為確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，實(shí)驗(yàn)室需定期參與由權(quán)威機(jī)構(gòu)組織的室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)。室間質(zhì)評(píng)是一種外部質(zhì)量控制手段，通過(guò)將本實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果與其他實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，能夠全面、客觀(guān)地評(píng)估自身檢測(cè)水平。在對(duì)比過(guò)程中，可以清晰地發(fā)現(xiàn)自身檢測(cè)結(jié)果與其他實(shí)驗(yàn)室的差異，進(jìn)而深入分析可能存在的問(wèn)題，如檢測(cè)方法的差異、儀器設(shè)備的精度、人員操作的規(guī)范性等。針對(duì)發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題，及時(shí)采取有效的糾正措施，持續(xù)提升檢測(cè)能力，保證檢測(cè)結(jié)果符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)際需求，為畜禽疫病防控等工作提供堅(jiān)實(shí)可靠的數(shù)據(jù)支持。假陽(yáng)性與假陰性控制在檢測(cè)工作中，要嚴(yán)格控制假陽(yáng)性和假陰性情況的發(fā)生。假陽(yáng)性結(jié)果可能會(huì)誤導(dǎo)對(duì)畜禽健康狀況的判斷，導(dǎo)致不必要的恐慌和過(guò)度防控措施；而假陰性結(jié)果則可能使感染畜禽得不到及時(shí)的治療和隔離，增加疫病傳播的風(fēng)險(xiǎn)。因此，規(guī)定假陽(yáng)性率不得超過(guò)5%，假陰性率也不得超過(guò)5%。若連續(xù)出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果，這往往意味著檢測(cè)過(guò)程中可能存在某些問(wèn)題。此時(shí)，需全面檢查檢測(cè)卡質(zhì)量是否合格、試劑性能是否穩(wěn)定以及操作流程是否規(guī)范，仔細(xì)排查并排除可能存在的干擾因素，如樣本污染、環(huán)境因素等，確保檢測(cè)結(jié)果真實(shí)準(zhǔn)確，為畜禽疫病防控提供科學(xué)依據(jù)。