T細(xì)胞耗竭的分子機制及逆轉(zhuǎn)策略演講人01.02.03.04.05.目錄T細(xì)胞耗竭的分子機制及逆轉(zhuǎn)策略引言T細(xì)胞耗竭的分子機制T細(xì)胞耗竭的逆轉(zhuǎn)策略總結(jié)與展望01T細(xì)胞耗竭的分子機制及逆轉(zhuǎn)策略02引言引言在免疫學(xué)領(lǐng)域，T細(xì)胞作為適應(yīng)性免疫的核心效應(yīng)細(xì)胞，其功能狀態(tài)直接決定機體對抗病原體、清除腫瘤細(xì)胞的能力。然而，在慢性感染、腫瘤微環(huán)境等持續(xù)性抗原刺激下，T細(xì)胞會逐漸喪失效應(yīng)功能，進入一種稱為“耗竭”（exhaustion）的dysfunctional狀態(tài)。作為長期從事腫瘤免疫與慢性感染機制研究的工作者，我在實驗室中反復(fù)觀察到：晚期黑色素瘤患者的外周血T細(xì)胞、荷瘤小鼠腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TILs）均表現(xiàn)出典型的耗竭表型——PD-1、TIM-3等抑制性受體高表達(dá)，細(xì)胞因子分泌能力顯著下降，增殖能力近乎喪失，甚至出現(xiàn)凋亡抵抗。這種“精疲力竭”的T細(xì)胞不僅無法有效清除病原體或腫瘤，反而成為免疫逃逸的關(guān)鍵幫兇。引言近年來，以免疫檢查點抑制劑（ICIs）為代表的免疫治療策略通過逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耗竭在腫瘤治療中取得突破，但仍有部分患者響應(yīng)不佳或產(chǎn)生耐藥，這提示我們對T細(xì)胞耗竭的分子機制仍需深入解析，其逆轉(zhuǎn)策略也需不斷優(yōu)化。本文將從T細(xì)胞耗竭的表型特征出發(fā)，系統(tǒng)闡述其分子機制，并基于機制探討多維度、個體化的逆轉(zhuǎn)策略，以期為臨床免疫治療提供更堅實的理論基礎(chǔ)和更精準(zhǔn)的干預(yù)靶點。03T細(xì)胞耗竭的分子機制T細(xì)胞耗竭的分子機制T細(xì)胞耗竭并非簡單的功能衰退，而是一個涉及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)異常、轉(zhuǎn)錄程序重編程、代謝紊亂、表觀遺傳修飾及微環(huán)境互作的復(fù)雜動態(tài)過程。其核心特征是“漸進性功能喪失”，即從效應(yīng)功能受損到終末耗竭的連續(xù)譜系變化，不同階段的耗竭T細(xì)胞（Tex）具有獨特的分子標(biāo)志物和功能特征。1持續(xù)性抗原刺激：耗竭的“始動因素”T細(xì)胞耗竭的根源在于抗原的持續(xù)存在。在急性感染（如流感病毒）中，病原體被清除后，抗原刺激迅速終止，T細(xì)胞分化為記憶細(xì)胞，長期維持免疫監(jiān)視功能；而在慢性感染（如HIV、HBV）或腫瘤中，抗原呈遞細(xì)胞（APCs）持續(xù)提呈抗原肽-MHC復(fù)合物，通過T細(xì)胞受體（TCR）向T細(xì)胞傳遞慢性激活信號。這種“永不停止的喚醒信號”導(dǎo)致T細(xì)胞長期處于活化狀態(tài)，如同“一根被過度拉伸的橡皮筋”，逐漸失去彈性。從分子機制看，持續(xù)性TCR信號通過以下途徑啟動耗竭程序：-TCR信號通路過度激活：慢性抗原刺激使CD4+T細(xì)胞輔助信號不足（如CD80/CD86-CD28共刺激減弱），而TCR信號強度異常升高，導(dǎo)致ZAP70、LAT、PLCγ1等信號分子持續(xù)磷酸化，激活下游MAPK、NF-κB等通路。這種“失衡的信號傳導(dǎo)”會誘導(dǎo)T細(xì)胞周期阻滯（如p21、p27表達(dá)升高）和代謝應(yīng)激，為后續(xù)耗竭相關(guān)基因表達(dá)奠定基礎(chǔ)。1持續(xù)性抗原刺激：耗竭的“始動因素”-抗原呈遞細(xì)胞的異常調(diào)控：腫瘤微環(huán)境中的樹突狀細(xì)胞（DCs）常處于未成熟狀態(tài)，共刺激分子（如CD80/CD86）表達(dá)低下，而免疫抑制分子（如PD-L1、IDO）表達(dá)升高，導(dǎo)致T細(xì)胞接受“不完全激活信號”，更易向耗竭方向分化。2抑制性受體信號通路：耗竭的“剎車踩到底”抑制性受體的異常高表達(dá)及其信號通路過度激活是T細(xì)胞耗竭的核心特征。這些受體如同“免疫系統(tǒng)的剎車”，在慢性刺激下持續(xù)被激活，最終導(dǎo)致T細(xì)胞功能“鎖死”。2抑制性受體信號通路：耗竭的“剎車踩到底”2.1免疫檢查點受體的表達(dá)與功能-PD-1（CD279）：作為最具代表性的抑制性受體，PD-1在耗竭Tex中高表達(dá)，其配體PD-L1廣泛分布于腫瘤細(xì)胞、髓系抑制細(xì)胞（MDSCs）等細(xì)胞表面。PD-1與PD-L1結(jié)合后，通過胞內(nèi)免疫受體酪氨酸抑制基序（ITIM）和免疫受體酪氨酸轉(zhuǎn)換基序（ITSM）招募SHP-1/SHP-2磷酸酶，使TCR信號復(fù)合物中的CD3ζ鏈、ZAP70等分子去磷酸化，阻斷TCR信號傳導(dǎo)。值得注意的是，PD-1不僅抑制初始T細(xì)胞活化，更通過誘導(dǎo)“轉(zhuǎn)錄耗竭程序”使效應(yīng)T細(xì)胞不可逆地進入耗竭狀態(tài)。-CTLA-4（CD152）：主要表達(dá)在活化的T細(xì)胞和Treg細(xì)胞上，通過與CD80/CD86競爭性結(jié)合，抑制CD28提供的共刺激信號。在慢性感染中，CTLA-4的高表達(dá)會進一步削弱T細(xì)胞的活化能力，其信號通路可通過抑制PI3K-Akt通路促進T細(xì)胞凋亡。2抑制性受體信號通路：耗竭的“剎車踩到底”2.1免疫檢查點受體的表達(dá)與功能-TIM-3（CD366）：表達(dá)于終末耗竭Tex上，與配體Galectin-9、HMGB1等結(jié)合后，通過誘導(dǎo)caspase-1介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡和抑制STAT1/STAT4信號通路，抑制Th1型細(xì)胞因子（如IFN-γ、TNF-α）分泌。TIM-3常與PD-1共表達(dá)，形成“雙重抑制”，標(biāo)志T細(xì)胞功能不可逆喪失。-LAG-3（CD223）：通過與MHC-II類分子結(jié)合，抑制TCR信號傳導(dǎo)和T細(xì)胞增殖，同時促進Treg細(xì)胞擴增。在黑色素瘤中，LAG-3高表達(dá)與PD-1形成協(xié)同抑制，是聯(lián)合免疫治療的重要靶點。2抑制性受體信號通路：耗竭的“剎車踩到底”2.2抑制性受體的協(xié)同效應(yīng)多種抑制性受體并非獨立作用，而是形成“抑制性受體網(wǎng)絡(luò)”。例如，PD-1+TIM-3+雙陽性T細(xì)胞較單一受體陽性細(xì)胞具有更嚴(yán)重的功能缺陷；而PD-1+LAG-3+T細(xì)胞的增殖能力和細(xì)胞因子分泌能力幾乎完全喪失。這種“協(xié)同抑制”機制使得單一靶點阻斷療效有限，成為聯(lián)合免疫治療的理論基礎(chǔ)。3轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)：耗竭的“程序重編碼”T細(xì)胞耗竭的本質(zhì)是轉(zhuǎn)錄程序的不可逆重編程，涉及多個轉(zhuǎn)錄因子（TFs）的動態(tài)平衡與異常表達(dá)。這些TFs如同“基因表達(dá)的指揮家”，通過調(diào)控下游靶基因表達(dá)，決定T細(xì)胞的命運走向。3轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)：耗竭的“程序重編碼”3.1耗竭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的激活與功能-TOX家族：TOX（Thymocyteselection-associatedhighmobilitygroupboxprotein）是耗竭的關(guān)鍵驅(qū)動因子。在慢性抗原刺激下，鈣調(diào)磷酸酶（calcineurin）-NFAT信號通路持續(xù)激活，誘導(dǎo)TOX表達(dá)。TOX通過結(jié)合耗竭相關(guān)基因（如PDCD1、HAVCR2/TIM-3、LAG-3）的啟動子區(qū)域，促進其表達(dá)，同時抑制T細(xì)胞效應(yīng)基因（如IFNG、TNF）的轉(zhuǎn)錄。值得注意的是，TOX的缺失可使耗竭T細(xì)胞部分恢復(fù)功能，而其過表達(dá)則直接誘導(dǎo)初始T細(xì)胞進入耗竭狀態(tài)。-NR4A核受體家族：NR4A1（Nur77）、NR4A2（Nurr1）、NR4A3（Nor1）在慢性TCR信號下被快速誘導(dǎo)，通過抑制IL-2信號和促進細(xì)胞周期阻滯，加速T細(xì)胞耗竭。NR4A1可通過結(jié)合BCL2基因啟動子，抑制抗凋亡蛋白BCL2的表達(dá)，促進T細(xì)胞凋亡。3轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)：耗竭的“程序重編碼”3.1耗竭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的激活與功能-TOX與NR4A的協(xié)同作用：TOX與NR4A家族成員形成正反饋環(huán)路——TOX促進NR4A表達(dá)，而NR4A又增強TOX的轉(zhuǎn)錄活性，共同維持耗竭狀態(tài)的穩(wěn)定性。3轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)：耗竭的“程序重編碼”3.2耗竭與記憶T細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子平衡耗竭T細(xì)胞與記憶T細(xì)胞的分化命運取決于轉(zhuǎn)錄因子的平衡。例如，TCF1（T細(xì)胞因子1）是記憶T細(xì)胞和耗竭前體細(xì)胞（Tpex）的關(guān)鍵維持因子，其高表達(dá)可促進T細(xì)胞自我更新和長期存活；而BLIMP-1（Blymphocyte-inducedmaturationprotein-1）則通過抑制TCF1表達(dá)和促進效應(yīng)分子分化，推動T細(xì)胞向終末耗竭狀態(tài)發(fā)展。在慢性刺激下，TOX/NR4A通路會抑制TCF1表達(dá)，打破“記憶-耗竭”平衡，使T細(xì)胞鎖定在耗竭狀態(tài)。4代謝紊亂：耗竭的“能源危機”T細(xì)胞的活化與功能高度依賴代謝重編程——從靜息態(tài)的氧化磷酸化（OXPHOS）為主，活化后轉(zhuǎn)向糖酵解為主，以支持快速增殖和效應(yīng)功能。然而，耗竭T細(xì)胞的代謝途徑發(fā)生嚴(yán)重紊亂，如同“工廠生產(chǎn)線癱瘓”，無法為效應(yīng)功能提供充足的能量和生物合成原料。4代謝紊亂：耗竭的“能源危機”4.1線粒體功能障礙與OXPHOS抑制耗竭T細(xì)胞的線粒體形態(tài)異常（嵴減少、腫脹），功能顯著受損：電子傳遞鏈（ETC）復(fù)合物I、III活性下降，ATP產(chǎn)生能力降低，活性氧（ROS）過度積累。ROS不僅直接損傷細(xì)胞膜和DNA，還通過激活p38MAPK通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。線粒體功能障礙的根源在于慢性抗原刺激誘導(dǎo)的PPARγ（過氧化物酶體增殖物激活受體γ）高表達(dá)——PPARγ抑制PGC-1α（過氧化物酶體增殖物激活受體γ共激活因子1α）的表達(dá)，而PGC-1α是線粒體生物發(fā)生的關(guān)鍵調(diào)控因子。4代謝紊亂：耗竭的“能源危機”4.2糖代謝異常與代謝中間產(chǎn)物分流正?；罨疶細(xì)胞通過糖酵解快速產(chǎn)生ATP和乳酸，并利用磷酸戊糖途徑（PPP）產(chǎn)生NADPH以應(yīng)對氧化應(yīng)激。而耗竭T細(xì)胞的糖酵解能力顯著下降，葡萄糖攝取減少（GLUT1表達(dá)降低），同時PPP被過度激活——這導(dǎo)致大量糖酵解中間產(chǎn)物（如6-磷酸葡萄糖）分流至PPP，產(chǎn)生過量NADPH，雖然緩解了氧化應(yīng)激，但也加劇了代謝底物浪費，無法支持效應(yīng)功能所需的大量ATP和生物合成。4代謝紊亂：耗竭的“能源危機”4.3脂肪酸氧化（FAO）與氨基酸代謝失衡耗竭T細(xì)胞表現(xiàn)出對FAO的依賴，但FAO產(chǎn)生的能量不足以維持效應(yīng)功能。此外，腫瘤微環(huán)境中的精氨酸酶（ARG1）和吲胺胺2,3-雙加氧酶（IDO）會消耗精氨酸和色氨酸，抑制T細(xì)胞增殖和功能。色氨酸代謝產(chǎn)物犬尿氨酸可直接激活Treg細(xì)胞，形成“免疫抑制閉環(huán)”。5表觀遺傳修飾：耗竭的“記憶烙印”表觀遺傳修飾通過改變?nèi)旧|(zhì)可及性和基因表達(dá)穩(wěn)定性，為T細(xì)胞耗竭提供“長期記憶”，使其即使脫離慢性刺激環(huán)境仍難以恢復(fù)功能。5表觀遺傳修飾：耗竭的“記憶烙印”5.1組蛋白修飾與染色質(zhì)重塑-抑制性組蛋白修飾：耗竭相關(guān)基因（如PDCD1、HAVCR2）的啟動子區(qū)域富集H3K27me3（抑制性組蛋白標(biāo)記，由PRC2復(fù)合物催化）和H3K9me3，導(dǎo)致染色質(zhì)高度壓縮，基因轉(zhuǎn)錄受阻。-激活性組蛋白修飾：效應(yīng)基因（如IFNG、TNF）的啟動子區(qū)域H3K4me3（激活性標(biāo)記）和H3K27ac（增強子標(biāo)記）減少，同時H3K9me3增加，形成“轉(zhuǎn)錄沉默”狀態(tài)。5表觀遺傳修飾：耗竭的“記憶烙印”5.2DNA甲基化與染色質(zhì)可及性DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMTs，如DNMT1、DNMT3a）在耗竭T細(xì)胞中高表達(dá)，通過甲基化耗竭基因啟動子區(qū)域的CpG島，穩(wěn)定其抑制狀態(tài)。而染色質(zhì)重塑因子（如BAF復(fù)合物）的異常調(diào)控會改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)，使耗竭相關(guān)基因處于“可及但沉默”的狀態(tài)，為后續(xù)轉(zhuǎn)錄因子（如TOX）的結(jié)合提供條件。5表觀遺傳修飾：耗竭的“記憶烙印”5.3非編碼RNA的調(diào)控作用長鏈非編碼RNA（lncRNA）如lncRNA-ATB、lncRNA-P21通過sponge作用吸附miRNAs，調(diào)控耗竭相關(guān)基因表達(dá)；miRNAs如miR-155、miR-21則通過靶向抑制PTEN、PD-1等分子，影響T細(xì)胞耗竭進程。這些非編碼RNA共同構(gòu)成“表觀遺傳調(diào)控網(wǎng)絡(luò)”，精細(xì)調(diào)控耗竭狀態(tài)的穩(wěn)定性。6微環(huán)境互作：耗竭的“外部推手”T細(xì)胞耗竭不僅由內(nèi)在機制驅(qū)動，更受腫瘤微環(huán)境（TME）或慢性感染微環(huán)境的“外部塑造”。這些微環(huán)境通過提供抑制性信號、剝奪營養(yǎng)、誘導(dǎo)免疫抑制細(xì)胞，加速T細(xì)胞耗竭。6微環(huán)境互作：耗竭的“外部推手”6.1抑制性細(xì)胞因子與趨化因子-TGF-β：由腫瘤細(xì)胞、Treg細(xì)胞等分泌，通過抑制Smad2/3信號通路，下調(diào)TCF1表達(dá)，促進TOX介導(dǎo)的耗竭程序，同時抑制T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子分泌。-IL-10：通過STAT3信號通路誘導(dǎo)PD-L1表達(dá)，抑制MHC-II類分子表達(dá)，削弱APCs的抗原呈遞能力。-CCL22、CCL28：招募Treg細(xì)胞和CCR4+抑制性細(xì)胞，形成“免疫抑制性微環(huán)境”。2.6.2髓系抑制性細(xì)胞（MDSCs）與腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）MDSCs通過表達(dá)ARG1、iNOS、PD-L1等分子，消耗精氨酸、產(chǎn)生NO，直接抑制T細(xì)胞功能；TAMs（尤其是M2型）通過分泌TGF-β、IL-10，促進Treg細(xì)胞擴增，形成“M2-Treg-Tex”抑制軸。6微環(huán)境互作：耗竭的“外部推手”6.3缺氧與酸中毒腫瘤組織缺氧通過激活HIF-1α（缺氧誘導(dǎo)因子-1α），上調(diào)PD-L1、VEGF表達(dá)，抑制T細(xì)胞糖酵解和OXPHOS，同時促進Treg細(xì)胞分化。酸中毒（乳酸積累）則通過GPR81受體抑制cAMP信號通路，削弱T細(xì)胞效應(yīng)功能。04T細(xì)胞耗竭的逆轉(zhuǎn)策略T細(xì)胞耗竭的逆轉(zhuǎn)策略基于對T細(xì)胞耗竭分子機制的深入解析，研究者們針對不同環(huán)節(jié)設(shè)計了多種逆轉(zhuǎn)策略，旨在“喚醒”耗竭T細(xì)胞，恢復(fù)其抗腫瘤或抗感染功能。這些策略從單一靶點阻斷到多維度聯(lián)合干預(yù)，逐步走向精準(zhǔn)化和個體化。3.1阻斷抑制性受體信號：釋放“免疫剎車”免疫檢查點抑制劑（ICIs）是當(dāng)前逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耗竭最成熟的策略，通過阻斷抑制性受體與其配體的相互作用，恢復(fù)TCR信號傳導(dǎo)和T細(xì)胞效應(yīng)功能。1.1單一靶點阻斷的療效與局限-抗PD-1/PD-L1抗體：如帕博利珠單抗（Pembrolizumab）、納武利尤單抗（Nivolumab），在黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）等多種腫瘤中取得顯著療效，客觀緩解率（ORR）可達(dá)20%-40%。然而，部分患者存在原發(fā)性耐藥（如PD-L1低表達(dá)、TMB低），或繼發(fā)性耐藥（如JAK/STAT信號突變），單一靶點阻斷難以完全逆轉(zhuǎn)耗竭。-抗CTLA-4抗體：如伊匹木單抗（Ipilimumab），通過增強T細(xì)胞活化而非直接阻斷耗竭，與PD-1抑制劑聯(lián)合可提高ORR至50%-60%，但免疫相關(guān)adverseevents（irAEs）發(fā)生率顯著增加。1.2聯(lián)合阻斷策略：協(xié)同增效針對抑制性受體網(wǎng)絡(luò)的協(xié)同效應(yīng)，聯(lián)合阻斷多個靶點成為提高療效的關(guān)鍵：-PD-1+CTLA-4：通過互補機制（CTLA-4抑制Treg細(xì)胞，PD-1抑制效應(yīng)T細(xì)胞），在黑色素瘤中顯著延長生存期，但毒性增加；-PD-1+TIM-3/LAG-3：針對終末耗竭T細(xì)胞，在NSCLC中顯示持久的臨床響應(yīng)，如relatlimab（抗LAG-3）+納武利尤單抗已獲批用于黑色素瘤治療；-三聯(lián)/四聯(lián)阻斷：如PD-1+CTLA-4+TIM-3，在臨床試驗中展現(xiàn)出更高的ORR，但需平衡療效與毒性。3.2調(diào)控轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)：重編程細(xì)胞命運針對耗竭相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子異常，通過基因編輯、小分子抑制劑等手段干預(yù)轉(zhuǎn)錄程序，可從根本上逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耗竭狀態(tài)。2.1靶向TOX與NR4A通路-TOX敲除：利用CRISPR-Cas9技術(shù)敲除TOX基因，可耗竭T細(xì)胞恢復(fù)效應(yīng)功能（IFN-γ分泌增加、增殖能力提升），且不影響記憶T細(xì)胞形成，是極具潛力的逆轉(zhuǎn)策略；-NR4A抑制劑：小分子抑制劑如TMPA-1（靶向NR4A1）可阻斷NR4A與DNA結(jié)合，恢復(fù)T細(xì)胞糖酵解和細(xì)胞因子分泌，在動物模型中聯(lián)合PD-1抑制劑顯著抑制腫瘤生長。3.2.2恢復(fù)TCF1表達(dá)與BLIMP-1抑制-TCF1過表達(dá)：通過慢病毒載體過表達(dá)TCF1，可促進耗竭前體細(xì)胞（Tpex）擴增，增強T細(xì)胞長期抗腫瘤能力；-BLIMP-1抑制劑：如小分子化合物抑制BLIMP-1活性，可阻斷Tpex向終末耗竭的分化，維持T細(xì)胞的效應(yīng)功能。2.3表觀遺傳修飾藥物-HDAC抑制劑：如伏立諾他（Vorinostat），通過抑制組蛋白去乙?；福黾親3K9ac表達(dá)，開放效應(yīng)基因染色質(zhì)，促進IFN-γ、TNF-α分泌；-DNMT抑制劑：如地西他濱（Decitabine），通過DNA去甲基化，重新激活耗竭相關(guān)基因（如PDCD1）的抑制，但需警惕脫靶效應(yīng)。2.3表觀遺傳修飾藥物3重編程代謝：重塑“能源工廠”通過代謝干預(yù)恢復(fù)T細(xì)胞的能量生產(chǎn)和生物合成能力，是逆轉(zhuǎn)耗竭的重要途徑。3.1增強線粒體功能-PPARγ拮抗劑：如GW9662，通過阻斷PPARγ，上調(diào)PGC-1α表達(dá)，改善線粒體生物發(fā)生和OXPHOS功能，在荷瘤小鼠中恢復(fù)T細(xì)胞效應(yīng)功能；-NAD+前體補充：如煙酰胺核糖（NR），通過增加NAD+水平，激活SIRT1（去乙酰化酶），促進線粒體功能恢復(fù)和細(xì)胞存活。3.2調(diào)節(jié)糖代謝與氨基酸代謝-二甲雙胍：通過激活A(yù)MPK信號通路，促進糖酵解向PPP分流，增加NADPH產(chǎn)生，緩解氧化應(yīng)激，增強T細(xì)胞抗腫瘤活性；-精氨酸補充：如精氨酸雙鹽酸鹽，通過對抗ARG1的消耗，恢復(fù)T細(xì)胞增殖和IFN-γ分泌；-IDO抑制劑：如epacadostat，通過阻斷色氨酸代謝，減少犬尿氨酸產(chǎn)生，抑制Treg細(xì)胞擴增。3.2調(diào)節(jié)糖代謝與氨基酸代謝4改善微環(huán)境：打破“免疫抑制閉環(huán)”通過清除抑制性細(xì)胞、中和抑制性因子，重塑免疫微環(huán)境，為T細(xì)胞功能恢復(fù)創(chuàng)造有利條件。4.1清除髓系抑制性細(xì)胞-CSF-1R抑制劑：如pexidartinib，通過抑制CSF-1R，減少TAMs和MDSCs浸潤，在臨床試驗中聯(lián)合PD-1抑制劑改善T細(xì)胞功能；-CCR4抑制劑：如mogamulizumab，通過清除CCR4+Treg細(xì)胞，解除對效應(yīng)T細(xì)胞的抑制。4.2中和抑制性細(xì)胞因子-抗TGF-β抗體：如fresolimumab，通過阻斷TGF-β信號，恢復(fù)TCF1表達(dá)，抑制TOX介導(dǎo)的耗竭，聯(lián)合PD-1抑制劑在胰腺癌中顯示初步療效；-抗IL-10抗體：如clidolimumab，通過中和IL-10，下調(diào)PD-L1表達(dá)，增強T細(xì)胞抗原呈遞能力。4.3改善缺氧與酸中毒-HIF-1α抑制劑：如PX-478，通過抑制HIF-1α表達(dá)，下調(diào)PD-L1和VEGF，改善腫瘤缺氧微環(huán)境；-碳酸氫鈉：通過中和乳酸，緩解酸中毒，恢復(fù)T細(xì)胞cAMP信號通路，增強效應(yīng)功能。4.3改善缺氧與酸中毒5細(xì)胞療法：輸注“新生”效應(yīng)T細(xì)胞體外擴增或基因編輯后的T細(xì)胞回輸，可直接補充功能性T細(xì)胞，繞過體內(nèi)耗竭微環(huán)境的抑制。5.1CAR-T細(xì)胞優(yōu)化-耗竭表型編輯：通過CRISPR-Cas9敲除CAR-T細(xì)胞的PD-1、TIM-3等抑制性受體，或過表達(dá)TCF1、IL-7，增強其抗腫瘤活性；-共刺激分子優(yōu)化：如PD-1-CD28嵌合共刺激分子，通過“智能”識別腫瘤微環(huán)境中的PD-1信號，僅在抑制性微環(huán)境中激活CD28信號，避免過度活化。5.2TILs與T細(xì)胞受體-T細(xì)胞（TCR-T）療法-TILs體外擴增與改造：從腫瘤組織中分離TILs，通過IL-2、IL-15體外擴增，并敲除PD-1基因后回輸，在黑色素瘤中取得60%-80%的ORR；-TCR-T療法：針對