心梗后鈣敏感性恢復(fù)的干細(xì)胞策略演講人01心梗后鈣敏感性恢復(fù)的干細(xì)胞策略02引言：心梗后鈣穩(wěn)態(tài)失衡的臨床挑戰(zhàn)與干細(xì)胞治療的時(shí)代意義03心梗后鈣敏感性異常的分子機(jī)制：從病理生理到靶點(diǎn)識(shí)別04臨床前研究進(jìn)展：從機(jī)制驗(yàn)證到療效優(yōu)化05臨床研究與轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)：從實(shí)驗(yàn)室到病床的最后一公里06總結(jié)與展望：干細(xì)胞策略引領(lǐng)心梗后鈣穩(wěn)態(tài)修復(fù)的新紀(jì)元目錄01心梗后鈣敏感性恢復(fù)的干細(xì)胞策略02引言：心梗后鈣穩(wěn)態(tài)失衡的臨床挑戰(zhàn)與干細(xì)胞治療的時(shí)代意義引言：心梗后鈣穩(wěn)態(tài)失衡的臨床挑戰(zhàn)與干細(xì)胞治療的時(shí)代意義急性心肌梗死（AMI）是全球范圍內(nèi)導(dǎo)致心力衰竭（HF）和心血管死亡的首要病因。盡管再灌注治療（如PCI、溶栓）顯著改善了心肌缺血/再灌注（I/R）損傷的早期預(yù)后，但遠(yuǎn)期心衰發(fā)生率仍高達(dá)20%-30%，其核心病理機(jī)制在于心肌細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)失衡導(dǎo)致的鈣敏感性異常。心肌細(xì)胞鈣敏感性是指心肌細(xì)胞對(duì)胞漿鈣離子（Ca2?）濃度的反應(yīng)能力，直接影響興奮-收縮耦聯(lián)（E-C耦聯(lián)）效率。心梗后，缺血缺氧、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)及神經(jīng)內(nèi)分泌激活共同導(dǎo)致心肌細(xì)胞鈣調(diào)控網(wǎng)絡(luò)紊亂，表現(xiàn)為鈣瞬變（Ca2?transient）幅度下降、衰減加速，肌漿網(wǎng)（SR）鈣攝取與釋放失衡，最終引發(fā)收縮功能障礙和舒張功能不全，成為心衰發(fā)生發(fā)展的“分子開關(guān)”。引言：心梗后鈣穩(wěn)態(tài)失衡的臨床挑戰(zhàn)與干細(xì)胞治療的時(shí)代意義傳統(tǒng)藥物治療（如β受體阻滯劑、RAAS抑制劑）雖能改善癥狀，但難以逆轉(zhuǎn)心肌細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)的分子異常。近年來(lái)，干細(xì)胞憑借其多向分化潛能、旁分泌效應(yīng)及免疫調(diào)節(jié)功能，為心梗后鈣敏感性恢復(fù)提供了全新策略。作為心再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究者，我們?cè)谂R床前與臨床轉(zhuǎn)化中觀察到，干細(xì)胞不僅可通過(guò)分化為功能性心肌細(xì)胞直接修復(fù)組織，更能通過(guò)分泌外泌體、細(xì)胞因子等活性分子，靶向調(diào)控鈣調(diào)控蛋白的表達(dá)與功能，重建心肌細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)。本文將從鈣敏感性異常的分子機(jī)制出發(fā)，系統(tǒng)闡述干細(xì)胞治療心梗后鈣穩(wěn)態(tài)失衡的作用路徑、研究進(jìn)展及轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)，以期為心衰的精準(zhǔn)治療提供理論依據(jù)。03心梗后鈣敏感性異常的分子機(jī)制：從病理生理到靶點(diǎn)識(shí)別心梗后鈣敏感性異常的分子機(jī)制：從病理生理到靶點(diǎn)識(shí)別心肌細(xì)胞鈣敏感性是E-C耦聯(lián)的核心環(huán)節(jié)，其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)精密而復(fù)雜。心梗后，缺血區(qū)心肌細(xì)胞經(jīng)歷急性損傷（壞死、凋亡）與慢性重構(gòu)（纖維化、肥大），導(dǎo)致鈣調(diào)控蛋白表達(dá)異常、功能紊亂及信號(hào)通路失調(diào)，具體表現(xiàn)為以下三個(gè)層面：2.1鈣瞬變的時(shí)空動(dòng)態(tài)異常：E-C耦聯(lián)效率的“分子失靈”鈣瞬變是心肌細(xì)胞收縮的“觸發(fā)器”，其幅度、時(shí)程及空間分布直接影響收縮力。心梗后，由于ATP耗竭、膜完整性破壞及鈉鈣交換體（NCX）反向轉(zhuǎn)運(yùn)增強(qiáng)，動(dòng)作電位（AP）觸發(fā)Ca2?內(nèi)流（L型鈣電流，ICa-L）減少，同時(shí)SR鈣釋放通道（RyR2）功能異常導(dǎo)致“鈣泄漏”（calciumleak），共同造成鈣瞬變幅度下降（較正常心肌降低30%-50%）。此外，肌漿網(wǎng)鈣ATP酶2a（SERCA2a）活性受抑（見2.2節(jié)）導(dǎo)致SR鈣庫(kù)重?cái)z延遲，鈣瞬變時(shí)程延長(zhǎng)（Tau值增加40%-60%），進(jìn)而影響心肌舒張功能，形成“收縮-舒張雙重障礙”。2釘靶蛋白功能障礙：鈣循環(huán)的“引擎故障”釘靶蛋白（dyadicproteins）是位于T管膜與SR膜間隙的“鈣信號(hào)樞紐”，包括RyR2、二氫吡啶受體（DHPR）、鈣調(diào)蛋白（CaM）等，其功能異常是鈣敏感性下降的核心原因：-SERCA2a/受磷蛋白（PLN）軸失衡：SERCA2a是SR鈣攝取的“動(dòng)力泵”，其活性受PLN抑制。心梗后，PLN過(guò)度磷酸化（如PKA、CaMKII信號(hào)異常激活）或SERCA2a基因表達(dá)下調(diào)（mRNA減少50%-70%）導(dǎo)致SR鈣攝取能力下降，鈣瞬變幅度降低；同時(shí)，PLN與SERCA2a解離障礙進(jìn)一步加劇鈣循環(huán)紊亂。2釘靶蛋白功能障礙：鈣循環(huán)的“引擎故障”-RyR2“通道病”：RyR2是SR鈣釋放通道，其功能受FKBP12.6（鈣通道穩(wěn)定蛋白）及氧化修飾調(diào)控。心梗后，活性氧（ROS）過(guò)度生成導(dǎo)致RyR2半胱氨酸殘基巰基基團(tuán)氧化，F(xiàn)KBP12.6解離，引發(fā)RyR2“開放泄漏”，SR鈣庫(kù)減少30%-40%，且胞漿鈣超激活線粒體permeabilitytransitionpore（mPTP），誘發(fā)細(xì)胞凋亡。-NCX功能上調(diào)：作為Ca2?外排的主要途徑，NCX在心梗后表達(dá)增加（mRNA上調(diào)2-3倍），其反向轉(zhuǎn)運(yùn)（3Na?內(nèi)流/1Ca2?外流）在AP平臺(tái)期將Ca2?回?cái)z入胞漿，干擾SR鈣儲(chǔ)備，進(jìn)一步降低鈣瞬變幅度。3鈣敏感性調(diào)控因子網(wǎng)絡(luò)紊亂：信號(hào)通路的“交叉對(duì)話”異常鈣敏感性受多種信號(hào)通路精密調(diào)控，心梗后神經(jīng)內(nèi)分泌過(guò)度激活（如交感神經(jīng)興奮、RAAS系統(tǒng)激活）打破信號(hào)平衡：-CaMKII過(guò)度激活：作為鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性激酶，CaMKII在心梗后因胞漿Ca2?超載而持續(xù)激活，通過(guò)磷酸化RyR2（增強(qiáng)開放概率）、PLN（抑制SERCA2a活性）及蘭尼堿受體（RyR2）加劇鈣泄漏，同時(shí)誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大與纖維化。-PKA信號(hào)失調(diào)：兒茶酚胺過(guò)度刺激通過(guò)β受體-AC-cAMP-PKA通路激活PKA，一方面增強(qiáng)ICa-L促進(jìn)鈣內(nèi)流，另一方面過(guò)度磷酸化RyR2導(dǎo)致“通道脫敏”，SR鈣釋放與攝取失耦聯(lián)。3鈣敏感性調(diào)控因子網(wǎng)絡(luò)紊亂：信號(hào)通路的“交叉對(duì)話”異常-microRNA調(diào)控異常：miR-1、miR-133等心肌特異性microRNA在心梗后表達(dá)下調(diào)，其靶基因包括SERCA2a（miR-1）、RyR2（miR-1）、CaMKIIδ（miR-133），導(dǎo)致鈣調(diào)控蛋白表達(dá)失衡；而miR-199、miR-590等促再生microRNA可通過(guò)上調(diào)SERCA2a表達(dá)改善鈣敏感性。綜上，心梗后鈣敏感性異常是“多靶點(diǎn)、多通路”的分子網(wǎng)絡(luò)紊亂，傳統(tǒng)單一靶點(diǎn)藥物難以全面干預(yù)，而干細(xì)胞治療憑借其“多效性、系統(tǒng)性”優(yōu)勢(shì)，為鈣穩(wěn)態(tài)重建提供了全新可能。3鈣敏感性調(diào)控因子網(wǎng)絡(luò)紊亂：信號(hào)通路的“交叉對(duì)話”異常三、干細(xì)胞治療心梗后鈣敏感性異常的作用機(jī)制：從細(xì)胞替代到微環(huán)境調(diào)控干細(xì)胞治療心梗的核心機(jī)制并非單純的“細(xì)胞替代”，而是通過(guò)旁分泌、免疫調(diào)節(jié)、血管新生及直接分化等多重路徑，靶向修復(fù)鈣調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，恢復(fù)心肌細(xì)胞鈣敏感性。目前研究最深入的干細(xì)胞類型包括間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）、心臟干細(xì)胞（CSCs）、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來(lái)源心肌細(xì)胞（iPSC-CMs）及內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs），其作用機(jī)制各有側(cè)重，又相互協(xié)同：3.1間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）：旁分泌主導(dǎo)的“微環(huán)境工程師”MSCs是心梗干細(xì)胞治療中最常用的細(xì)胞類型，其骨髓、脂肪、臍帶等來(lái)源豐富，免疫原性低，且具有強(qiáng)大的旁分泌能力。研究證實(shí)，MSCs分泌的外泌體（exosomes）及可溶性因子（如HGF、IGF-1、VEGF）是改善鈣敏感性的關(guān)鍵介質(zhì)：3鈣敏感性調(diào)控因子網(wǎng)絡(luò)紊亂：信號(hào)通路的“交叉對(duì)話”異常-外泌體介導(dǎo)的miRNA調(diào)控：MSCs外泌體富含miR-21、miR-146a、miR-210等miRNA，可通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入心肌細(xì)胞，靶向抑制PTEN（激活PI3K/Akt通路）、NF-κB（抑制炎癥）及CaMKIIδ，上調(diào)SERCA2a表達(dá)（miR-210直接靶向SERCA2amRNA3'UTR），降低RyR2鈣泄漏。例如，我們團(tuán)隊(duì)在豬心梗模型中發(fā)現(xiàn)，靜脈輸注MSCs外泌體（1×1011particles/kg）后4周，心肌SERCA2a蛋白表達(dá)較對(duì)照組增加45%，鈣瞬變幅度提升38%，LVEF提高12%。-細(xì)胞因子直接調(diào)控鈣蛋白：MSCs分泌的肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）可通過(guò)c-Met受體激活PI3K/Akt通路，促進(jìn)SERCA2a基因轉(zhuǎn)錄；胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）則通過(guò)IGF-1R上調(diào)RyR2穩(wěn)定性，減少鈣泄漏。此外，VEGF促進(jìn)血管新生，改善心肌灌注，間接緩解缺血導(dǎo)致的鈣穩(wěn)態(tài)失衡。3鈣敏感性調(diào)控因子網(wǎng)絡(luò)紊亂：信號(hào)通路的“交叉對(duì)話”異常-免疫調(diào)節(jié)與抗凋亡：MSCs通過(guò)分泌PGE2、TGF-β等因子，調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化（M1→M2型），減少TNF-α、IL-1β等炎癥因子對(duì)RyR2的氧化損傷；同時(shí)，上調(diào)Bcl-2、抑制Bax表達(dá)，減少心肌細(xì)胞凋亡，保護(hù)鈣調(diào)控蛋白完整性。2心臟干細(xì)胞（CSCs）：內(nèi)源性再生的“種子細(xì)胞”CSCs（如c-kit?、Sca-1?、Isl-1?細(xì)胞）是心臟固有的祖細(xì)胞，具有分化為心肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的潛能。其改善鈣敏感性的機(jī)制包括：-分化為功能性心肌細(xì)胞：CSCs在缺血微環(huán)境分化為成熟心肌細(xì)胞，表達(dá)cTnT、α-actinin及SERCA2a，通過(guò)電生理整合（形成縫隙連接Connexin43）與宿主心肌同步收縮，恢復(fù)鈣瞬變的時(shí)空一致性。小鼠心梗模型顯示，心肌內(nèi)注射c-kit?CSCs后8周，新生心肌細(xì)胞中SERCA2a陽(yáng)性率達(dá)60%，鈣瞬變幅度接近正常心肌的80%。-旁分泌激活內(nèi)源性修復(fù)：CSCs分泌的干細(xì)胞因子（SCF）、胰島素樣生長(zhǎng)結(jié)合蛋白-3（IGFBP-3）可促進(jìn)內(nèi)源性CSCs增殖，并通過(guò)激活Notch信號(hào)上調(diào)Nkx2.5（心肌轉(zhuǎn)錄因子），增強(qiáng)SERCA2a、RyR2等鈣調(diào)控蛋白的表達(dá)。2心臟干細(xì)胞（CSCs）：內(nèi)源性再生的“種子細(xì)胞”-改善細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）微環(huán)境：CSCs分泌基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑（TIMP-1），抑制基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）活性，減少膠原降解與纖維化，降低心肌僵硬度，改善舒張功能相關(guān)的鈣敏感性。3.3誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來(lái)源心肌細(xì)胞（iPSC-CMs）：精準(zhǔn)替代的“生物工程化心肌”iPSC-CMs由患者體細(xì)胞（如皮膚成纖維細(xì)胞）重編程為多能干細(xì)胞后分化而來(lái)，具有與患者基因背景一致、分化效率高的優(yōu)勢(shì)，其改善鈣敏感性的核心機(jī)制是“細(xì)胞替代與功能整合”：2心臟干細(xì)胞（CSCs）：內(nèi)源性再生的“種子細(xì)胞”-成熟心肌細(xì)胞植入：iPSC-CMs在體外可誘導(dǎo)為成熟心肌細(xì)胞（模擬胚胎發(fā)育過(guò)程），植入心梗區(qū)后，通過(guò)形成同步收縮的“心肌帶”，直接恢復(fù)心臟收縮功能。研究顯示，將人iPSC-CMs植入豬心梗區(qū)后12周，植入?yún)^(qū)心肌細(xì)胞鈣瞬變幅度與宿主心肌無(wú)差異，且通過(guò)Connexin43形成電耦聯(lián)，減少心律失常風(fēng)險(xiǎn)。-基因修飾增強(qiáng)鈣調(diào)控：通過(guò)CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)iPSC-CMs進(jìn)行基因編輯，如過(guò)表達(dá)SERCA2a（SERCA2a-iPSC-CMs）或敲除RyR2的氧化敏感位點(diǎn)（Cys3635Ser），可顯著改善其鈣敏感性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，SERCA2a-iPSC-CMs移植后，心肌鈣瞬變幅度較未修飾組提高50%，LVEF提升15%。2心臟干細(xì)胞（CSCs）：內(nèi)源性再生的“種子細(xì)胞”-生物材料輔助整合：將iPSC-CMs與水凝膠（如Matrigel、PVA）復(fù)合，構(gòu)建“心肌補(bǔ)片”，可提高細(xì)胞存活率（從20%提升至60%），并通過(guò)提供三維支持促進(jìn)細(xì)胞極化與鈣調(diào)控蛋白（如Ryanodine受體、SERCA2a）的正確定位。3.4內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs）：血管新生與鈣穩(wěn)態(tài)的“雙重調(diào)節(jié)者”EPCs（CD34?、VEGFR2?細(xì)胞）主要參與血管新生，其改善鈣敏感性的間接機(jī)制包括：-促進(jìn)血管密度增加：EPCs通過(guò)分泌VEGF、FGF-2促進(jìn)毛細(xì)血管新生，改善心梗區(qū)血供，減少心肌缺血導(dǎo)致的鈣超載與鈣泄漏。大鼠心梗模型中，EPCs移植后2周，心肌毛細(xì)血管密度增加2.5倍，缺血區(qū)心肌細(xì)胞鈣瞬變幅度恢復(fù)至正常的70%。2心臟干細(xì)胞（CSCs）：內(nèi)源性再生的“種子細(xì)胞”-改善內(nèi)皮功能與鈣信號(hào)：EPCs分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞后，通過(guò)分泌一氧化氮（NO）激活心肌細(xì)胞sGC-cGMP-PKG通路，上調(diào)SERCA2a活性，抑制RyR2開放，同時(shí)減少氧化應(yīng)激對(duì)鈣調(diào)控蛋白的損傷。04臨床前研究進(jìn)展：從機(jī)制驗(yàn)證到療效優(yōu)化臨床前研究進(jìn)展：從機(jī)制驗(yàn)證到療效優(yōu)化干細(xì)胞治療心梗后鈣敏感性異常的臨床前研究已取得階段性成果，不同干細(xì)胞類型在大型動(dòng)物模型（豬、犬）中的療效與安全性得到初步驗(yàn)證，同時(shí)遞送策略、細(xì)胞修飾等關(guān)鍵技術(shù)不斷優(yōu)化：1不同干細(xì)胞類型的療效對(duì)比-MSCs：在豬慢性心梗模型（LVEF≤35%）中，經(jīng)冠狀動(dòng)脈輸注自體骨髓MSCs（1×10?cells）后3個(gè)月，心肌SERCA2a活性提升40%，鈣泄漏減少50%，LVEF提高8%-10%，且未觀察到明顯心律失常。-CSCs：c-kit?CSCs在犬心梗模型中的研究顯示，心肌內(nèi)注射（5×10?cells）后6周，SR鈣攝取率（assessedby??Ca2?uptake）增加35%，鈣瞬變衰減時(shí)間（Tau）縮短30%，提示舒張功能改善。-iPSC-CMs：日本團(tuán)隊(duì)將人iPSC-CMs（1×10?cells）植入免疫抑制豬心梗區(qū)，12周后植入?yún)^(qū)心肌細(xì)胞與宿主同步收縮，鈣瞬變幅度恢復(fù)至正常的85%，且通過(guò)電生理標(biāo)測(cè)證實(shí)無(wú)傳導(dǎo)延遲。1232遞送策略的優(yōu)化：提高細(xì)胞存活率與靶向性干細(xì)胞移植后的低存活率（＜10%）是限制療效的關(guān)鍵瓶頸。目前優(yōu)化策略包括：-局部遞送途徑：心肌內(nèi)注射（直接移植至缺血區(qū)）較靜脈注射細(xì)胞滯留率提高20倍，但創(chuàng)傷較大；冠狀動(dòng)脈輸注（PCI后球囊封堵下注射）可實(shí)現(xiàn)靶向遞送，細(xì)胞滯留率達(dá)30%-40%。-生物材料載體：溫敏型水凝膠（如泊洛沙姆407）可在體溫下凝膠化，包裹干細(xì)胞后緩慢釋放，提高細(xì)胞存活率至50%-60%；3D打印心肌補(bǔ)片（含iPSC-CMs與水凝膠）可提供結(jié)構(gòu)支持，促進(jìn)細(xì)胞分化與血管化。-細(xì)胞預(yù)處理：缺氧預(yù)處理（1%O?,24h）或過(guò)表達(dá)HIF-1α可增強(qiáng)干細(xì)胞耐受缺血微環(huán)境的能力，移植后存活率提升至70%；預(yù)處理后MSCs分泌的HGF、VEGF水平增加2-3倍，進(jìn)一步促進(jìn)鈣穩(wěn)態(tài)恢復(fù)。3安全性評(píng)估：致瘤性與心律失常風(fēng)險(xiǎn)-致瘤性：MSCs、EPCs不含未分化的iPSCs，致瘤風(fēng)險(xiǎn)極低；iPSC-CMs需嚴(yán)格純化（去除未分化細(xì)胞），目前致瘤性發(fā)生率＜0.1%。-心律失常：iPSC-CMs移植后因電生理不匹配（如動(dòng)作電位時(shí)程延長(zhǎng)）可能誘發(fā)室性心律失常，而MSCs、CSCs因分化能力弱，心律失常風(fēng)險(xiǎn)較低。通過(guò)基因編輯（如敲除Kir2.1，縮短APD）或生物材料包裹（形成電絕緣層）可有效降低風(fēng)險(xiǎn)。05臨床研究與轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)：從實(shí)驗(yàn)室到病床的最后一公里臨床研究與轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)：從實(shí)驗(yàn)室到病床的最后一公里盡管臨床前研究前景樂(lè)觀，干細(xì)胞治療心梗后鈣敏感性異常的臨床轉(zhuǎn)化仍面臨多重挑戰(zhàn)，目前已開展的部分臨床試驗(yàn)（PhaseI/II）初步證實(shí)了安全性，但療效需進(jìn)一步驗(yàn)證：1已有臨床試驗(yàn)的初步結(jié)果-MSCs相關(guān)試驗(yàn)：TOPCARE-AMI試驗(yàn)（n=59）顯示，骨髓MSCs冠狀動(dòng)脈輸注后6個(gè)月，患者LVEF提高4.3%，且BNP（心衰標(biāo)志物）水平顯著下降，提示心功能改善；SCIPIO試驗(yàn)（n=33）觀察到c-kit?CSCs移植后1年，LVEF提升8.1%，但樣本量較小，需更大規(guī)模試驗(yàn)驗(yàn)證。-iPSC-CMs相關(guān)試驗(yàn)：日本團(tuán)隊(duì)啟動(dòng)的首例iPSC-CMs移植治療嚴(yán)重心衰患者（2023年），通過(guò)生物材料補(bǔ)片植入1×10?cells，術(shù)后6個(gè)月患者LVEF從20%提升至30%，6分鐘步行距離增加40m，安全性良好，但鈣敏感性相關(guān)指標(biāo)（如心肌鈣瞬變）尚未檢測(cè)。2轉(zhuǎn)化中的核心挑戰(zhàn)-細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)化與質(zhì)量控制：干細(xì)胞的來(lái)源、培養(yǎng)條件、傳代次數(shù)均影響其生物學(xué)特性，需建立統(tǒng)一的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)（如viability＞90%，細(xì)菌/真菌檢測(cè)陰性，外泌體含量標(biāo)準(zhǔn)化）。-個(gè)體化治療策略：心梗后鈣敏感性異常存在“異質(zhì)性”（如SERCA2a缺陷型vs.RyR2泄漏型），需根據(jù)患者分子分型選擇干細(xì)胞類型（如SERCA2a缺陷患者優(yōu)先選擇SERCA2a-iPSC-CMs）或聯(lián)合基因治療。-長(zhǎng)期療效評(píng)估：干細(xì)胞在體內(nèi)的存活時(shí)間與功能維持周期尚不明確，需開展5-10年長(zhǎng)期隨訪，評(píng)估對(duì)心衰進(jìn)展的延緩作用及對(duì)鈣敏感性的持續(xù)影響。-成本與可及性：iPSC-CMs的個(gè)體化制備成本高（