基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)規(guī)范

1范圍

本規(guī)范適用于48孔或96孔孔板結(jié)構(gòu)的測(cè)量范圍為（0-120）°C的多通道基因擴(kuò)

增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)或者單通道基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫儀的的校準(zhǔn)，其他孔

板結(jié)構(gòu)和溫度范圍的基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)的溫度校準(zhǔn)可以參考本規(guī)范。

2引用文件

本規(guī)范引用下列文件：

JJF1071-2000《國家計(jì)量校準(zhǔn)規(guī)范編寫規(guī)則》

JJF1007-2007《溫度計(jì)量名詞術(shù)語及定義》

JJF1527-2015《聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》

YY/T1173-2010《聚合酶鏈反應(yīng)分析儀》

ITS-901990年國際溫標(biāo)

凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本規(guī)范；凡是不注日期的引用文件,

其最新版本（包括所有的修改單）適用于本規(guī)范。

3術(shù)語

3.1基因擴(kuò)增儀（PCR儀），即聚合酶鏈反應(yīng)分析儀polymerasechainreaction

analyzer

基于PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）技術(shù)原理，模擬DNA或RNA的復(fù)制過程，在模板、引物、

校驗(yàn)和沒等存在的條件下，特異擴(kuò)增已知序列，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)分析的儀器設(shè)備,[YY/T

1173-20103.2]

3.2基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)temperaturemeasuringsystemforPolymerase

chainreactionanalyzer

用于基因擴(kuò)增儀（PCR儀）的專用溫度校準(zhǔn)裝置。

3.3溫度校準(zhǔn)專用等溫塊與配件isothermalblockandaccessoryfortemperature

calibration

與標(biāo)準(zhǔn)恒溫槽配套使用并提供基因擴(kuò)增儀測(cè)（PCR儀）溫系統(tǒng)溫度校準(zhǔn)的潔凈溫場(chǎng)

的輔助裝置。

3.4溫度校準(zhǔn)專用等溫塊測(cè)試孔testingholefortemperaturecalibration

模擬基因擴(kuò)增儀控溫塊內(nèi)的結(jié)構(gòu)，提供基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)探頭布放插

孔的專用等溫塊。

3.5基因擴(kuò)增儀溫度校準(zhǔn)專用等溫塊標(biāo)準(zhǔn)溫度驗(yàn)證孔temperaturevalidatehole

基因擴(kuò)增儀等溫塊中提供放置標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻溫度計(jì)的固定位置。

3.6溫度測(cè)量范圍rangefortemperaturemeasurement

在準(zhǔn)確度要求內(nèi)，基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)所能實(shí)現(xiàn)的上下限溫度f范圍。

3.7示值誤差indicationerror

基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在溫度測(cè)量范圍內(nèi)所能達(dá)到的最大溫度誤差。

3.8溫度分辨力temperatureresolution

基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)顯示在末尾上變化一個(gè)計(jì)數(shù)順序?qū)?yīng)的輸入變化溫度值。

4概述

基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)，是一種用于基因擴(kuò)增儀（PCR儀）實(shí)時(shí)溫度校

準(zhǔn)的傳感系統(tǒng)。通常由多通道測(cè)溫傳感器（測(cè)溫模塊），數(shù)據(jù)采集模塊，數(shù)據(jù)線，顯示

器（計(jì)算機(jī)）組成.

圖1基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)測(cè)溫結(jié)構(gòu)示意圖

5計(jì)量特性

5.1示值誤差

基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)的的溫度示值誤差最大允許誤差：±0.20℃o

5.2溫度測(cè)量范圍

基因力,增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)的溫度測(cè)量范圍應(yīng)覆蓋（30?100）C。

5.3溫度分辨力

基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)的溫度分辨力應(yīng)小于等于0.01°C。

5.4功能性檢查

5.4.1外觀

基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)應(yīng)外觀良好。各通道溫度傳感器外形應(yīng)完好，無彎

折，無斷裂，潔凈無污染。溫度傳感器封裝良好，引線接插件必須接觸良好。溫度傳感

器所使用的保護(hù)管及引線應(yīng)能承受相應(yīng)的使用溫度。

5.4.2顯示功能

基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)顯示功能的檢查應(yīng)在電源接通情況下進(jìn)行。測(cè)溫系

統(tǒng)各通道溫度值應(yīng)符合溫度分辨力要求，其顯示數(shù)以及圖像應(yīng)清晰，小數(shù)點(diǎn)和狀態(tài)顯示

應(yīng)正確。

如有測(cè)溫系統(tǒng)超出測(cè)溫范圍或傳感器發(fā)生故障，軟件應(yīng)實(shí)時(shí)顯示其相應(yīng)的道道號(hào)。

6校準(zhǔn)條件

6.1環(huán)境條件

6.1.1環(huán)境溫度：（15?35）℃；環(huán)境濕度：＜85%RHo

6.1.2電測(cè)儀器設(shè)備的環(huán)境條件應(yīng)滿足其相應(yīng)要求。

6.1.3校準(zhǔn)時(shí)，基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)供電電壓應(yīng)在正常工作的范圍內(nèi)，共

恒溫設(shè)備和電測(cè)一起使用的電源條件應(yīng)滿足相應(yīng)的使用要求。

6.2測(cè)量用標(biāo)準(zhǔn)器及配套設(shè)備

測(cè)量用標(biāo)準(zhǔn)器及配套設(shè)備見表3o

表3測(cè)量用標(biāo)準(zhǔn)器及配套設(shè)備

序號(hào)設(shè)備名稱技術(shù)要求用途備注

二等標(biāo)準(zhǔn)溫度標(biāo)也可使用

1測(cè)量范圍(-189.3442?419.527)C

伯電阻溫度計(jì)準(zhǔn)器滿足要求

級(jí)，電測(cè)設(shè)備配接標(biāo)淮器后，最小配套電的其他測(cè)

2電測(cè)設(shè)備0.005

分辨力相當(dāng)于0.001測(cè)設(shè)備量標(biāo)準(zhǔn)

使用標(biāo)準(zhǔn)

溫度范圍溫度均勻性溫度波動(dòng)性

弟電阻做

測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)

時(shí),工作

提供基

區(qū)域深度

恒溫槽及因擴(kuò)增

不小于

PCR測(cè)溫儀測(cè)溫

3300mm

專用等溫塊及(-20-0.01℃系統(tǒng)專o

0.03℃無自重結(jié)

配件150)℃/10min用均勻

構(gòu)的基因

溫場(chǎng)

擴(kuò)增儀測(cè)

溫系統(tǒng)需

配套使用

壓條

4水三相點(diǎn)瓶L/=0.002℃,k=2測(cè)量標(biāo)

準(zhǔn)銷電

阻的水

三相點(diǎn)

值

7校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法

7.1校準(zhǔn)項(xiàng)目

a）溫度示值誤差

b）測(cè)溫范圍

c）溫度分辨力

7.2校準(zhǔn)方法

7.2.1校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備

a）開啟電測(cè)設(shè)備進(jìn)行預(yù)熱，預(yù)熱時(shí)間至少20min或滿足其使用說明書的相應(yīng)要求。

b）將標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻溫度計(jì)放入預(yù)先凍制好的水二相點(diǎn)瓶中，測(cè)量具水二相點(diǎn)值。將新

測(cè)得的水三相點(diǎn)值輸入配套電測(cè)設(shè)備使用。

c）按恒溫槽和使用說明書的要求使其處于正常工作狀態(tài)，并保證工作區(qū)域的液面處

于規(guī)定的位置。

d）基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)主機(jī)開機(jī)預(yù)熱，進(jìn)入測(cè)量狀態(tài)。

e）基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊，如圖2,放置于恒溫槽內(nèi)（推薦在等溫

塊溫度孔內(nèi)注入15pL的導(dǎo)熱油以保障更好的溫度傳導(dǎo)性），需保證等溫塊在恒溫槽內(nèi)所

需的液面浸沒深度符合下表要求。

局浸式等溫塊全浸式等溫塊

浸沒深度2180mm2180mm

/I

圖2基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊示意圖

f）將基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)放入PCR測(cè)溫專用等溫塊，如圖3。標(biāo)準(zhǔn)銷電阻溫度計(jì)

插入PCR測(cè)溫專用等溫塊專用驗(yàn)證孔內(nèi)，保證標(biāo)準(zhǔn)鉛電阻感溫部件與等溫塊底部保持

水平，將恒溫槽設(shè)定在所需校準(zhǔn)的溫度點(diǎn)，將等溫塊與恒溫槽一起溫度穩(wěn)定1小時(shí)后，

監(jiān)控的標(biāo)準(zhǔn)伯電阻溫度計(jì)顯示基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)裝置溫度波動(dòng)度小于

0.01/10min,基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)裝置方可進(jìn)行校準(zhǔn)。

圖3基因擴(kuò)增儀;則溫系統(tǒng)在等溫塊內(nèi)校準(zhǔn)溫度示值誤差原理圖

7.2.2校準(zhǔn)過程

7.2.2.1溫度示值誤差

a）校準(zhǔn)溫度示值誤差的溫度點(diǎn)一般選擇30℃、50℃、60℃、70℃、90℃、95℃。

用戶有要求時(shí)，可按用戶要求選擇校準(zhǔn)點(diǎn)。

b）將基因擴(kuò)增儀測(cè)溫模塊與測(cè)溫系統(tǒng)主機(jī)相連，使其處于正常工作狀態(tài)。將基因擴(kuò)

增儀模塊放入基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊中，溫度傳感器配合放置于等溫塊測(cè)

試孔內(nèi)，保證測(cè)溫傳感器與等溫塊貼合緊密，并上蓋絕熱棉。無自重功能的基因擴(kuò)增儀

測(cè)溫系統(tǒng)須在測(cè)溫模塊上加壓封條。參見圖3。同時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻溫度計(jì)放入恒溫槽中，

標(biāo)準(zhǔn)伯電阻溫度計(jì)插入PCR測(cè)溫專用等溫塊專用驗(yàn)證孔內(nèi)，浸沒恒溫介質(zhì)深度不小于

180mm。

c）將恒溫槽設(shè)定在被校準(zhǔn)溫度點(diǎn)上，恒溫槽實(shí)際溫度最大偏差不超過±0.20℃,（以

二等標(biāo)準(zhǔn)鉆電阻溫度計(jì)示值為準(zhǔn)），穩(wěn)定30min以上，分別讀取標(biāo)準(zhǔn)器和基因擴(kuò)增儀測(cè)

溫系統(tǒng)每個(gè)通道的溫度值，連續(xù)4次測(cè)量。并計(jì)算相應(yīng)的平均值。

標(biāo)準(zhǔn)器。*1）一測(cè)試點(diǎn)測(cè)試點(diǎn)去伽2）一……―測(cè)試點(diǎn)an（tan）

標(biāo)準(zhǔn)器(t'2)一測(cè)試點(diǎn)a1(tal)一測(cè)試點(diǎn)a2(ta2)-……―測(cè)試點(diǎn)an(tan)

I

標(biāo)準(zhǔn)器(t*3)T測(cè)試點(diǎn)a1(tal)T測(cè)試點(diǎn)a2(ta2)T…―測(cè)試點(diǎn)an(tan)

I

標(biāo)準(zhǔn)器(t*4)一測(cè)試點(diǎn)a1(tai)—測(cè)試點(diǎn)a2(ta2)—……—測(cè)試點(diǎn)an(tan)

在測(cè)量過程中，恒溫槽溫度變化不超過0.01℃。

d)根據(jù)上述c)的測(cè)量要求，依次測(cè)量在30℃、50℃、60℃>70℃、90℃、95c狀

態(tài)下，標(biāo)準(zhǔn)器和基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道a1~an點(diǎn)的溫度示值。

e)溫度校準(zhǔn)點(diǎn)也可以根據(jù)客戶的要求，按照上述方法進(jìn)行測(cè)量。

722.2溫度測(cè)量范圍

按照7.2.2.1中的b)和c)的要求，分別測(cè)量基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在溫度測(cè)量常規(guī)下

限30℃和常規(guī)上限95℃狀態(tài)卜.的示值誤差。

溫度測(cè)量上限和溫度下限也可以根據(jù)生產(chǎn)廠家標(biāo)注的溫度測(cè)量范圍，按照上述方法

進(jìn)行測(cè)量。

7.2.2.3溫度分辨力

a)按照7.2.2.1中的b)和c)的要求，基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)測(cè)溫模塊放入恒溫槽中

的基因擴(kuò)增儀校準(zhǔn)專用等溫塊溫度驗(yàn)證孔內(nèi)，將恒溫槽與等溫塊一起設(shè)定在90℃,恒

溫30min以上，測(cè)量基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)顯示穩(wěn)定在90℃狀態(tài)下的示值5記錄下此

時(shí)標(biāo)準(zhǔn)的電阻溫度計(jì)示值;

b)根據(jù)被校準(zhǔn)基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)標(biāo)稱顯示的溫度分辨力Di,緩慢調(diào)整恒溫槽的

設(shè)定溫度，直至被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)顯示值穩(wěn)定在(ti+Di)℃,記錄下化時(shí)標(biāo)準(zhǔn)

伯電阻溫度計(jì)示值T2℃,基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)放入恒溫槽中的基因擴(kuò)增儀校準(zhǔn)專用等溫

塊，恒溫10min以上，測(cè)量基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在90℃狀態(tài)下的示值心。

c)按照步躲a和步驟b,重復(fù)連續(xù)4次測(cè)量，并記錄數(shù)據(jù)。并計(jì)算4次測(cè)量7；和-

的平均值。

d)溫度分辨力(率)。應(yīng)按。=心-不計(jì)算

7.3校準(zhǔn)結(jié)果的處理

7.3.1溫度示值誤差按下式計(jì)算：

=￡-1"

式中可〃：基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)溫度示值誤差。

工：基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)a1-an通道4次溫度測(cè)量的平均值。

F：標(biāo)準(zhǔn)伯電阻溫度計(jì)4次測(cè)量得到的溫度測(cè)量的平均值。

依據(jù)JJG160的規(guī)定，換算標(biāo)準(zhǔn)鈉電阻溫度計(jì)4次測(cè)量得到的溫度值，并計(jì)算其的

平均值7：

a）依據(jù)JJG160的規(guī)定，換算標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻溫度計(jì)4次測(cè)量得到的溫度值，并計(jì)算其

的平均值*:

+￡）/4

b）計(jì)算基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)a1-an通道4次溫度測(cè)量的平均值。

[=痣+%+%+"/4

c）計(jì)算基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道a1~an的示值誤差：

『，修約至IJ0.01C。

7.3.2溫度分辨力（率），按下式計(jì)算：

其中：。一為溫度分辨力，℃,按照標(biāo)稱溫度分辨力D1的有效位數(shù)修約，。C；

1=（＞+?+?+^）/4

12—為等溫塊在恒溫槽內(nèi)穩(wěn)定在90.00C時(shí)，基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道單

次測(cè)量的溫度示值4的4次平均值；℃,按照標(biāo)稱溫度分辨力D1的

有效位數(shù)修約，℃；

彳=（V+邛+穹+看|）/4

7一為基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道單次測(cè)量的溫度示值（T2+DI）時(shí)標(biāo)準(zhǔn)銷

電阻溫度計(jì)示值7；的4次平均值；。C,按照標(biāo)稱溫度分辨力D1的有

效位數(shù)修約，℃；

a）計(jì)算基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道a1~an的示值誤差：

o=Z-1,按照標(biāo)稱溫度分辨力D1的有效位數(shù)修約，°C。

b）計(jì)算基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)某通道4次測(cè)量結(jié)果的平均值3。

『=（。1+。2+。3+。4）/4,按照標(biāo)稱溫度分辨力D1的有效位數(shù)修約，℃o

8校準(zhǔn)結(jié)果的表達(dá)

校準(zhǔn)結(jié)果應(yīng)在校準(zhǔn)證書上反映。校準(zhǔn)證書應(yīng)至少包括以下信息：

a）標(biāo)題：“校準(zhǔn)證書”；

b）實(shí)驗(yàn)室名稱和地址；

c）進(jìn)行校準(zhǔn)的地點(diǎn)（如果與實(shí)驗(yàn)室的地址不同）；

d）證書的唯一性標(biāo)識(shí)（如編號(hào)），每頁及總頁數(shù)的標(biāo)識(shí)；

e）客戶的名稱和地址；

f）被校對(duì)象的描述和明確標(biāo)識(shí)：

g）進(jìn)行校準(zhǔn)的日期，如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性和應(yīng)用有關(guān)時(shí)，應(yīng)說明被校對(duì)象的

接收日期；

h）如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性應(yīng)用有關(guān)時(shí)，應(yīng)對(duì)被校樣品的抽樣程序進(jìn)行說明；

i）校準(zhǔn)所依據(jù)的技術(shù)規(guī)范的標(biāo)識(shí)，包括名稱及代號(hào)；

j）本次校準(zhǔn)所用測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性及有效性說明；

k）校準(zhǔn)環(huán)境的描述；

I）各校準(zhǔn)項(xiàng)目檢查結(jié)果的說明；

m）對(duì)校準(zhǔn)規(guī)范的偏寓的說明；

n）校準(zhǔn)證書簽發(fā)人的簽名、職務(wù)或等效標(biāo)識(shí)；

o）校準(zhǔn)結(jié)果僅對(duì)被校對(duì)象有效的聲明；

P）未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室竹面批準(zhǔn)，不得部分復(fù)制證書的聲明。

附錄A

基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)原始記錄

委托單位：校準(zhǔn)記錄編號(hào)：

產(chǎn)品名稱：外觀狀況：

制造單位：型號(hào)/規(guī)格：

樣品編號(hào)：校準(zhǔn)地點(diǎn)：

環(huán)境溫度：_環(huán)境濕度：____%RH

主要計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)器具

最大允許誤復(fù)檢（校）

差/準(zhǔn)確度等日期

名稱型號(hào)規(guī)格儀器編號(hào)證書編號(hào)

級(jí)/

不確定度

1、溫度力7值誤差（℃）

測(cè)量

校準(zhǔn)溫度示值誤差

項(xiàng)目

通道號(hào)305060709095

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

本次溫度示值誤差校押E擴(kuò)展不確定度U（k=2）：

2、測(cè)量范圍為，匕?℃,>

3、溫度分辨力：（℃）

讀數(shù)順序

不值溫度分辨力

1234平均值

基因擴(kuò)增儀

測(cè)溫系統(tǒng)心

基因擴(kuò)增儀

測(cè)溫系統(tǒng)［

附錄B

證書內(nèi)頁格式

1、溫度測(cè)量范圍：℃?℃

2、溫度示值誤差

測(cè)量項(xiàng)目校準(zhǔn)溫度示值誤差(°C)

通道號(hào)305060709095

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

溫度分辨力：℃

本次溫度示值誤差校準(zhǔn)擴(kuò)展不確定度U(k=2):

3、溫度分辨力:℃

備注：基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)采樣周期或采樣頻率:

附錄c

基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)示值誤差

測(cè)量結(jié)果不確定度評(píng)定實(shí)例

C.1概述

C.1.1測(cè)量環(huán)境：溫度：（15?35）℃；環(huán)境濕度：＜85%RHo

C.1.2主要標(biāo)準(zhǔn)器：二等伯電阻溫度計(jì)，1594測(cè)溫弓橋。

C.1.3配套設(shè)備：深井恒溫槽、配套基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊。

C.1.4被校對(duì)象：PCR溫度實(shí)時(shí)檢測(cè)系統(tǒng)（0~120）℃U=0.13℃k=2

其技術(shù)指標(biāo)見表1。

表C.1基因擴(kuò)增儀（PCR儀）測(cè)溫系統(tǒng)技術(shù)指標(biāo)

分辨率o.orc

測(cè)溫范圍(10-105)℃

最大允許誤差±0.20℃

C.1.5測(cè)量方法：在常規(guī)測(cè)量上限溫度95C用比較法進(jìn)行測(cè)量。按恒溫槽和使用說明書

的要求使其處于正常工作狀態(tài)，并保證工作區(qū)域的液面處于規(guī)定的位置。全浸式基因擴(kuò)

增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊放置于恒溫槽內(nèi)（推薦在等溫塊溫度孔內(nèi)注入15PL的導(dǎo)

熱油以保障更好的溫度傳導(dǎo)性），需保證等溫塊在恒溫槽內(nèi)所需的液面浸沒深度符合要

求?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)主機(jī)開機(jī)預(yù)熱，進(jìn)入測(cè)量狀態(tài)。將基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)放入

PCR測(cè)溫專用等溫塊。標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻溫度計(jì)插入PCR測(cè)溫專用等溫塊專用驗(yàn)證孔內(nèi)，保

證標(biāo)準(zhǔn)銷電阻感溫部件位置與等溫塊底部保持水平，將恒溫槽設(shè)定在所需校準(zhǔn)的溫度

點(diǎn)，將等溫塊與恒溫槽一起溫度穩(wěn)定1小時(shí)后，監(jiān)控的標(biāo)準(zhǔn)伯電阻溫度計(jì)顯示基因擴(kuò)增

儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)裝置溫度波動(dòng)度小于0.01/10min,基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)裝置方可進(jìn)

行溫度校準(zhǔn)。

C.2數(shù)學(xué)模型

△匕=寫工+普（1）

式中：

△T—基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在校準(zhǔn)溫度點(diǎn)的示值誤差值，。C；

心一基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在校準(zhǔn)溫度點(diǎn)的示值平均值，。c；

4一標(biāo)準(zhǔn)銷電阻溫度計(jì)在校準(zhǔn)溫度點(diǎn)顯示的實(shí)際溫度值，。C；

北一基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)專用等溫塊與標(biāo)準(zhǔn)恒溫槽實(shí)際溫度的偏差，。c。

C.3靈敏系數(shù)、方差

d\td\t

C3.1靈敏系數(shù)：弓=M=1,4=久=-1;Q=9=1

次。

C3.2方差：.（△￡）=%四）］+泌&）f+與此才=C（%j）+/?）+/位產(chǎn)

C.4標(biāo)準(zhǔn)不確定度來源

C.4.1輸入量導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度認(rèn)。）的評(píng)定

輸入量七導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度水幻由4個(gè)分量構(gòu)成。

C.4.1.1由被校基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量從即）；

C.4.1.2由恒溫槽和等溫塊提供溫場(chǎng)不均勻性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量”?）；

C.4.1.3由被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)分辨力引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度〃（=）；

C.4.1.4由恒溫槽和等溫塊插入深度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量“（」）；

C.4.2輸入量4導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度〃&）的評(píng)定

輸入量％導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度”幻由4個(gè)分量構(gòu)成。

C.4.2.1由標(biāo)準(zhǔn)粕電阻溫度計(jì)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量〃（媼）；

C.4.2.2由電測(cè)設(shè)備誤差引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量〃（還）；

C.4.2.3由測(cè)量電流引起的自熱效應(yīng)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度〃（￡）；

C.4.2.4由標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻穩(wěn)定性的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量以勤）；

C.4.3輸入量口導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度〃（1）的評(píng)定

輸入量1導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度貿(mào)［）由1個(gè)分量構(gòu)成。

即標(biāo)準(zhǔn)的電阻示值和等溫塊測(cè)試孔內(nèi)部實(shí)際溫度的偏差〃（7）。

C.5標(biāo)準(zhǔn)不確定度的評(píng)定

C.5.1〃G）的評(píng)定

C.5.1.1〃（如）的評(píng)定

被校基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度〃（1），采用A類不確定度評(píng)

定方法。

在重復(fù)性條件下，對(duì)被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)的1號(hào)通道進(jìn)行10次測(cè)量，測(cè)到10

次的示值，測(cè)量值分別為：94.85℃,94.85℃,94.86℃,94.86℃,94.85℃,94.85℃,

94.85℃,94.85℃,94.85℃,94.85C。在該通道測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)偏差為

■（△廣正）

S=［上-----------=0.003℃

\10-1

實(shí)際測(cè)量中以2次測(cè)量結(jié)果的平均值作為測(cè)量結(jié)果，則

u（G=s/亞=0.002C

C.5.1.2u（K）的評(píng)定

由恒溫槽和等溫塊提供溫場(chǎng)不均勻性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量”乙），采用B類標(biāo)

準(zhǔn)不確定度評(píng)定方法。

恒溫槽內(nèi)配套專用等溫塊提供的溫場(chǎng)均勻性在95c時(shí)可以達(dá)到，則區(qū)間半寬a=0.015C,

該分布服從均勻分布，k=6,故

uQ=0.015/A/3=0.009℃

C.5.1.3〃公）的評(píng)定

由被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)分辨力引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度〃（康），采用B類標(biāo)準(zhǔn)不確

定度評(píng)定方法。

被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)分辨力為0.01C,則區(qū)間半寬。=0.01/2=0.005。。，該分布服從

均勻分布，故

=0.005/73=0.003℃

C51.4MK）的評(píng)定

由等溫塊插入恒溫槽深度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量〃（覆），采用B類標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng)

定方法。

由等溫塊插入恒溫嘈深度引入的垂直溫度均勻性為0.005C,則區(qū)間半寬

a=0.005/2=0.0025℃,該分在服從均勻分布，故

扁）=09025/次=0.001℃

C.5.2u&.）的評(píng)定

C.5.2.1u（W）的評(píng)定

由標(biāo)準(zhǔn)伯電阻溫度計(jì)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量水口），采用B類標(biāo)準(zhǔn)不確定

度評(píng)定方法。

標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻溫度計(jì)在95C時(shí)，L/=0.005℃,（k=2）

w（rT）=0.005/2=0.0025C

C52.2〃（窘）的評(píng)定

由電測(cè)設(shè)備誤差引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u（短），采用B類標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng)定方法。

標(biāo)準(zhǔn)鉆電阻溫度計(jì)每次使用前測(cè)得的Rtp值，用同一臺(tái)測(cè)溫電橋測(cè)量該標(biāo)準(zhǔn)鐺電阻

在95c時(shí)的溫度值。

u（港）=〃（"/）/（叱$/八）』5

=（0.001x0.4732128/24.8440x揚(yáng)/0.0038741229=0.003℃

C.5.2.3貿(mào)?。┑脑u(píng)定

由測(cè)量電流引起的自熱效應(yīng)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度M匚），采用B類標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng)

定方法。

95℃恒溫槽內(nèi)，由于在較高溫度流動(dòng)介質(zhì)的恒溫槽中，自熱影響可以忽略不計(jì)。則

U（￡E）=0.000℃。

C.5.2.4〃區(qū)）的評(píng)定

由標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻穩(wěn)定性的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量〃（乙），采用B類標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng)定方法。

由于標(biāo)準(zhǔn)箱電阻溫度計(jì)的W95可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)箱電阻溫度計(jì)檢定證書中獲得，引起溫度的不

確定度可以用周期穩(wěn)定性來評(píng)估，0.0149,按均勻分布估計(jì)k=6。貝ij〃（乙）=0.008℃。

C.5.3.貿(mào)1）的評(píng)定

全浸式等溫塊測(cè)試孔內(nèi)部與恒溫槽實(shí)際溫度的偏差〃（&）：95。。在重復(fù)性條件下.測(cè)

量等溫塊溫度與恒溫槽內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)鉗電阻溫度計(jì)實(shí)際溫度值進(jìn)行10次誤差測(cè)量，則到10

次的誤差值，誤差值分別為：0.0