再生醫(yī)學NK細胞培養(yǎng)技術員崗位考試試卷及答案單項選擇題（每題2分，共10題）1.NK細胞培養(yǎng)常用的基礎培養(yǎng)基是（）A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.F122.培養(yǎng)NK細胞時，添加的血清一般為（）A.小牛血清B.胎牛血清C.馬血清D.人血清3.NK細胞培養(yǎng)的適宜溫度是（）A.35℃B.37℃C.39℃D.40℃4.細胞計數(shù)時常用的染料是（）A.結(jié)晶紫B.臺盼藍C.甲基綠D.伊紅5.培養(yǎng)NK細胞的氣體環(huán)境中CO?濃度一般為（）A.2%B.5%C.8%D.10%6.以下哪種物質(zhì)可用于激活NK細胞（）A.IL-2B.IL-4C.IL-6D.IL-87.進行細胞培養(yǎng)時，超凈工作臺需提前開機多久進行紫外消毒（）A.10分鐘B.20分鐘C.30分鐘D.60分鐘8.培養(yǎng)NK細胞的器皿通常用什么方法滅菌（）A.干熱滅菌B.濕熱滅菌C.化學消毒D.過濾除菌9.NK細胞屬于（）A.T淋巴細胞B.B淋巴細胞C.固有免疫細胞D.吞噬細胞10.細胞凍存時常用的保護劑是（）A.甘油B.DMSOC.乙醇D.丙酮多項選擇題（每題2分，共10題）1.影響NK細胞培養(yǎng)的因素有（）A.培養(yǎng)基成分B.血清質(zhì)量C.氣體環(huán)境D.培養(yǎng)溫度2.以下哪些操作需要在無菌條件下進行（）A.細胞接種B.培養(yǎng)基配制C.細胞收獲D.試劑添加3.培養(yǎng)NK細胞所需的設備有（）A.二氧化碳培養(yǎng)箱B.超凈工作臺C.離心機D.顯微鏡4.細胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)的污染類型有（）A.細菌污染B.真菌污染C.支原體污染D.病毒污染5.用于檢測NK細胞活性的方法有（）A.乳酸脫氫酶釋放法B.流式細胞術C.MTT法D.免疫熒光法6.細胞凍存的步驟包括（）A.配制凍存液B.收集細胞C.梯度降溫D.液氮保存7.培養(yǎng)NK細胞的培養(yǎng)基中可能添加的成分有（）A.氨基酸B.維生素C.葡萄糖D.抗生素8.以下哪些是NK細胞的功能（）A.殺傷腫瘤細胞B.抗病毒感染C.調(diào)節(jié)免疫D.分泌抗體9.細胞培養(yǎng)過程中，換液的目的是（）A.補充營養(yǎng)物質(zhì)B.去除代謝廢物C.維持適宜的pH值D.防止細胞老化10.檢測細胞密度的方法有（）A.血細胞計數(shù)板計數(shù)B.流式細胞儀計數(shù)C.比濁法D.熒光定量法判斷題（每題2分，共10題）1.NK細胞培養(yǎng)過程中不需要添加抗生素。（）2.細胞培養(yǎng)所用的器皿可以不經(jīng)過滅菌處理。（）3.提高培養(yǎng)溫度一定能促進NK細胞生長。（）4.血清在細胞培養(yǎng)中主要起提供營養(yǎng)和緩沖的作用。（）5.臺盼藍染色后，活細胞會被染成藍色。（）6.二氧化碳培養(yǎng)箱的作用只是提供適宜的溫度。（）7.培養(yǎng)NK細胞時，細胞傳代次數(shù)越多越好。（）8.細胞凍存復蘇后，其活性不會受到影響。（）9.只要在超凈工作臺內(nèi)操作，就不會發(fā)生細胞污染。（）10.NK細胞只能來源于外周血。（）簡答題（每題5分，共4題）1.簡述NK細胞培養(yǎng)的基本流程。答案：準備適宜培養(yǎng)基及添加物，配制含血清、抗生素等的完全培養(yǎng)基；采集外周血等來源細胞樣本，分離出NK細胞；將細胞接種于培養(yǎng)瓶，置于適宜溫度、氣體環(huán)境的培養(yǎng)箱培養(yǎng)；期間適時換液、觀察細胞生長狀態(tài)；細胞生長到一定密度時進行傳代。2.簡述細胞污染的常見原因及預防措施。答案：常見原因有操作環(huán)境不無菌、器皿未嚴格滅菌、試劑污染等。預防措施：嚴格進行操作環(huán)境及器皿的消毒滅菌；使用無菌試劑；規(guī)范實驗操作，在超凈工作臺內(nèi)按無菌要求操作；定期檢測培養(yǎng)環(huán)境及細胞狀態(tài)。3.簡述凍存NK細胞的意義。答案：可長期保存NK細胞，避免細胞在連續(xù)培養(yǎng)中發(fā)生遺傳特性改變、老化及污染等問題；方便在需要時復蘇使用，保證細胞的活性和功能；對于研究、臨床應用等，能隨時提供質(zhì)量穩(wěn)定的細胞資源，利于實驗的重復性和連貫性。4.簡述檢測NK細胞活性的意義。答案：能評估NK細胞的功能狀態(tài)，了解其對腫瘤細胞、病毒感染細胞等靶細胞的殺傷能力；在免疫治療中，可監(jiān)測治療效果，判斷NK細胞療法是否有效；研究免疫相關疾病時，有助于分析疾病發(fā)生發(fā)展過程中NK細胞功能的變化。討論題（每題5分，共4題）1.討論如何提高NK細胞培養(yǎng)的產(chǎn)量和質(zhì)量。答案：優(yōu)化培養(yǎng)基配方，選擇合適血清和添加生長因子；控制培養(yǎng)條件如溫度、氣體、pH精準穩(wěn)定；采用合適培養(yǎng)方式，如懸浮培養(yǎng)或特殊培養(yǎng)體系；定期檢測細胞狀態(tài)，及時處理污染等問題；合理傳代，避免細胞老化。2.討論NK細胞培養(yǎng)過程中遇到細胞生長緩慢的可能原因及解決方法。答案：可能原因有培養(yǎng)基營養(yǎng)不足、血清質(zhì)量差、培養(yǎng)條件不適宜、細胞初始狀態(tài)不佳等。解決方法：更換優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基和血清，調(diào)整培養(yǎng)溫度、氣體等條件，對細胞進行復蘇優(yōu)化，添加促進細胞生長的因子，排查是否有潛在污染并處理。3.討論在臨床應用中，NK細胞培養(yǎng)技術面臨的挑戰(zhàn)及應對策略。答案：挑戰(zhàn)包括大規(guī)模培養(yǎng)技術優(yōu)化、細胞質(zhì)量控制、培養(yǎng)成本高、安全性保障等。策略：研發(fā)高效培養(yǎng)體系，建立嚴格質(zhì)量標準，優(yōu)化工藝降低成本，加強安全性評估和監(jiān)控，與多學科合作推進技術發(fā)展。4.討論如何保證NK細胞培養(yǎng)實驗的可重復性。答案：統(tǒng)一實驗材料，如使用同一批次的培養(yǎng)基、血清等；規(guī)范操作流程，詳細記錄每一步驟參數(shù)；使用標準化設備，定期校準；對實驗人員進行培訓，確保操作一致性；設置平行實驗，多次重復驗證實驗結(jié)果，嚴格控制實驗環(huán)境條件穩(wěn)定。答案單項選擇題1.B2.B3.B4.B