檢驗(yàn)科專業(yè)技術(shù)指南檢驗(yàn)科作為醫(yī)學(xué)診療的關(guān)鍵支撐部門，其技術(shù)操作的規(guī)范性與準(zhǔn)確性直接影響臨床診斷、治療及預(yù)后評(píng)估。以下從標(biāo)本采集與處理、檢測(cè)方法選擇與驗(yàn)證、質(zhì)量控制體系構(gòu)建、儀器設(shè)備管理、結(jié)果審核與報(bào)告發(fā)布等核心環(huán)節(jié)，系統(tǒng)闡述檢驗(yàn)科專業(yè)技術(shù)操作的具體要求與實(shí)踐要點(diǎn)。一、標(biāo)本采集與處理技術(shù)規(guī)范標(biāo)本質(zhì)量是檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的基礎(chǔ)，需嚴(yán)格遵循“正確患者、正確項(xiàng)目、正確時(shí)間、正確容器、正確保存”的五原則。1.標(biāo)本采集前準(zhǔn)備采集前需確認(rèn)患者基本信息（姓名、性別、年齡、住院號(hào)等）與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一致，避免張冠李戴。針對(duì)特殊項(xiàng)目（如空腹血糖、血藥濃度監(jiān)測(cè)），需提前告知患者準(zhǔn)備事項(xiàng)：空腹項(xiàng)目需禁食8-12小時(shí)，避免劇烈運(yùn)動(dòng)；激素類檢測(cè)需注明采集時(shí)間（如皮質(zhì)醇需8:00、16:00、24:00分時(shí)段采集）；女性患者需避開(kāi)月經(jīng)期（婦科相關(guān)項(xiàng)目）或注明妊娠狀態(tài)（HCG、甲狀腺功能等）。2.不同類型標(biāo)本的采集要求-血液標(biāo)本：靜脈采血時(shí)，止血帶綁扎時(shí)間應(yīng)≤1分鐘，避免因淤血導(dǎo)致血液成分濃縮（如乳酸、鉀離子升高）；抗凝管選擇需嚴(yán)格對(duì)應(yīng)檢測(cè)項(xiàng)目（如EDTA-K2用于血常規(guī)，枸櫞酸鈉用于凝血功能，肝素鋰用于生化急診項(xiàng)目）；采血順序遵循“無(wú)菌管→凝血管→抗凝管→其他管”，防止添加劑交叉污染；嬰幼兒末梢血采集需避免擠壓（防止組織液混入），采集量需滿足檢測(cè)需求（血常規(guī)至少100μl）。-尿液標(biāo)本：常規(guī)尿常規(guī)需留取中段晨尿（約10-20ml），避免月經(jīng)血、糞便污染；24小時(shí)尿蛋白定量需添加防腐劑（如甲苯），并準(zhǔn)確記錄總尿量；尿培養(yǎng)需嚴(yán)格無(wú)菌操作，采集前清潔外陰，留取中段尿于無(wú)菌容器。-體液標(biāo)本：胸腹水、腦脊液等需在無(wú)菌條件下采集，避免接觸空氣（如血?dú)夥治鲂韪艚^氧氣）；微生物培養(yǎng)標(biāo)本需在使用抗生素前采集，量≥5ml（腦脊液≥1ml），及時(shí)送檢。3.標(biāo)本運(yùn)輸與保存標(biāo)本需在采集后1小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，特殊項(xiàng)目（如血?dú)夥治觯┬?分鐘內(nèi)檢測(cè)；需冷藏的標(biāo)本（如胰島素、胃泌素）應(yīng)置于4℃保存（≤2小時(shí)），避免反復(fù)凍融；需常溫保存的標(biāo)本（如凝血功能）應(yīng)避免陽(yáng)光直射或高溫環(huán)境；微生物培養(yǎng)標(biāo)本需保持35-37℃運(yùn)輸（如腦脊液），防止病原菌死亡。4.不合格標(biāo)本的識(shí)別與處理實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本時(shí)需嚴(yán)格核查，以下情況視為不合格：標(biāo)簽信息不全或錯(cuò)誤、標(biāo)本量不足（如血常規(guī)＜50μl）、溶血（血紅蛋白＞0.5g/L影響鉀離子、LDH等）、脂血（甘油三酯＞10mmol/L影響比色法項(xiàng)目）、凝固（抗凝管出現(xiàn)凝塊）、污染（如尿液含糞便）。不合格標(biāo)本需登記并及時(shí)聯(lián)系臨床重新采集，避免錯(cuò)誤結(jié)果誤導(dǎo)診療。二、檢測(cè)方法選擇與驗(yàn)證技術(shù)要點(diǎn)檢測(cè)方法的科學(xué)性與適用性直接影響結(jié)果可靠性，需結(jié)合項(xiàng)目特性、患者需求及實(shí)驗(yàn)室條件綜合選擇。1.方法學(xué)選擇原則-臨床需求導(dǎo)向：如腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)優(yōu)先選擇高靈敏度方法（化學(xué)發(fā)光免疫分析法），感染性疾病確診需結(jié)合病原體培養(yǎng)（金標(biāo)準(zhǔn)）與分子檢測(cè)（快速篩查）；-性能指標(biāo)匹配：定量項(xiàng)目需關(guān)注精密度（CV≤5%）、準(zhǔn)確度（偏差≤10%）、線性范圍（覆蓋臨床常見(jiàn)值）；定性項(xiàng)目需關(guān)注靈敏度（≥95%）、特異度（≥98%）；-成本效益平衡：急診項(xiàng)目選擇快速檢測(cè)（如心肌標(biāo)志物POCT），常規(guī)項(xiàng)目選擇高通量自動(dòng)化方法（如生化分析儀）。2.方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)施新方法引入或參數(shù)變更時(shí)需進(jìn)行全面驗(yàn)證：-精密度驗(yàn)證：連續(xù)20天檢測(cè)高、中、低值質(zhì)控品，計(jì)算批內(nèi)CV（≤1/4CLIA’88允許誤差）、批間CV（≤1/3允許誤差）；-準(zhǔn)確度驗(yàn)證：通過(guò)與參考方法（如質(zhì)譜法）比對(duì)，檢測(cè)20份臨床標(biāo)本，計(jì)算相對(duì)偏差（≤允許誤差）；-線性范圍驗(yàn)證：用高值標(biāo)本倍比稀釋，檢測(cè)6個(gè)濃度點(diǎn)，相關(guān)系數(shù)r需≥0.990，偏離線性≤10%；-抗干擾能力驗(yàn)證：模擬溶血（Hb≤5g/L）、脂血（TG≤20mmol/L）、黃疸（Bil≤342μmol/L）等干擾因素，檢測(cè)結(jié)果偏差需≤10%。3.方法學(xué)確認(rèn)與持續(xù)改進(jìn)對(duì)于已通過(guò)驗(yàn)證的方法，需定期進(jìn)行性能確認(rèn)（每6個(gè)月1次），當(dāng)試劑批次變更、儀器維修后需重新驗(yàn)證關(guān)鍵參數(shù)；若發(fā)現(xiàn)方法學(xué)缺陷（如交叉污染、攜帶污染率＞0.1%），需及時(shí)優(yōu)化（如增加清洗步驟、更換反應(yīng)杯）。三、質(zhì)量控制體系構(gòu)建與實(shí)施質(zhì)量控制（QC）是確保檢驗(yàn)結(jié)果一致性與可比性的核心手段，需建立“室內(nèi)質(zhì)控（IQC）+室間質(zhì)評(píng)（EQA）+過(guò)程控制”的三級(jí)體系。1.室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)范-質(zhì)控品選擇：需選擇與患者標(biāo)本基質(zhì)相似、穩(wěn)定期長(zhǎng)（≥1年）、濃度覆蓋醫(yī)學(xué)決定水平的商品化質(zhì)控品（如Levey-Jennings圖用高、中、低值）；-質(zhì)控頻率：生化、免疫項(xiàng)目每批檢測(cè)前需檢測(cè)1次質(zhì)控，血常規(guī)、凝血項(xiàng)目每4小時(shí)檢測(cè)1次，微生物培養(yǎng)需每批培養(yǎng)基進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)；-質(zhì)控規(guī)則應(yīng)用：采用Westgard多規(guī)則（12s警告，13s、22s、R4s、41s、10x失控），失控時(shí)需立即分析原因（試劑失效、儀器故障、操作錯(cuò)誤），并記錄處理過(guò)程（如更換試劑、校準(zhǔn)儀器、重新檢測(cè)），失控期間檢測(cè)的患者結(jié)果需重新測(cè)定；-質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)管理：每月統(tǒng)計(jì)質(zhì)控靶值、標(biāo)準(zhǔn)差（SD）、變異系數(shù)（CV），繪制趨勢(shì)圖，若發(fā)現(xiàn)CV持續(xù)升高（如從3%升至8%），需排查儀器穩(wěn)定性或試劑均一性問(wèn)題。2.室間質(zhì)評(píng)參與要求實(shí)驗(yàn)室需參加國(guó)家或省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心組織的EQA項(xiàng)目（如衛(wèi)生部臨檢中心、各省臨檢中心），每年至少2次。收到質(zhì)評(píng)樣本后，需與常規(guī)患者標(biāo)本同批檢測(cè)，不得額外處理（如增加檢測(cè)次數(shù)）；結(jié)果回報(bào)后，分析失控項(xiàng)目原因（如方法學(xué)差異、校準(zhǔn)偏差），制定改進(jìn)措施（如更換校準(zhǔn)品、調(diào)整參數(shù)），并形成EQA總結(jié)報(bào)告存檔。3.全流程過(guò)程控制除QC外，需關(guān)注檢測(cè)過(guò)程中的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)：-校準(zhǔn)控制：儀器需定期校準(zhǔn)（生化儀每月1次，血球儀每季度1次），使用配套校準(zhǔn)品，校準(zhǔn)后檢測(cè)質(zhì)控品確認(rèn)有效性；-交叉污染控制：檢測(cè)高值標(biāo)本后需檢測(cè)空白樣本，攜帶污染率需≤0.1%（如乙肝表面抗原高值標(biāo)本后檢測(cè)陰性標(biāo)本，結(jié)果需≤臨界值）；-人員操作控制：新員工需通過(guò)操作考核（如血涂片制備、PCR加樣），熟練掌握SOP（標(biāo)準(zhǔn)操作程序），定期進(jìn)行技能復(fù)訓(xùn)（每半年1次）。四、儀器設(shè)備管理技術(shù)要求儀器設(shè)備是檢驗(yàn)工作的物質(zhì)基礎(chǔ)，其性能狀態(tài)直接影響檢測(cè)結(jié)果。需建立“日常維護(hù)-定期校準(zhǔn)-性能驗(yàn)證”的全生命周期管理體系。1.日常維護(hù)-每日維護(hù)：開(kāi)機(jī)前檢查儀器狀態(tài)（如水位、電壓），運(yùn)行空白測(cè)試（如生化儀比色杯清洗）；關(guān)機(jī)后清理樣本針、試劑針（用75%酒精擦拭），傾倒廢液（避免細(xì)菌滋生）；-每周維護(hù)：更換蠕動(dòng)泵管（血球儀）、清洗反應(yīng)槽（免疫分析儀）、校準(zhǔn)加樣針（PCR儀）；-每月維護(hù)：檢查光路系統(tǒng)（生化儀光源強(qiáng)度）、更換濾芯（質(zhì)譜儀）、潤(rùn)滑機(jī)械部件（離心機(jī)）；-年度維護(hù)：聯(lián)系廠家進(jìn)行全面檢測(cè)（如流式細(xì)胞儀激光校準(zhǔn)、全自動(dòng)發(fā)報(bào)告系統(tǒng)數(shù)據(jù)備份）。2.校準(zhǔn)與性能驗(yàn)證-校準(zhǔn)時(shí)機(jī)：新儀器安裝后、試劑批次變更、儀器維修（更換關(guān)鍵部件如檢測(cè)器）、室內(nèi)質(zhì)控連續(xù)3天失控時(shí)需進(jìn)行校準(zhǔn)；-校準(zhǔn)方法：使用配套校準(zhǔn)品（如羅氏、貝克曼原廠校準(zhǔn)品），按SOP進(jìn)行多點(diǎn)校準(zhǔn)（生化項(xiàng)目至少3個(gè)濃度點(diǎn)），校準(zhǔn)后檢測(cè)質(zhì)控品確認(rèn)校準(zhǔn)有效性（質(zhì)控結(jié)果需在靶值±2SD內(nèi)）；-性能驗(yàn)證：校準(zhǔn)后需驗(yàn)證儀器關(guān)鍵性能（如生化儀線性范圍、免疫分析儀靈敏度），確保符合預(yù)期（如乙肝DNA檢測(cè)下限≤20IU/ml）。3.故障處理與應(yīng)急管理儀器故障時(shí)需立即停用并標(biāo)注“維修中”，記錄故障現(xiàn)象（如生化儀比色杯報(bào)警），聯(lián)系廠家工程師維修；維修后需進(jìn)行性能確認(rèn)（如檢測(cè)高、中、低值質(zhì)控品，CV≤5%）；對(duì)于關(guān)鍵設(shè)備（如血球儀、凝血儀），需配備備用機(jī)或與其他實(shí)驗(yàn)室建立應(yīng)急協(xié)作機(jī)制，確保急診項(xiàng)目2小時(shí)內(nèi)出結(jié)果。五、結(jié)果審核與報(bào)告發(fā)布規(guī)范檢驗(yàn)報(bào)告是臨床診療的重要依據(jù)，需確保結(jié)果準(zhǔn)確、表述清晰、發(fā)布及時(shí)。1.結(jié)果審核流程-一級(jí)審核：檢測(cè)人員完成檢測(cè)后，首先核對(duì)標(biāo)本信息（姓名、項(xiàng)目）與檢測(cè)結(jié)果匹配性，觀察數(shù)據(jù)合理性（如成人血紅蛋白＜50g/L需復(fù)核），排除儀器報(bào)警（如血球儀“涂片提示”需人工鏡檢）；-二級(jí)審核：組長(zhǎng)或授權(quán)主管技師進(jìn)行復(fù)核，重點(diǎn)關(guān)注異常結(jié)果（如肌鈣蛋白＞99百分位值）、與臨床診斷矛盾的結(jié)果（如發(fā)熱患者白細(xì)胞正常）、危急值（如血鉀＞6.0mmol/L、血糖＜2.2mmol/L），必要時(shí)聯(lián)系臨床醫(yī)生確認(rèn)患者狀態(tài)（如是否輸入庫(kù)存血導(dǎo)致高鉀）；-特殊結(jié)果處理：微生物培養(yǎng)陽(yáng)性（如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌）、基因檢測(cè)突變（如EGFR19外顯子缺失）需附加專業(yè)解釋（如“提示對(duì)吉非替尼敏感”），避免臨床誤讀。2.報(bào)告發(fā)布要求-及時(shí)性：急診項(xiàng)目（如心肌酶譜）30分鐘內(nèi)發(fā)布，常規(guī)項(xiàng)目（如血常規(guī)）2小時(shí)內(nèi)，復(fù)雜項(xiàng)目（如病理活檢）3個(gè)工作日內(nèi)；-規(guī)范性：報(bào)告需包含患者信息、檢測(cè)項(xiàng)目、結(jié)果（數(shù)值/定性）、參考范圍、檢測(cè)方法、檢測(cè)時(shí)間、審核人員簽名（電子簽名需加密）；-安全性：電子報(bào)告通過(guò)醫(yī)院LIS系統(tǒng)發(fā)布，設(shè)置訪問(wèn)權(quán)限（僅授權(quán)醫(yī)生查看），紙質(zhì)報(bào)告需密封發(fā)放，避免患者信息泄露。3.報(bào)告追溯與反饋患者對(duì)結(jié)果有疑問(wèn)時(shí)，需提供原始檢測(cè)數(shù)據(jù)（如血球儀散點(diǎn)圖、生化反應(yīng)曲線）、質(zhì)控記錄、儀器狀