儀器分析技術(shù)項(xiàng)目一緒論項(xiàng)目二可見分光光度法項(xiàng)目三紫外分光光度法項(xiàng)目四原子吸收分光光度法項(xiàng)目五電位分析法課程內(nèi)容：任務(wù)1-認(rèn)識(shí)實(shí)訓(xùn)室項(xiàng)目二學(xué)習(xí)目標(biāo)：實(shí)訓(xùn)室的定義精密儀器的管理分光光度實(shí)訓(xùn)室的環(huán)境要求分光光度實(shí)訓(xùn)室的管理規(guī)范實(shí)訓(xùn)室的定義對(duì)給定的產(chǎn)品、材料、設(shè)備、生物體、物理現(xiàn)象、工藝過程或服務(wù)，按規(guī)定的程序?qū)嵤┘夹g(shù)操作，以確定一種或多種特性或性能的實(shí)驗(yàn)室。氣相色譜室精密儀器實(shí)驗(yàn)室:液相色譜室原子吸收室光學(xué)儀器分析室配套的樣品預(yù)處理室大型精密儀器每臺(tái)建立技術(shù)檔案：1、儀器說明書、裝箱單、零配件清單2、安裝、調(diào)試、性能鑒定、驗(yàn)收記錄、索賠記錄3、使用規(guī)程、保養(yǎng)維修規(guī)程圖2.1某單位島津氣質(zhì)色譜儀的校準(zhǔn)證書圖2.2氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范使用登記本、維修記錄圖2.1島津氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀的校準(zhǔn)證書大型精密儀器每臺(tái)建立技術(shù)檔案：圖2.2氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范分光光度實(shí)訓(xùn)室的環(huán)境要求①溫度要求常溫，建議安裝空調(diào)設(shè)備，無回風(fēng)口；②濕度一般在45%~60%；③可配置1~2個(gè)水龍頭；④配置廢液收集桶，集中處理；⑤設(shè)置單相插座若于，設(shè)置獨(dú)立的配電盤、通風(fēng)柜開關(guān)；一般需安裝穩(wěn)壓電源；⑥無特殊要求無需用氣；⑦避免強(qiáng)光照射；⑧合成樹脂臺(tái)面，防振，工作臺(tái)應(yīng)離墻，以便于檢修儀器；⑨配置滅火器；⑩屬于第三類防雷建筑物；?設(shè)置良好接地；?有精密電子儀器設(shè)備，需進(jìn)行有效的電磁屏蒰；?

配置通風(fēng)柜，要求具有良好通風(fēng)。分光光度實(shí)訓(xùn)室管理規(guī)范1、化驗(yàn)員應(yīng)做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作，嚴(yán)禁無關(guān)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室；2、檢測(cè)用儀器、量具、卡具應(yīng)按類進(jìn)行設(shè)置、擺放3、實(shí)驗(yàn)室的精密儀器要建檔保管，做到防震、防塵、防腐蝕，并定時(shí)校驗(yàn)；4、所有的化學(xué)藥品都必須用規(guī)定的器具盛放；5、配制化學(xué)藥品或化驗(yàn)物品時(shí)，必須按操作程序進(jìn)行規(guī)范操作，杜絕違規(guī)產(chǎn)生的意外事故；6、在化驗(yàn)或檢測(cè)物品過程中，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)隨時(shí)保持有人在監(jiān)視或測(cè)量7、化驗(yàn)員應(yīng)對(duì)化驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)論負(fù)責(zé)，并如實(shí)、準(zhǔn)確填寫報(bào)告單；8、對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿要合理的存放，常用常洗，保持干凈、干燥；9、工作期間必須按要求做好自身安全防護(hù)，防止出現(xiàn)安全事故。分光光度實(shí)訓(xùn)室管理規(guī)范圖2.3實(shí)驗(yàn)室相關(guān)管理規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)總結(jié)分光光度實(shí)訓(xùn)室的環(huán)境要求實(shí)訓(xùn)室的定義分光光度實(shí)訓(xùn)室的管理規(guī)范精密儀器的管理任務(wù)2-食品添加劑碳酸鈉中鐵含量的測(cè)定項(xiàng)目二主要內(nèi)容原理——反應(yīng)條件的確定——標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制——儀器的相關(guān)操作——測(cè)定條件的確定——數(shù)據(jù)處理——報(bào)告目標(biāo)：1、拆解經(jīng)典案例，了解紫外可見分光光度法需要掌握的主要知識(shí)點(diǎn)和技能點(diǎn)2、根據(jù)崗位需求和操作規(guī)程或者國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，獨(dú)自完成相近的分析任務(wù)圖2.4食用堿案例分解：1、測(cè)定方法：紫外-可見分光光度法——知識(shí)點(diǎn)2、分析任務(wù)的原理——知識(shí)點(diǎn)圖2.5標(biāo)準(zhǔn)系列3、顯色反應(yīng)條件的確定——知識(shí)點(diǎn)4、標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的配制——技能點(diǎn)案例分解：5、分光光度計(jì)——知識(shí)點(diǎn)、技能點(diǎn)6、測(cè)定條件的選擇——知識(shí)點(diǎn)7、定量方法及數(shù)據(jù)處理圖2.6UV1800紫外可見分光光度計(jì)總結(jié)原理反應(yīng)條件的確定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制儀器的相關(guān)操作測(cè)定條件的確定數(shù)據(jù)處理報(bào)告思考題：01食品添加劑碳酸鈉中鐵含量的測(cè)定參考的是哪個(gè)國(guó)標(biāo)呢？02測(cè)定步驟步驟包括哪些呢？任務(wù)3-可見分光光度法-概述項(xiàng)目二提出疑問為什么用這種方法分析時(shí)，被分析的物質(zhì)需要有顏色？沒有顏色的物質(zhì)能否用分光光度法來分析呢？什么是分光光度法？這種方法的特點(diǎn)和應(yīng)用又有哪些呢？1.1目視比色法：1、比色分析法：利用比較待測(cè)溶液本身的顏色或加入試劑后呈現(xiàn)的顏色的深淺來測(cè)定溶液中待測(cè)物質(zhì)的濃度的方法用人的眼睛來檢測(cè)溶液顏色深淺的方法；1.2光電比色法：以光電轉(zhuǎn)換器件(如光電池)為檢測(cè)器來區(qū)別顏色深淺的方法；分光光度法(又稱吸收光譜法)根據(jù)物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的單色光的吸收程度不同而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法；可見分光光度法(400～780nm)紫外分光光度法(200～400nm)紅外分光光度法(3×103～3×104nm)特點(diǎn)及應(yīng)用1、靈敏度高下限可達(dá)10-5～10-6mol·L-1適用于微量組分的測(cè)定2、準(zhǔn)確度高3、測(cè)量范圍寬4、分析速度快、操作簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉5、應(yīng)用領(lǐng)域?qū)?、應(yīng)用前景廣總結(jié)比色分析法分光光度法定義分光光度法的特點(diǎn)及應(yīng)用思考題：01分光光度法定義？02為什么食品添加劑碳酸鈉中鐵含量的測(cè)定屬于可見分光光度法？任務(wù)4-光的基本性質(zhì)項(xiàng)目二學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握光的波粒二象性了解電磁波譜掌握單色光、復(fù)合光、互補(bǔ)光的定義光和光譜1.1波動(dòng)性光速

和頻率

與波長(zhǎng)

的關(guān)系為式中：頻率，光速，真空中為波長(zhǎng)，光和光譜1.2粒子性實(shí)際應(yīng)用案例：已知可見光的波長(zhǎng)范圍是400—780nm，求該波長(zhǎng)光對(duì)應(yīng)的能量范圍？光是一種粒子，具有能量式中能量普朗克常數(shù)，將各種電磁波按照波長(zhǎng)或者能量的高低進(jìn)行排列，可以構(gòu)成由短波射線到長(zhǎng)波微波的各種類型的光譜。1.3電磁波譜：?jiǎn)紊狻?fù)合光和互補(bǔ)光1、不同色光的波長(zhǎng)范圍單色光：具有同一波長(zhǎng)的光2、單色光、復(fù)合光和互補(bǔ)光復(fù)合光：含有多種波長(zhǎng)的光紅光是單色光嗎？白光和白熾燈的光屬于哪種光？互補(bǔ)光:如果把適當(dāng)顏色的兩種光按照一定強(qiáng)度比例混合，可以稱為白光，這兩種顏色的光即為互補(bǔ)光總結(jié)光的波粒二象性了解電磁波譜單色光、復(fù)合光、互補(bǔ)光的定義思考題：01已知紫外光的波長(zhǎng)范圍時(shí)10-400nm，試求其能量范圍時(shí)多少？任務(wù)5-物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收項(xiàng)目二學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握物質(zhì)顏色產(chǎn)生的原因掌握吸收光譜曲線的繪制過程及結(jié)論物質(zhì)顏色的產(chǎn)生動(dòng)畫1規(guī)律：若某溶液選擇性的吸收了可見光區(qū)某波長(zhǎng)的光，則該溶液即呈現(xiàn)出被吸收光的互補(bǔ)色光的顏色。重鉻酸鉀溶液為什么呈現(xiàn)黃色呢？無色溶液？黑色溶液？吸收光譜曲線吸收光譜曲線繪制過程：將不同波長(zhǎng)的光依次通過某一固定濃度和厚度的有色溶液，分別測(cè)出它們對(duì)各種波長(zhǎng)光的吸收程度(用吸光度A表示)，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)作圖，面出曲線，此曲線即稱為該物質(zhì)的光吸收曲線（或吸收光譜曲線)，吸收光譜曲線吸收光譜曲線繪制過程：①高錳酸鉀溶液對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收程度是不同的，對(duì)波長(zhǎng)為525nm的綠色光吸收最多，在吸收曲線上有一高峰（稱為吸收峰）。光吸收程度最大處的波長(zhǎng)稱為最大吸收波長(zhǎng)(常以表示）。在進(jìn)行光度測(cè)定時(shí)，通管都是選取在的波長(zhǎng)處來測(cè)量，因?yàn)檫@時(shí)可得到最大的靈敏度②不同濃度的高錳酸鉀溶液，其吸收曲線的形狀相似，最大吸收波長(zhǎng)也一樣。所不同的是吸收峰峰高隨濃度的增加而增高。③不同物質(zhì)的吸收曲線，其形狀和最大吸收波長(zhǎng)各不相同——定性分析分子吸收光譜產(chǎn)生的機(jī)理(1）分子運(yùn)動(dòng)及其能級(jí)躍遷分子內(nèi)部三種運(yùn)動(dòng)方式：電子運(yùn)動(dòng)：分子內(nèi)電子相對(duì)原子核的運(yùn)動(dòng)——電子能級(jí)；分子振動(dòng)：分子內(nèi)原子在其平衡位置上的振動(dòng)——振動(dòng)能級(jí)；分子轉(zhuǎn)動(dòng)：以及分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動(dòng)——轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)吸收光譜躍遷的一般原理(2）分子吸收光譜的產(chǎn)生一個(gè)分子的內(nèi)能

是它的轉(zhuǎn)動(dòng)能

、振動(dòng)能

和電子能

之和，即總結(jié)物質(zhì)顏色產(chǎn)生的原因物質(zhì)的吸收光譜曲線分子吸收光譜產(chǎn)生的機(jī)理思考題：01高錳酸鉀的吸收光譜曲線的繪制過程，我們基本已經(jīng)掌握，請(qǐng)大家通過查找資料設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，做出硫酸銅溶液的吸收光譜曲線？任務(wù)6-朗伯比爾定律項(xiàng)目二學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握朗伯-比爾定律掌握朗伯--比爾定律的影響因素朗伯（"??.H.Lambet"）定律：當(dāng)一束平行的單色光垂直照射到一定濃度的均勻透明溶液時(shí)，入射光被溶液吸收的程度與溶液厚度成正比，具體的關(guān)系為：式中:必為入射光通量;

辦為通過溶液后透射光通量;

為溶液的液層厚度，也稱光程長(zhǎng)度;

為比例常數(shù)，與入射光波長(zhǎng)，溶液性質(zhì)，濃度和溫度有關(guān);透射比透射光通量與入射光通量之比辦，為溶液對(duì)光的透射程度，即透射比;吸光度單色光通過溶液時(shí)被吸收的程度比爾（????????）定律：當(dāng)一束平行單色光垂直照射到同種物質(zhì)不同濃度、相同液層厚度的均勻透明溶液時(shí)，入射光被溶液吸收的程度與溶液濃度成正比，具體關(guān)系為：式中:k‘為比例常數(shù)，它與與入射光波長(zhǎng)，液層厚度，溶液性質(zhì)，濃度和溫度有關(guān)C為溶液濃度:注意：由于濃度過高或者過低時(shí)，溶液中的溶質(zhì)會(huì)發(fā)生電離或聚合而產(chǎn)生誤差，所以比爾定律只能在一定濃度范圍內(nèi)才適用！朗伯-比爾定律當(dāng)一束平行的單色光垂直入射通過均勻、透明的吸光物質(zhì)的稀溶液時(shí)，溶液對(duì)光的吸收程度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。式中：??——比例常數(shù)，它與入射光波長(zhǎng)，物質(zhì)的性質(zhì)，溶液的溫度等因素有關(guān)；應(yīng)用條件：1、入射光必須是單色光；2、吸收發(fā)生在均勻的介質(zhì)中；3、吸收過程中，吸收物質(zhì)互相不發(fā)生作用；吸光系數(shù)??的物理意義：?jiǎn)挝粷舛鹊娜芤阂簩雍穸葹?cm時(shí)，在一定波長(zhǎng)下測(cè)得的吸光度；當(dāng)單色光波長(zhǎng)、組分性質(zhì)、溫度和溶劑一定時(shí)，??一定；1、不同物質(zhì)在同一波長(zhǎng)下??可能不同（選擇性吸收），但同一物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下??一定不同；2、??越大，物質(zhì)對(duì)光吸收能力越強(qiáng)，測(cè)定靈敏度越高。3、??是定性、定量分析的依據(jù)，在一定條件下是常數(shù)！摩爾吸光系數(shù)：物理意義注意溶液的濃度為，于光程為1cm的吸收池中，在一定波長(zhǎng)下測(cè)得的吸光度；1.ε表示物質(zhì)對(duì)某一特定波長(zhǎng)光的吸收能力;ε越大，吸收能力越強(qiáng)，測(cè)定的靈敏度就越高。2.測(cè)定是選擇ε大的有色化合物進(jìn)行測(cè)定，選定具有最大ε值波長(zhǎng)的單色光作為入射光3.通常靈敏度低中等靈敏度高靈敏度摩爾吸光系數(shù)：物理意義適用條件溶液的濃度為，于光程為1cm的吸收池中，在一定波長(zhǎng)下測(cè)得的吸光度；質(zhì)量吸光系數(shù)適用于摩爾質(zhì)量未知的化合物吸光度的加和性當(dāng)溶液中含有多種對(duì)光產(chǎn)生吸收的物質(zhì)，且各組分之間不存在相互作用時(shí)，則該溶液對(duì)波長(zhǎng)λ光的總吸光度等于溶液中每一成分的吸光度之和，即吸光度具有加和性?？捎孟率奖硎荆豪什?-比爾定律的影響因素1、非單色光：Lambert-Bear定律的一個(gè)重要前提是單色光，但事實(shí)上真正的單色光是難以得到的。如在分光光度計(jì)中，從光源發(fā)出的光不是真正的單色光，而是包括了所需波長(zhǎng)的光和附近波長(zhǎng)的光，即：有一定波長(zhǎng)范圍的光，范圍越小，單色性越好，儀器越精密。測(cè)定時(shí)應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)?/p>