生物檢測(cè)崗位考試題庫及答案一、單選題（每題1分，共30分。每題只有一個(gè)正確答案，請(qǐng)將正確選項(xiàng)字母填入括號(hào)內(nèi)）1.在實(shí)時(shí)熒光定量PCR中，用于消除引物二聚體干擾的常用熒光探針類型是（）A.SYBRGreenIB.TaqManC.EvaGreenD.LUXprimer答案：B2.對(duì)同一批次ELISA試劑盒進(jìn)行靈敏度驗(yàn)證時(shí)，若陽性對(duì)照OD值低于說明書下限，首先應(yīng)排查（）A.酶標(biāo)儀波長設(shè)置B.洗板機(jī)針孔堵塞C.底物溶液失效D.封板膜粘性不足答案：C3.采用二代測(cè)序平臺(tái)檢測(cè)FFPE樣本的突變頻率時(shí)，最易導(dǎo)致假陽性的環(huán)節(jié)是（）A.片段化后末端修復(fù)B.文庫PCR富集C.橋式擴(kuò)增D.堿基識(shí)別算法答案：B4.在微生物限度檢查中，若供試品對(duì)細(xì)菌有中度抑菌活性，首選的中和劑為（）A.卵磷脂吐溫80B.硫代硫酸鈉C.組氨酸卵磷脂D.聚山梨酯20答案：A5.對(duì)血清中HBVDNA進(jìn)行定量時(shí)，若內(nèi)標(biāo)Ct值較歷史均值升高1.5個(gè)循環(huán)，提示（）A.提取效率下降B.擴(kuò)增體系抑制C.標(biāo)準(zhǔn)品降解D.探針熒光淬滅答案：A6.采用HPLCMS/MS進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)分析時(shí)，為降低基質(zhì)效應(yīng)，通常選擇（）A.梯度洗脫B.氘代內(nèi)標(biāo)C.柱后補(bǔ)償D.源內(nèi)裂解答案：B7.在細(xì)胞培養(yǎng)支原體檢測(cè)中，PCR法與指示細(xì)胞法結(jié)果不一致，應(yīng)優(yōu)先采用（）A.重復(fù)PCRB.熒光染色法C.16SrRNA測(cè)序D.盲傳三代答案：C8.對(duì)新型冠狀病毒抗原檢測(cè)試劑進(jìn)行臨床性能評(píng)價(jià)時(shí)，計(jì)算陽性符合率的參照方法是（）A.病毒分離培養(yǎng)B.數(shù)字PCRC.高通量測(cè)序D.實(shí)時(shí)熒光RTPCR答案：D9.在真菌βD葡聚糖檢測(cè)中，若空白對(duì)照出現(xiàn)陽性信號(hào)，最可能污染環(huán)節(jié)是（）A.采樣試管B.蒸餾水系統(tǒng)C.移液器槍頭D.操作者手套答案：B10.采用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行CD34+干細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，ISAGE方案要求至少獲取（）A.30000個(gè)有核細(xì)胞B.75000個(gè)CD34+事件C.100000個(gè)活細(xì)胞D.150000個(gè)總事件答案：B11.對(duì)血液篩查NAT試劑進(jìn)行批間精密度驗(yàn)證時(shí)，通常采用（）A.2×2×2設(shè)計(jì)B.3×3×3設(shè)計(jì)C.5×5×5設(shè)計(jì)D.10×10×10設(shè)計(jì)答案：B12.在數(shù)字PCR中，若微滴發(fā)生器的油相出現(xiàn)乳化失敗，首先應(yīng)調(diào)整（）A.油相粘度B.水相pHC.表面活性劑濃度D.溫度控制答案：C13.采用MALDITOFMS進(jìn)行細(xì)菌鑒定時(shí)，若得分值<1.7，下一步應(yīng)（）A.重復(fù)點(diǎn)靶B.增加甲酸提取C.換用生化鑒定D.16S測(cè)序確認(rèn)答案：B14.在CART細(xì)胞拷貝數(shù)檢測(cè)中，為避免基因組重復(fù)序列干擾，首選的qPCR策略是（）A.外顯子內(nèi)含子跨接B.質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)曲線C.數(shù)字PCR絕對(duì)定量D.相對(duì)ΔΔCt法答案：A15.對(duì)疫苗效力ELISA檢測(cè)進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)時(shí)，要求CV值不超過（）A.5%B.10%C.15%D.20%答案：B16.在微生物質(zhì)譜鑒定中，若大腸桿菌被誤判為志賀菌，最可能原因是（）A.數(shù)據(jù)庫缺失B.蛋白指紋重疊C.樣品量不足D.靶板污染答案：B17.采用ddPCR進(jìn)行EGFRL858R突變檢測(cè)時(shí)，若突變型微滴數(shù)<3，應(yīng)報(bào)告為（）A.未檢出B.低于LODC.0拷貝/μLD.陰性答案：B18.在無菌檢查中，若硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁但鏡檢無微生物，應(yīng)首先考慮（）A.培養(yǎng)基氧化層B.碳酸鈣沉淀C.溫度波動(dòng)D.光照影響答案：A19.對(duì)HPV分型試劑進(jìn)行交叉反應(yīng)驗(yàn)證時(shí)，需納入的最低近源型別數(shù)為（）A.3B.5C.7D.10答案：C20.在NGS建庫過程中，使用磁珠進(jìn)行片段篩選時(shí)，若目標(biāo)片段為300bp，最佳磁珠比例為（）A.0.6×B.0.8×C.1.0×D.1.2×答案：B21.采用qPCR進(jìn)行轉(zhuǎn)基因大豆檢測(cè)時(shí)，若內(nèi)參基因Ct>30，提示（）A.DNA降解B.抑制劑存在C.取樣誤差D.引物二聚體答案：A22.在細(xì)胞STR鑒定中，若兩個(gè)樣本的匹配度為85%，應(yīng)判定為（）A.同一來源B.高度相關(guān)C.不同來源D.需進(jìn)一步驗(yàn)證答案：D23.對(duì)血液篩查HBsAg試劑進(jìn)行靈敏度驗(yàn)證時(shí)，WHO標(biāo)準(zhǔn)品濃度為（）A.0.5IU/mLB.1.0IU/mLC.2.0IU/mLD.5.0IU/mL答案：B24.在微生物限度檢查中，若R2A瓊脂計(jì)數(shù)結(jié)果顯著高于TSA，原因可能是（）A.培養(yǎng)基營養(yǎng)差異B.培養(yǎng)溫度不同C.pH范圍差異D.培養(yǎng)時(shí)間差異答案：A25.采用ELISPOT檢測(cè)IFNγ時(shí)，若背景斑點(diǎn)>10/孔，應(yīng)優(yōu)先（）A.降低包被抗體濃度B.增加洗板次數(shù)C.更換血清批次D.降低細(xì)胞密度答案：B26.在病毒滴度TCID50測(cè)定中，若出現(xiàn)跳孔現(xiàn)象，應(yīng)首先考慮（）A.加樣誤差B.病毒聚集C.細(xì)胞狀態(tài)差異D.培養(yǎng)箱CO2波動(dòng)答案：A27.對(duì)qPCR探針進(jìn)行HPLC純化時(shí)，若主峰前出現(xiàn)小峰，提示（）A.脫鹽不完全B.短片段缺失C.熒光基團(tuán)脫落D.氧化副產(chǎn)物答案：D28.在CART細(xì)胞檢測(cè)中，若載體拷貝數(shù)>5copies/細(xì)胞，需警惕（）A.插入突變B.細(xì)胞凋亡C.表達(dá)沉默D.免疫原性答案：A29.采用NGS進(jìn)行腫瘤突變負(fù)荷（TMB）分析時(shí)，若覆蓋度<100×，將導(dǎo)致（）A.靈敏度下降B.特異性下降C.假陽性升高D.假陰性升高答案：D30.在支原體PCR檢測(cè)中，若內(nèi)參條帶缺失，應(yīng)首先檢查（）A.引物濃度B.DNA聚合酶活性C.樣本DNA質(zhì)量D.電泳緩沖液答案：C二、配伍題（每題2分，共20分。每組試題先列出A、B、C、D四個(gè)備選答案，后列出若干題干，每題選出一個(gè)最佳答案，每個(gè)備選答案可重復(fù)選用）A.數(shù)字PCRB.熒光原位雜交C.二代測(cè)序D.流式細(xì)胞術(shù)31.檢測(cè)外周血BCRABL1融合基因MR4.5級(jí)別，首選（）答案：A32.確認(rèn)HER2基因擴(kuò)增狀態(tài)，金標(biāo)準(zhǔn)為（）答案：B33.同時(shí)篩查肺癌EGFR、ALK、ROS1、MET、KRAS突變，首選（）答案：C34.監(jiān)測(cè)CD19CART細(xì)胞體內(nèi)存續(xù)水平，首選（）答案：D35.檢測(cè)FFPE樣本EGFRT790M突變豐度0.05%，首選（）答案：A36.分析急性白血病免疫表型，首選（）答案：D37.檢測(cè)染色體17p缺失，首選（）答案：B38.進(jìn)行腫瘤突變負(fù)荷評(píng)估，首選（）答案：C39.監(jiān)測(cè)移植后供受體嵌合率，首選（）答案：A40.檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞PDL1表達(dá)，首選（）答案：D三、判斷題（每題1分，共10分。正確打“√”，錯(cuò)誤打“×”）41.在qPCR中，Ct值與起始模板量呈線性反比關(guān)系。（）答案：×42.采用EDTA抗凝血漿進(jìn)行HBVDNA檢測(cè)，結(jié)果可能低于血清。（）答案：√43.在ELISA中，TMB顯色后終止液為硫酸，可提高吸光度穩(wěn)定性。（）答案：√44.數(shù)字PCR無需標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實(shí)現(xiàn)絕對(duì)定量。（）答案：√45.采用16SrRNA測(cè)序進(jìn)行菌種鑒定時(shí)，V3V4區(qū)比V1V2區(qū)具有更高分辨率。（）答案：√46.在流式細(xì)胞術(shù)中，F(xiàn)ITC與PE熒光補(bǔ)償系數(shù)可設(shè)為負(fù)值。（）答案：×47.支原體污染可導(dǎo)致細(xì)胞增殖加快。（）答案：×48.采用NGS進(jìn)行ctDNA檢測(cè)時(shí)，UMI技術(shù)可降低背景錯(cuò)誤率。（）答案：√49.在無菌檢查中，若培養(yǎng)14天無微生物生長，即可判定無菌。（）答案：√50.采用ddPCR進(jìn)行融合基因檢測(cè)時(shí)，野生型微滴數(shù)為0即可報(bào)告陽性。（）答案：×四、填空題（每空1分，共20分）51.在實(shí)時(shí)熒光定量PCR中，用于校正不同樣本間RNA上樣量的內(nèi)參基因通常選擇________或________。答案：GAPDH；βactin52.根據(jù)《中國藥典》2020版，無菌檢查的培養(yǎng)時(shí)間不少于________天，環(huán)境潔凈度應(yīng)為________級(jí)。答案：14；A53.數(shù)字PCR的微滴生成率應(yīng)控制在________%以上，微滴直徑通常為________μm。答案：85；12054.在ELISA中，封閉液常用________濃度為________的BSA或脫脂奶粉。答案：15%；37℃55.采用NGS進(jìn)行ctDNA檢測(cè)時(shí)，背景錯(cuò)誤率主要由________和________引入。答案：PCR擴(kuò)增錯(cuò)誤；測(cè)序平臺(tái)錯(cuò)誤56.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞周期分析時(shí)，常用染料為________，其最大激發(fā)波長為________nm。答案：PI；53557.在微生物限度檢查中，若供試品為油劑，應(yīng)加入________作為乳化劑，培養(yǎng)溫度為________℃。答案：吐溫80；303558.支原體PCR檢測(cè)的靶基因通常為________，產(chǎn)物長度約為________bp。答案：16SrRNA；27059.采用HPLCMS/MS進(jìn)行定量時(shí)，內(nèi)標(biāo)應(yīng)選擇________，以消除________效應(yīng)。答案：氘代類似物；基質(zhì)60.在CART細(xì)胞拷貝數(shù)檢測(cè)中，若標(biāo)準(zhǔn)曲線R2<________，應(yīng)重新建立曲線，靈敏度通常要求達(dá)到________copies/μgDNA。答案：0.99；10五、簡答題（每題10分，共30分）61.簡述實(shí)時(shí)熒光定量PCR中引物二聚體產(chǎn)生的原因及優(yōu)化策略。答案：原因：引物3′端互補(bǔ)、退火溫度過低、引物濃度過高、鎂離子濃度過高、循環(huán)數(shù)過多。優(yōu)化：1.重新設(shè)計(jì)引物，避免3′端互補(bǔ)，使用PrimerBLAST驗(yàn)證；2.提高退火溫度25℃；3.降低引物濃度至100200nM；4.優(yōu)化鎂離子濃度，梯度測(cè)試1.53.0mM；5.采用熱啟動(dòng)Taq酶，減少非特異擴(kuò)增；6.使用探針法替代SYBRGreenI；7.熔解曲線分析確認(rèn)，若72℃以下出現(xiàn)峰，提示二聚體；8.采用UDG酶防污染，減少非特異積累；9.增加模板量，降低引物相對(duì)比例；10.使用touchdownPCR策略，前10個(gè)循環(huán)每循環(huán)降低0.5℃。62.描述數(shù)字PCR與實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)低豐度突變時(shí)的技術(shù)差異及各自優(yōu)勢(shì)。答案：差異：1.定量原理：qPCR依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線相對(duì)定量，ddPCR為終點(diǎn)絕對(duì)定量；2.靈敏度：ddPCR可達(dá)0.01%，qPCR約1%；3.精密度：ddPCRCV<5%，qPCRCV>10%；4.抑制耐受：ddPCR對(duì)抑制劑耐受高10倍；5.標(biāo)準(zhǔn)品：ddPCR無需標(biāo)準(zhǔn)品，避免標(biāo)準(zhǔn)品誤差；6.成本：ddPCR試劑成本高35倍；7.通量：qPCR可96孔同時(shí)，ddPCR通常18樣本；8.數(shù)據(jù)解讀：ddPCR直接計(jì)數(shù)微滴，qPCR需標(biāo)準(zhǔn)曲線插值；9.動(dòng)態(tài)范圍：ddPCR5logs，qPCR7logs；10.操作復(fù)雜度：ddPCR需微滴生成，步驟多。優(yōu)勢(shì)：ddPCR適合低豐度、絕對(duì)定量、無標(biāo)準(zhǔn)品場(chǎng)景；qPCR適合高通量、動(dòng)態(tài)范圍寬、成本敏感場(chǎng)景。63.闡述NGS建庫過程中接頭二聚體形成機(jī)制及控制措施。答案：機(jī)制：1.接頭濃度過高，自身退火；2.插入片段不足，優(yōu)先連接接頭；3.T4