2026年微生物檢驗(yàn)技師技能競賽題庫與答案一、單選題（每題1分，共20題）1.在無菌操作過程中，以下哪項(xiàng)措施最能有效防止微生物污染？A.操作人員洗手次數(shù)不足B.環(huán)境空氣流通不暢C.使用超凈工作臺或生物安全柜D.培養(yǎng)基滅菌后未冷卻即使用2.稀釋倍數(shù)為10?3時，每毫升原液接種100毫升培養(yǎng)基，接種后的菌液濃度約為多少？A.103CFU/mLB.10?CFU/mLC.10?CFU/mLD.10??CFU/mL3.細(xì)菌培養(yǎng)時，哪項(xiàng)現(xiàn)象提示培養(yǎng)基可能被污染？A.培養(yǎng)皿底部有菌落B.培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁C.菌落形態(tài)與目標(biāo)菌株一致D.培養(yǎng)皿邊緣有散在菌落4.革蘭染色中，陽性菌和陰性菌最主要的區(qū)別在于：A.細(xì)胞大小不同B.細(xì)胞壁厚度不同C.細(xì)胞核形態(tài)不同D.莢膜的有無5.腸道致病性大腸埃希菌（EPEC）的主要致病因子是：A.H抗原B.O抗原C.K抗原D.鞭毛蛋白6.需氧培養(yǎng)時，厭氧菌通常無法生長的原因是：A.培養(yǎng)基營養(yǎng)不足B.缺乏氧氣C.培養(yǎng)溫度過高D.培養(yǎng)時間過長7.真菌培養(yǎng)時，最常用的溫箱溫度是：A.30℃B.37℃C.45℃D.56℃8.沙門氏菌屬與志賀氏菌屬的主要區(qū)別在于：A.血清型不同B.培養(yǎng)溫度要求不同C.致病機(jī)制不同D.生化反應(yīng)不同9.細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的主要機(jī)制是：A.環(huán)境污染B.患者免疫力下降C.細(xì)菌基因突變D.藥物使用不規(guī)范10.快速鑒定金黃色葡萄球菌的方法是：A.靛基質(zhì)試驗(yàn)B.協(xié)同試驗(yàn)C.硫化氫試驗(yàn)D.靛紅試驗(yàn)11.培養(yǎng)基pH值通常調(diào)節(jié)在多少范圍最適宜細(xì)菌生長？A.4.0-5.0B.6.5-7.5C.8.0-9.0D.10.0-11.012.耐熱芽孢最適的滅菌溫度是：A.100℃B.121℃C.150℃D.180℃13.細(xì)菌菌落形態(tài)特征中，"M"型菌落通常提示：A.銅綠假單胞菌B.金黃色葡萄球菌C.大腸埃希菌D.變形桿菌14.痰液標(biāo)本培養(yǎng)時，若出現(xiàn)少量雜菌生長，可能的原因是：A.標(biāo)本采集不規(guī)范B.培養(yǎng)基污染C.患者自身菌群污染D.以上都是15.霉菌培養(yǎng)最適宜的濕度是：A.30%-40%B.50%-60%C.70%-80%D.90%-100%16.細(xì)菌的生化鑒定依據(jù)是：A.細(xì)胞形態(tài)B.生化反應(yīng)譜C.API鑒定卡D.藥敏試驗(yàn)結(jié)果17.環(huán)境微生物監(jiān)測中，常用哪種方法評估空氣潔凈度？A.平板菌落計(jì)數(shù)B.顯微鏡直接計(jì)數(shù)C.流式細(xì)胞術(shù)D.電鏡觀察18.細(xì)菌DNA的提取通常需要使用：A.蛋白酶KB.胰蛋白酶C.RNA酶D.脫氧核糖核酸酶19.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的主要特征是：A.對青霉素敏感B.對萬古霉素敏感C.對甲氧西林耐藥D.無毒力20.實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理中，含病原微生物的培養(yǎng)基應(yīng)如何處理？A.直接丟棄B.高壓蒸汽滅菌后丟棄C.濃硫酸酸化后丟棄D.漂白處理后丟棄二、多選題（每題2分，共10題）1.細(xì)菌培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會影響生長速度？A.溫度B.pH值C.營養(yǎng)物質(zhì)D.氧氣供應(yīng)2.革蘭染色步驟包括：A.初染B.媒染C.復(fù)染D.脫色3.真菌檢驗(yàn)中，常用的顯微鏡檢查方法包括：A.暗視野顯微鏡B.相差顯微鏡C.熒光顯微鏡D.光學(xué)顯微鏡4.細(xì)菌耐藥性傳播途徑包括：A.患者間傳播B.環(huán)境污染C.醫(yī)務(wù)人員交叉感染D.動物源性傳播5.常見的細(xì)菌培養(yǎng)基包括：A.血瓊脂平板B.麥康凱瓊脂平板C.中國藍(lán)瓊脂平板D.沙氏葡萄糖瓊脂平板6.細(xì)菌菌落形態(tài)特征包括：A.大小B.形狀C.顏色D.突起7.環(huán)境微生物監(jiān)測中，常用的采樣方法包括：A.沉降法B.擦拭法C.灌洗法D.活性炭吸附法8.細(xì)菌鑒定常用的方法包括：A.生化試驗(yàn)B.API鑒定系統(tǒng)C.基因測序D.藥敏試驗(yàn)9.實(shí)驗(yàn)室生物安全等級包括：A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-410.細(xì)菌耐藥性防控措施包括：A.規(guī)范用藥B.加強(qiáng)監(jiān)測C.消毒隔離D.疫苗接種三、判斷題（每題1分，共10題）1.細(xì)菌培養(yǎng)時，厭氧罐內(nèi)需通入無氧氣體（如氮?dú)?氫氣+CO?）。2.革蘭染色陽性菌的細(xì)胞壁較厚，能保留結(jié)晶紫染料。3.大腸埃希菌是人體正常菌群，無致病性。4.真菌的培養(yǎng)溫度通常比細(xì)菌高。5.耐熱芽孢可在121℃下被完全滅活。6.細(xì)菌的生化反應(yīng)譜具有種屬特異性。7.環(huán)境微生物監(jiān)測中，空氣采樣通常使用直徑9cm的培養(yǎng)皿。8.細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生與抗生素濫用無關(guān)。9.MRSA對萬古霉素敏感，屬于相對低毒菌株。10.實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理時，含病原微生物的培養(yǎng)基可直接倒入下水道。四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述革蘭染色的原理及其臨床意義。2.簡述真菌檢驗(yàn)的基本步驟。3.簡述細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的主要原因。4.簡述實(shí)驗(yàn)室生物安全的基本原則。五、論述題（每題10分，共2題）1.試述腸道致病性大腸埃希菌的檢驗(yàn)流程及臨床意義。2.試述醫(yī)院環(huán)境中微生物污染的防控措施。答案與解析一、單選題答案與解析1.C解析：超凈工作臺或生物安全柜能提供無菌操作環(huán)境，有效防止微生物污染。2.A解析：稀釋10?3后接種100mL，原液菌數(shù)為103CFU/mL×103=10?CFU/mL，但實(shí)際接種體積為100mL，因此菌液濃度約為103CFU/mL。3.B解析：培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁提示有大量微生物生長，可能是污染。4.B解析：革蘭陽性菌細(xì)胞壁較厚，含大量肽聚糖，能保留結(jié)晶紫染料；陰性菌細(xì)胞壁較薄，易被脫色。5.D解析：EPEC的致病因子是致病性島（EIEC），產(chǎn)生鞭毛蛋白吸附宿主細(xì)胞。6.B解析：厭氧菌需在無氧環(huán)境下生長，氧氣會抑制其代謝。7.B解析：大多數(shù)真菌在37℃下生長良好，但部分真菌需更高溫度（如酵母菌）。8.D解析：沙門氏菌屬氧化酶陰性，志賀氏菌屬氧化酶陽性。9.C解析：細(xì)菌通過基因突變或質(zhì)粒傳遞耐藥基因。10.B解析：協(xié)同試驗(yàn)（金葡菌與S.aureus產(chǎn)生溶血環(huán)）可快速鑒定金黃色葡萄球菌。11.B解析：細(xì)菌最適pH6.5-7.5，過高或過低會抑制生長。12.B解析：121℃高壓蒸汽滅菌可殺滅耐熱芽孢。13.A解析："M"型菌落（遷徙生長）是銅綠假單胞菌典型特征。14.D解析：雜菌可能源于標(biāo)本、培養(yǎng)基或操作污染。15.C解析：霉菌生長需高濕度（70%-80%）。16.B解析：生化反應(yīng)譜是細(xì)菌鑒定的核心依據(jù)。17.A解析：平板菌落計(jì)數(shù)是評估空氣潔凈度常用方法。18.A解析：蛋白酶K可降解蛋白質(zhì)，保護(hù)DNA。19.C解析：MRSA對甲氧西林耐藥，但萬古霉素敏感。20.B解析：高壓蒸汽滅菌后丟棄可防止環(huán)境污染。二、多選題答案與解析1.A,B,C,D解析：溫度、pH、營養(yǎng)、氧氣均影響細(xì)菌生長。2.A,B,C,D解析：革蘭染色包括初染、媒染、復(fù)染、脫色四步。3.A,B,C,D解析：四種顯微鏡均可用于真菌觀察。4.A,B,C,D解析：耐藥性可通過多種途徑傳播。5.A,B,C,D解析：均為常用培養(yǎng)基。6.A,B,C,D解析：菌落特征包括大小、形狀、顏色、突起等。7.A,B,C,D解析：均為常用采樣方法。8.A,B,C,D解析：均為細(xì)菌鑒定方法。9.A,B,C,D解析：生物安全等級從BSL-1到BSL-4。10.A,B,C,D解析：均為耐藥性防控措施。三、判斷題答案與解析1.√解析：厭氧罐需通入無氧氣體以維持環(huán)境。2.√解析：革蘭陽性菌細(xì)胞壁厚，不易脫色。3.×解析：部分大腸埃希菌可致?。ㄈ鏓PEC）。4.×解析：真菌生長溫度通常比細(xì)菌低。5.√解析：121℃可滅活耐熱芽孢。6.√解析：生化反應(yīng)譜具有種屬特異性。7.√解析：9cm培養(yǎng)皿是標(biāo)準(zhǔn)空氣采樣皿。8.×解析：抗生素濫用會誘導(dǎo)耐藥性產(chǎn)生。9.×解析：MRSA雖敏感，但仍具高致病性。10.×解析：應(yīng)高壓滅菌后處理，不可隨意丟棄。四、簡答題答案與解析1.革蘭染色的原理及臨床意義原理：革蘭染色利用細(xì)菌細(xì)胞壁厚度差異，通過結(jié)晶紫-碘復(fù)合物和脫色劑作用，將細(xì)菌分為革蘭陽性（保留紫色）和陰性（變紅色）。臨床意義：幫助初步鑒定細(xì)菌，指導(dǎo)抗生素選擇（如G?菌對青霉素敏感，G?菌對頭孢菌素敏感）。2.真菌檢驗(yàn)的基本步驟①標(biāo)本采集與處理（如離心、過濾）；②直接鏡檢（觀察菌絲、孢子）；③培養(yǎng)分離（沙氏葡萄糖瓊脂）；④形態(tài)學(xué)鑒定（菌落形態(tài)、顯微結(jié)構(gòu)）；⑤必要時做分子生物學(xué)鑒定（如PCR）。3.細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的主要原因①濫用抗生素（誘導(dǎo)耐藥基因表達(dá)）；②耐藥基因轉(zhuǎn)移（質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座子）；③細(xì)菌進(jìn)化（自然選擇）；④環(huán)境污染（耐藥菌富集）。4.實(shí)驗(yàn)室生物安全的基本原則①防護(hù)分級（BSL-1至BSL-4）；②個人防護(hù)（手套、口罩、實(shí)驗(yàn)服）；③環(huán)境控制（通風(fēng)、消毒）；④廢棄物處理（滅菌后丟棄）；⑤人員培訓(xùn)（操作規(guī)范）。五、論述題答案與解析1.腸道致病性大腸埃希菌的檢驗(yàn)流程及臨床意義檢驗(yàn)流程：①標(biāo)本采集（糞便、肛拭子）；②直接鏡檢（WBC、RBC）；③增菌培養(yǎng)（TSI、麥康凱）；④