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華北理工大學(xué)信息學(xué)院 苦茶的降血糖活性研究摘要苦茶是山茶科山茶屬普洱茶的變種。分布于云南和中國(guó)大陸其他地區(qū),海拔1370米。在山地森林中生長(zhǎng),它已被記錄為上一代草藥,具有長(zhǎng)期臨床應(yīng)用,并已用于治療心臟病,降低血脂和降低血糖。在論文中,苦茶被用作研究工具,根據(jù)低血糖和低脂血癥的藥理活性來(lái)調(diào)節(jié)葡萄糖和脂質(zhì)代謝紊亂。它遵循引導(dǎo)模式和后續(xù)模式來(lái)檢測(cè)和確定傳統(tǒng)皮膚茶的植物化學(xué)損失的血液和脂肪損失的活性成分。本論文完全遵照中醫(yī)用藥的基本原則,遵照傳統(tǒng)植物化學(xué)消融模型的苦茶降糖原則,為苦茶的臨床應(yīng)用提供新的理論依據(jù),并為苦茶的開(kāi)發(fā)和利用奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞苦茶;降血糖;活性AbstractAbstractBitterteaisavariantoftheCamelliaCamelliagenusPu'ertea.DistributedinYunnanandotherpartsofmainlandChina,atanaltitudeof1,370meters.Growinginmountainforests,ithasbeendocumentedasapreviousgenerationofherbalmedicines,haslong-termclinicalapplications,andhasbeenusedtotreatheartdisease,lowerbloodfatandlowerbloodsugar.Inthepaper,bitterteaisusedasaresearchtooltoregulateglucoseandlipidmetabolismdisordersbasedonthepharmacologicalactivitiesofhypoglycemiaandhypolipidemia.Itfollowsaguidedmodeandasubsequentmodetodetectanddeterminethephytochemicallossofbloodandfatlossoftheactiveskintea.ThispapercompletelycomplieswiththebasicprinciplesoftraditionalChinesemedicine,andfollowstheprincipleofbitterteahypoglycemicintraditionalphytochemicalablationmodel,whichprovidesanewtheoreticalbasisfortheclinicalapplicationofbitterteaandlaysafoundationforthedevelopmentandutilizationofbittertea.KeywordsBittertea;bloodsugarlowering;activity 目錄 目錄 目錄15697Abstract II27620第1章緒論 529211.1苦茶的研究現(xiàn)狀 5263821.1.1苦茶資源的研究與利用 5127201.1.2苦茶的藥理活性研究 6216411.2中醫(yī)藥治療糖尿病的研究現(xiàn)狀 6208491.2.1糖尿病的研究背景 685341.2.2降血糖的中藥的研究進(jìn)展 614592第2章苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠降血糖活性的初步研究 826632.1實(shí)驗(yàn)材料 84332.1.1藥材 8315542.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 8190542.1.3試劑及藥品 8232352.1.4儀器設(shè)備 8235342.2實(shí)驗(yàn)方法 8324772.2.1苦茶水煎液的制備 8112442.2.2小鼠二型糖尿病造模方法的選擇與優(yōu)化 819402.2.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與給藥 978862.2.4小鼠血清GLU、TC、TG、SOD、MDA及游離脂肪酸的測(cè)定 988302.2.5數(shù)據(jù)分析處理 990952.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果 109072.3.1糖尿病小鼠的兩種不同造模方式比較 10255562.3.2苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠體重和血糖的影響 1012612.3.3苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠TC、TG和NEFA的影響 10212372.3.4苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠SOD和MDA的影響 11121132.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論與討論 1130609第3章苦茶不同部位對(duì)高血糖小鼠降血糖活性的實(shí)驗(yàn)比較研究 13135113.1實(shí)驗(yàn)材料 13290383.1.1藥材 13317603.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 135373.1.3試劑及藥品 1318283.1.4儀器設(shè)備 13224623.2實(shí)驗(yàn)方法 1359403.2.1苦茶不同部位提取物的制備 1350453.2.2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與給藥 14167583.2.3小鼠血清GLU、TC、TG、SOD、MDA及NEFA的測(cè)定 1447593.2.4數(shù)據(jù)分析處理 148833.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果 14270953.3.1苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠進(jìn)食量、進(jìn)水量的影響 1468373.3.2苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠體重及各臟器重量的影響 15284593.3.3苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠血糖、血脂的影響 15171623.3.4苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠抗氧化指標(biāo)的影響 16833.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論與討論 1622457結(jié)論 1713818參考文獻(xiàn) 18華北理工大學(xué)XXXX學(xué)院第4章考試系統(tǒng)中題庫(kù)和組卷子系統(tǒng)的實(shí)現(xiàn)第1章緒論1.1苦茶的研究現(xiàn)狀1.1.1苦茶資源的研究與利用苦茶(學(xué)名:Camelliaassamicavar.kucha)山茶花是PuerredeCamellia屬的茶。生長(zhǎng)于云南和中國(guó)大陸其他地區(qū),它生長(zhǎng)在1,370米米的高度的森林。它是中國(guó)傳統(tǒng)的純天然健康飲料,以及使用順勢(shì)療法藥物和食品的傳統(tǒng)中草藥。江華苦茶種也被稱為高腳茶,是茶樹(shù)的一種。江華苦茶是在建國(guó)桃鎮(zhèn)“牛牯嶺”和其他地方生產(chǎn)的,是一種綠色健康飲品,“茶多酚”的含量非常有名,因?yàn)樗窃撝葑罡挥械?。它具有消除口渴,清涼發(fā)熱,清爽和降低血壓的作用。它味道苦,甜,充滿氣味,回味無(wú)窮。最近開(kāi)發(fā)了一系列書(shū)面茶產(chǎn)品,已出口到西歐,北美,東南亞等地,如袋,顆粒,口服片,軟飲料等,并贏得了“綠色金”的美譽(yù)。與此同時(shí),苦茶在中國(guó)廣泛分布,苦茶的年產(chǎn)量估計(jì)約為5噸?;?,芽,小竅門,老葉,山羊,根,外皮和苦茶籽可用作草藥或加工各種茶飲料。它可以進(jìn)一步加工和開(kāi)發(fā)成新產(chǎn)品,如藥品,食品和保健品。隨著韓國(guó)生活水平的不斷提高,對(duì)優(yōu)質(zhì)健康飲品的需求不斷增加。由于其良好的藥物活性和飲用價(jià)值,苦茶已被開(kāi)發(fā)并用作茶和藥物的兩用植物,這為苦茶產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)和僅在中國(guó)使用苦茶提供了主要推動(dòng)力。中國(guó)是茶樹(shù)和茶葉的起源已經(jīng)種植了三千多年,茶樹(shù)的遺傳來(lái)源非常豐富。野生茶植物是寶貴的資源野生茶植物含有在長(zhǎng)期發(fā)育后抵抗各種困難所必需的基因。最后,杭州茶葉研究所,云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,巴南茶研究所的國(guó)家生殖系統(tǒng)被用作保護(hù)的基礎(chǔ),保護(hù)茶源2665種。該藏品保存了云南金平庫(kù)車,四川黃山庫(kù)車,貴州興義庫(kù)車(祁社大茶),湖南江華庫(kù)車,廣東乳源庫(kù)車,江西安源家,重慶庫(kù)車等?!侗静菽静俊酚涊d:“苦茶。甜而苦,微寒,無(wú)毒。主要是痔瘡,小便,去口渴加熱。主要?dú)怏w是消化?!背似胀ú璧谋=」δ芡?,苦茶還具有茶,清熱,防火,預(yù)防中暑,消毒,消炎,抗衰老,抗衰老,降血壓,降血糖,防動(dòng)脈硬化,防腐,頻繁自我生產(chǎn)當(dāng)?shù)卮迕窠?jīng)常以苦茶為原料制作“蜂蜜茶”(純冬蜜浸泡苦茶超過(guò)三年),“糯米茶”(即“柚子茶”)茶“,并將苦茶烘入掏空的瓜??荆?,中暑,腹痛,痢疾等疾病都有特殊的治療效果,其中大部分都是由中國(guó)人服用,被稱為”神茶“產(chǎn)品。1.1.2苦茶的藥理活性研究1.改善血液循環(huán):在中國(guó)南方,特別是在巴馬,江西和西浙江,心臟病死亡率最低,是最長(zhǎng)的城市。芬蘭和美國(guó)最高的心血管疾病。主要區(qū)別在于居民吃不同類型的脂肪。像西鄉(xiāng)一樣,喜馬拉雅居民使用苦茶作為該省的主要來(lái)源。醫(yī)學(xué)證明,苦茶可預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化,高血壓和腦出血等發(fā)病癥狀。2.對(duì)人體消化系統(tǒng)有所幫助:對(duì)人體脾胃肝腸有所改善,能夠預(yù)防膽囊方面的疾病,在診治胃病和胃潰瘍方面有著顯著效果。苦茶還有潤(rùn)滑大腸,通便的功效。研究證明,苦茶能夠有效的減少膽固醇含量。3.能夠調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng):苦茶能夠有效改進(jìn)人體的新陳代謝,新的研究結(jié)果證明,健康人可以在吃苦茶后將葡萄糖水平降低5%。因此,苦茶已成為預(yù)防和控制糖尿病的最佳食用油。4.加強(qiáng)骨骺系統(tǒng)的功能:促進(jìn)苦茶骨的發(fā)育,促進(jìn)礦物質(zhì)的形成和鈣的吸收。它還在骨生長(zhǎng)和預(yù)防骨質(zhì)疏松癥中起重要作用。1.2中醫(yī)藥治療糖尿病的研究現(xiàn)狀1.2.1糖尿病的研究背景糖尿病是降低胰島素分泌,降低身體抵御力的一種大腦和其他單一或多種病毒。代謝紊亂和其他癥狀表明高血糖癥和“三多一少”癥狀。糖尿病是一種多發(fā)性代謝疾病,全世界約有1.46億人被診斷患有糖尿病。預(yù)計(jì)將增加到三億。中國(guó)約有一百萬(wàn)糖尿病患者,成人患病率為3.3%。急性和長(zhǎng)期并發(fā)癥是有害的,被稱為“無(wú)聲殺手”。最近糖尿病發(fā)病率的增加包括人類健康,心血管和腦血管疾病,以及癌癥,中風(fēng),心臟病,失明,腎衰竭和解剖學(xué)。隨著我國(guó)城市化的快速遞進(jìn),人們的生活質(zhì)量越來(lái)越好,生活方式的改變導(dǎo)致高糖量的攝入,再加上很多人對(duì)飲食的不注重,引發(fā)了一系列的糖尿病并發(fā)癥。另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),18歲的糖尿病患病率約為7.45%。到3010年,患病率增加了3.27個(gè)百分點(diǎn),預(yù)防和治療糖尿病至關(guān)重要。1.2.2降血糖的中藥的研究進(jìn)展許多研究人員這些年研究糖尿病時(shí),已經(jīng)確定并開(kāi)發(fā)了具有明顯降血糖活性的草藥的味道。這些中藥有清熱解毒,補(bǔ)氣養(yǎng)血,活血化痰的功效。1.有幾項(xiàng)關(guān)于如何去除卡路里和解毒草藥的研究,包括小檗堿,黃疸,大黃等。通過(guò)研究黃連單一生物堿及其復(fù)合生物堿對(duì)人體肝細(xì)胞和小白鼠血糖水平的作用,發(fā)現(xiàn)其對(duì)降低血糖活性和毒性具有協(xié)同作用。實(shí)驗(yàn)表明,黃芪莖葉的莖和葉上的黃酮類化合物可以降低胰島素抵抗,以及葡萄糖和脂質(zhì)。也有其它的研究成果能夠證明大黃的多糖部分有著良好的降血糖活性。2.人參,黃芪,生地黃和中藥等中草藥能夠益氣養(yǎng)陰,有著良好的降血糖功效。將實(shí)驗(yàn)應(yīng)用在小白鼠身上,最后結(jié)果證實(shí)降血糖作用的機(jī)制可以控制血液中糖和血清甘油三酯的相互作用。據(jù)李楠等人說(shuō)。糖尿病模型大鼠黃芪總皂苷含量,黃芪總黃酮和黃芪總多糖含量可影響血糖含量。等級(jí)吳金環(huán)等。結(jié)果表明,地黃可降低糖尿病大鼠鏈脲佐菌素的高血糖和高脂血癥水,已經(jīng)使用臨時(shí)肺葉對(duì)降低糖尿病模型茶中的低血糖和血脂有顯著作用。3.丹參,川芎,紅花等活血化痰中藥也具有良好的治療作用。燈盞花素和丹參能夠引導(dǎo)患糖尿病的白鼠增加身體分泌的總多酚酸,空腹服用丹參總多酚酸可有效的減少血糖和三環(huán)素的含量,提升胰島素在體內(nèi)的敏感指數(shù)。從川芎中提取的糖尿病大鼠對(duì)2%乙醇,3%乙醇和川芎,8%乙醇的降血糖作用最小。根據(jù)Takahashi等人的研究,從藏紅花種子中分離5-羥色胺NP和5-羥色胺N-鐵。中藥復(fù)方已被用作中藥的主要方法。各種中藥具有互補(bǔ)和互利的作用,不僅可以增強(qiáng)效果,還可以充分發(fā)揮各種藥物和毒素的功效。你可以制造越來(lái)越少的藥水來(lái)保護(hù)。目前,中國(guó)有5種中成藥,有100多種支持療法。中華人民共和國(guó)中藥版包括治療糖尿病的中草藥,如降糖加片,參芪消渴膠囊,參芪止咳丸,養(yǎng)陰降糖片,消渴丸,消渴靈片,消克平平等大量研究包括片劑和口服片在內(nèi),已經(jīng)證明草藥化合物可以更好地反映中藥的整體治療特性,對(duì)糖尿病患者更有效。
第2章苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠降血糖活性的初步研究2.1實(shí)驗(yàn)材料2.1.1藥材苦茶品種又名高腳茶,茶樹(shù)有性群體品種之一??嗖璁a(chǎn)于江華濤圩鎮(zhèn)“牛牯嶺”等地,除了可可和咖啡外不含酒精,是一種健康的飲料它具有消除口渴,清涼發(fā)熱,清爽和降低血壓的作用。2.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物重19至23g的雌性昆明小鼠。2.1.3試劑及藥品TG,GLU試劑;TC試劑盒;SOD,MDA,NEFA試劑盒;alloxan;鹽酸二甲雙胍片。2.1.4儀器設(shè)備EL-600HA動(dòng)物電子秤;FY-8700半自動(dòng)生化分析儀;BFU-16B高速離心機(jī);756P紫外可見(jiàn)分光光度計(jì);冷凍干燥機(jī)。2.2實(shí)驗(yàn)方法2.2.1苦茶水煎液的制備用2斤的苦茶葉加適度的雙氧水,用蒸餾水煮4次,時(shí)間為2小時(shí),加水煮沸,過(guò)濾,真空濃縮成凍干粉,在-30℃溫度種保護(hù),凍干的苦茶湯粉末提取物在相同的置換溫度下率為37.4%。2.2.2小鼠二型糖尿病造模方法的選擇與優(yōu)化高劑量,單劑量型四氧嘧啶二型糖尿?。?0只雌性昆明小鼠,1周個(gè)性化飲食,大劑量腹腔內(nèi)腹腔注射生理鹽水(300mg·kg-1),注射完成。一周后,血液被抽吸到小鼠尾,血清通過(guò)離心分離和血清中的血糖值是使用生化試劑盒進(jìn)行測(cè)定。二型糖尿病的組合具有高脂肪的飲食和低劑量四氧嘧啶30只雌性昆明小鼠選擇一個(gè)合適的飲食1周后喂養(yǎng)1個(gè)月高脂肪飲食(參考飲食8.9%,蛋黃10%,豬油10%,膽固醇1%,膽鹽0.2%),然后低劑量腹膜內(nèi)注射,鹽水溶液四氧嘧啶(90mg·kg-1),1周后注射微血處于Mausschwanzvene,離心血糖水平,通過(guò)血清和生化濟(jì)慈測(cè)量Erama。2.2.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與給藥將低劑量四氧嘧啶注入高脂肪飲食大鼠:雌性55個(gè)昆明小鼠,每只小鼠(18-22g)喂食7天,并選擇47只大鼠。對(duì)于脂肪供應(yīng),另八個(gè)是正常食物喂養(yǎng)一個(gè)月。然后選擇45只高脂小鼠,隨機(jī)抽取36只小鼠保持禁食12小時(shí),腔注射低劑量四氧嘧啶鹽水注射液(90mg·kg-1),剩下8只高脂血癥小鼠(高親脂性組)和13只小鼠喂食正常飲食(空白對(duì)照組)給予相同劑量的生理鹽水。一周后,輸注尾靜脈以測(cè)量同種異體小鼠的葡萄糖水平。將成功小鼠隨機(jī)分為1型糖尿病組,陽(yáng)性對(duì)照組和犬煎劑組,每組5只大鼠。對(duì)照組接受正常飲食,其他組接受較高脂肪飲食。二甲雙胍陽(yáng)性對(duì)照藥和苦蕎湯提取物被用于懸浮灌胃均勻地在雙蒸水,和陽(yáng)性對(duì)照組的劑量為(0.02ml·g-1)。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍每千克50mg·kg-1·d-1??嗖铚M給予苦茶湯凍干粉,相當(dāng)于苦茶原料藥10g·kg-1·d-1;空白對(duì)照組中高脂血癥模型組和二型糖尿病模型組是相同的,方法依舊是用雙氧水水煮。為保證藥物的穩(wěn)定性,所有試驗(yàn)白鼠在連續(xù)攝藥的30天的下午開(kāi)始進(jìn)食12h,之后進(jìn)行稱重并保留稱重和血樣數(shù)據(jù)。在葡萄糖耐量試驗(yàn)結(jié)束后,將小鼠麻醉并選擇一定數(shù)量將眼球放血,通過(guò)離心分離血清并儲(chǔ)存在-80℃直至使用。2.2.4小鼠血清GLU、TC、TG、SOD、MDA及游離脂肪酸的測(cè)定采用GLU試劑盒,TC試劑盒,TG試劑盒,SOD試劑盒和MDA試劑盒來(lái)進(jìn)行測(cè)驗(yàn),使用半自動(dòng)生化分析儀測(cè)量血清GLU,CT,TG,SOD和MDA水平。測(cè)量方法使用紫外分光光度計(jì)測(cè)量無(wú)血清脂肪酸水平。2.2.5數(shù)據(jù)分析處理在使用SPSS22.0版本對(duì)全部數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)之前和之后進(jìn)行t檢驗(yàn),p<0.05,差別太大的數(shù)據(jù)均為x±s表示。2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.3.1糖尿病小鼠的兩種不同造模方式比較通過(guò)一星期的高劑量四氧嘧啶注射后,大鼠的死亡率估計(jì)很嚴(yán)重,約為61%。同時(shí),存活小鼠血液中的糖含量超過(guò)30mmol·L-1,小鼠的成功率為41%,死亡率較高,因此沒(méi)有使用。單劑量的四氧嘧啶與高脂肪飲食對(duì)比,30%的小鼠在30周后死亡或死于血糖并且模型成功率高,約81%的成功率,該二型糖尿病小鼠11mmol·L-1或更高的模型中建模。2.3.2苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠體重和血糖的影響經(jīng)過(guò)和高脂血癥對(duì)照組數(shù)據(jù)相比發(fā)現(xiàn),服用苦茶的對(duì)照組的白鼠體重明顯的減少并且這種差異是顯著的,數(shù)據(jù)反映了苦茶在降輕體重方面有著藥理學(xué)影響。另外,高脂血癥對(duì)照組的重量明顯高于二型糖尿病小鼠的體重,表明有著糖尿病癥狀的高脂小鼠在經(jīng)過(guò)注射四氧嘧啶的治療后體重得到了明顯的控制,重量逐漸減少。高脂血癥對(duì)照組的血糖水平高于空對(duì)照組,表明脂質(zhì)代謝紊亂影響體內(nèi)的葡萄糖代謝。該Kuchao組中的血糖水平是與苦咳湯片治療后比在糖尿病對(duì)照組模型2的低血糖的量顯著下基本上是相同的苦茶湯,在降血糖方面有著顯著的療效。結(jié)果見(jiàn)下表2-1:表2-1苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠體重和血糖的影響對(duì)比與二型糖尿病模型組,**p<0.01;對(duì)比與高脂血癥對(duì)照組ap<0.052.3.3苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠TC、TG和NEFA的影響跟二型糖尿病小鼠對(duì)比,苦茶水煎液能夠有效的減少患糖尿病白鼠的血清,其反映出來(lái)TC,TG和NEFA水平不同,證明了苦茶水煎液能夠有效的改良二型糖尿病白鼠的非正常新陳代謝。結(jié)果見(jiàn)下表2-2:表2-2苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠TC、TG和NEFA的影響和二型糖尿病模型組對(duì)比,*p<0.05,**p<0.012.3.4苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠SOD和MDA的影響苦茶蒸煮可以顯著增加二型糖尿病小鼠的抗氧化能力,增加血清SOD活性,并減少二型糖尿病大鼠的血清MDA含量。結(jié)果見(jiàn)下表2-3:表2-3苦茶水煎液對(duì)二型糖尿病小鼠SOD和MDA的影響和二型糖尿病模型組對(duì)比,*p<0.052.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論與討論四氧嘧啶在國(guó)內(nèi)外是比較常用的方法,專門用來(lái)控制二星糖尿病患者,其本身具有的毒性低,常用于組織和動(dòng)物的存活。四氧嘧啶在該島上引起β-細(xì)胞毒性,損害細(xì)胞內(nèi)DNA和mRNA功能,導(dǎo)致小鼠胰島素缺乏和糖尿病。這個(gè)實(shí)驗(yàn)的模型是經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期高脂飲食誘導(dǎo)先通過(guò)一個(gè)獨(dú)特的脂質(zhì)代謝的胰島素抵抗,然后通過(guò)注射四氧嘧啶少量治療傷病和胰腺功能繼續(xù)胰腺Belohnungssekretion。胰島素功能障礙(不直接破壞胰腺的所有功能),可以恢復(fù)二型糖尿病模型,反映各種降糖藥物的作用,調(diào)節(jié)血脂藥物,往往適合科學(xué)研究。中醫(yī)法是以不同于西藥的煎劑為基礎(chǔ)的,在長(zhǎng)期煎劑中,中藥的狀態(tài)會(huì)影響中藥的結(jié)構(gòu),這對(duì)藥物質(zhì)量的研究尤為重要。因此,不可能在草藥等研究模式下對(duì)草藥的藥理活性進(jìn)行深入研究,特別是用生物溶劑提取藥用組分。因此,這一經(jīng)驗(yàn)是基于中藥的原理,用傳統(tǒng)的苦藥提取藥用物質(zhì),優(yōu)化中藥的有效性,為進(jìn)行基礎(chǔ)研究和研究奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ),藥物的作用機(jī)制。在二型糖尿病白鼠的實(shí)驗(yàn)中,證實(shí)了苦茶水煎液能夠減少血糖和血脂含量,增加抗氧活性,表明苦茶水煎液有著良好的治療功效??嗖杷逡哼€可以有效的改善葡萄糖平衡,調(diào)節(jié)脂質(zhì)新陳代謝異常。
第3章苦茶不同部位對(duì)高血糖小鼠降血糖活性的實(shí)驗(yàn)比較研究3.1實(shí)驗(yàn)材料3.1.1藥材苦茶品種又名高腳茶,茶樹(shù)有性群體品種之一??嗖璁a(chǎn)于江華濤圩鎮(zhèn)“牛牯嶺”等地,除了可可和咖啡外不含酒精,是一種健康的飲料它具有消除口渴,清涼發(fā)熱,清爽和降低血壓的作用。3.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物重19至23g的雌性昆明小鼠。3.1.3試劑及藥品TG、GLU試劑盒;TC試劑盒;SOD、MDA、NEFA試劑盒;四氧嘧啶;鹽酸二甲雙胍片。3.1.4儀器設(shè)備EL-600HA動(dòng)物電子秤;FY-8700半自動(dòng)生化分析儀;BFU-16B高速離心機(jī);756P紫外可見(jiàn)分光光度計(jì);冷凍干燥機(jī)。3.2實(shí)驗(yàn)方法3.2.1苦茶不同部位提取物的制備將3kg苦茶葉在5倍雙蒸水中浸泡24小時(shí),然后將苦茶葉在10倍雙蒸水中煮沸3小時(shí),通過(guò)濾紙過(guò)濾并反復(fù)萃取。將所有濾液濃縮物合并,真空并凍干。冰箱干粉中的苦茶茶湯。將凍干粉末加熱并用10倍100%甲醇回流3小時(shí),通過(guò)濾紙過(guò)濾,回流數(shù)次,收集所有濾液,空白,并凍干成粉末。凍干。在50%甲醇(部位A)中提供回流組分?jǐn)?shù);以與上述相同的方式用甲醇萃取剩余的固體%1%甲醇,得到回流組分(位點(diǎn)B);殘余物是殘余組分(位點(diǎn)C)。將所有凍干粉末真空包裝并在30℃的冰箱中儲(chǔ)存并在使用后取出。3.2.2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與給藥在實(shí)驗(yàn)前一周,將健康的昆明小鼠在實(shí)驗(yàn)室中預(yù)孵育。隨機(jī)選擇5只大鼠作為空對(duì)照。其他小鼠腹膜內(nèi)注射生理活性高劑量鹽水(300mg.kg-1)。一星期后,從白鼠尾靜脈針扎取出微量血液樣本進(jìn)行測(cè)驗(yàn)血糖和血脂含量度高低。凡是在實(shí)驗(yàn)中含量度大于16.7mmol·L-1的白鼠皆能夠認(rèn)定藥效良好。把實(shí)驗(yàn)效果良好的高血糖模型小鼠隨機(jī)分成每組8組:進(jìn)行高血糖的模式對(duì)照,陽(yáng)性對(duì)照,苦味部分A,B,C三個(gè)劑量組。成功應(yīng)用后,將模型應(yīng)用于胃中4周。對(duì)照和高血糖模型從探針對(duì)照和二甲雙胍(50mg·kg-1)接受正常鹽。用草藥當(dāng)量15克·kg-1處理三組不同的攪拌器。灌胃給藥劑量,記錄每餐的水消耗量和每組水用于日常使用。最后一次給藥后,大鼠禁食十二小時(shí)。在葡萄糖耐量試驗(yàn)結(jié)束時(shí),麻醉小鼠,取出眼睛用于出血,分離血清,分離肝臟,腎臟和胰腺,稱重并取實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。3.2.3小鼠血清GLU、TC、TG、SOD、MDA及NEFA的測(cè)定在對(duì)GLU試劑盒,TC試劑盒,TG試劑盒,SOD試劑盒和MDA試劑盒中使用規(guī)定的測(cè)定方法,用半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清GLU,TC,TG,SOD,MDA水平;使用游離脂肪酸試劑盒規(guī)定的測(cè)量方法進(jìn)行紫外分光光度計(jì)測(cè)量血清游離脂肪酸水平測(cè)試。3.2.4數(shù)據(jù)分析處理對(duì)參與實(shí)驗(yàn)的全部數(shù)據(jù)進(jìn)行劃分,采用SPSS20.0版本軟件測(cè)試靶向ANOVA的同質(zhì)性。使用LSD方法比較各組之間的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析,p<0.05表示顯著差異,所有數(shù)據(jù)表示為x±s。3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.3.1苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠進(jìn)食量、進(jìn)水量的影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)行當(dāng)中所有對(duì)照組實(shí)驗(yàn)生物的食物飲食和水量攝取都保持穩(wěn)定。在成功建模高血糖模型后,其他小鼠的水?dāng)z入量和攝食量以及空對(duì)照組的例外情況同時(shí)增加,并且存在顯著差異。早在給藥后的第二周,就有吃食物和減少苦茶部分A和B的水消耗的傾向。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),苦味部分A和B小鼠保險(xiǎn)充分減少消費(fèi)和水。在高血糖模型組中,C點(diǎn)的食物攝入和小鼠消耗與高血糖模型對(duì)照組的食物攝取和水?dāng)z入沒(méi)有顯著差異。3.3.2苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠體重及各臟器重量的影響在成功構(gòu)建數(shù)據(jù)后,高血糖大鼠顯示出體重減輕的特定跡象。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),高血糖模型組的重量明顯顯著低于空對(duì)照組,陽(yáng)性對(duì)照組和苦茶組A與高血糖模式組對(duì)比,體重顯著更高,這表明苦茶點(diǎn)A可以減少由于糖尿病引起的體重減輕。而且還發(fā)現(xiàn),苦茶成分降低了高血糖小鼠的肝臟重量,顯著增加了高血糖小鼠的胰腺重量,并且對(duì)腎臟重量沒(méi)有顯著影響。而且與高血糖模式組對(duì)比,苦茶B和C沒(méi)有其他的阻礙。結(jié)果見(jiàn)表3-1:表3-1苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠體重及各臟器重量的影響和高血糖模型組對(duì)比,*p<0.053.3.3苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠血糖、血脂的影響高血糖模型組的血糖含量明顯大于空對(duì)照組,證明該模型的實(shí)驗(yàn)是可行的。每4周治療后,陽(yáng)性對(duì)照組和苦味組A中的血糖水平顯著低于高血糖模式組,表明苦味A可以減輕大鼠的高血糖癥狀,而苦味B和C則沒(méi)有影響很大。同時(shí),藥物組中所有小鼠的血脂水平?jīng)]有顯著差異,這可能造成血糖含量突然上升,體內(nèi)的血脂代謝異常變化,結(jié)果詳見(jiàn)表3-2:表3-2苦茶部位A、B、C對(duì)高血糖模型小鼠血糖、血脂的影響和高血糖模型小鼠對(duì)比,*p<0.0
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