1WS/TXXX—202X病原微生物菌（毒）種保藏低溫保存技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)本文件規(guī)定了人間傳染的病原微生物菌（毒）種低溫保存過(guò)程中的基本流程與技術(shù)要求，包括保藏基本要求，低溫冷藏保存、低溫冷凍保存、超低溫冷凍保存、深低溫冷凍保存、冷凍干燥、轉(zhuǎn)運(yùn)環(huán)境下低溫保存流程及相關(guān)要求。本文件適用于全國(guó)各級(jí)人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)，以及涉及病原微生物菌（毒）種保管、使用和疫苗生產(chǎn)等單位。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T43429人感染病原微生物與樣本保藏通用要求WS233病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則WS315人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)設(shè)置技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)WS/T病原微生物菌（毒）種保藏質(zhì)量控制通用標(biāo)準(zhǔn)WS/T病原微生物菌（毒）種保藏建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)T/CPMA011病原微生物菌（毒）種保藏?cái)?shù)據(jù)描述通則3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1病原微生物pathogenicmicroorganisms可以侵犯人、動(dòng)物，引起其感染甚至傳染病的微生物。注：包括細(xì)菌、病毒、真菌、立克次體等。3.2菌（毒）種microorganismstrain可培養(yǎng)的，人間傳染的細(xì)菌、病毒、真菌、立克次體等具有保存價(jià)值的，經(jīng)鑒定、分類并給予固定編號(hào)的病原微生物。3.3保藏collectionandpreservation保藏機(jī)構(gòu)依法以適當(dāng)?shù)姆绞绞占?、鑒定、編目、儲(chǔ)存菌（毒）種或樣本，維持其活性和生物學(xué)特性，并向合法從事病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的單位提供菌（毒）種或樣本的活動(dòng)。3.4保存storageWS/TXXX—202X2儲(chǔ)存菌（毒）種，維持其活性和生物學(xué)特性的活動(dòng)。3.5復(fù)蘇revival將菌（毒）種代謝活動(dòng)從停止或趨于停止?fàn)顟B(tài)恢復(fù)到正常生理活動(dòng)狀態(tài)的過(guò)程。3.6低溫保存low-temperaturepreservation在低溫條件下保存菌（毒）種，使其代謝水平降低乃至完全停止生長(zhǎng)繁殖，達(dá)到半休眠或完全休眠狀態(tài)的技術(shù)方法。注：低溫保存條件包括低溫冷藏（2～8℃)、低溫冷凍（-20～-40℃)、超低溫冷凍（-60～-80℃)、深低溫冷3.7低溫冷藏保存refrigeratedpreservation在2～8℃條件下保存菌（毒）種的方法。3.8低溫冷凍保存low-temperaturefrozenpreservation在-20～-40℃條件下保存菌（毒）種的方法。3.9超低溫冷凍保存ultra-lowtemperaturefrozenpreservation在-60～-80℃條件下保存菌（毒）種的方法。3.10深低溫冷凍保存deepcryogenicfrozenpreservation在-150～-196℃條件下保存菌（毒）種的方法。3.11低溫保護(hù)劑cryoprotectant保護(hù)菌（毒）種，使其在低溫保存及復(fù)蘇過(guò)程中維持存活率、遺傳穩(wěn)定性和生物學(xué)特性的關(guān)鍵物質(zhì)。3.12凍干保護(hù)劑lyoprotectant保護(hù)菌（毒）種，使其在冷凍干燥、保存及復(fù)蘇過(guò)程中維持存活率、遺傳穩(wěn)定性和生物學(xué)特性的關(guān)鍵物質(zhì)。3.13程序降溫programmedcooling按照特定程序設(shè)計(jì)對(duì)菌（毒）種進(jìn)行降溫的過(guò)程。其中程序設(shè)計(jì)包括合理的溫度梯度、可控的降溫速率等。3.14冷凍干燥freezedrying將菌（毒）種懸浮于適宜的凍干保護(hù)劑中，經(jīng)預(yù)凍后在高真空狀態(tài)下以升華方式除去水分，熔封管口或軋蓋密封的過(guò)程。4保藏基本要求4.1病原微生物菌（毒）種保藏管理、生物安全、保藏機(jī)構(gòu)功能分區(qū)及設(shè)施設(shè)備等應(yīng)符合《人間傳染的病原微生物菌(毒)種保藏機(jī)構(gòu)管理辦法》《人間傳染的病原微生物目錄》以及GB19489、GB50346、GB/T43429、WS233、WS315、WS/T建標(biāo)等有關(guān)要求。4.2保藏的病原微生物菌（毒）種應(yīng)具有典型生物學(xué)特性或遺傳學(xué)特性的描述，活性和傳代信息明確，培養(yǎng)條件、表型和分子特征穩(wěn)定。4.3保藏的病原微生物菌（毒）種應(yīng)具有明確的特征信息，包括但不限于中文名稱、外文名稱、分類學(xué)地位、來(lái)源歷史、分離時(shí)間和分離地址等。信息描述應(yīng)符合GB/T43429、T/CPMA011。WS/TXXX—202X34.4應(yīng)做好病原微生物菌（毒）種低溫保藏各環(huán)節(jié)質(zhì)量控制工作，建立、成文并實(shí)施質(zhì)量控制程序，具體按照WS/T《病原微生物菌（毒）種保藏質(zhì)量控制通用標(biāo)準(zhǔn)》執(zhí)行。5低溫（凍干）保護(hù)劑選擇5.1應(yīng)遵循適配性、無(wú)菌性、安全性和滲透性原則選擇適宜的保護(hù)劑，建立選擇低溫（凍干）保護(hù)劑的程序和方法。常用低溫（凍干）保護(hù)劑及其推薦使用情況，見附錄A和附錄B。5.1.1適配性：根據(jù)病原微生物種類（細(xì)菌、病毒、真菌等）及種屬選擇最適保護(hù)劑。5.1.2無(wú)菌性：保護(hù)劑及溶劑應(yīng)確保無(wú)其他微生物污染。5.1.3安全性：對(duì)病原微生物無(wú)毒或微毒性，不影響其復(fù)蘇后的生物學(xué)特性。5.1.4滲透性：小分子保護(hù)劑（如甘油、二甲基亞砜（Dimethylsulfoxide，DMSO））能滲透入細(xì)胞，大分子保護(hù)劑（如脫脂牛奶、血清）在細(xì)胞外部形成保護(hù)層。5.2不同種類的菌（毒）種宜使用不同類型、不同配方及相應(yīng)濃度的低溫（凍干）保護(hù)劑。宜優(yōu)先選擇權(quán)威保藏機(jī)構(gòu)推薦或經(jīng)過(guò)適用性評(píng)價(jià)的保護(hù)劑及配方，新的配方以存活率/滴度恢復(fù)率為金標(biāo)準(zhǔn)來(lái)進(jìn)行篩選和優(yōu)化。5.2.1滲透性保護(hù)劑：如甘油（常用濃度10%-20%，適用于大多數(shù)細(xì)菌、真菌DMSO（常用濃度5%-10%，適用于細(xì)胞系和某些病毒）。5.2.2非滲透性保護(hù)劑：如蔗糖、海藻糖、脫脂牛奶、血清白蛋白。適用于冷凍干燥。5.2.3復(fù)合保護(hù)劑：如“脫脂牛奶-蔗糖-谷氨酸鈉”混合液，常用于細(xì)菌的冷凍干燥。5.3不同類型的保存方法宜使用不同類型的低溫（凍干）保護(hù)劑。5.3.1超低溫冷凍保存：可選用滲透性或非滲透性保護(hù)劑，濃度需根據(jù)降溫速率優(yōu)化。5.3.2深低溫冷凍保存：通常選用滲透性保護(hù)劑（如10%甘油或5%DMSO）或與滲透性保護(hù)劑的混合物。5.3.3冷凍干燥：使用復(fù)合凍干保護(hù)劑，通常包含緩沖鹽、防凍劑和聚合物，形成穩(wěn)定的多孔基質(zhì)。6低溫冷藏保存6.1技術(shù)要求6.1.1適用于生長(zhǎng)旺盛期的菌種斜面、半固體瓊脂穿刺培養(yǎng)物、液體培養(yǎng)物，及不宜冷凍的病原微生物（如某些螺旋體、奈瑟菌等）。6.1.2適用于菌（毒）種的短期保存?？筛鶕?jù)需要決定是否選用保護(hù)劑。6.1.3使用螺旋蓋試管或密封性良好的無(wú)菌容器，防止培養(yǎng)基干燥。對(duì)于斜面，可封堵無(wú)菌棉塞或覆蓋無(wú)菌礦物油以延長(zhǎng)保藏時(shí)間。對(duì)于有條件的實(shí)驗(yàn)室，可使用一次性無(wú)菌培養(yǎng)瓶或試管。6.2菌（毒）種準(zhǔn)備6.2.1將細(xì)菌和真菌菌落接種于含相應(yīng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器中，在合適的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。6.2.2通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)、雞胚培養(yǎng)、動(dòng)物接種等方法獲得病毒培養(yǎng)物。6.3保存6.3.1待生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（細(xì)菌或真菌）或適宜滴度（病毒將含培養(yǎng)物的培養(yǎng)容器密封，做好相應(yīng)標(biāo)記保存于2～8℃。6.3.2保存時(shí)間不宜超過(guò)3個(gè)月，具體時(shí)間視菌（毒）種的種類不同而異。6.3.3定期檢查培養(yǎng)基是否干裂、污染，并按時(shí)轉(zhuǎn)種，保證質(zhì)量控制。7低溫冷凍保存WS/TXXX—202X47.1技術(shù)要求7.1.1適用于多數(shù)細(xì)菌、部分真菌和病毒。除少數(shù)特殊耐凍菌（毒）種外，應(yīng)選擇適合的、針對(duì)性低溫保護(hù)劑，如采用無(wú)菌的甘油或脫脂奶粉，或DMSO。7.1.2適用于菌（毒）種的中、短期保存。7.1.3宜使用耐低溫?zé)o菌凍存管，采用螺旋蓋設(shè)計(jì)或配備硅膠密封圈，避免使用玻璃安瓿瓶。7.2菌（毒）種準(zhǔn)備7.2.1將細(xì)菌和真菌菌落接種于含相應(yīng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器中，在合適的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。7.2.2通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)、雞胚培養(yǎng)、動(dòng)物接種等方法獲得病毒培養(yǎng)物。7.2.3收獲對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（細(xì)菌和真菌）或適宜滴度（病毒）培養(yǎng)物，制備懸液并與無(wú)菌處理的低溫保護(hù)劑按一定比例混勻后分裝于無(wú)菌凍存管內(nèi)。7.3保存7.3.1分裝后的凍存管密封后標(biāo)記信息，包括菌（毒）種編號(hào)、名稱、保藏日期、代次等，直接保存于-20～-40℃。7.3.2保存時(shí)間不宜超過(guò)2年，根據(jù)菌（毒）種的種類不同而異。7.3.3此溫度下冰晶仍可能緩慢生長(zhǎng)，不適合長(zhǎng)期保藏珍貴菌（毒）種。7.4復(fù)蘇7.4.1從低溫保藏設(shè)備中取出菌（毒）種凍存管，可采用2～8℃或室溫等方式解凍。7.4.2開啟凍存管，將菌（毒）種移至適宜的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)。8超低溫冷凍保存8.1技術(shù)要求8.1.1菌（毒）種保藏最常用的方法。適用于多數(shù)細(xì)菌、真菌、病毒等病原微生物。8.1.2低溫保護(hù)劑準(zhǔn)備：應(yīng)根據(jù)菌（毒）種類別選擇適合的、有針對(duì)性低溫保護(hù)劑，如采用無(wú)菌的甘油或脫脂牛奶，或DMSO。8.2菌（毒）種準(zhǔn)備8.2.1使用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（細(xì)菌和真菌）或適宜滴度（病毒）培養(yǎng)物，避免不同的生理狀態(tài)對(duì)微生物存活率的影響。8.2.2接種固體培養(yǎng)基的細(xì)菌和真菌，可刮取適量菌苔轉(zhuǎn)移至含有無(wú)菌低溫保護(hù)劑（如含20%甘油的新鮮配制液體培養(yǎng)基）的凍存管內(nèi)，混勻，制成菌懸液。8.2.3接種液體培養(yǎng)基的細(xì)菌和真菌，振蕩培養(yǎng)后取菌懸液與低溫保護(hù)劑按一定比例混勻后，分裝于無(wú)菌凍存管內(nèi)，或者用無(wú)菌玻璃珠或磁珠吸附菌種懸液，然后將玻璃珠或磁珠置于無(wú)菌凍存管內(nèi)。8.2.4病毒在培養(yǎng)至適宜滴度后，收獲培養(yǎng)病毒至無(wú)菌凍存管內(nèi)（需要時(shí)，加適宜的低溫保護(hù)劑）。8.3程序降溫8.3.1將含菌（毒）種的凍存管進(jìn)行程序性梯度降溫（每分鐘下降1℃)或置入程序降溫設(shè)備（如“凍存盒”）中，應(yīng)控制合適的降溫速率，實(shí)現(xiàn)緩慢降溫，避免冰晶損傷。8.3.2待凍存管降至規(guī)定溫度后轉(zhuǎn)移至儲(chǔ)存盒，置于-60～-80℃超低溫保藏設(shè)備中保存。8.4保存8.4.1凍存管上應(yīng)清晰標(biāo)識(shí)，包括菌（毒）種編號(hào)、名稱、保藏日期、代次等。8.4.2保存期間應(yīng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)設(shè)備性能、環(huán)境參數(shù)等，定期抽樣檢查活力及雜菌情況。8.4.3可長(zhǎng)期保存，根據(jù)菌（毒）種的種類不同而異。WS/TXXX—202X58.5復(fù)蘇8.5.1從低溫保藏設(shè)備中取出菌（毒）種凍存管，可采用2～8℃或室溫等方式解凍。8.5.2開啟凍存管，將菌（毒）種移至適宜的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)。9深低溫冷凍保存9.1技術(shù)要求9.1.1保藏效果最好的方法，通常在液氮（氣相或液相）或深低溫冰箱（-150℃及以下）中保存。適用于多數(shù)病原微生物，尤其適用于不宜冷凍干燥的菌（毒）種（如支原體、衣原體、部分病毒）。9.1.2應(yīng)使用保護(hù)劑，保護(hù)劑的選擇同8.1.2。9.1.3應(yīng)使用耐深低溫凍存管。9.1.4氣相與液相保藏：氣相液氮保藏（-150℃至-196℃)安全性更高，能避免液相保藏可能造成的交叉污染和管體爆裂風(fēng)險(xiǎn)。需確保溫度始終低于-150℃。液相液氮保藏（-196℃)溫度最穩(wěn)定，但存在生物安全風(fēng)險(xiǎn)和液氮持續(xù)消耗。9.1.5安全要求：操作需佩戴防凍手套和護(hù)目鏡，在通風(fēng)良好的區(qū)域進(jìn)行，防止窒息。凍存管密封性應(yīng)做好嚴(yán)格檢查。9.2菌（毒）種準(zhǔn)備9.3程序降溫9.3.1將含菌（毒）種的凍存管置于程序降溫設(shè)備中，以合適的降溫速率進(jìn)行降溫，直到溫度達(dá)到菌（毒）種懸浮液凍結(jié)點(diǎn)之下（通常為5～10℃),并維持1～2小時(shí)。將凍存管迅速移入液氮罐中于液相(-196℃)或氣相(-150℃)中保存。9.3.2如果無(wú)程序降溫設(shè)備，則可將含菌（毒）種的凍存管置于（-60～-80℃)冰箱中冷凍2小時(shí)后，迅速移入液氮罐中于液相(-196℃)或氣相(-150℃)中保存。9.4保存9.4.1凍存管上應(yīng)清晰標(biāo)識(shí)，包括菌（毒）種編號(hào)、名稱、保藏日期、代次等。9.4.2保存期間應(yīng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)設(shè)備性能、環(huán)境參數(shù)等，定期檢查活力及污染情況。9.4.3理論上可無(wú)限期保藏。9.5復(fù)蘇7.4.1從低溫保藏設(shè)備中取出菌（毒）種凍存管，可采用2～8℃、室溫、37～40℃水浴等方式解凍。7.4.2開啟凍存管，將菌（毒）種移至適宜的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)。10冷凍干燥10.1技術(shù)要求10.1.1適用于多數(shù)病原微生物，但對(duì)干燥敏感的微生物（如螺旋體、不產(chǎn)孢子的絲狀真菌、藻類、原蟲）不適用。10.1.2應(yīng)采用合適的凍干保護(hù)劑，過(guò)濾除菌或高壓滅菌備用，保護(hù)劑的選用見附錄B。10.1.3應(yīng)使用專為冷凍干燥設(shè)計(jì)的耐真空安瓿瓶或西林瓶，分裝菌（毒）株懸液前，應(yīng)檢查容器是否有裂紋或瑕疵，避免冷凍干燥過(guò)程中容器爆炸。10.1.4凍干機(jī)和真空泵之間應(yīng)安裝有效的疏水過(guò)濾器，防止含有微生物的液體或氣溶膠進(jìn)入真空泵，再通過(guò)排氣口污染環(huán)境，或損壞真空泵。應(yīng)定期檢查并更換過(guò)濾器。10.1.5應(yīng)確保凍干機(jī)密封圈清潔、完好，防止真空泄漏。10.2菌（毒）種準(zhǔn)備WS/TXXX—202X610.2.1在無(wú)菌條件下，將凍干保護(hù)劑與菌（毒）種培養(yǎng)物按一定比例混勻，制成懸液。10.2.2取適量體積菌（毒）種懸液分裝至滅菌安瓿管或西林瓶中，避免濺污上部管壁，無(wú)菌封口。10.2.3液體培養(yǎng)的細(xì)菌或真菌，應(yīng)離心去除培養(yǎng)基，將培養(yǎng)物與凍干保護(hù)劑混勻，再分裝至滅菌安瓿管或西林瓶中，于1～2小時(shí)內(nèi)分裝完畢。10.3預(yù)凍應(yīng)將裝有菌（毒）種懸液的安瓿管或西林瓶，以合適的降溫速率降溫至預(yù)凍目標(biāo)溫度，預(yù)凍2小時(shí)以上。預(yù)凍的降溫速率可參考8.3。注：對(duì)大多數(shù)細(xì)菌而言，采用-80℃超低溫冰箱進(jìn)行預(yù)凍10.4冷凍干燥預(yù)凍結(jié)束后，應(yīng)結(jié)合不同菌（毒）種生物學(xué)特性，選擇合適的冷凍干燥程序進(jìn)行操作。注：通常先后通過(guò)主干燥與二次干燥步驟，經(jīng)升華移除游離水，及解吸移除結(jié)合水，獲得冷凍10.5熔封或密封干燥后，將安瓿管頸部用強(qiáng)火焰拉細(xì)熔封，或西林瓶軋蓋密封。10.6真空度或密封性測(cè)定熔封或密封后的安瓿管或西林瓶采用適宜方法確定真空度或密封性。10.7保存10.7.1凍存管上應(yīng)清晰標(biāo)識(shí)，包括菌（毒）種編號(hào)、名稱、保藏日期、代次等。10.7.2安瓿管或西林瓶應(yīng)在2～8℃或-20℃及以下溫度避光保存。10.7.3保存期間應(yīng)定期抽檢開展質(zhì)量控制。10.8復(fù)蘇應(yīng)嚴(yán)格規(guī)定復(fù)蘇操作步驟與流程（如用砂輪劃痕、無(wú)菌棉包裹、掰開，加入適宜的液體培養(yǎng)基重懸）。從低溫設(shè)備中取出并打開安瓿管或西林瓶，加入適量培養(yǎng)基。緩慢旋轉(zhuǎn)安瓿管或西林瓶后，將菌（毒）種移種到新鮮培養(yǎng)基中（上）培養(yǎng)。11轉(zhuǎn)運(yùn)環(huán)境下的低溫保存11.1轉(zhuǎn)運(yùn)包裝與標(biāo)識(shí)11.1.1包裝主容器應(yīng)無(wú)菌防漏，采用可靠封口方式，輔助容器應(yīng)防水防漏，且內(nèi)置吸收材料，外包裝應(yīng)堅(jiān)固抗損。11.1.2轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中應(yīng)包含生物危害標(biāo)識(shí)、信息標(biāo)識(shí)和放置方向標(biāo)識(shí)等。11.1.3轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中應(yīng)附有菌（毒）種清單、說(shuō)明文件，并提前完成必要的審批手續(xù)。11.2轉(zhuǎn)運(yùn)方法11.2.1應(yīng)根據(jù)菌（毒）種保藏條件選擇適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)運(yùn)方法，在整個(gè)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程維持穩(wěn)定的低溫溫區(qū)，以避免反復(fù)凍融。11.2.2低溫冷藏轉(zhuǎn)運(yùn)（2～8℃),宜使用低溫冷藏箱，或配置冰袋、凝膠等制冷劑的保溫容器，宜配備溫度監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，連續(xù)運(yùn)行時(shí)溫區(qū)溫度內(nèi)波動(dòng)幅度≤±2℃。11.2.3低溫冷凍轉(zhuǎn)運(yùn)（-20～-40℃),宜使用專用冷凍轉(zhuǎn)運(yùn)箱，具備持續(xù)制冷功能與溫度監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，連續(xù)運(yùn)行時(shí)溫區(qū)溫度內(nèi)波動(dòng)幅度≤±2℃,在預(yù)設(shè)溫度范圍內(nèi)宜保持均勻、穩(wěn)定的低溫環(huán)境。11.2.4超低溫冷凍轉(zhuǎn)運(yùn)（-60～-80℃),宜使用性能可靠的超低溫轉(zhuǎn)運(yùn)設(shè)備，如深低溫冰箱或干冰儲(chǔ)運(yùn)系統(tǒng)，宜具備溫度監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。設(shè)備應(yīng)保持工況穩(wěn)定，連續(xù)運(yùn)行時(shí)溫區(qū)溫度內(nèi)波動(dòng)幅度≤±4℃。11.2.5深低溫冷凍轉(zhuǎn)運(yùn)（-150～-196℃),宜使用專用的氣相/液相氮轉(zhuǎn)運(yùn)設(shè)備，宜具備溫度監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，應(yīng)確保樣本始終處于預(yù)設(shè)深低溫狀態(tài)，連續(xù)運(yùn)行時(shí)溫區(qū)溫度內(nèi)波動(dòng)幅度≤±4℃。11.2.6容器應(yīng)通過(guò)穩(wěn)定性驗(yàn)證及溫度分布均勻性測(cè)試。11.2.7低溫轉(zhuǎn)運(yùn)方法低溫溫區(qū)維持時(shí)長(zhǎng)應(yīng)大于轉(zhuǎn)運(yùn)總行程時(shí)長(zhǎng)（含裝卸、中轉(zhuǎn)、臨時(shí)停留等）。WS/TXXX—202X711.3轉(zhuǎn)運(yùn)溫度監(jiān)控與記錄11.3.2宜具備校準(zhǔn)合格的溫度監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，實(shí)時(shí)采集、記錄并傳輸轉(zhuǎn)運(yùn)期間溫度數(shù)據(jù)。11.3.3溫度傳感器測(cè)點(diǎn)宜包含菌（毒）種幾何中心及靠近箱壁處，確保單點(diǎn)溫度準(zhǔn)確性和溫區(qū)均勻性。11.3.4溫度數(shù)據(jù)宜全程連續(xù)監(jiān)測(cè)，采樣頻率≤5分鐘/次，上傳頻率≤15分鐘/次，數(shù)據(jù)保存期限≥樣本保存期限。11.3.5溫度監(jiān)測(cè)系統(tǒng)宜具備本地聲光報(bào)警、短信推送、平臺(tái)彈窗等多重報(bào)警機(jī)制，報(bào)警延遲≤5分鐘。WS/TXXX—202X8（資料性）常用低溫保護(hù)劑常用低溫保護(hù)劑見表A.1。表A.1常用低溫保護(hù)劑保護(hù)劑