TIL細(xì)胞衰老機(jī)制及延緩策略演講人CONTENTSTIL細(xì)胞衰老機(jī)制及延緩策略TIL細(xì)胞概述及其在腫瘤免疫治療中的核心地位TIL細(xì)胞衰老的多維度分子機(jī)制TIL細(xì)胞衰老的延緩策略：從體外優(yōu)化到體內(nèi)調(diào)控總結(jié)與展望：TIL細(xì)胞衰老研究的臨床轉(zhuǎn)化前景目錄01TIL細(xì)胞衰老機(jī)制及延緩策略TIL細(xì)胞衰老機(jī)制及延緩策略在從事腫瘤免疫治療的十余年里，我始終被TIL細(xì)胞（腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞）的獨(dú)特魅力所吸引——這些從患者腫瘤組織中“喚醒”的免疫細(xì)胞，如同機(jī)體的“特種部隊(duì)”，能夠精準(zhǔn)識(shí)別并殺傷腫瘤細(xì)胞，為晚期癌癥患者帶來(lái)前所未有的生存希望。然而，臨床實(shí)踐中一個(gè)棘手的難題反復(fù)浮現(xiàn)：經(jīng)過體外擴(kuò)增回輸?shù)腡IL細(xì)胞，為何有時(shí)會(huì)“力不從心”？隨著研究的深入，答案逐漸清晰——TIL細(xì)胞的衰老，正成為制約其療效的關(guān)鍵瓶頸。今天，我將結(jié)合最新研究進(jìn)展與臨床實(shí)踐，與大家一同深入探討TIL細(xì)胞的衰老機(jī)制及其延緩策略，為優(yōu)化腫瘤細(xì)胞免疫治療提供新思路。02TIL細(xì)胞概述及其在腫瘤免疫治療中的核心地位1TIL細(xì)胞的定義與來(lái)源TIL細(xì)胞是指從腫瘤組織中分離、浸潤(rùn)在腫瘤實(shí)質(zhì)和間質(zhì)中的異質(zhì)性淋巴細(xì)胞群體，主要包括CD8?細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞、CD4?輔助T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）等。與外周血淋巴細(xì)胞（PBLs）不同，TIL細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境（TME）的長(zhǎng)期“教育”下，天然具備腫瘤抗原特異性，能夠通過識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面的主要組織相容性復(fù)合體（MHC）分子，釋放穿孔素、顆粒酶等效應(yīng)分子，直接殺傷腫瘤細(xì)胞。2TIL細(xì)胞療法的臨床應(yīng)用與挑戰(zhàn)基于TIL細(xì)胞的過繼性細(xì)胞治療（ACT），尤其是自體TIL細(xì)胞療法，在黑色素瘤、宮頸癌等實(shí)體瘤治療中展現(xiàn)出顯著療效。例如，晚期黑色素瘤患者接受TIL細(xì)胞治療后，客觀緩解率（ORR）可達(dá)50%以上，其中部分患者實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期完全緩解（CR）。然而，TIL細(xì)胞療法的臨床應(yīng)用仍面臨多重挑戰(zhàn)：體外擴(kuò)增效率不足、回輸后存活時(shí)間短、腫瘤浸潤(rùn)能力弱等，而TIL細(xì)胞衰老正是導(dǎo)致這些問題的重要內(nèi)在原因。3細(xì)胞衰老：TIL細(xì)胞功能衰竭的核心特征細(xì)胞衰老是一種不可逆的生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，表現(xiàn)為細(xì)胞周期阻滯、形態(tài)改變、分泌表型（SASP）及功能喪失。對(duì)于TIL細(xì)胞而言，衰老不僅削弱其直接殺傷腫瘤的能力，還會(huì)通過分泌炎性因子促進(jìn)腫瘤免疫抑制微環(huán)境的形成，形成“惡性循環(huán)”。因此，深入解析TIL細(xì)胞衰老的分子機(jī)制，開發(fā)針對(duì)性延緩策略，是提升TIL細(xì)胞療法療效的核心突破口。03TIL細(xì)胞衰老的多維度分子機(jī)制TIL細(xì)胞衰老的多維度分子機(jī)制TIL細(xì)胞衰老并非由單一因素驅(qū)動(dòng)，而是腫瘤微環(huán)境長(zhǎng)期壓迫、細(xì)胞內(nèi)在調(diào)控網(wǎng)絡(luò)紊亂及代謝失衡共同作用的結(jié)果。近年來(lái)，隨著單細(xì)胞測(cè)序、蛋白質(zhì)組學(xué)等技術(shù)的應(yīng)用，TIL細(xì)胞衰老的機(jī)制圖譜逐漸清晰。1端粒功能障礙與端粒酶活性抑制端粒是位于染色體末端的重復(fù)DNA序列，其長(zhǎng)度隨細(xì)胞分裂逐漸縮短，當(dāng)縮短至臨界長(zhǎng)度（“Hayflick極限”）時(shí)，可激活DNA損傷應(yīng)答（DDR），誘導(dǎo)細(xì)胞衰老。1端粒功能障礙與端粒酶活性抑制1.1端?？s短與細(xì)胞周期阻滯TIL細(xì)胞在腫瘤組織中長(zhǎng)期處于“激活-增殖”狀態(tài)，以應(yīng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸。每一次細(xì)胞分裂都會(huì)導(dǎo)致端粒DNA丟失，當(dāng)端粒長(zhǎng)度縮短至5-10kb時(shí)，端粒結(jié)合蛋白（如TRF1、TRF2）脫落，暴露端粒末端，被細(xì)胞感知為DNA雙鏈斷裂（DSB），激活A(yù)TM/ATR-Chk1/2-p53-p21信號(hào)軸，誘導(dǎo)p21???1和p16?????等細(xì)胞周期抑制蛋白表達(dá)，最終將細(xì)胞阻滯在G1期。1端粒功能障礙與端粒酶活性抑制1.2端粒酶活性受抑端粒酶（由催化亞基hTERT、RNA模板TERC和調(diào)節(jié)亞基TP1組成）可通過添加TTAGGG重復(fù)序列延長(zhǎng)端粒，延緩細(xì)胞衰老。然而，腫瘤微環(huán)境中的抑制性因子（如TGF-β、IL-10）可直接下調(diào)hTERT的表達(dá)；此外，TIL細(xì)胞表面的免疫檢查點(diǎn)分子（如PD-1）激活后，可通過SHIP-1/PTEN信號(hào)抑制PI3K/Akt通路，而Akt是hTERT轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵激活因子，導(dǎo)致端粒酶活性顯著降低。2表觀遺傳調(diào)控紊亂表觀遺傳修飾（DNA甲基化、組蛋白修飾、染色質(zhì)重塑）在TIL細(xì)胞衰老中扮演“開關(guān)”角色，通過穩(wěn)定衰老表型限制細(xì)胞功能恢復(fù)。2表觀遺傳調(diào)控紊亂2.1DNA甲基化異常啟動(dòng)子區(qū)CpG島的高甲基化是基因沉默的經(jīng)典機(jī)制。在衰老TIL細(xì)胞中，與T細(xì)胞功能相關(guān)的基因（如IFN-γ、IL-2）啟動(dòng)子區(qū)出現(xiàn)高甲基化，導(dǎo)致其表達(dá)下調(diào)；而衰老相關(guān)分泌表型（SASP）相關(guān)基因（如IL-6、MMP9）則因低甲基化而過度表達(dá)。例如，DNMT1（DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1）在TIL細(xì)胞中表達(dá)升高，通過甲基化沉默CD28共刺激分子基因，削弱T細(xì)胞的活化能力。2表觀遺傳調(diào)控紊亂2.2組蛋白修飾失衡組蛋白乙?；?去乙?；?、甲基化/去甲基化修飾動(dòng)態(tài)調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄。衰老TIL細(xì)胞中，組蛋白去乙酰化酶（HDACs，如HDAC1、HDAC2）表達(dá)升高，導(dǎo)致組蛋白H3K9、H3K27乙?；浇档?，抑制了效應(yīng)細(xì)胞因子基因的開放染色質(zhì)狀態(tài)；而H3K9me3（抑制性組蛋白標(biāo)記）在衰老相關(guān)基因（如p16?????）啟動(dòng)子區(qū)富集，維持其持續(xù)表達(dá)。2表觀遺傳調(diào)控紊亂2.3染色質(zhì)重塑障礙染色質(zhì)復(fù)合物（如SWI/SNF）通過調(diào)控核小體位置影響基因可及性。衰老TIL細(xì)胞中，BRG1（SWI/SNF核心亞基）表達(dá)下調(diào)，導(dǎo)致T細(xì)胞受體（TCR）信號(hào)通路相關(guān)基因（如ZAP70、LAT）染色質(zhì)結(jié)構(gòu)緊縮，削弱T細(xì)胞對(duì)抗原的識(shí)別與應(yīng)答能力。3關(guān)鍵信號(hào)通路的異常激活多條信號(hào)通路的過度激活或抑制，共同驅(qū)動(dòng)TIL細(xì)胞進(jìn)入衰老狀態(tài)。3關(guān)鍵信號(hào)通路的異常激活3.1p53-p21???1信號(hào)軸持續(xù)激活p53是“基因組守護(hù)者”，當(dāng)細(xì)胞受到DNA損傷、氧化應(yīng)激等壓力時(shí)，p53被激活，誘導(dǎo)p21???1表達(dá)。p21???1通過抑制周期蛋白依賴性激酶（CDKs）阻斷Rb蛋白磷酸化，使細(xì)胞停滯在G1期。在TIL細(xì)胞中，腫瘤微環(huán)境中的慢性抗原刺激和炎性因子（如TNF-α）可導(dǎo)致p53-p21軸持續(xù)激活，加速細(xì)胞衰老。2.3.2p16?????-Rb信號(hào)軸不可逆激活p16?????是另一種關(guān)鍵的CDK抑制劑，通過與CDK4/6結(jié)合，抑制Rb蛋白磷酸化，阻斷G1/S期轉(zhuǎn)換。與p53不同，p16?????的表達(dá)隨細(xì)胞分裂次數(shù)增加而“不可逆”升高，是細(xì)胞衰老的“生物標(biāo)志物”。在衰老TIL細(xì)胞中，p16?????啟動(dòng)子區(qū)因組蛋白H3K27me3富集而高表達(dá)，導(dǎo)致Rb蛋白持續(xù)低磷酸化，細(xì)胞周期永久停滯。3關(guān)鍵信號(hào)通路的異常激活3.1p53-p21???1信號(hào)軸持續(xù)激活2.3.3mTORC1信號(hào)通路過度激活mTORC1（哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白復(fù)合物1）是調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、代謝的核心樞紐。腫瘤微環(huán)境中的營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)（如葡萄糖、氨基酸缺乏）可激活TIL細(xì)胞的AMPK-mTORC1通路，長(zhǎng)期mTORC1激活通過誘導(dǎo)ROS積累、蛋白質(zhì)合成過度負(fù)荷及線粒體功能障礙，促進(jìn)細(xì)胞衰老。臨床前研究顯示，mTOR抑制劑（如雷帕霉素）可延緩TIL細(xì)胞衰老，但需注意劑量依賴性免疫抑制效應(yīng)。4腫瘤微環(huán)境的誘導(dǎo)作用腫瘤微環(huán)境是TIL細(xì)胞衰老的“外部推手”，通過缺氧、代謝重編程、免疫抑制細(xì)胞浸潤(rùn)等多重機(jī)制，加速TIL細(xì)胞功能衰竭。4腫瘤微環(huán)境的誘導(dǎo)作用4.1缺氧誘導(dǎo)HIF-1α表達(dá)，驅(qū)動(dòng)衰老程序?qū)嶓w瘤內(nèi)部普遍存在缺氧狀態(tài)，缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）在缺氧條件下穩(wěn)定表達(dá)，可上調(diào)p16?????、TGF-β等基因表達(dá)，同時(shí)抑制線粒體氧化磷酸化，促進(jìn)乳酸積累，加劇細(xì)胞內(nèi)酸中毒，誘導(dǎo)TIL細(xì)胞衰老。此外，HIF-1α還可通過上調(diào)PD-L1表達(dá)，增強(qiáng)TIL細(xì)胞的耗竭與衰老。4腫瘤微環(huán)境的誘導(dǎo)作用4.2代謝重編程與營(yíng)養(yǎng)剝奪腫瘤細(xì)胞通過高表達(dá)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體（如GLUT1）和單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體（MCT4），競(jìng)爭(zhēng)性攝取葡萄糖并分泌乳酸，導(dǎo)致TIL細(xì)胞周圍葡萄糖耗竭、乳酸堆積。葡萄糖缺乏抑制TIL細(xì)胞的糖酵解和氧化磷酸化，減少ATP生成，激活A(yù)MPK-p53衰老通路；乳酸則通過抑制組蛋白去乙?；福℉DACs）和促進(jìn)MCT1介導(dǎo)的H?內(nèi)流，破壞細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，誘導(dǎo)衰老。4腫瘤微環(huán)境的誘導(dǎo)作用4.3免疫抑制性細(xì)胞因子的持續(xù)作用腫瘤微環(huán)境中富含TGF-β、IL-10、前列腺素E2（PGE2）等抑制性細(xì)胞因子。TGF-β可通過Smad3信號(hào)上調(diào)p15?????和p21???1表達(dá)，同時(shí)抑制T細(xì)胞受體ζ鏈（CD3ζ）的表達(dá)，削弱T細(xì)胞活化；IL-10通過STAT3信號(hào)誘導(dǎo)SOCS3表達(dá)，抑制IL-2信號(hào)通路，促進(jìn)T細(xì)胞失能與衰老；PGE2則通過EP2/EP4受體激活PKA-CREB信號(hào)，下調(diào)CD28和IL-2Rα（CD25）表達(dá)，加速T細(xì)胞耗竭。4腫瘤微環(huán)境的誘導(dǎo)作用4.4免疫抑制性細(xì)胞的浸潤(rùn)與作用腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）、髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）等免疫抑制細(xì)胞可通過直接接觸（如PD-L1/PD-1）或分泌抑制性因子（如IL-10、TGF-β、精氨酸酶1），抑制TIL細(xì)胞的增殖與功能，促進(jìn)其衰老。例如，MDSCs通過精氨酸酶1消耗局部精氨酸，導(dǎo)致T細(xì)胞內(nèi)精氨酸缺乏，抑制mTORC1信號(hào)和細(xì)胞周期進(jìn)程，誘導(dǎo)衰老。5線粒體功能障礙與氧化應(yīng)激線粒體是細(xì)胞的“能量工廠”，也是活性氧（ROS）的主要來(lái)源。衰老TIL細(xì)胞中，線粒體形態(tài)異常（如嵴減少、腫脹）、功能下降（OXPHOS活性降低、ATP生成減少），同時(shí)ROS過度積累。5線粒體功能障礙與氧化應(yīng)激5.1ROS積累與DNA損傷過量的ROS可攻擊DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，導(dǎo)致DNA氧化損傷（如8-oxo-dg積累），激活A(yù)TM-Chk2-p53-p21衰老通路；同時(shí)，ROS可直接氧化線粒體DNA（mtDNA），進(jìn)一步損害線粒體功能，形成“ROS-線粒體功能障礙-更多ROS”的惡性循環(huán)。5線粒體功能障礙與氧化應(yīng)激5.2線粒體動(dòng)力學(xué)失衡線粒體融合（由MFN1/2、OPA1介導(dǎo)）與分裂（由DRP1介導(dǎo)）的動(dòng)態(tài)平衡維持線粒體功能。衰老TIL細(xì)胞中，DRP1表達(dá)升高，MFN1/2表達(dá)降低，導(dǎo)致線粒體過度分裂，功能碎片化。抑制DRP1活性可減少ROS積累，延緩TIL細(xì)胞衰老，提示線粒體動(dòng)力學(xué)是潛在干預(yù)靶點(diǎn)。04TIL細(xì)胞衰老的延緩策略：從體外優(yōu)化到體內(nèi)調(diào)控TIL細(xì)胞衰老的延緩策略：從體外優(yōu)化到體內(nèi)調(diào)控基于對(duì)TIL細(xì)胞衰老機(jī)制的深入理解，我們可通過“體外擴(kuò)增優(yōu)化”“體內(nèi)微環(huán)境調(diào)控”“多模式聯(lián)合治療”三大策略，延緩或逆轉(zhuǎn)TIL細(xì)胞衰老，提升其抗腫瘤活性。1體外擴(kuò)增優(yōu)化：構(gòu)建“年輕化”TIL細(xì)胞培養(yǎng)體系TIL細(xì)胞回輸前的體外擴(kuò)增是決定療效的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，傳統(tǒng)培養(yǎng)條件（如高濃度IL-2、血清培養(yǎng)）易誘導(dǎo)細(xì)胞衰老。優(yōu)化培養(yǎng)體系，可顯著改善TIL細(xì)胞質(zhì)量。1體外擴(kuò)增優(yōu)化：構(gòu)建“年輕化”TIL細(xì)胞培養(yǎng)體系1.1細(xì)胞因子組合優(yōu)化：替代高劑量IL-2IL-2是TIL細(xì)胞擴(kuò)增的經(jīng)典細(xì)胞因子，但高劑量IL-2不僅促進(jìn)Treg增殖，還通過激活STAT5信號(hào)上調(diào)p16?????表達(dá)，加速衰老。研究發(fā)現(xiàn)，低劑量IL-2聯(lián)合IL-15（促進(jìn)效應(yīng)T細(xì)胞增殖、抑制Treg分化）、IL-21（增強(qiáng)T細(xì)胞細(xì)胞毒性和記憶形成）可顯著減少TIL細(xì)胞衰老比例。例如，IL-15超激動(dòng)劑（N-803）可激活JAK1/JAK3-STAT5信號(hào)，同時(shí)抑制PD-1表達(dá)，在體外擴(kuò)增中使SA-β-gal?細(xì)胞比例降低40%以上。1體外擴(kuò)增優(yōu)化：構(gòu)建“年輕化”TIL細(xì)胞培養(yǎng)體系1.2小分子抑制劑：靶向衰老關(guān)鍵通路-mTOR抑制劑：雷帕霉素或其類似物（如Everolimus）可通過抑制mTORC1信號(hào)，減少ROS積累和蛋白質(zhì)合成負(fù)荷，延緩TIL細(xì)胞衰老。臨床前研究顯示，雷帕霉素處理的TIL細(xì)胞在回輸后腫瘤浸潤(rùn)能力顯著增強(qiáng)。01-PI3Kδ抑制劑：PI3Kδ在T細(xì)胞活化中起關(guān)鍵作用，其抑制劑（如Idelalisib）可阻斷PD-1介導(dǎo)的抑制信號(hào)，減少p16?????表達(dá)，同時(shí)促進(jìn)TIL細(xì)胞干細(xì)胞樣記憶（Tscm）表型分化，增強(qiáng)長(zhǎng)期抗腫瘤能力。02-端粒酶激活劑：小分子化合物（如TA-65）可激活端粒酶，延長(zhǎng)端粒長(zhǎng)度。在TIL細(xì)胞培養(yǎng)中加入TA-65，可端粒長(zhǎng)度增加500-1000bp，細(xì)胞增殖能力提升2-3倍。031體外擴(kuò)增優(yōu)化：構(gòu)建“年輕化”TIL細(xì)胞培養(yǎng)體系1.3表觀遺傳修飾：逆轉(zhuǎn)衰老相關(guān)基因沉默-DNA甲基化抑制劑：5-氮雜胞苷（5-Aza）或地西他濱（Decitabine）可抑制DNMT1活性，恢復(fù)IFN-γ、IL-2等效應(yīng)基因的甲基化狀態(tài)。研究顯示，低劑量地西他賓處理的TIL細(xì)胞，IFN-γ分泌量增加3倍，體外殺傷腫瘤效率提升50%。-組蛋白去乙酰化酶抑制劑（HDACi）：伏立諾他（Vorinostat）或帕比司他（Panobinostat）可增加組蛋白H3K9、H3K27乙?；?，開放染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，促進(jìn)效應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄。聯(lián)合HDACi與IL-15可顯著減少TIL細(xì)胞的SASP因子分泌，改善細(xì)胞功能。1體外擴(kuò)增優(yōu)化：構(gòu)建“年輕化”TIL細(xì)胞培養(yǎng)體系1.3基因編輯技術(shù)：敲除衰老相關(guān)基因CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)為精準(zhǔn)調(diào)控TIL細(xì)胞衰老提供了新工具。通過敲除p16?????、p21???1或PD-1基因，可顯著延緩TIL細(xì)胞衰老，增強(qiáng)其增殖與殺傷能力。例如，敲除p16?????的TIL細(xì)胞在體外連續(xù)擴(kuò)增4周后，仍保持較高的增殖活性，而野生型TIL細(xì)胞已進(jìn)入生長(zhǎng)停滯。1體外擴(kuò)增優(yōu)化：構(gòu)建“年輕化”TIL細(xì)胞培養(yǎng)體系1.43D培養(yǎng)與生物支架模擬體內(nèi)微環(huán)境傳統(tǒng)2D培養(yǎng)平面結(jié)構(gòu)單一，缺乏細(xì)胞間相互作用，易誘導(dǎo)TIL細(xì)胞衰老。3D培養(yǎng)（如水凝膠微球、仿生支架）可模擬腫瘤組織的三維結(jié)構(gòu)，通過提供細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）成分（如膠原蛋白、纖連蛋白）和細(xì)胞間接觸信號(hào)，減少TIL細(xì)胞應(yīng)激。例如，基于透明質(zhì)酸的3D培養(yǎng)體系可使TIL細(xì)胞中CD28、CD27等共刺激分子表達(dá)升高30%，衰老相關(guān)基因p16?????表達(dá)降低50%。2體內(nèi)調(diào)控：改善腫瘤微環(huán)境，重塑TIL細(xì)胞功能回輸后的TIL細(xì)胞能否在腫瘤部位存活、浸潤(rùn)并發(fā)揮功能，取決于體內(nèi)微環(huán)境的“友好度”。通過靶向腫瘤微環(huán)境的免疫抑制成分，可延緩TIL細(xì)胞體內(nèi)衰老。2體內(nèi)調(diào)控：改善腫瘤微環(huán)境，重塑TIL細(xì)胞功能2.1免疫檢查點(diǎn)抑制劑：解除TIL細(xì)胞“剎車”PD-1/PD-L1、CTLA-4等免疫檢查點(diǎn)分子是T細(xì)胞耗竭與衰老的關(guān)鍵調(diào)控因子?？筆D-1抗體（如Pembrolizumab）可阻斷PD-1/PD-L1相互作用，恢復(fù)TIL細(xì)胞的增殖與殺傷功能。臨床研究顯示，TIL細(xì)胞聯(lián)合抗PD-1抗體治療黑色素瘤，客觀緩解率從單藥TIL治療的50%提升至70%，且患者外周血中衰老T細(xì)胞比例顯著降低。2體內(nèi)調(diào)控：改善腫瘤微環(huán)境，重塑TIL細(xì)胞功能2.2TGF-β信號(hào)阻斷：抑制纖維化與衰老TGF-β是誘導(dǎo)TIL細(xì)胞纖維化與衰老的核心因子。TGF-β中和抗體（如Fresolimumab）或TGF-β受體激酶抑制劑（如Galunisertib）可減少腫瘤間質(zhì)纖維化，改善TIL細(xì)胞的浸潤(rùn)能力。此外，TGF-β阻斷可下調(diào)p16?????和SASP因子表達(dá)，延緩TIL細(xì)胞衰老。2體內(nèi)調(diào)控：改善腫瘤微環(huán)境，重塑TIL細(xì)胞功能2.3代謝調(diào)節(jié)：改善TIL細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)供給-葡萄糖代謝重編程：二肽基肽酶-4（DPP-4）抑制劑（如西格列?。┛梢种艷LUT1內(nèi)化，增加TIL細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝??；同時(shí)，提供替代能源（如酮體β-羥基丁酸）可緩解葡萄糖缺乏對(duì)TIL細(xì)胞的壓力，減少ROS積累。-腺苷通路抑制：腫瘤微環(huán)境中腺苷通過A2A受體抑制T細(xì)胞功能。A2A受體拮抗劑（如Ciforadenant）可阻斷腺苷信號(hào)，恢復(fù)TIL細(xì)胞的增殖和IFN-γ分泌，聯(lián)合抗PD-1抗體可產(chǎn)生協(xié)同抗腫瘤效果。2體內(nèi)調(diào)控：改善腫瘤微環(huán)境，重塑TIL細(xì)胞功能2.4調(diào)節(jié)性細(xì)胞清除：減少免疫抑制通過抗體清除Tregs或抑制其功能（如抗CTLA-4抗體），可減少TIL細(xì)胞受到的抑制信號(hào)。例如，抗CCR4抗體（Mogamulizumab）可選擇性清除Tregs，增加CD8?TIL細(xì)胞/CD4?Tregs比值，延緩TIL細(xì)胞衰老。3多模式聯(lián)合治療：協(xié)同延緩TIL細(xì)胞衰老單一策略難以完全逆轉(zhuǎn)TIL細(xì)胞衰老，聯(lián)合治療（如“放療/化療+TIL細(xì)胞”“TIL細(xì)胞+CAR-T”）可通過協(xié)同作用，打破免疫抑制微環(huán)境，增強(qiáng)TIL細(xì)胞功能。3.3.1放療/化療：誘導(dǎo)免疫原性細(xì)胞死亡，增強(qiáng)TIL細(xì)胞活性放療和化療可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫原性細(xì)胞死亡（ICD），釋放腫瘤抗原和損傷相關(guān)分子模式（DAMPs，如ATP、HMGB1），激活樹突狀細(xì)胞（DCs），促進(jìn)TIL細(xì)胞的增殖與活化。同時(shí)，低劑量化療（如環(huán)磷酰胺）可清除Tregs，改善TIL細(xì)胞的微環(huán)境。例如，放療后聯(lián)合TIL細(xì)胞治療，可使腫瘤浸潤(rùn)C(jī)D8?T細(xì)胞數(shù)量增加2倍，衰老比例降低60%。3多模式聯(lián)合治療：協(xié)同延緩TIL細(xì)胞衰老3.2TIL細(xì)胞與CAR-T細(xì)胞聯(lián)合：優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)CAR-