ctDNA檢測質(zhì)量控制：確保結(jié)果可靠性演講人01檢測前質(zhì)量控制：筑牢“源頭防線”，確保樣本真實性與完整性02檢測中質(zhì)量控制：打造“精密儀器”，確保檢測過程穩(wěn)定可重復(fù)03檢測后質(zhì)量控制：構(gòu)建“閉環(huán)管理”，確保結(jié)果解讀準(zhǔn)確可靠目錄ctDNA檢測質(zhì)量控制：確保結(jié)果可靠性作為在腫瘤分子診斷領(lǐng)域深耕十余年的從業(yè)者，我親歷了ctDNA（循環(huán)腫瘤DNA）檢測從實驗室研究走向臨床應(yīng)用的全過程。從最初只能在頂級研究中心開展的“奢侈品”，到如今成為腫瘤早篩、用藥指導(dǎo)、預(yù)后監(jiān)測的常規(guī)工具，ctDNA技術(shù)的每一次突破都令人振奮。但與此同時，我也深刻體會到：ctDNA檢測的“可靠性”從來不是理所當(dāng)然的結(jié)果，而是貫穿于檢測全流程的“質(zhì)量閉環(huán)”精心打磨的產(chǎn)物。一次微小的質(zhì)控疏漏，可能讓一個本應(yīng)通過靶向治療獲益的患者錯失機會；一次看似不起眼的操作偏差，可能導(dǎo)致腫瘤負(fù)荷評估的嚴(yán)重誤差。因此，構(gòu)建科學(xué)、全面的質(zhì)量控制體系，不僅是實驗室合規(guī)性的要求，更是對患者生命的承諾。本文將從檢測前、檢測中、檢測后三個核心環(huán)節(jié)，結(jié)合實際工作場景，系統(tǒng)闡述ctDNA檢測的質(zhì)量控制要點，為同行提供可落地的實踐參考。01檢測前質(zhì)量控制：筑牢“源頭防線”，確保樣本真實性與完整性檢測前質(zhì)量控制：筑牢“源頭防線”，確保樣本真實性與完整性檢測前階段是ctDNA質(zhì)量控制的“第一道關(guān)口”，也是最容易因“看不見”而被忽視的環(huán)節(jié)。ctDNA在血液中以極低豐度存在（通常占游離DNA的0.1%-1%），且穩(wěn)定性差，極易受樣本采集、運輸、處理等過程的影響。若源頭樣本失真，后續(xù)任何“精密”的檢測都將是“空中樓閣”。1樣本采集：標(biāo)準(zhǔn)化流程是“生命線”ctDNA檢測的樣本類型主要是外周血，其采集過程需嚴(yán)格遵循“防污染、保穩(wěn)定”原則。1樣本采集：標(biāo)準(zhǔn)化流程是“生命線”1.1采集管的選擇：抑制“背景噪音”的關(guān)鍵傳統(tǒng)EDTA抗凝管雖能防止血液凝固，但無法抑制白細(xì)胞體外裂解——白細(xì)胞基因組DNA（gDNA）是ctDNA檢測中最主要的“干擾源”。一旦白細(xì)胞裂解，會釋放大量gDNA，稀釋ctDNA豐度，甚至掩蓋低頻變異（如術(shù)后微小殘留病灶監(jiān)測中的0.1%變異豐度）。我們曾遇到一例結(jié)直腸癌術(shù)后患者，使用EDTA管采集的血漿ctDNA檢測未發(fā)現(xiàn)KRAS突變，但更換為含細(xì)胞穩(wěn)定劑的StreckcfDNATube后，同一血液樣本成功檢測到0.3%的KRASG12D突變。這一案例讓我深刻認(rèn)識到：采集管的選擇不是“可有可無”的選項，而是決定檢測下限的核心要素。目前，臨床推薦使用StreckcfDNATube、PAXgeneBloodccfDNATube等含細(xì)胞穩(wěn)定劑的采集管，其原理是通過穩(wěn)定劑抑制白細(xì)胞膜完整性，避免gDNA釋放，同時保護(hù)ctDNA不被核酸酶降解。1樣本采集：標(biāo)準(zhǔn)化流程是“生命線”1.2采集體積與時機：精準(zhǔn)把控“腫瘤信號”ctDNA釋放具有“時空異質(zhì)性”——不同腫瘤類型、不同臨床階段（如治療前、治療中、復(fù)發(fā)時），ctDNA豐度差異可達(dá)10-100倍。因此，采集體需根據(jù)臨床目的調(diào)整：-腫瘤早篩：需采集10mL以上外周血（建議10-15mL），確保足夠的ctDNA起始量；-治療監(jiān)測：如靶向治療療效評估，可在用藥前、用藥后2-4周采集動態(tài)對比，此時ctDNA豐度變化敏感，僅需5-10mL血液；-術(shù)后復(fù)發(fā)監(jiān)測：推薦在術(shù)后1個月內(nèi)（基線）、術(shù)后每3-6個月定期采集，此時ctDNA豐度極低（可能<0.1%），需嚴(yán)格避免稀釋。此外，采集體積需確保血漿分離后獲得至少4mL血漿（對應(yīng)2-5mL血液），避免因體積不足導(dǎo)致后續(xù)核酸提取量不足。1樣本采集：標(biāo)準(zhǔn)化流程是“生命線”1.3采集體位與操作細(xì)節(jié)：杜絕“人為污染”采血時需患者處于靜息狀態(tài)，避免劇烈運動（運動會導(dǎo)致肌肉細(xì)胞釋放gDNA，增加背景噪聲）；操作者需嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，避免反復(fù)穿刺（組織液混入會稀釋血漿，降低ctDNA濃度）；采血后需立即輕柔顛倒混勻8-10次（確保抗凝劑/穩(wěn)定劑與血液充分接觸，但避免劇烈震蕩導(dǎo)致溶血）。我們曾因新入職護(hù)士采血后未充分混勻，導(dǎo)致部分血液凝固，血漿分離量不足，不得不重新抽血，不僅增加患者痛苦，更延誤了治療時機——這些“細(xì)節(jié)的魔鬼”，正是質(zhì)量控制需要死守的底線。2樣本運輸與保存：守護(hù)“分子穩(wěn)定性”ctDNA在體外極易被核酸酶降解或吸附于管壁，運輸與保存條件直接影響其完整性。2樣本運輸與保存：守護(hù)“分子穩(wěn)定性”2.1運輸條件：“冷鏈+時效”雙保障含細(xì)胞穩(wěn)定劑的采集管雖可在室溫（6-25℃）保存72小時，但為最大限度降低降解風(fēng)險，推薦：-2-8℃冷藏運輸，使用保溫箱配合冰袋（避免直接接觸管壁防止凍裂）；-運輸時間≤24小時（偏遠(yuǎn)地區(qū)可延長至48小時，但需全程溫度監(jiān)控，確保溫度波動≤±2℃）；-禁止冷凍運輸（反復(fù)凍融會導(dǎo)致ctDNA片段化，影響后續(xù)文庫構(gòu)建）。我們實驗室建立了“運輸溫度實時監(jiān)控系統(tǒng)”，每個樣本箱配備溫度記錄儀，數(shù)據(jù)實時上傳至LIS系統(tǒng)，一旦溫度超出范圍，立即啟動樣本復(fù)檢流程——這種“數(shù)字化追溯”機制，讓運輸風(fēng)險從“不可控”變?yōu)椤翱深A(yù)警”。2樣本運輸與保存：守護(hù)“分子穩(wěn)定性”2.2保存規(guī)范：“分級分類”管理血漿分離后，需根據(jù)檢測目的制定保存策略：-短期保存（≤7天）：-80℃冰箱凍存，避免反復(fù)凍融（建議分裝成200μL/管，減少取用次數(shù)）；-長期保存（＞7天）：-80℃冰箱，需定期（每6個月）檢查冰箱溫度波動，確保溫度穩(wěn)定；-對照樣本：需設(shè)置健康人對照、陰性對照（如不含ctDNA的緩沖液）、陽性對照（含已知濃度突變DNA的血漿），與臨床樣本同步保存，用于監(jiān)控保存過程中的穩(wěn)定性。3血漿分離：精準(zhǔn)“富集ctDNA”的核心步驟血漿分離是ctDNA檢測中最關(guān)鍵的“物理分離”環(huán)節(jié)，目標(biāo)是最大限度去除細(xì)胞成分，同時保留血漿中的游離DNA（cfDNA，包含ctDNA）。3血漿分離：精準(zhǔn)“富集ctDNA”的核心步驟3.1離心參數(shù)：“力與時間”的平衡-第一次離心（2000×g，10分鐘，4℃）：目的是分離血漿與血細(xì)胞（紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板），若離心力不足或時間過短，會導(dǎo)致血細(xì)胞殘留；-第二次離心（16000×g，10分鐘，4℃）：目的是去除殘留的血小板（血小板裂解會釋放gDNA），這是容易被忽視的細(xì)節(jié)——我們曾因省略第二次離心，導(dǎo)致一例肺癌患者的血漿gDNA濃度高達(dá)50ng/μL（正常應(yīng)＜10ng/μL），ctDNA豐度被稀釋10倍以上，最終漏檢EGFR敏感突變。3血漿分離：精準(zhǔn)“富集ctDNA”的核心步驟3.2血漿轉(zhuǎn)移：“避免細(xì)胞污染”第二次離心后，需使用無菌吸頭（避免管壁附著的細(xì)胞污染）小心吸取上層血漿，避免吸到下層血細(xì)胞沉淀。轉(zhuǎn)移過程中需動作輕柔，避免產(chǎn)生氣泡（氣泡可能導(dǎo)致樣本附著于管壁，損失ctDNA）。我們實驗室要求“雙人核對”：一人轉(zhuǎn)移血漿，另一人記錄轉(zhuǎn)移體積，確保血漿轉(zhuǎn)移量誤差≤5%。4核酸提?。骸皬暮Ａ勘尘爸胁东@微量信號”ctDNA提取是連接樣本與檢測的“橋梁”，其效率直接影響下游結(jié)果的可靠性。4核酸提取：“從海量背景中捕獲微量信號”4.1提取方法：“磁珠法vs柱層析法”的選擇-磁珠法：提取效率高（可達(dá)80%-95%），對短片段ctDNA（＜150bp）親和力強，適合低豐度ctDNA檢測；操作自動化程度高（如使用KingFisher、QIAcube等儀器），減少人為誤差；是目前ctDNA提取的主流方法。-柱層析法：成本低，但提取效率較低（60%-80%），且對操作者經(jīng)驗要求高（如上樣流速控制不當(dāng)會導(dǎo)致DNA吸附不充分），適合資源有限但檢測需求較高的基層實驗室。4核酸提取：“從海量背景中捕獲微量信號”4.2提取質(zhì)控：“定量與定性”雙重評估提取完成后，需對cfDNA進(jìn)行質(zhì)控：-定量：使用QubitdsDNAHSAssay（高靈敏度DNA定量試劑盒）檢測濃度，確保cfDNA總量≥10ng（若樣本量不足，可適當(dāng)降低至5ng，但需驗證檢測靈敏度）；-定性：使用Bioanalyzer或Tapestation檢測片段分布，ctDNA主要分布在160-180bp（核小體保護(hù)片段），若主峰＞200bp，提示可能存在gDNA污染；若片段＜100bp，提示樣本降解嚴(yán)重。我曾遇到一例胰腺癌患者的cfDNA，定量顯示濃度達(dá)標(biāo)（15ng/μL），但片段分布主峰在250bp，追溯發(fā)現(xiàn)血漿分離時離心溫度未控溫（室溫離心導(dǎo)致白細(xì)胞裂解），不得不重新采集樣本——這種“定量+定性”的雙重質(zhì)控，避免了不合格樣本進(jìn)入下游流程。02檢測中質(zhì)量控制：打造“精密儀器”，確保檢測過程穩(wěn)定可重復(fù)檢測中質(zhì)量控制：打造“精密儀器”，確保檢測過程穩(wěn)定可重復(fù)檢測中階段是ctDNA檢測的“核心戰(zhàn)場”，涉及文庫構(gòu)建、測序、數(shù)據(jù)分析等多個環(huán)節(jié)。此階段的質(zhì)量控制需聚焦“標(biāo)準(zhǔn)化、可重復(fù)性、靈敏度”，確保同一份樣本在不同時間、不同操作者、不同儀器上的結(jié)果一致。2.1文庫構(gòu)建：“將微量信號放大為可檢測的信號”ctDNA片段短、豐度低，文庫構(gòu)建是其“信號放大”的關(guān)鍵步驟，直接影響檢測的靈敏度與準(zhǔn)確性。1.1文庫類型：“靶向捕獲vs全外顯子測序”的選擇-靶向捕獲測序：針對特定基因（如肺癌的EGFR、ALK，結(jié)直腸癌的KRAS、NRAS）設(shè)計探針，富集目標(biāo)區(qū)域，測序深度高（可達(dá)10,000×以上），檢測靈敏度可達(dá)0.1%-0.01%，適合臨床用藥指導(dǎo)、復(fù)發(fā)監(jiān)測等場景；-全外顯子測序（WES）：覆蓋所有外顯子區(qū)域，適合未知驅(qū)動基因的探索，但測序深度較低（通常100×-200×），檢測靈敏度較差（1%-5%），且成本較高，目前多用于科研。1.2文庫構(gòu)建質(zhì)控：“避免擴(kuò)增偏好性與污染”-片段大小選擇：使用AMPureXP磁珠進(jìn)行片段大小選擇（如0.2×-0.8倍磁珠比例，保留150-300bp片段），去除過長gDNA或過短片段（非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物）；01-UDG酶處理：使用尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG）降解含尿嘧啶的DNA（PCR擴(kuò)增過程中dUTP替代dTTP摻入），防止PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)入后續(xù)文庫，降低“重復(fù)序列”導(dǎo)致的假陽性；02-接頭連接效率：使用qPCR定量接頭連接后的文庫，確保文庫濃度≥2nM（若濃度過低，需增加擴(kuò)增循環(huán)數(shù)，但可能增加背景噪聲）；03-陰性對照：每次文庫構(gòu)建需設(shè)置“無模板對照（NTC）”，即不加cfDNA樣本，僅加酶和緩沖液，若NTC檢出突變，提示試劑或環(huán)境污染，需暫停實驗并排查。041.2文庫構(gòu)建質(zhì)控：“避免擴(kuò)增偏好性與污染”我們曾因一批接頭連接效率下降（文庫濃度僅0.5nM），導(dǎo)致10例樣本的檢測靈敏度從0.1%降至0.5%，不得不重新構(gòu)建文庫——這讓我深刻認(rèn)識到：文庫構(gòu)建的每個試劑、每個步驟，都需經(jīng)過嚴(yán)格的預(yù)驗證，且每次實驗都需設(shè)置質(zhì)控對照。1.2文庫構(gòu)建質(zhì)控：“避免擴(kuò)增偏好性與污染”2測序過程：“數(shù)字化讀取基因信息的“眼睛”測序是ctDNA檢測的“讀碼器”，其質(zhì)量直接影響數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與可靠性。2.1測序平臺：“NGS是主流，單分子測序是補充”-NGS平臺：如IlluminaNovaSeq6000、Miseq，是目前ctDNA檢測的主流平臺，優(yōu)點是通量高、成本低、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確（錯誤率＜0.1%）；-單分子測序平臺：如PacBioSequelII、Nanopore，優(yōu)點是讀長長（可直接檢測片段大?。珳?zhǔn)確率較低（5%-10%），目前主要用于科研或復(fù)雜結(jié)構(gòu)變異檢測。2.2測序質(zhì)控：“從原始數(shù)據(jù)到有效數(shù)據(jù)”1-原始數(shù)據(jù)質(zhì)控：使用FastQC軟件評估原始數(shù)據(jù)質(zhì)量，要求Q30值（堿基準(zhǔn)確率≥99.9%）≥80%，GC含量40%-60%（若偏離過大，提示文庫構(gòu)建或擴(kuò)增偏好性）；2-測序深度達(dá)標(biāo)：靶向捕獲測序要求目標(biāo)區(qū)域測序深度≥10,000×（低頻變異檢測需≥20,000×），全基因組測序（WGS）要求≥30×；3-陽性對照覆蓋：每次測序需加入“人工合成突變DNA”（如SeraCell），要求突變位點覆蓋深度≥1000倍，且變異檢出率≥95%；4-陰性對照驗證：設(shè)置“健康人血漿cfDNA”對照，要求未檢出已知驅(qū)動基因突變（若檢出，提示試劑或環(huán)境污染）。5我們實驗室建立了“測序數(shù)據(jù)自動質(zhì)控系統(tǒng)”，一旦原始數(shù)據(jù)Q30＜80%或陽性對照未檢出，系統(tǒng)會自動報警并暫停數(shù)據(jù)下傳，確保不合格數(shù)據(jù)不進(jìn)入分析流程。2.2測序質(zhì)控：“從原始數(shù)據(jù)到有效數(shù)據(jù)”3數(shù)據(jù)分析：“從海量數(shù)據(jù)中挖掘“真實變異”數(shù)據(jù)分析是ctDNA檢測的“解碼器”，其復(fù)雜度高、易受主觀因素影響，需建立標(biāo)準(zhǔn)化的分析流程。3.1生物信息學(xué)流程：“標(biāo)準(zhǔn)化+可追溯”-數(shù)據(jù)預(yù)處理：使用Trimmomatic或Cutadapt去除接頭序列和低質(zhì)量reads（Q20＜10的堿基切除）；-序列比對：使用BWA或Bowtie2將reads比對到人類參考基因組（如GRCh38），要求比對率≥95%；-duplicate標(biāo)記：使用Picard或sambamba標(biāo)記PCR重復(fù)序列（去除后可降低假陽性）；-變異檢測：使用GATKMutect2（NGS金標(biāo)準(zhǔn)）或VarScan2檢測單核苷酸變異（SNV）、插入缺失（InDel），要求變異支持reads數(shù)≥5（低頻變異需≥10），變異豐度≥0.1%；3.1生物信息學(xué)流程：“標(biāo)準(zhǔn)化+可追溯”-變異過濾：去除dbSNP、gnomAD等常見多態(tài)性位點（人群頻率＞0.1%），去除低質(zhì)量變異（如支持reads在基因組上分布不均、strandbias嚴(yán)重）。3.2變異驗證：“避免假陽性的“最后一道防線”對于關(guān)鍵臨床決策的變異（如EGFRT790M、ALK融合），需通過Sanger測序或數(shù)字PCR（dPCR）驗證：-Sanger測序：適合檢測豐度＞5%的變異，成本低，但靈敏度低（無法檢測＜5%的低頻變異）；-dPCR：通過微滴分區(qū)實現(xiàn)“絕對定量”，靈敏度可達(dá)0.01%，是低頻變異驗證的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但成本高、通量低。我們曾遇到一例樣本通過NGS檢出BRAFV600E突變（豐度0.8%），但dPCR驗證未檢出，追溯發(fā)現(xiàn)是生物信息學(xué)流程中“duplicate標(biāo)記”錯誤（將部分真實reads標(biāo)記為重復(fù)），優(yōu)化流程后dPCR驗證成功檢出——這讓我深刻認(rèn)識到：數(shù)據(jù)分析流程的每一步都需經(jīng)過實驗驗證，且關(guān)鍵變異必須通過獨立方法確認(rèn)。03檢測后質(zhì)量控制：構(gòu)建“閉環(huán)管理”，確保結(jié)果解讀準(zhǔn)確可靠檢測后質(zhì)量控制：構(gòu)建“閉環(huán)管理”，確保結(jié)果解讀準(zhǔn)確可靠檢測后階段是ctDNA檢測的“臨門一腳”，涉及結(jié)果審核、報告解讀、質(zhì)量評估等多個環(huán)節(jié)。此階段的質(zhì)量控制需聚焦“臨床相關(guān)性、可解釋性、溯源性”，確保檢測結(jié)果真正服務(wù)于臨床決策。1結(jié)果審核：“數(shù)據(jù)到結(jié)論的“最后一公里”ctDNA檢測結(jié)果需經(jīng)過“三級審核”，確保準(zhǔn)確無誤：1結(jié)果審核：“數(shù)據(jù)到結(jié)論的“最后一公里”1.1一級審核：技術(shù)員初審檢查實驗流程完整性（樣本接收、提取、文庫構(gòu)建、測序、數(shù)據(jù)分析各環(huán)節(jié)記錄），數(shù)據(jù)質(zhì)控指標(biāo)（Q30、測序深度、陰性對照等）是否達(dá)標(biāo)，變異檢測結(jié)果是否符合預(yù)期（如肺癌樣本EGFR突變豐度是否與腫瘤負(fù)荷一致）。1結(jié)果審核：“數(shù)據(jù)到結(jié)論的“最后一公里”1.2二級審核：生物信息分析師審核復(fù)核變異檢測算法參數(shù)（如變異豐度閾值、過濾條件是否與SOP一致），驗證變異位點在基因組上的注釋（是否為編碼區(qū)、是否影響蛋白功能），檢查變異的臨床數(shù)據(jù)庫匹配情況（如OncoKB、COSMIC）。1結(jié)果審核：“數(shù)據(jù)到結(jié)論的“最后一公里”1.3三級審核：臨床分子診斷醫(yī)師審核結(jié)合患者臨床信息（腫瘤類型、治療史、影像學(xué)檢查結(jié)果），評估變異的“臨床意義”：-Tier1（臨床意義明確）：如EGFRL858R突變（肺癌靶向治療敏感），需明確標(biāo)注“推薦使用EGFR-TKI（如奧希替尼）”；-Tier2（臨床意義可能明確）：如METexon14跳躍突變（肺癌潛在靶點），需標(biāo)注“建議進(jìn)行MET抑制劑治療”；-Tier3（臨床意義不明）：如未知功能變異（VUS），需標(biāo)注“暫無明確臨床意義，需結(jié)合其他檢查結(jié)果”。我們曾遇到一例胃癌患者檢出HER2擴(kuò)增（豐度8.0%），但患者既往病理HER2IHC檢測為1+（陰性），經(jīng)三級審核發(fā)現(xiàn)是“克隆性造血”（CHIP）導(dǎo)致的假陽性——結(jié)合患者年齡（75歲）、腫瘤位置等臨床信息，最終判斷該擴(kuò)增無臨床意義，避免患者接受不必要的抗HER2治療。1結(jié)果審核：“數(shù)據(jù)到結(jié)論的“最后一公里”1.3三級審核：臨床分子診斷醫(yī)師審核3.2報告解讀：“讓數(shù)據(jù)“說話”，指導(dǎo)臨床決策ctDNA檢測報告是連接實驗室與臨床的“橋梁”，其內(nèi)容需“準(zhǔn)確、清晰、可操作”。1結(jié)果審核：“數(shù)據(jù)到結(jié)論的“最后一公里”2.1報告內(nèi)容要素：“標(biāo)準(zhǔn)化+個性化”1-基本信息：患者姓名、性別、年齡、樣本編號、檢測時間；2-檢測方法：所用的技術(shù)平臺（如NGS靶向捕獲）、檢測基因列表、檢測靈敏度；3-檢測結(jié)果：變異位點（基因、外顯子、核苷酸變化）、變異類型（SNV/InDel/CNV）、變異豐度、臨床意義（Tier分級）；4-質(zhì)控信息：樣本提取量、測序深度、Q30值、陰性對照結(jié)果；5-解讀與建議：結(jié)合臨床信息的變異解讀、推薦的治療方案或進(jìn)一步檢查建議。1結(jié)果審核：“數(shù)據(jù)到結(jié)論的“最后一公里”2.2報告解讀原則：“避免過度解讀”1-區(qū)分“檢出”與“有意義”：即使檢出某種變異，也需結(jié)合腫瘤類型判斷其臨床相關(guān)性（如結(jié)直腸癌中BRAFV600E突變是預(yù)后不良指標(biāo)，但罕見于肺癌）；2-動態(tài)監(jiān)測“趨勢”：治療中ctDNA豐度下降提示治療有效，上升提示耐藥或進(jìn)展（需與影像學(xué)結(jié)果結(jié)合）；3-解釋“假陰性”可能：若臨床高度懷疑腫瘤但ctDNA檢測陰性，需考慮腫瘤負(fù)荷低、ctDNA釋放不足或檢測技術(shù)限制，建議結(jié)合組織活檢或其他液體活檢（如外泌體RNA）。3質(zhì)量體系持續(xù)改進(jìn)：“從問題中學(xué)習(xí)，讓質(zhì)量“螺旋上升”質(zhì)量控制不是“一勞永逸”的工作，需建立“監(jiān)測-評估-改進(jìn)”的閉環(huán)機制，持續(xù)提升檢測質(zhì)量。3質(zhì)量體系持續(xù)改進(jìn)：“從問題中學(xué)習(xí)，讓質(zhì)量“螺旋上升”3.1室內(nèi)質(zhì)控（IQC）與室間質(zhì)評（EQA）-IQC：每日使用陰陽性對照監(jiān)控檢測流程穩(wěn)定性，每月統(tǒng)計變異檢出率、重復(fù)性等指標(biāo)，若連續(xù)3次超出警戒限（如變異豐度誤差＞20%），需暫停實驗并排查原因；-EQA