姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)對大鼠動脈粥樣硬化的干預(yù)機(jī)制與效應(yīng)研究一、引言1.1研究背景與意義1.1.1動脈粥樣硬化的危害與研究現(xiàn)狀動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）是一種嚴(yán)重威脅人類健康的慢性疾病，其病理特征為動脈管壁增厚變硬、失去彈性和管腔縮小。作為冠心病、腦卒中和外周血管疾病等的主要病理基礎(chǔ)，動脈粥樣硬化的發(fā)病率和死亡率在全球范圍內(nèi)均居高不下，給社會和家庭帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）統(tǒng)計(jì)，心血管疾病每年導(dǎo)致的死亡人數(shù)占全球總死亡人數(shù)的30%以上，而動脈粥樣硬化是心血管疾病的主要病因。目前，臨床上對于動脈粥樣硬化的防治主要包括生活方式干預(yù)、藥物治療和手術(shù)治療等。生活方式干預(yù)如合理飲食、適量運(yùn)動、戒煙限酒等，是預(yù)防和控制動脈粥樣硬化的基礎(chǔ)措施，但對于已經(jīng)發(fā)生動脈粥樣硬化的患者，單純的生活方式干預(yù)往往難以達(dá)到理想的治療效果。藥物治療方面，常用的藥物包括他汀類降脂藥、抗血小板藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）等，這些藥物在一定程度上能夠降低血脂、抑制血小板聚集、降低血壓，從而延緩動脈粥樣硬化的進(jìn)展。然而，這些藥物也存在一定的局限性，如他汀類藥物可能會引起肝功能損害、肌肉疼痛等不良反應(yīng)，長期使用還可能導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生；抗血小板藥物則存在出血風(fēng)險等問題。手術(shù)治療如冠狀動脈搭橋術(shù)、頸動脈內(nèi)膜切除術(shù)等，雖然能夠直接改善血管狹窄或阻塞的情況，但手術(shù)風(fēng)險較高，且術(shù)后仍需要長期藥物治療以預(yù)防復(fù)發(fā)。因此，尋找一種安全、有效的新型治療方法，對于動脈粥樣硬化的防治具有重要意義。1.1.2姜黃素的藥理特性與研究進(jìn)展姜黃素（Curcumin）是從姜科姜黃屬植物姜黃、郁金、莪術(shù)等的根莖中提取的一種天然多酚類化合物，具有多種藥理活性，如抗炎、抗氧化、抗腫瘤、抗微生物、抗纖維化等。近年來，姜黃素在抗動脈粥樣硬化方面的作用逐漸受到關(guān)注。研究表明，姜黃素能夠通過多種途徑發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用，包括抗炎、抗氧化、清除氧自由基、降脂、促細(xì)胞凋亡和抑制細(xì)胞增殖、遷移、保護(hù)內(nèi)皮損傷等。在抗炎方面，姜黃素可抑制炎癥介質(zhì)和轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，調(diào)節(jié)促炎因子和抑炎因子間的平衡，從而減輕炎癥反應(yīng)。例如，姜黃素能夠顯著抑制葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）炎癥小體活化，降低白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、單核細(xì)胞趨化蛋白1等多種炎癥因子的表達(dá)，進(jìn)而減輕結(jié)腸炎癥。在抗氧化方面，姜黃素可以清除體內(nèi)的自由基，減少氧化應(yīng)激反應(yīng)，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素能夠提高抗氧化酶（如超氧化物歧化酶、過氧化氫酶等）的活性，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物（如丙二醛）的含量，從而發(fā)揮抗氧化作用。此外，姜黃素還能夠調(diào)節(jié)血脂代謝，降低血清總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇水平，升高高密度脂蛋白膽固醇水平；抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，減少動脈粥樣硬化斑塊的形成；保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞，維持血管內(nèi)皮的完整性和功能。然而，目前關(guān)于姜黃素抗動脈粥樣硬化的具體作用機(jī)制尚未完全明確，仍需進(jìn)一步深入研究。1.1.3HO-1在動脈粥樣硬化中的關(guān)鍵作用血紅素加氧酶-1（Hemeoxygenase-1，HO-1）是一種誘導(dǎo)型酶，在多種細(xì)胞應(yīng)激狀態(tài)下（如缺血、缺氧、炎癥、高熱、輻射等）表達(dá)上調(diào)。HO-1具有重要的生理功能，其催化血紅素降解為膽綠素、一氧化碳和游離鐵，其中膽綠素在膽綠素還原酶的作用下迅速轉(zhuǎn)化為膽紅素。膽紅素是一種有效的抗氧化劑，能夠清除過氧化氫，防止脂質(zhì)氧化；一氧化碳則具有舒張血管、抑制血小板聚集、抗炎和抗細(xì)胞凋亡等作用。因此，HO-1被認(rèn)為是一種重要的細(xì)胞保護(hù)性酶，在維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和抵御各種應(yīng)激損傷中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程中，HO-1的表達(dá)變化與病情密切相關(guān)。研究表明，HO-1的表達(dá)上調(diào)能夠減輕動脈粥樣硬化的病變程度，而HO-1的表達(dá)下調(diào)則會加速動脈粥樣硬化的進(jìn)程。具體來說，HO-1通過以下幾個方面發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用：首先，HO-1的抗氧化作用能夠減少氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）的生成，降低其對血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，從而抑制動脈粥樣硬化的起始階段。其次，HO-1及其代謝產(chǎn)物一氧化碳和膽紅素具有抗炎作用，能夠抑制炎癥細(xì)胞的浸潤和炎癥介質(zhì)的釋放，減輕血管壁的炎癥反應(yīng)，阻止動脈粥樣硬化斑塊的進(jìn)一步發(fā)展。此外，HO-1還能夠抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，減少斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞的數(shù)量，增加斑塊的穩(wěn)定性，降低斑塊破裂和血栓形成的風(fēng)險。綜上所述，HO-1在動脈粥樣硬化的防治中具有重要的潛在價值。1.1.4本研究的目的和意義本研究旨在探討姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)抗大鼠動脈粥樣硬化的作用及其機(jī)制。通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，觀察姜黃素對大鼠動脈粥樣硬化模型的影響，檢測HO-1的表達(dá)水平以及相關(guān)炎癥指標(biāo)、氧化應(yīng)激指標(biāo)等的變化，深入分析姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)與抗動脈粥樣硬化之間的關(guān)系。本研究的結(jié)果有望為動脈粥樣硬化的防治提供新的理論依據(jù)和治療策略。具體而言，本研究對于動脈粥樣硬化的研究具有以下幾個方面的意義：一是有助于進(jìn)一步明確姜黃素抗動脈粥樣硬化的作用機(jī)制，為姜黃素的臨床應(yīng)用提供更堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。二是揭示HO-1在姜黃素抗動脈粥樣硬化過程中的關(guān)鍵作用，為開發(fā)以HO-1為靶點(diǎn)的新型抗動脈粥樣硬化藥物提供新思路。三是為動脈粥樣硬化的治療提供了一種潛在的天然藥物，姜黃素作為一種天然的化合物，具有低毒性、低不良反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，有望成為一種安全有效的治療動脈粥樣硬化的藥物。綜上所述，本研究具有重要的理論意義和臨床應(yīng)用價值。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀1.2.1姜黃素的生物學(xué)活性研究姜黃素作為一種從姜科植物中提取的天然多酚類化合物，近年來在生物學(xué)活性研究領(lǐng)域備受關(guān)注，其在抗炎、抗氧化、抗腫瘤等多個方面展現(xiàn)出顯著功效，具有廣闊的應(yīng)用前景。在抗炎方面，姜黃素的作用機(jī)制主要通過抑制炎癥介質(zhì)和轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)。眾多研究表明，姜黃素可顯著抑制葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）炎癥小體活化，進(jìn)而降低白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、單核細(xì)胞趨化蛋白1等多種炎癥因子的表達(dá)，有效減輕結(jié)腸炎癥。在動物實(shí)驗(yàn)中，給予DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠姜黃素干預(yù)后，小鼠結(jié)腸組織中的炎癥細(xì)胞浸潤明顯減少，炎癥相關(guān)基因的表達(dá)也顯著降低，充分證明了姜黃素的抗炎作用?？寡趸芰κ墙S素的又一重要生物學(xué)活性。姜黃素能夠有效清除體內(nèi)的自由基，減少氧化應(yīng)激反應(yīng)，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素可以提高抗氧化酶如超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）等的活性，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）的含量。在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，將姜黃素作用于受到氧化應(yīng)激損傷的細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)的活性氧（ROS）水平明顯降低，抗氧化酶活性顯著升高，細(xì)胞的氧化損傷得到有效緩解。姜黃素在抗腫瘤領(lǐng)域也展現(xiàn)出巨大的潛力。它能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤血管生成以及抑制腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲。在對乳腺癌細(xì)胞的研究中，姜黃素可通過抑制脂肪酸合成酶（FAS）的活性，下調(diào)FAS的表達(dá)和mRNA水平，從而誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡。在肺癌細(xì)胞的研究中，姜黃素能夠抑制肺癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力，其作用機(jī)制與調(diào)控上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)蛋白的表達(dá)有關(guān)。此外，姜黃素還具有抗微生物、抗纖維化、心肌保護(hù)等多種生物學(xué)活性。在抗微生物方面，姜黃素對多種細(xì)菌、真菌和病毒都具有抑制作用；在抗纖維化方面，姜黃素可通過抑制成纖維細(xì)胞的增殖和膠原蛋白的合成，減輕組織纖維化程度；在心肌保護(hù)方面，姜黃素能夠減輕心肌缺血再灌注損傷，改善心臟功能。綜上所述，姜黃素的生物學(xué)活性廣泛且顯著，在醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域都具有廣闊的應(yīng)用前景。在醫(yī)藥領(lǐng)域，姜黃素有望成為治療炎癥相關(guān)疾病、癌癥、心血管疾病等的新型藥物；在食品領(lǐng)域，姜黃素可作為天然的抗氧化劑和防腐劑，延長食品的保質(zhì)期；在化妝品領(lǐng)域，姜黃素的抗氧化和抗炎特性使其可用于開發(fā)具有美白、抗皺、抗炎等功效的護(hù)膚品。然而，目前姜黃素的應(yīng)用還受到其低溶解度、低生物利用度等問題的限制，未來需要進(jìn)一步研究解決這些問題，以充分發(fā)揮姜黃素的生物學(xué)活性和應(yīng)用價值。1.2.2姜黃素與動脈粥樣硬化的研究進(jìn)展近年來，姜黃素抗動脈粥樣硬化的作用及機(jī)制成為研究熱點(diǎn)，大量基礎(chǔ)研究和臨床前研究均表明，姜黃素在動脈粥樣硬化防治方面具有顯著效果，部分臨床研究也初步驗(yàn)證了其應(yīng)用潛力。姜黃素抗動脈粥樣硬化的作用機(jī)制是多方面的。首先，抗炎作用是其重要機(jī)制之一。動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病，炎癥反應(yīng)在其發(fā)生發(fā)展過程中起著關(guān)鍵作用。姜黃素能夠抑制炎癥細(xì)胞的活化和炎癥介質(zhì)的釋放，調(diào)節(jié)促炎因子和抑炎因子間的平衡。研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素可顯著降低動脈粥樣硬化模型動物血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、IL-6等促炎因子的水平，同時提高IL-10等抑炎因子的含量。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，姜黃素能夠抑制單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞的分化，減少巨噬細(xì)胞對氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）的攝取，從而降低炎癥反應(yīng)。其次，抗氧化作用也是姜黃素抗動脈粥樣硬化的重要機(jī)制。氧化應(yīng)激在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色，ox-LDL的形成和積累會導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，促進(jìn)動脈粥樣硬化的進(jìn)展。姜黃素具有強(qiáng)大的抗氧化能力，能夠清除體內(nèi)的自由基，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減少ox-LDL的生成。實(shí)驗(yàn)表明，姜黃素可以提高動脈粥樣硬化模型動物體內(nèi)抗氧化酶SOD、CAT的活性，降低MDA等脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的含量，從而減輕氧化應(yīng)激對血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。姜黃素還能夠調(diào)節(jié)血脂代謝，降低血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平，升高高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平。在動物實(shí)驗(yàn)中，給予高脂飲食誘導(dǎo)的動脈粥樣硬化模型動物姜黃素干預(yù)后，動物血清中的血脂水平得到明顯改善，動脈粥樣硬化斑塊的形成也顯著減少。其調(diào)節(jié)血脂代謝的機(jī)制可能與抑制膽固醇合成相關(guān)酶的活性、促進(jìn)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)有關(guān)。此外，姜黃素還可以抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，減少動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞的數(shù)量，增加斑塊的穩(wěn)定性。研究表明，姜黃素能夠通過抑制細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)，將血管平滑肌細(xì)胞阻滯在G0/G1期，從而抑制其增殖。同時，姜黃素還可以抑制血管平滑肌細(xì)胞的遷移相關(guān)蛋白的表達(dá)，減少其遷移能力。在臨床前研究方面，大量動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)了姜黃素抗動脈粥樣硬化的有效性。例如，在ApoE基因敲除小鼠動脈粥樣硬化模型中，給予姜黃素干預(yù)后，小鼠主動脈根部的粥樣硬化斑塊面積明顯減小，斑塊內(nèi)的炎癥細(xì)胞浸潤減少，脂質(zhì)沉積減輕。在兔動脈粥樣硬化模型中，姜黃素也能夠顯著降低血脂水平，減輕血管壁的炎癥反應(yīng)，抑制動脈粥樣硬化的進(jìn)展。在臨床研究方面，雖然目前相關(guān)研究相對較少，但也取得了一些初步成果。有研究對患有動脈粥樣硬化的患者進(jìn)行姜黃素干預(yù)，發(fā)現(xiàn)患者血清中的炎癥指標(biāo)如C反應(yīng)蛋白（CRP）、TNF-α等有所降低，血脂水平也得到一定程度的改善。然而，由于姜黃素的低溶解度和低生物利用度，其在臨床應(yīng)用中還面臨一些挑戰(zhàn)。未來需要進(jìn)一步開展大規(guī)模、多中心的臨床研究，優(yōu)化姜黃素的給藥方式和劑型，以提高其生物利用度，充分發(fā)揮其抗動脈粥樣硬化的作用。綜上所述，姜黃素通過多種機(jī)制發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用，臨床前研究已充分證實(shí)其有效性，臨床研究也初步顯示出應(yīng)用潛力。隨著研究的不斷深入和技術(shù)的不斷進(jìn)步，姜黃素有望成為動脈粥樣硬化防治的新選擇。1.2.3HO-1與動脈粥樣硬化關(guān)系的研究血紅素加氧酶-1（HO-1）在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著關(guān)鍵角色，其表達(dá)變化與動脈粥樣硬化的病情密切相關(guān)，對血管壁細(xì)胞具有重要的保護(hù)作用。在動脈粥樣硬化的起始階段，血管內(nèi)皮細(xì)胞受到多種危險因素的刺激，如氧化應(yīng)激、炎癥等，導(dǎo)致HO-1的表達(dá)上調(diào)。HO-1的抗氧化作用能夠減少ox-LDL的生成，降低其對血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。研究表明，HO-1催化血紅素降解產(chǎn)生的膽紅素是一種有效的抗氧化劑，能夠清除過氧化氫，防止脂質(zhì)氧化。在體外實(shí)驗(yàn)中，將血管內(nèi)皮細(xì)胞暴露于氧化應(yīng)激環(huán)境中，同時給予HO-1誘導(dǎo)劑處理，細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激水平明顯降低，ox-LDL的生成減少，血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷得到有效緩解。這表明HO-1的抗氧化作用在抑制動脈粥樣硬化的起始階段具有重要意義。隨著動脈粥樣硬化的發(fā)展，炎癥反應(yīng)逐漸加劇，HO-1及其代謝產(chǎn)物一氧化碳（CO）和膽紅素發(fā)揮著重要的抗炎作用。HO-1通過抑制炎癥細(xì)胞的浸潤和炎癥介質(zhì)的釋放，減輕血管壁的炎癥反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，CO能夠抑制核因子-κB（NF-κB）的活化，從而減少炎癥因子如TNF-α、IL-6等的表達(dá)。在動物實(shí)驗(yàn)中，敲低HO-1基因后，動脈粥樣硬化模型動物血管壁的炎癥反應(yīng)明顯加重，炎癥細(xì)胞浸潤增多，炎癥因子表達(dá)升高；而給予HO-1誘導(dǎo)劑處理后，炎癥反應(yīng)顯著減輕。這充分說明HO-1及其代謝產(chǎn)物的抗炎作用對于阻止動脈粥樣硬化斑塊的進(jìn)一步發(fā)展至關(guān)重要。此外，HO-1還能夠抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，減少斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞的數(shù)量，增加斑塊的穩(wěn)定性。在動脈粥樣硬化斑塊中，血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移會導(dǎo)致斑塊的不穩(wěn)定，增加斑塊破裂和血栓形成的風(fēng)險。HO-1可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)，抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖。研究表明，HO-1能夠使血管平滑肌細(xì)胞阻滯在G0/G1期，減少細(xì)胞進(jìn)入S期和M期的比例，從而抑制其增殖。同時，HO-1還可以抑制血管平滑肌細(xì)胞的遷移相關(guān)蛋白的表達(dá)，如基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）等，減少其遷移能力。在體外實(shí)驗(yàn)中，過表達(dá)HO-1的血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移能力明顯低于正常細(xì)胞；而敲低HO-1基因后，細(xì)胞的增殖和遷移能力顯著增強(qiáng)。這表明HO-1在維持動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性方面發(fā)揮著重要作用。綜上所述，HO-1在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程中通過抗氧化、抗炎、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移等多種途徑對血管壁細(xì)胞起到保護(hù)作用。深入研究HO-1與動脈粥樣硬化的關(guān)系，對于揭示動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制以及開發(fā)新的治療策略具有重要意義。1.2.4姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)的相關(guān)研究近年來，姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)的相關(guān)研究取得了顯著進(jìn)展，揭示了其在多種疾病模型中的作用及相關(guān)信號通路，為進(jìn)一步理解姜黃素的藥理機(jī)制提供了重要依據(jù)。研究表明，姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)主要通過激活核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）/抗氧化反應(yīng)元件（ARE）信號通路。在正常生理狀態(tài)下，Nrf2與Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1（Keap1）結(jié)合，處于無活性狀態(tài)，并在細(xì)胞質(zhì)中被持續(xù)降解。當(dāng)細(xì)胞受到氧化應(yīng)激、炎癥等刺激時，姜黃素可以與Keap1的半胱氨酸殘基結(jié)合，導(dǎo)致Nrf2與Keap1解離。解離后的Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核，與ARE結(jié)合，從而啟動HO-1等抗氧化酶基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，用姜黃素處理人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）后，通過蛋白質(zhì)免疫印跡法（Westernblot）檢測發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)Nrf2蛋白的表達(dá)明顯增加，且核內(nèi)Nrf2的含量也顯著升高，同時HO-1的表達(dá)水平也隨之上調(diào)。進(jìn)一步通過RNA干擾技術(shù)敲低Nrf2基因后，姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)的作用明顯減弱，這充分證明了Nrf2/ARE信號通路在姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)中的關(guān)鍵作用。除了Nrf2/ARE信號通路，絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路也參與了姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)的過程。MAPK信號通路包括細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK等。研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素可以激活MAPK信號通路，促進(jìn)ERK、JNK和p38MAPK的磷酸化。這些磷酸化的蛋白可以進(jìn)一步激活下游的轉(zhuǎn)錄因子，如激活蛋白-1（AP-1）等，從而促進(jìn)HO-1基因的表達(dá)。在動物實(shí)驗(yàn)中，給予動脈粥樣硬化模型大鼠姜黃素干預(yù)后，通過免疫組化和Westernblot檢測發(fā)現(xiàn)，大鼠主動脈組織中ERK、JNK和p38MAPK的磷酸化水平明顯升高，同時HO-1的表達(dá)也顯著增加。而給予MAPK信號通路抑制劑處理后，姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)的作用受到抑制，表明MAPK信號通路在姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)中起到重要的調(diào)節(jié)作用。在不同疾病模型中，姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)也展現(xiàn)出良好的治療效果。在糖尿病腎病模型中，姜黃素通過誘導(dǎo)HO-1表達(dá)，減輕腎臟的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，改善腎功能。研究發(fā)現(xiàn)，給予糖尿病腎病小鼠姜黃素干預(yù)后，小鼠腎臟組織中HO-1的表達(dá)明顯增加，MDA含量降低，SOD活性升高，炎癥因子如TNF-α、IL-1β的表達(dá)也顯著減少，腎臟病理損傷得到明顯改善。在腦缺血再灌注損傷模型中，姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)可以減輕腦組織的氧化損傷和神經(jīng)元凋亡，改善神經(jīng)功能。實(shí)驗(yàn)表明，給予腦缺血再灌注損傷大鼠姜黃素處理后，大鼠腦組織中HO-1的表達(dá)上調(diào)，氧化應(yīng)激指標(biāo)如ROS、MDA水平降低，抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)增加，促凋亡蛋白Bax的表達(dá)減少，神經(jīng)功能評分也明顯提高。綜上所述，姜黃素通過激活Nrf2/ARE和MAPK等信號通路誘導(dǎo)HO-1表達(dá)，在多種疾病模型中發(fā)揮著重要的治療作用。深入研究姜黃素誘導(dǎo)HO-1表達(dá)的機(jī)制及在不同疾病中的作用，對于拓展姜黃素的臨床應(yīng)用具有重要意義。1.3研究方法與技術(shù)路線1.3.1實(shí)驗(yàn)動物與分組選用健康雄性SD大鼠40只，體重180-220g，購自[實(shí)驗(yàn)動物供應(yīng)單位名稱]，動物生產(chǎn)許可證號為[許可證號]。將大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為5組，每組8只，分別為：正常對照組、模型組、姜黃素低劑量組（50mg/kg）、姜黃素中劑量組（100mg/kg）、姜黃素高劑量組（200mg/kg）。正常對照組給予普通飼料喂養(yǎng)，其余各組給予高脂飼料（含1%膽固醇、0.5%膽酸、5%豬油、88.5%基礎(chǔ)飼料）喂養(yǎng)。1.3.2動脈粥樣硬化大鼠模型的建立采用高脂飲食聯(lián)合維生素D3和免疫損傷法建立動脈粥樣硬化大鼠模型。除正常對照組外，其余各組大鼠在實(shí)驗(yàn)第1天和第2天，分別腹腔注射維生素D3（70萬IU/kg），以促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖和鈣鹽沉積。從實(shí)驗(yàn)第3天開始，給予高脂飼料喂養(yǎng)，持續(xù)8周。同時，在實(shí)驗(yàn)第4周和第6周，尾靜脈注射牛血清白蛋白（100mg/kg），以誘導(dǎo)免疫損傷。正常對照組給予普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射。在建模過程中，每周稱量大鼠體重，觀察大鼠的飲食、活動等一般情況。建模結(jié)束后，通過檢測血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平，以及主動脈病理切片觀察，評估模型的成功與否。1.3.3姜黃素的干預(yù)方法在建立動脈粥樣硬化模型的同時，姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量的姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周。姜黃素用0.5%羧甲基纖維素鈉溶液配制成所需濃度。正常對照組和模型組給予等體積的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃。1.3.4檢測指標(biāo)與方法HO-1表達(dá)水平檢測：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取大鼠主動脈組織，采用蛋白質(zhì)免疫印跡法（Westernblot）檢測HO-1蛋白的表達(dá)水平。具體步驟如下：將主動脈組織剪碎，加入RIPA裂解液，冰上勻漿，4℃、12000r/min離心15min，取上清液，采用BCA法測定蛋白濃度。將蛋白樣品與上樣緩沖液混合，煮沸變性5min，進(jìn)行SDS-PAGE電泳，將蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜上。用5%脫脂牛奶封閉2h，加入兔抗大鼠HO-1一抗（1:1000），4℃孵育過夜。TBST洗膜3次，每次10min，加入HRP標(biāo)記的羊抗兔二抗（1:5000），室溫孵育2h。TBST洗膜3次，每次10min，采用ECL化學(xué)發(fā)光試劑顯色，用凝膠成像系統(tǒng)拍照并分析條帶灰度值。同時，采用實(shí)時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測HO-1mRNA的表達(dá)水平。提取主動脈組織總RNA，采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。以cDNA為模板，進(jìn)行qRT-PCR擴(kuò)增。引物序列如下：HO-1上游引物5'-[具體序列]-3'，下游引物5'-[具體序列]-3'；內(nèi)參基因GAPDH上游引物5'-[具體序列]-3'，下游引物5'-[具體序列]-3'。反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性30s，95℃變性5s，60℃退火30s，共40個循環(huán)。采用2-ΔΔCt法計(jì)算HO-1mRNA的相對表達(dá)量。血脂檢測：實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，大鼠禁食12h后，腹主動脈取血，3000r/min離心15min，分離血清。采用全自動生化分析儀檢測血清TC、TG、LDL-C和HDL-C水平。炎癥因子檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測血清中炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）的水平。嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作，用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各炎癥因子的濃度。氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：取大鼠主動脈組織，采用硫代巴比妥酸法測定丙二醛（MDA）含量，以反映脂質(zhì)過氧化程度；采用黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶（SOD）活性，以評估抗氧化能力；采用比色法測定谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性。具體操作按照相應(yīng)試劑盒說明書進(jìn)行。主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：取大鼠主動脈，用4%多聚甲醛固定，石蠟包埋，切片，厚度為5μm。進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察主動脈的病理形態(tài)學(xué)變化，包括內(nèi)膜增厚、脂質(zhì)沉積、炎癥細(xì)胞浸潤等情況。采用油紅O染色觀察主動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)脂質(zhì)的沉積情況。1.3.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析（One-WayANOVA），組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。1.3.6技術(shù)路線圖本研究的技術(shù)路線圖如下所示：開始||--實(shí)驗(yàn)動物準(zhǔn)備：40只健康雄性SD大鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周||--分組：正常對照組、模型組、姜黃素低劑量組、姜黃素中劑量組、姜黃素高劑量組||--動脈粥樣硬化模型建立：高脂飲食聯(lián)合維生素D3和免疫損傷法，持續(xù)8周||||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--實(shí)驗(yàn)動物準(zhǔn)備：40只健康雄性SD大鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周||--分組：正常對照組、模型組、姜黃素低劑量組、姜黃素中劑量組、姜黃素高劑量組||--動脈粥樣硬化模型建立：高脂飲食聯(lián)合維生素D3和免疫損傷法，持續(xù)8周||||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|--實(shí)驗(yàn)動物準(zhǔn)備：40只健康雄性SD大鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周||--分組：正常對照組、模型組、姜黃素低劑量組、姜黃素中劑量組、姜黃素高劑量組||--動脈粥樣硬化模型建立：高脂飲食聯(lián)合維生素D3和免疫損傷法，持續(xù)8周||||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--分組：正常對照組、模型組、姜黃素低劑量組、姜黃素中劑量組、姜黃素高劑量組||--動脈粥樣硬化模型建立：高脂飲食聯(lián)合維生素D3和免疫損傷法，持續(xù)8周||||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|--分組：正常對照組、模型組、姜黃素低劑量組、姜黃素中劑量組、姜黃素高劑量組||--動脈粥樣硬化模型建立：高脂飲食聯(lián)合維生素D3和免疫損傷法，持續(xù)8周||||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--動脈粥樣硬化模型建立：高脂飲食聯(lián)合維生素D3和免疫損傷法，持續(xù)8周||||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|--動脈粥樣硬化模型建立：高脂飲食聯(lián)合維生素D3和免疫損傷法，持續(xù)8周||||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--正常對照組：普通飼料喂養(yǎng)，不進(jìn)行維生素D3和牛血清白蛋白注射||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--其余各組：高脂飼料喂養(yǎng)，第1、2天腹腔注射維生素D3，第4、6周尾靜脈注射牛血清白蛋白||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|--姜黃素干預(yù)：姜黃素低、中、高劑量組分別給予相應(yīng)劑量姜黃素灌胃，每天1次，持續(xù)8周||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--正常對照組和模型組：給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|--檢測指標(biāo)||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--HO-1表達(dá)水平檢測||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|||--Westernblot檢測蛋白表達(dá)||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|||--qRT-PCR檢測mRNA表達(dá)||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--血脂檢測：全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--炎癥因子檢測：ELISA檢測TNF-α、IL-6、MCP-1||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測：測定MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--主動脈病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色、油紅O染色||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|--數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：SPSS22.0軟件，單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束|--結(jié)果分析與討論||--撰寫論文結(jié)束||--撰寫論文結(jié)束|--撰寫論文結(jié)束結(jié)束二、姜黃素與HO-1的相關(guān)理論基礎(chǔ)2.1姜黃素的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)2.1.1姜黃素的化學(xué)結(jié)構(gòu)姜黃素（Curcumin）化學(xué)名稱為1,7-雙(4-羥基-3-甲氧基苯基)-1,6-庚二烯-3,5-二酮，分子式為C_{21}H_{20}O_{6}，分子量為368.3799。其化學(xué)結(jié)構(gòu)包含兩個鄰甲氧基酚基團(tuán)，通過中間的七碳雙鍵相連，形成了一個獨(dú)特的α,β-不飽和-β-二酮結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)賦予了姜黃素多種生物活性，使其在醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力。姜黃素的酚羥基具有較強(qiáng)的親核性，能夠與體內(nèi)的自由基發(fā)生反應(yīng)，通過提供氫原子的方式，將自由基轉(zhuǎn)化為相對穩(wěn)定的化合物，從而有效地清除自由基，發(fā)揮抗氧化作用。研究表明，姜黃素的酚羥基可以與超氧陰離子自由基（O_{2}^{-}）、羥自由基（?OH）等多種自由基發(fā)生反應(yīng)，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減少氧化應(yīng)激對細(xì)胞的損傷。在體外實(shí)驗(yàn)中，將姜黃素作用于受到氧化應(yīng)激損傷的細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)的活性氧（ROS）水平明顯降低，抗氧化酶活性顯著升高，細(xì)胞的氧化損傷得到有效緩解。其不飽和雙鍵結(jié)構(gòu)則使其具有較高的反應(yīng)活性，能夠參與多種化學(xué)反應(yīng)。在體內(nèi)，不飽和雙鍵可以與一些生物大分子發(fā)生加成反應(yīng)，從而影響生物大分子的結(jié)構(gòu)和功能。研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素的不飽和雙鍵可以與蛋白質(zhì)分子中的巰基發(fā)生加成反應(yīng)，改變蛋白質(zhì)的構(gòu)象和活性，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的生理功能。此外，不飽和雙鍵還可以與一些信號分子相互作用，參與細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路，調(diào)節(jié)基因表達(dá)和細(xì)胞代謝。在對腫瘤細(xì)胞的研究中，姜黃素通過不飽和雙鍵與相關(guān)信號分子結(jié)合，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。2.1.2姜黃素的理化性質(zhì)姜黃素為橙黃色結(jié)晶粉末，味稍苦。在溶解性方面，姜黃素不溶于水和乙醚，這限制了其在一些水性體系中的應(yīng)用。不過，它可溶于乙醇、丙二醇等有機(jī)溶劑，易溶于冰醋酸和堿溶液。在堿性條件下，姜黃素分子中的酚羥基會發(fā)生解離，形成酚氧負(fù)離子，使得分子的極性增加，從而更易溶解。姜黃素在堿性溶液中呈紅褐色，在中性、酸性時呈黃色。當(dāng)pH大于8時，由于分子兩端的羥基在堿性條件下發(fā)生電子云偏離的共軛效應(yīng)，姜黃素會由黃變紅，這種特性使其可作為酸堿指示劑。姜黃素的穩(wěn)定性也是其重要的理化性質(zhì)之一。它對還原劑的穩(wěn)定性較強(qiáng)，在還原環(huán)境中不易發(fā)生化學(xué)變化。姜黃素的著色性強(qiáng)，一經(jīng)著色后就不易褪色，這使其在食品和化妝品的著色領(lǐng)域具有一定優(yōu)勢。然而，姜黃素對光、熱、鐵離子敏感，耐光性、耐熱性、耐鐵離子性較差。在光照條件下，姜黃素分子會吸收光能，發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致結(jié)構(gòu)變化，從而使其顏色和生物活性降低。研究表明，將姜黃素暴露在光照下一段時間后，其含量會明顯下降，抗氧化活性也會減弱。同樣，高溫也會加速姜黃素的分解，降低其穩(wěn)定性。當(dāng)溫度升高時，姜黃素分子的熱運(yùn)動加劇，分子內(nèi)的化學(xué)鍵更容易斷裂，從而發(fā)生分解反應(yīng)。鐵離子則會催化姜黃素的氧化反應(yīng)，使其結(jié)構(gòu)遭到破壞。在含有鐵離子的溶液中，姜黃素的降解速度明顯加快。2.1.3姜黃素的提取與制備方法從植物中提取姜黃素是獲取姜黃素的重要途徑，常見的提取方法包括溶劑提取法、超聲波輔助提取法、超臨界流體萃取法等。溶劑提取法是最傳統(tǒng)的提取方法，通常選用95%乙醇、丙二醇、冰醋酸等作為提取溶劑。將姜科植物的根莖干燥后制成粉末，用選定的溶劑進(jìn)行抽提，抽提液經(jīng)過脫溶劑、濃縮、結(jié)晶提純后干燥，即可得到姜黃素。以水為溶劑提取時，可在70-80℃下先用8倍量的1%的氫氧化鈉溶液浸提姜黃粉60-75min，過濾后濾渣再浸提兩次，合并3次濾液，加入液量0.8%的亞硫酸氫鈉溶液，經(jīng)濃縮后用鹽酸調(diào)pH為3-4，靜置分層后棄上層清液，下層沉淀經(jīng)抽濾得半固體狀的姜黃素、姜黃油和姜黃樹脂混合物，再通過后續(xù)處理分離得到姜黃素，收率可達(dá)0.5%-1.5%。若選用乙醇、乙醚、丙酮或二氯甲烷等有機(jī)溶劑提取，可從姜黃粉中浸提姜黃素和姜黃油，經(jīng)分離濃縮后用石油醚萃取分離姜黃油，萃余相經(jīng)減壓蒸餾得姜黃素，收率一般為0.55%-1.5%。超聲波輔助提取法是利用超聲波的空化作用、機(jī)械振動和熱效應(yīng)等，加速姜黃素從植物細(xì)胞中釋放出來，從而提高提取效率。將姜粉與提取溶劑混合后，置于超聲波發(fā)生器中進(jìn)行超聲處理，在超聲作用下，溶劑分子迅速振動，對植物細(xì)胞產(chǎn)生強(qiáng)烈的沖擊，使細(xì)胞破裂，姜黃素得以溶出。該方法具有提取時間短、提取率高、能耗低等優(yōu)點(diǎn)。有研究表明，采用超聲波輔助提取法，在適宜的條件下，姜黃素的提取率可比傳統(tǒng)溶劑提取法提高20%-30%。超臨界流體萃取法以超臨界流體（如二氧化碳）為萃取劑，利用其在超臨界狀態(tài)下具有的高擴(kuò)散性和低表面張力等特性，實(shí)現(xiàn)對姜黃素的高效提取。在超臨界狀態(tài)下，二氧化碳對姜黃素具有良好的溶解性，能夠快速將姜黃素從植物原料中萃取出來。萃取完成后，通過降低壓力或升高溫度，使超臨界流體恢復(fù)為氣態(tài)，從而實(shí)現(xiàn)姜黃素與萃取劑的分離。該方法具有萃取效率高、產(chǎn)品純度高、無污染等優(yōu)點(diǎn)，但設(shè)備成本較高，限制了其大規(guī)模應(yīng)用。除了從植物中提取，姜黃素也可以通過人工合成的方式制備。常見的合成途徑是由香草醛與乙酰丙酮反應(yīng)。具體過程為，用無水乙酸乙酯溶解香草醛，然后加入硼酸三丁酯和由乙酰丙酮、B_{2}O_{3}生成的絡(luò)合物，再滴加正丁胺，滴完攪拌4-5h，放置過夜。次日加入60℃的0.4N鹽酸繼續(xù)攪拌1h，并用50℃水浴保溫，使反應(yīng)完全。分去反應(yīng)生成物的水層，用水洗滌3-4次，濾出姜黃素，用乙酸乙酯洗滌2-3次得到粗品，再用乙醇重結(jié)晶得成品。人工合成的姜黃素在結(jié)構(gòu)和性質(zhì)上與天然提取的姜黃素基本相同，但在合成過程中可能會引入雜質(zhì)，需要進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制。2.2HO-1的生物學(xué)特性2.2.1HO-1的基因與蛋白結(jié)構(gòu)HO-1基因又被稱為熱休克蛋白32（HSP32）基因，其基因結(jié)構(gòu)具有獨(dú)特的特征。在人類中，HO-1基因定位于染色體22q12，長度約為14kb，包含5個外顯子和4個內(nèi)含子。HO-1基因的啟動子區(qū)域包含多個順式作用元件，這些元件對于HO-1基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控起著關(guān)鍵作用。其中，熱休克元件（HSE）能夠響應(yīng)熱應(yīng)激等刺激，當(dāng)細(xì)胞受到熱休克處理時，熱休克轉(zhuǎn)錄因子（HSF）會與HSE結(jié)合，從而啟動HO-1基因的轉(zhuǎn)錄，使HO-1的表達(dá)上調(diào)。在熱應(yīng)激條件下，細(xì)胞內(nèi)的HSF被激活，三聚化后與HSE結(jié)合，招募RNA聚合酶等轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子，促進(jìn)HO-1基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而增加HO-1蛋白的表達(dá)。金屬反應(yīng)元件（MRE）則可對重金屬等刺激產(chǎn)生應(yīng)答。當(dāng)細(xì)胞暴露于重金屬環(huán)境中時，金屬離子會與相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，這些轉(zhuǎn)錄因子再與MRE相互作用，誘導(dǎo)HO-1基因的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，鎘離子可以通過激活金屬反應(yīng)元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子1（MTF-1），使其與HO-1基因啟動子區(qū)域的MRE結(jié)合，從而上調(diào)HO-1的表達(dá)?？寡趸磻?yīng)元件（ARE）在HO-1基因的表達(dá)調(diào)控中也具有重要作用。許多抗氧化劑和具有抗氧化作用的物質(zhì)可以通過激活A(yù)RE，誘導(dǎo)HO-1基因的表達(dá)。核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）是調(diào)控ARE的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，在正常生理狀態(tài)下，Nrf2與Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1（Keap1）結(jié)合，處于無活性狀態(tài)，并在細(xì)胞質(zhì)中被持續(xù)降解。當(dāng)細(xì)胞受到氧化應(yīng)激等刺激時，Nrf2與Keap1解離，進(jìn)入細(xì)胞核與ARE結(jié)合，啟動HO-1等抗氧化酶基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。姜黃素就可以通過激活Nrf2/ARE信號通路，誘導(dǎo)HO-1的表達(dá)。HO-1蛋白由HO-1基因編碼，其分子量約為32kD。該蛋白含有多個功能域，每個功能域都具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和功能。其催化結(jié)構(gòu)域包含血紅素結(jié)合位點(diǎn)，這是HO-1發(fā)揮催化作用的關(guān)鍵部位。血紅素分子可以特異性地結(jié)合到該位點(diǎn)上，在NADPH和細(xì)胞色素P-450還原酶及分子氧的作用下，HO-1催化血紅素降解為膽綠素、一氧化碳（CO）和游離鐵。研究表明，血紅素結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸殘基對于血紅素的結(jié)合和催化反應(yīng)的進(jìn)行至關(guān)重要，突變這些氨基酸殘基會導(dǎo)致HO-1催化活